Иммунные процессы, связанные с формированием устойчивости к патогенам в кишечнике, зависят от микробиома. Поддержание гомеостаза в кишечнике обеспечивают регуляторные Т-клетки. При воспалительных заболеваниях кишечника (ВЗК) наблюдают как нарушение функции Т-регуляторных клеток, так и изменения микрофлоры. Развитие осложнений при этих заболеваниях сопровождается различными инфекциями. Однако некоторые представители патобионтов, например Helicobacter spp., могут влиять на Т-регуляторные клетки. Одной из генетических моделей для изучения ВЗК являются мыши с нокаутом гена Muc2. У таких мышей, как и у людей с ВЗК, эпителиальные и иммунные клетки кишечника находятся в тесном взаимодействии с микрофлорой. Полагают, что иммунные клетки лимфатических узлов Muc2-/- мышей чувствительны к изменению сформировавшейся у них микрофлоры, даже если в ее состав входят патобионты. В данном исследовании было показано влияние присутствия Helicobacter spp. на количество и процент различных типов лейкоцитов и Т-регуляторных клеток в мезентериальных лимфатических узлах Muc2-/- мышей. Количество CD45⁺CD19⁺, CD45⁺CD3⁺, CD45⁺CD3⁺CD4⁺, CD45⁺CD3⁺CD8⁺-клеток в мезентериальных лимфатических узлах мышей Muc2^-/- был достоверно выше, чем у мышей дикого типа Muc2^+/+. Однако наличие инфекции у Muc2^-/- мышей отменяло увеличение количества CD45⁺CD19⁺, CD45⁺CD3⁺, CD45⁺CD3⁺CD4⁺, CD45⁺CD3⁺CD8⁺-клеток. У мышей дикого типа Muc2^+/+ инфекция не оказывала достоверного эффекта на клетки в мезентериальных лимфатических узлах. Такое изменение в снижении иммунных клеток в мезентериальных лимфатических узлах под действием Helicobacter spp. может быть связано с активацией регуляторных Т-клеток. Действительно, было показано, что наличие врожденной инфекции Helicobacter spp. вызывало увеличение количества регуляторных Т-клеток (CD45⁺CD4⁺CD25⁺FoxP3⁺) в мезентериальных лимфатических узлах. Известно, что регуляторные Т-клетки обеспечивают противовоспалительные реакции в кишечнике. Таким образом, увеличение регуляторных Т-клеток способствует снижению всех типов иммунных клеток в мезентериальных лимфатических узлах мышей Muc2^-/- с инфекцией Helicobacter spp., что способствует улучшению жизнедеятельности этих мышей и, возможно, уменьшает воспалительные реакции в кишечнике. Это может быть свидетельством того, что некоторые патобионты, приобретенные с рождения, могут быть активаторами регуляторных механизмов иммунитета и, тем самым, оказывать благоприятное воздействие на хозяина. 

Нанотехнологии в иммунологии – перспективно развивающееся направление в фундаментальной и практической медицине. Кукурбитурилы являются макроциклическими кавитандами с определенным количеством гликолурильных фрагментов (n), определяющих размер полости данного соединения. На данный момент существует шесть синтезированных гомологов: 5, 6, 7, 8, 10 и 14. Отличаются друг от друга портальным размером и размером полостей. Характеризуются особыми физико-химическими и биологическими свойствами, такими как биосовместимость, стабильность, высокая способность к инкапсуляции химических соединений. Известно, что кукурбитурилы инкапсулируют молекулы путем формирования комплексов по типу «гость–хозяин», что позволяет высвобождать вещество из комплекса, повышать растворимость соединений и использовать кукурбитурилы как системы доставки лекарственных веществ. Иммуномодуляторная активность зависит от его специфических наноразмерных характеристик: функциональные группы, форма, размер, поверхность, растворимость в различных средах. Каждая наночастица, в зависимости от этих свойств, оказывает различные эффекты на клетки. Эффекты кукурбитурилов могут быть различными даже для одной субпопуляции клеток в зависимости от гомолога или дозировки. Взаимодействие клеток врожденного иммунитета с кукурбитурилами пока еще недостаточно изучены.

Целью этого исследования была оценка влияния кукурбит[n]урилов (n = 6, n = 7, n = 8) на клетки врожденного иммунитета – моноциты, NK-клетки, NKT-клетки.

Иммунологическое исследование включало выделение мононуклеарных клеток периферической крови условно здоровых доноров (n = 8) на градиенте плотности фиколл-урографина и проточную цитометрию с определением количества иммунокомпетентных клеток по классическим маркерам дифференциации этих клеток – CD3^- CD16⁺CD56⁺ для NK-клеток, CD3⁺CD16⁺CD56⁺ для NKTклеток и CD3^- CD14⁺ для моноцитов. Активацию моноцитов определяли по экспрессию поверхностного маркера HLA-DR.

Клетки культивировали 72 часа с добавлением кукурбитурилов CB[6], CB[7] в концентрациях 0,1, 0,3, 0,5 мМ и CB[8] в концентрации 0,01 мМ, поскольку он имеет плохую растворимость. Было отмечено достоверное снижение количества NK-клеток (p < 0,01 для исследуемых концентраций CB[7]), увеличение количества NKT-клеток (p < 0,04 и p < 0,02 для концентраций CB[6] и CB[7] соответственно). Также наблюдалась тенденция к повышению экспрессии HLA-DR на моноцитах (p = 0,06 для CB[6]).

Учитывая такое разностороннее действие кукурбитурилов, в перспективе можно рассматривать возможность использования кукурбитурилов в качестве иммуномодуляторов, противоопухолевых агентов, при аутоиммунных заболеваниях. 

Гликоделин (PP14, PAEP, альфа-2-микроглобулин, димерный гликопротеин с молекулярной массой от 42 до 56 кД) рассматривается как маркер рецептивности репродуктивной ткани. Невзирая на то, что иммунодепрессивные эффекты гликоделина хорошо известны, его роль в регуляции миелоидных супрессорных клеток (MDSC) не изучена. MDSC представляют собой гетерогенную популяцию незрелых миелоидных клеток, которые при патологических состояниях приобретают супрессорный фенотип, подавляя иммунный ответ.

Известно, что MDSC играют важную роль в поддержании иммунной толерантности в период беременности и при трансплантации. Наша гипотеза состоит в том, что гликоделин способен индуцировать формирование MDSC, поскольку уровень этих клеток во время успешной беременности повышается, в то время как спонтанное прерывание беременности и развитие преэклампсии ассоциировано с низким уровнем циркулирующего гликоделина. Таким образом, целью работы являлось изучение роли рекомбинантного гликоделина в физиологических концентрациях, в регуляции дифференцировки MDSC.

Для генерации MDSC in vitro мононуклеарные клетки из периферической крови добровольцев-доноров сепарировали путем центрифугирования на градиенте плотности 1,077 г/см3 (Ficoll-Hypaque, Sigma-Aldrich). Затем полученные клетки культивировали в 24-луночном планшете в концентрации 1 × 106 клеток/мл в ППС с внесенными в среду цитокинами IL-6 (20 нг/мл), GM-CSF (40 нг/мл) в течение 14 суток при 5% CO2 и 37 °C. Замена среды в культуре производилась на 7-е сутки, тогда же повторно вносили цитокины, а на 11-е сутки вносили рекомбинантный гликоделин (MyBioSource. Inc., США) в физиологических концентрациях (0,2; 2 мкг/мл), фармакологическая концентрация была 50 мкг/мл. В культурах оценивали уровень M-MDSC (LinHLA-DRCD33+CD11b+CD14+CD66b- ) и PMN-MDSC (LinHLA-DRCD33+CD11b+CD14- CD66b+) методом проточной цитометрии (СytoFlexS (Beckman Coulter)) при помощи антител R&D Systems по стандартной методике. Статистическую обработку данных проводили в программе GraphPad Prizm 6 при помощи критерия Фридмана.

Установлено, что гликоделин не оказывал существенного влияния на жизнеспособность клеток, оцениваемую методом проточной цитометрии (PI). Высокая концентрация GdA (50 мкг/мл), которая является фармакологической, не оказывала достоверного эффекта на дифференцировку MDSC. В то же время гликоделин в концентрациях, соответствующих нормальной беременности (0,2; 2 мкг/мл), повышал процент MDSC в индуцированных культурах мононуклеарных клеток человека.

При анализе субпопуляций установлено, что этот эффект был обусловлен повышением уровня PMN-MDSC, в то время как уровень M-MDSC достоверно не изменялся. Данный результат можно интерпретировать как фетопротективный эффект гликоделина, поскольку повышение уровня G-MDSC связывают с подавлением иммунного ответа на патернальные антигены. Известно, что уровень PMN-MDSC увеличивается в периферической крови здоровых беременных женщин на всех стадиях беременности по сравнению с небеременными, тогда как число M-MDSC остается без изменений.

В то же время у пациенток с выкидышем более чем на 30% снижено количество MDSC в крови и эндометрии, особенно в первом триместре. В период физиологической беременности PMN-MDSC накапливаются в плаценте, но при спонтанном аборте их количество уменьшается. Плацентарные PMN-MDSC эффективно подавляют Т-клеточный ответ, одновременно поляризуя CD4+-лимфоциты в фенотип Th2. Вероятно, PMN-MDSC играют важную роль в индуцировании и поддержании толерантности к антигенам плода, что позволяет рассматривать их как перспективную мишень терапевтического манипулирования при осложнениях беременности. В целом, мы впервые продемонстрировали влияние GdA на процесс дифференцировки MDSC. 

Благодаря своим свойствам, материалы на основе графена обладают потенциалом к использованию в биомедицине, но из-за их цитотоксического и провоспалительного воздействия на клетки практическое применение препаратов на его основе затруднено. Известно, что различные поверхностные модификации (функционализация) наночастиц оксида графена (ОГ) полиэтиленгликолем (ПЭГ) – один из способов снижения негативных эффектов графена на живые клетки. Так как применение наночастиц подразумевает их взаимодействие с иммунной системой, которая участвует в защите организма и в регуляции его функций, изучение этого вопроса крайне важно. Моноциты – клетки врожденного иммунитета и первая линия защиты человеческого организма от микроорганизмов и других чужеродных объектов. Одна из реакций моноцитов на стимул любой природы – производство активных форм кислорода (АФК). Ранее опубликованные данные демонстрируют неполную картину влияния наночастиц модифицированного оксида графена на образование АФК моноцитами человека. Таким образом, целью нашего исследования явилось оценка влияния пегилированного оксида графена (ОГ-ПЭГ и ОГ-8армПЭГ) на продукцию АФК моночитами человека в тесте спонтанной и стимулированной люминол-зависимой хемилюминесценции (ЛЗХЛ).

В качестве объектов исследования использовались CD14+-клетки, выделенные из мононуклеаров периферической крови здоровых доноров. Продукция АФК стимулировалась опсонизированным зимозаном (ОЗ), в качестве контроля выступал спонтанный вариант ЛЗХЛ. В работе использовались частицы оксида графена модифицированные линейным и разветвленным (армированным) ПЭГом (ОГ-ПЭГ и ОГ-8армПЭГ) размерами 100-200 нм («малые») и 1-5 мкм («большие»), с количеством покрывающего ПЭГ около 20%. Наночастицы применяли в концентрациях 5 и 25 мкг/мл.

Установлено, что на уровне спонтанной продукции АФК наночастицы малого размера в низкой концентрации (5 мкг/мл) и наночастицы большой размерности, покрытые разветвленным ПЭГом, в обеих концентрациях, оказывают достоверные подавляющие эффекты. На уровне стимулированной продукции АФК было обнаружено, что наночастицы графена малой размерности в концентрации 25 мкг/мл также подавляли продукцию АФК, как и частицы большой размерности, покрытые линейным ПЭГом, в той же концентрации. Таким образом, нами впервые установлено, что наночастицы оксида графена, функционализированные ПЭГом, способны ингибировать продукцию активных форм кислорода моноцитами человека, в связи с чем, можно говорить об антиоксидантной активности ОГ-ПЭГ. 

На сегодняшний день, трансфекция клеток млекопитающих ДНК или РНК конструкциями является единственным методом доставки запрограммированной информации в ядро клетки. Одним из часто используемых методов трансфекции в работе с дендритными клетками, является электропорация. Суть метода состоит в повышении проницаемости мембраны путем проведения электрического импульса через клетку. В связи с повышенной проницаемостью мембраны повышается шанс попадания ДНК или РНК конструкций внутрь клетки, но при этом снижается выживаемость клетки после воздействия тока на плазматическую мембрану клетки.

В исследовании использовали мышей самцов линии C57Bl/6 возраста 2-4 месяца. Из бедренной кости мышей выделяли 20 × 10⁶ клеток костного мозга, после клетки культивировали в полной RPMI1640 среды в течение 7 суток. Для генерации дендритных клеток из клеток костного мозга, в культуральную среду добавляли 100 нг/мл rmFlt3-L на 0 день. После 7 дней культивирования, клеточную культуру электропорировали контрольными некодирующими плазмидами p5 (EP P5) или пламзмидами pmaxCCR9 (EP CCR9), кодирующими мышиный рецептор хемотаксиса CCR9. В качестве контролей выступали, клеточные культуры электропорированные без плазмид (mock EP) и культуры клеток без электропорации (none EP). Электропорировали 5 × 10⁵ клеток и оставляли на 10 минут. После 10 минут клетки собирались и рассаживались в 24-луночном планшете в 1 мл культуральной среды и кондиционной среды (1:1). Затем добавляли по 50 нг/мл Flt3-L в каждую лунку. На следующий день трансфицированные клетки оценивались с помощью метода проточной цитофлуориметрии и количественной ПЦР.

Установлено, что после электропорации в группах mock EP, EP P5, EP CCR9 относительное количество живых CD11c⁺ дендритных клеток было достоверно меньше, чем в non EP группе. Более того, в группах EP P5 и EP CCR9 было достоверно меньше живых CD11c+ дендритных клеток, чем в группе mock EP. Экспрессия маркера CD86 было достоверно выше в группах EP P5 и EP CCR9, чем в группах non EP и mock EP. Экспрессия I-Ab среди cDC2s было достоверно выше в группе EP CCR9 по сравнению с группой non EP. У плазмацитоидных дендритных клеток и конвенциональных дендритных клеток 2-го типа, в группах EP CCR9, экспрессия CCR9 была достоверно выше, чем в группе non EP.

Таким образом, в данном исследовании продемонстрирована эффективность электропорации, сопровождающаяся снижением выживаемости и созреванием дендритных клеток. 

В ходе многочисленных исследований, в том числе в нашей лаборатории, было обнаружено, что баланс Th1/Th2 играет важную роль в регуляции реакций, определяющих исход иммунопатологических процессов как в моделях хронической РТПХ, так и в моделях острой РТПХ. Однако до сих пор открыт вопрос: от активности какого именно элемента регуляторного процесса в момент индукции РТПХ (например рецептора или фермента) зависит соотношение этого баланса. Сделано предположение, что степень активации рецептора GPR84 в момент индукции РТПХ может существенно влиять на Th1/Th2-баланс в организме и благодаря этому определяет направление развития и интенсивность патологического процесса. Целью настоящей работы являлось изучить влияние лигандов рецептора среднецепочечных жирных кислот GPR84 на баланс Th1/Th2 в экспериментальной модели in vivo.

В экспериментах были использованы самки мышей линий DBA/2 и гибридов (C57Bl/6 × DBA/2)F. В качестве исследуемых лигандов GPR84 использовали каприновую и лауриновую кислоты, а также синтетический лиганд 6-OAU. Хроническую РТПХ в полуаллогенной системе индуцировали вводя спленоциты мышей DBA/2 мышам-гибридам B6D2F1: по 60-70 × 106 клеток в/в двукратно с интервалом в 6 дней. Первое введение лигандов GPR84 производили через час после переноса донорских клеток и затем раз в сутки в течение двух недель. Эффект воздействия исследуемых препаратов на течение хронической РТПХ оценивали через три месяца после начала экспериментa.

Было показано, что введение животным лигандов к GPR84 в ходе индукции хронической РТПХ влияет на активность рецептора и на Th1/Th2-соотношение в организме. Введение синтетического лиганда 6-OAU увеличило количество животных, у которых иммунопатологический процесс развивался по Th1-зависимому варианту, почти в полтора раза по сравнению с группой без введения лиганда, что соответствовало литературным данным, полученным в системе in vitro. Эффект смеси каприновой и лауриновой кислот, видимо, опосредуется каким-то иным механизмом, отличным от активации GPR84. Следовательно, для осуществления перспективной возможности корректировать иммунные реакции путем включения в диету определенных жирных кислот требуются дальнейшие исследования. 

Появление злокачественной опухоли являются ассоциируется с  нарушением механизмов пролиферации, дифференцировки, способности к апоптозу. Этих изменений недостаточно для того, чтобы иммунная система распознала и уничтожила мутировавшие клетки. Причина этого явления - слабая иммуногенность опухолево-ассоциированных антигенов (ТАА) .Противоопухолевая вакцинация является наиболее эффективным специфическим методом  как профилактики рецидива заболевания , так и терапевтическим инструментом лечения в онкологии. Одним из главных условий эффективности противоопухолевой иммунотерапии является повышение иммуногенности  опухолевых клеток. Иммунизация моно - или олиго-ТАА-производными пептидами  не обеспечивает общее подавление развития опухоли и даже создает благоприятные условия для селективного роста отдельных клонов опухолевых клеток, не имеющих общих АГ с вакцинальными клетками.  Ксеногенные АГ обладают высокой иммуногенностью и эффективны в разрушении иммунной толерантности к человеческим аналогам, представленным на опухолевых клетках. В нашей работе мы использовали тестикулярные АГ барана в качестве источника ксеногенных ТАА. Яички овец содержат большой набор ТАА. Экспериментальные мыши были иммунизированы липосомальной тестикулярной вакциной, полученной из яичек барана. Через месяц после вакцинации мышам подкожно имплантировали опухолевые клетки карциномы LLC. Обнаружено, что продолжительность жизни мышей опытной группы была в 2 раза выше по сравнению с сингенным контролем, при этом, у 20% из них опухоль не развилась вообще. В спленоцитах мышей , у которых не было опухолей , определяли Т-регуляторные клетки и Т-клетки памяти. Мы обнаружили достоверное снижение как наивных Т-регуляторных ( CD4+CD25+) , так и активированных (CD4+CD25+FoxP3+), а также Т-памяти( CD4+CD44+), в том числе популяцию центральных Т- памяти (CD4+CD44+CD62L+) в селезенке предварительно иммунизированных мышей по сравнению с лимфоцитами мышей, полученных из интактной селезенки. Исследование содержания ИФН-гамма и ИЛ-10 в супернатантах мышиных спленоцитов , полученных от вакцинированных мышей без опухолей показало достоверное снижение количества ИЛ-10, но не ИФН-гамма. На основании полученных результатов мы полагаем, что иммунизация ксеногенными опухолевыми АГ может привести к формированию эффективного противоопухолевого ответа, направленного на опухолеассоциированные АГ, имеющиеся на собственной опухоли.

Цитокины IL-7 и IL-15 являются наиболее важными гуморальными факторами, обеспечивающими восстановление пула Т-лимфоцитов после лимфопении в процессе гомеостатической пролиферации (ГП). Однако неизвестно, могут ли эти цитокины обеспечивать гомеостатическое поддержание и пролиферацию T-регуляторных клеток (Treg). Также, учитывая связь между гомеостатической пролиферацией и развитием аутоиммунных заболеваний, интересно, могут ли цитокины ГП вызывать переход Treg-клеток в Th17-лимфоциты. Поэтому целью данного исследования было изучить влияние гуморальных факторов ГП (IL-7 и IL-15) на Treg-клетки in vitro. В исследовании использовалась периферическая кровь 22 здоровых доноров. Фракцию МНК получали центрифугированием в градиенте плотности фиколла. Для стимуляции пролиферации использовались цитокины ГП – IL-7 и IL-15, а также комбинация IL-2 с анти-CD3-антителами. Интенсивность пролиферации Treg оценивалась с помощью проточной цитометрии с использованием CFSE в общих культурах МНК по фенотипу CD3⁺CD4⁺CD25⁺FoxP3⁺, а также в чистой популяции Treg-клеток CD3⁺CD4⁺CD25⁺CD127lo, полученной с помощью иммуномагнитной сепарации с использованием набора MACS Treg Isolation Kit. Также во время культивирования оценивалась экспрессия основного транскрипционного фактора Th17-лимфоцитов – RORyt в CD3⁺CD4⁺CD25⁺FoxP3⁺-лимфоцитах. Было обнаружено, что IL-7 и IL-15 могут поддерживать Treg-клетки численно и по фенотипу, поддерживая экспрессию FoxP3 в Treg-клетках. При этом, в отличие от цитокинов ГП, стимуляция IL-2 + анти-CD3 индуцировала экспрессию FoxP3 de novo в CD4⁺ лимфоцитах. Также было обнаружено, что IL-7 и IL-15 могут вызывать пролиферацию Treg-клеток, однако она значительно менее интенсивна по сравнению со стимуляцией IL-2 + анти-CD3. При этом цитокины ГП не обладали способностью индуцировать экспрессию RORyt как в Treg клетках, так и в CD4+ лимфоцитах. Таким образом, было показано, что IL-7 и IL-15 потенциально могут участвовать в поддержании общего пула клеток Treg во время лимфопении, когда возникает дефицит IL-2, и не индуцируют экспрессию RORyt. Однако, как эти цитокины влияют на функциональную активность Treg-клеток, остается неясным и требует дальнейших исследований. 

Известно, что макрофаги играют важную роль в запуске и регуляции процессов нейрорегенерации. Макрофаги характеризуются выраженной пластичностью, что проявляется в их способности изменять свой фенотип в зависимости от сигналов микроокружения. В условиях патологии одним из индукторов формирования противовоспалительного М2-фенотипа макрофагов является взаимодействие с апоптотическими клетками (эффероцитоз). Ранее нами был разработан оригинальный протокол генерации М2-подобных макрофагов, поляризованных в результате эффероцитоза в условиях депривации сыворотки. Целью настоящего исследования явилась оценка нейрорегенеративного потенциала таких макрофагов (M2 (LS), Low Serum). Исследовали влияние кондиционных сред М2 (LS) на процесс дифференцировки клеток линии SH-SY5Y в сравнении c ретиноевой кислотой (RA). В качестве морфологических критериев дифференцировки оценивали относительное содержание дифференцированных клеток, т.е. клеток с длиной нейритов, превышающей длину тела клетки, а также среднюю длину нейритов на 3-и, 7-е и 13-е сутки. Наряду с этим оценивали соотношение нейроноподобных (N-тип) и эпителиально-подобных (S-тип) клеток в культурах. Клетки SHSY5Y характеризовались низким уровнем спонтанной дифференцировки как в стандартных условиях (10% FBS), так и при депривации сыворотки (1% FBS). При обработке ретиноевой кислотой клетки SH-SY5Y прекращали делиться и подвергались нейрональной дифференцировке. Культивирование клеток SH-SY5Y в присутствии кондиционной среды (КС)-M2 (LS) (30% v/v) также приводило к значимому возрастанию относительного содержания дифференцированных клеток, средней длины нейритоподобных отростков, а также изменению баланса клеток S- и N-типа в сторону выраженного преобладания последних. При этом выраженность морфологических признаков дифференцировки на ранних этапах дифференцировки (3-и сут.) была достоверно снижена по сравнению с уровнем RA-индуцированных изменений и достигала уровня позитивного контроля только на более поздних стадиях (к 13-м сут.) (p < 0,05). В отличие от ретиноевой кислоты, КС-М2 (LS) индуцировали нейрональную дифференцировку клеток SH-SY5Y без подавления их пролиферативной активности. Полученные данные могут свидетельствовать о нейрорегенеративном потенциале M2 (LS) макрофагов in vitro, который опосредуется через растворимые факторы и проявляется в усилении дифференцировки клеток SH-SY5Y. 

Мезенхимальные стволовые клетки, которые обладают как плюрипотентными, так и иммунорегуляторными функциями, активно изучаются как один из способов лечения во многих областях медицины, включая реабилитацию в нефрологии. Однако в некоторых статьях, посвященных лечению различных органических патологий с помощью МСК, было доказано, что эффекты от применения МСК в регенеративной медицине заключаются в том, что после трансплантации в поврежденные органы они могут ингибировать апоптоз клеток, способствуют ангиогенезу для лучшего кровоснабжения и в некоторых случаях стимулируют местную пролиферацию клеток в поврежденных тканях. Другими словами, про-регенерационные функции были обусловлены их паракринными эффектами без влияния дифференциации.

При введении мышам МСК было показано иммуноподавляющее действие, что в конечном счете приводило к уменьшению воспаления и улучшенной регенерации почек. Одним из механизмов восстановления могут быть МВ – внеклеточные тельца, продуцируемые МСК. Как стало известно из последних сообщений, МВ сохраняют некоторые функции клеток, такие как перенос микроРНК и т.д. Считается, что терапевтический эффект МСК может быть во многом связан с их иммуносупрессорными свойствами.

Целью данного исследования было изучение иммунорегуляторных свойств микровезикул (МСКМВ, МВ) в сравнении с мезенхимальными стволовыми клетками (МСК). Эксперимент проводился на мышах линии CBA возрастом 3-4 месяца, использовалась модель глицерол-индуцированной хронической почечной недостаточности (ХПН). МСК были получены из костного мозга сингенных мышей большеберцовой и бедренной костей. Клетки культивировались в культуральном матрасе до достижения монослоя. МВ были получены из МСК путем апоптоза при помощи культивирования в бессывороточной среде в условиях депривации кислорода в течении суток. МСК и МСК-МВ вводились в хвостовую вену мышей, забор органов производился на 11-е сутки после введения МСК и МСК-МВ.

Методом проточной цитофлуориметрии оценили состояние клеточного иммунитета у мышей с хронической почечной недостаточностью (ХПН) после введения мезенхимальных стволовых клеток (МСК) и полученных из них микровезикул (МСК-МВ) на 11-е сутки эксперимента. В результате наблюдалось снижение количества Т-регуляторных клеток CD4⁺CD25⁺Foxp3⁺, повышение содержания CD4⁺CD44⁺CD62⁺ и CD8⁺CD44⁺CD62⁺ Т-клеток памяти.

Влияние МВ не существенно отличалось от МСК. Это может свидетельствовать о том, что терапевтические свойства МСК обусловлены в большей степени, если не полностью МСК-МВ.

Агрессия – серьезная биомедицинская проблема, связанная с большим процентом пациентов и отсутствием селективных корректирующих средств. Наиболее часто повышенная агрессивность наблюдается у пациентов с депрессивными расстройствами, шизофренией, реактивными психозами и расстройствами адаптации, которые, как известно, характеризуются иммунологической дисфункцией. Нейролептики достаточно широко используются в клинической практике для коррекции психомоторного возбуждения: антипсихотическое действие указанных препаратов проявляется в достижении седативного эффекта. Однако, как и другие психоактивные вещества, они обладают рядом побочных эффектов, ограничивающих их длительное использование, что ограничивает их длительное применение и определяет необходимость поиск новых подходов к коррекции аффективных расстройств. Экспериментальное моделирование агрессии – один из основных подходов к изучению ее патогенетических механизмов и поиску новых эффективных средств для терапии. Изучение патогенетических механизмов агрессии и поиск подходов к ее терапии в рамках нейроиммунного взаимодействия в настоящее время является чрезвычайно перспективными. Имеется большое количество клинических и экспериментальных данных, указывающих на взаимосвязанные изменения функциональной активности нервной и иммунной систем при агрессии. Ведущим звеном патогенетического механизма агрессии является нарушение выработки и взаимной регуляции цитокинов, нейротрансмиттеров, нейропептидов, факторов роста, гормонов, действие которых опосредуется клеточными элементами иммунной системы. Существенная роль иммунокомпетентных клеток в патогенезе агрессии, равно как и однонаправленное действие большинства психоактивных препаратов на клеточные элементы иммунной и нервной систем, позволяет рассматривать иммунокомпетентные клетки в качестве модельного объекта для воздействия на межсистемные функциональные связи для редактирования агрессивного фенотипа. Целью настоящего исследования было изучение влияния трансплантации модулированных in vitro нейролептиком иммунокомпетентых клеток на поведенческий фенотип и содержание цитокинов в головном мозге агрессивных сингенных реципиентов. Агрессивное поведение было сформировано у активных мышей-самцов (CBA × C57Bl/6) F1 в результате опыта 20-кратных побед в межцовых конфронтациях (метод парного дистантного сенсорного контакта). Спленоциты агрессивных мышей обрабатывали in vitro хлорпромазином и внутривенно вводили сингенным агрессивным реципиентам. Было продемонстрировано, что модулируемые in vitro хлорпрома зином спленоциты агрессивных мышей после трансплантации редактируют поведение агрессивных сингенных реципиентов на фоне снижения в патогенетически значимых для агрессии структурах головного мозга цитокинов IL-1β, IL-2, IL-6, IFNγ и повышения уровня IL-4. Механизмы коррекции агрессивной стратегии поведения модулированными in vitro нейролептиком иммунокомпетентными клетками обсуждаются. 

Иммунная и нейроэндокринная системы играют решающую роль в поддержании динамического гомеостаза в нормальных условиях и при психической дезадаптации. Психо- и иммунопатология тесно взаимосвязаны: патологические изменения в функционировании обеих систем происходят одновременно и взаимозависимы. Депрессия, как психическое расстройство, – серьезная проблема общественного здравоохранения. Экспертные оценки показывают рост заболеваемости депрессией в будущем. Однако применяемая в настоящее время терапия депрессии не обеспечивает полного излечения. Известно, что нарушение нейроиммунного взаимодействия является существенным звеном в патогенезе заболевания, негативно влияя на его течение, ухудшая клиническую картину, снижая эффективность терапии, поэтому актуален поиск нового подхода к лечению. Имеется достаточное количество данных о ведущей роли иммунных клеток и их биологически активных продуктов в патогенезе депрессии. Однонаправленное действие большинства психоактивных препаратов на центральную нервную систему и иммунную систему подтверждает межсистемную взаимную регуляцию и позволяет рассматривать иммунные клетки в качестве модельных объектов для влияния на межсистемную функциональную взаимосвязь; в силу чего, клеточная иммунотерапия может быть методом выбора при лечении депрессивных расстройств. Мы впервые продемонстрировали возможность направленной регуляции поведения экспериментальных животных путем трансплантации иммунных клеток с определенными функциональными характеристиками, в том числе с функциональной активностью, модулированной экстракорпорально психоактивным веществом. Основываясь на предыдущих результатах, мы исследовали влияние иммунных клеток, модулированных in vitro кофеином, на иммунный и поведенческий фенотипы у депрессивно-подобных сингенных реципиентов. Было показано, что трансплантация прекультивированных с кофеином спленоцитов депрессивно-подобных доноров вызвала редактирование депрессивно-подобного поведения у сингенных реципиентов, что проявилось в снижении ангедонии, стимуляции ориентировочно-исследовательского поведения в тесте «открытое поле» и двигательной активности в тесте вынужденного плавания по Порсолту. Поведенческие изменения у депрессивно-подобных реципиентов после клеточной трансплантации регистрировались на фоне снижения уровня провоспалительных цитокинов (TNFα, IL-1β, IL-6, IFNγ) и увеличения уровня IL-10 в патогенетически значимых для депрессивно-подобного состояния структурах головного мозга (гиппокампе, гипоталамусе, фронтальной коре, стриатуме), что свидетельствует о снижении нейровоспаления. Выявлена также модуляция функциональной активности иммунной системы реципиентов. Цитокин-опосредованные механизмы редактирования депрессивно-подобного поведения модулированными in vitro кофеином иммунными клетками обсуждаются. 

Ожоговый травматизм представляет одну из ключевых медико-социальных проблем. Несмотря на значительные достижения в комбустиологии, медленное заживление и присоединение инфекции составляют ключевые проблемы у ожоговых больных, приводящие к удлинению сроков госпитализации, снижению качества жизни и эмоциональным расстройствам. До 70% всех осложнений после термической травмы (ТТ) связаны с инфекцией – это, прежде всего, пневмония, инфекции мочевыводящих путей. Формирование инфекционных осложнений, включая сепсис, после ТТ связывают с избыточными иммуносупрессивными реакциями, в том числе как компенсацию на длительный, устойчивый провоспалительный ответ, в частности обусловленными гиперпродукцией и эффектами IL-10, IL-4, TGF-β. Цель работы: изучить влияние системного и локального в составе оригинальной дермальной пленки (ДП) применения МТ на показатели репарации и концентрацию в сыворотке некоторых цитокинов в динамике экспериментальной ТТ. Работа выполнена на 84 крысах – самцах линии Wistar массой 240±20 г, которые случайным образом разделены на 4 группы: группа 1 (n = 12) – интактный контроль, группа 2 (n = 30) – животные с ТТ, группа 3 (n = 21) – животные с ТТ и наложением ДП с МТ на область ожога, группа 4 (n = 21) – животные с ТТ и внутрибрюшинным введением МТ. Для моделирования ТТ IIIА степени и относительной площадью 3,5% изолированный участок кожи межлопаточной области погружали в дистиллированную воду с температурой 98-990 С на 12 с. ДП с МТ (в концентрации 0,005 г/г) площадью 12 см2 в группе 3 наносили сразу после ТТ, закрепляя асептической повязкой, перевязку осуществляли ежедневно в течение 5 суток. Внутрибрюшинно вводили МТ ежедневно в дозе 10 мг/кг в течение 5 суток. На 5-е, 10-е и 20-е сутки от момента индукции ТТ вычисляли площадь раны, скорость эпителизации в сыворотке определяли концентрацию интерлейкина-4 (IL-4), фактора некроза опухолей альфа (TNFα), интерферона-гамма (IFNγ). При экспериментальной ТТ в динамике наблюдений от 5-х к 20-м суткам уменьшается абсолютная и относительная площадь раневого дефекта, в связи с чем прогрессивно увеличивается скорость эпителизации раны и доля уменьшения ее площади, на 5-е, 10-е и 20-е сутки в сыворотке увеличивается концентрация TNFα и IL-4 с максимальными значениями на 10-е сутки наблюдения. Локальное применение МТ в составе ДП при ТТ ускоряет заживление ожоговой раны и снижает в сыворотке концентрацию TNFα и IL-4 на 5-е, 10-е и 20-е сутки. Внутрибрюшинное применение МТ при ТТ ускоряет заживление ожоговой раны и снижает в сыворотке концентрацию TNFα на 10-е и 20-е сутки. Ускоряющий репарацию эффект МТ при ТТ более выражен при локальном применении в составе ДП по сравнению с внутрибрюшинным введением. 

Доказана важная роль иммунных нарушений в привычном невынашивании беременности. Уточнение характера дифференцировки В-лимфоцитов и факторов ее регуляции у женщин с угрожающим выкидышем и привычным невынашиванием беременности в анамнезе является актуальной проблемой, поскольку позволит выявить иммунные механизмы патогенеза данной патологии.

Цель: установить особенности дифференцировки В-лимфоцитов и факторов ее регуляции у женщин с привычным невынашиванием беременности в анамнезе и угрожающим самопроизвольным выкидышем на момент обследования.

Были обследованы беременные женщины в возрасте 18-40 лет в сроке гестации 5-12 недель. Основную группу составили 60 беременных женщин с угрожающим самопроизвольным выкидышем на момент обследования и привычным невынашиванием в анамнезе. В качестве контроля обследовано 35 беременных женщин с неосложненным течением беременности. Группу сравнения составили 25 первобеременных женщин с угрожающим самопроизвольным выкидышем на момент обследования. Материалом исследования служила периферическая венозная кровь. Методом проточной цитофлюориметрии определяли субпопуляции В-лимфоцитов СD19⁺, CD19⁺IgD⁺, CD20⁺IgM⁺, CD20⁺IgG⁺; СD19⁺СD20^- СD38⁺, CD19⁺CD27^- , CD19⁺CD27⁺. Сывороточный уровень BAFF и APRIL оценивался методом иммуноферментного анализа. В основной группе зарегистрировано увеличение в периферической крови доли В-клеток, CD20⁺IgM⁺ лимфоцитов и клеток памяти, наряду со снижением уровня наивных клеток и плазмоцитов. В группе сравнения зарегистрировано увеличение доли незрелых IgM⁺В-клеток, циркулирующих клеток памяти наряду со снижением наивных В-лимфоцитов.

В основной группе наблюдалось выраженное снижение сывороточного уровня BAFF по сравнению с группой контроля и сравнения. Анализ содержания APRIL показал выраженную тенденцию к снижению в группах с угрожающим выкидышем относительно здоровых беременных. Таким образом, угрожающий привычный и спорадический выкидыши были ассоциированы со сдвигом дифференцировки В-лимфоцитов в сторону незрелых форм и недостатком регулирующего влияния BAFF и APRIL, что выражается в нарушении В-клеточного гомеостаза и ослаблении гуморальных эффекторных механизмов на системном уровне.

Выявленные изменения могут свидетельствовать о едином механизме развития угрожающего самопроизвольного выкидыша, выраженность которого увеличивается при повторной потере беременности. Эти изменения могут приводить к усилению эффекторных цитотоксических механизмов и увеличению провоспалительных цитокинов, что может привести к развитию повреждающих реакций в фетоплацентарном комплексе, отражением чего может являться клиническая картина угрозы прерывания беременности. 

Ревматоидный артрит (РА) является частым фоном для развития почечной патологии. Хроническая болезнь почек (ХБП) определяется более чем у 30% пациентов с РА. Наряду с воспалением и другими факторами прогрессирования основного заболевания развитию почечного поражения при РА способствует наличие метаболического синдрома (МС).

Цель исследования – оценить взаимосвязь сывороточных концентраций ангиопоэтин-подобных белков (АППБ) и антител к фосфолипидам (аФЛ) с развитием почечной дисфункции у больных РА.

Было обследовано 158 пациентов с РА (91,8% – женщин и 8,2% – мужчин) в возрасте от 21 до 80 лет и средней длительностью заболевания – 9 (4-15) лет. Преобладали пациенты серопозитивные по ревматоидному фактору и по антителам к циклическому цитруллинированному пептиду, с развернутой клинической стадией и умеренной активностью (3,2 < DAS28 ≤ 5,1) патологического процесса.

ELISA-тест был использован для количественного определения в сыворотке крови больных РА ангиопоэтин-подобного белка 3-го типа и 4-го типа и антител к фосфолипидам (aФЛ-IgG/IgM) для суммарного выявления антител к кардиолипину, фосфатидилсерину, фосфатидилинозитолу, фосфатидиловой кислоте и комплексу отрицательно заряженного фосфолипида и β₂-гликопротеина-I.

Более половины обследованных больных РА имели расчетную скорость клубочковой фильтрации (рСКФ) в пределах от 89 до 60 мл/мин/1,73 м² (распределение по стадиям ХБП: С1 – 21,5%; С2 – 58,9%; С3 – 19,6%). Признаки МС (сочетания повышенного АД, повышения уровня триглицеридов и нарушений углеводного обмена на фоне центрального ожирения) были диагностированы у 68 (43%) больных РА.

Был выполнен многофакторный дисперсионный анализ по сравнению изучаемых показателей (АППБ3, АППБ4, aФЛ) в зависимости от рСКФ в группах больных РА без признаков метаболического синдрома и больных РА с МС. Между больными РА с различной степенью выраженности метаболических нарушений были установлены существенные различия в уровне АППБ3 (F = 8,86, р = 0,0034) и АППБ4 (F = 29,6,р < 0,001), но не aФЛ (p > 0,05). Проведение многофакторного дисперсионного анализа показало достоверное увеличение АППБ4 в сыворотке крови больных РА со сниженной рСКФ (< 89 мл/мин) (F = 18,5, р < 0,001) и выраженными метаболическими изменениями (F = 24,2, р < 0,001). Таким образом, на содержание АППБ4 у больных РА непосредственное влияние оказывали только два фактора (почечная дисфункция и наличие МС), способные более чем в 30% случаев описать изменчивость данного признака. Квадрат множественного коэффициента корреляции (R2 ) в данной модели составил 0,33. АППБ 4-го типа следует рассматривать в роли ключевого фактора, связывающего развитие почечной дисфункции и метаболические изменения, вызванные ревматоидным воспалением. 

Большое внимание исследователей направлено на изучение роли факторов гомеостатической пролиферации в патогенезе аутоиммунных заболеваний, однако, до сих пор недостаточно изучено влияние IL-7 и IL-15 на фенотип наивных Т-клеток при патологии. Целью данного исследования стало изучение соотношения CD45RA⁺ и CD31⁺ наивных клеток среди CD4⁺ и CD8⁺ лимфоцитов здоровых индивидуумов и пациентов с ревматоидным артритом (РА) при стимуляции IL-7, IL-15 in vitro. В периферической крови мы не обнаружили отличий по числу CD45RA⁺ и CD31⁺ клеток между группами доноров и пациентов. Стимуляция комбинацией IL-7 с IL-15 способствовала увеличению числа CD4⁺CD45RA⁺ и CD8⁺CD45RA⁺  у доноров относительно их уровня в периферической крови. Тогда как у пациентов с РА число CD8⁺CD45RA⁺ клеток снижалось под действием IL-15, комбинации IL-15 с IL-7 по сравнению с контролем без стимуляции, и достоверно отличалось, как и число CD4⁺CD45RA⁺ клеток, от содержания данных клеток у доноров в тех же условиях. Достоверных отличий по содержанию CD31⁺ клеток и числу CD31⁺ клеток, отвечающих пролиферацией на цитокины, как между группами доноров и пациентов с РА, так и различными вариантами культивирования не было выявлено.  Таким образом, можно говорить о том, что под влиянием факторов гомеостатической пролиферации происходит пропорциональное увеличение CD31⁺ Т-клеток, как у доноров, так и пациентов с РА. При этом наивные Т-клетки доноров при культивировании сохраняют экспрессию CD45RA, а наивные Т-клетки пациентов частично ее утрачивают. Полученные данные говорят о том, что под действием факторов гомеостатической пролиферации при РА происходит конверсия фенотипа наивных Т-клеток в фенотип Т-клеток памяти.

Ключевые клеточные и молекулярные факторы, вовлеченные в разрешение воспаления после острого инфаркта миокарда, остаются изученными недостаточно. Т-регуляторные (Treg) лимфоциты характеризуются значительным потенциалом к регуляции силы и направления иммунных ответов при повреждении миокарда. Функциональная активность Treg-лимфоцитов зависит от транскрипционного фактора forkhead box protein P3 (FoxP3). Он также может экспрессироваться в конвенционных Т-лимфоцитах на этапе их активации. Ядерная локализация FoxP3 является обязательным условием, определяющим способность FoxP3 вносить вклад в регуляцию супрессорной активности Treg-лимфоцитов.

Целью данной работы стала сравнительная оценка частоты и абсолютного количества FoxP3⁺Тлимфоцитов, в сочетании с определением субклеточной локализации FoxP3, у пациентов с острым инфарктом миокарда и хроническим коронарным синдромом, а также исследование изменений этих параметров в краткосрочный период наблюдения пациентов с инфарктом миокарда. Исследование включало 14 пациентов с хроническим коронарным синдромом (8 мужчин; 6 женщин; средний возраст 63,2±9,0 лет) и 5 пациентов с острым передним инфарктом миокарда с подъемом сегмента ST (4 мужчины; 1 женщина; средний возраст 61,4±11,2 лет), обследованных на 1-е, 3-и и 7-е сутки после события. Частота FoxP3⁺ конвенционных и регуляторных Т-лимфоцитов оценивалась во фракции мононуклеарных лейкоцитов периферической крови, наряду с определением уровня ядерной локализации FoxP3, методом проточной цитометрии с визуализацией.

Пациенты с инфарктом характеризовались снижением абсолютного количества FoxP3⁺Tregлимфоцитов, по сравнению с пациентами с хроническим коронарным синдромом, и демонстрировали еще более выраженное снижение абсолютного количества FoxP3⁺Treg-клеток к 7-му дню после инфаркта, в то время как относительное количество Treg и конвенционных Т-лимфоцитов значимо не различалось. Уровень ядерной локализации FoxP3 был ниже как в Treg, так и в конвенционных Т-лимфоцитах пациентов с инфарктом в первый день, по сравнению с пациентами с хроническим коронарным синдромом. Абсолютное количество FoxP3+Treg с ядерной локализацией оставалось значимо сниженным на 1-е и 7-е сутки после инфаркта по сравнению с пациентами с хроническим коронарным синдромом.

Таким образом, в нашем исследовании мы показали, что ядерная локализация FoxP3 снижается при остром инфаркте миокарда и может являться более чувствительным маркером изменения функционирования Treg, по сравнению с обычной оценкой их относительного количества. 

Проведено определение взаимосвязей между нарушениями лабораторных показателей иммунного и метаболического статуса у пациентов с хронической ишемией головного мозга I-II стадии. В исследование было включено 104 пациента, из которых 76 больных женского пола и 28 мужского, с ХИМ на фоне гипертонической болезни II степени, из которых 52 больных были с I стадией и 52 со II стадией в возрасте 50±5 лет. Кроме того, изучены клинические и лабораторные показатели у 22 здоровых доноров того же возраста. Оценку клинико-лабораторных данных осуществляли в начале лечения и через 2 недели после его окончания. Определяли в плазме крови и эритроцитах сорбционную способность эритроцитов и сорбционную емкость гликокаликса (СЕГ), активность процессов перекисного окисления липидов, состояние антиоксидантной системы, выявляли уровень стабильных метаболитов оксида азота (SМNO), неоптерина, С-реактивного белка, цитокинов (TNFα, IL-1β, IL-8, IFNγ, IL-18, G-CSF, IL-4, IL-10), иммуноглобулинов (IgМ, IgG, IgА), компонентов системы комплемента (С3, С4, С5, С5А), фагоцитарную и кислородзависимую активность полиморфноядерных лейкоцитов крови. Проводя сравнительную оценку результатов корреляционного, факторного и кластерного анализов оценки показателей иммунного и метаболического статуса у пациентов с ХИМ I стадии выявлены наиболее значимые лабораторные параметры, необходимые для определения в клинике с целью объективной оценки выраженности иммунных и метаболических нарушений: TNFα, IL-8, IL-10, SМNO и СЕГ. У больных ХИМ II стадии с целью объективной оценки выраженности иммунных и метаболических нарушений рекомендованы TNFα, IL-8, IL-17, IL-10, фагоцитарное число нейтрофилов и СЕГ. 

Целью настоящей работы стало изучение некоторых параметров клеточного иммунитета у больных рассеянным склерозом (РС). В исследование были включены 10 пациентов с ремиттирующей формой РС в возрасте от 32 до 50 лет. Диагноз был установлен клинически и подтвержден магнитно-резонансным исследованием. Пациенты не получали иммуносупрессивную терапию в течение по крайней мере 6 месяцев до начала исследования. Неврологический статус всех обследованных пациентов оценивался по функциональной шкале Куртцке с использованием расширенной шкалы инвалидизации (EDSS) и составил в среднем 4,0±0,67 балла. Среднее число обострений в год было 1,25±0,25. При исследовании таких параметров иммунного статуса, как количество T-, B-, NK-клеток, содержание иммуноглобулинов, фагоцитарная активность моноцитов и гранулоцитов, продукция ими активных видов кислорода, у пациентов с РС существенных различий в сравнении с нормальным донорским уровнем не наблюдалось. Вместе с тем, нами было отмечено усиление пролиферативного ответа мононуклеарных клеток крови на миелиновый антиген в 2,35 раза. Содержание CD4⁺CD45RO⁺CD62L⁺ и CD8⁺CD45RO⁺CD62L⁺ центральных T-клеток памяти, а также CD8⁺CD45RO⁺CD62L^- эффекторных T-клеток памяти в крови больных РС значимо превышало контрольные значения (p < 0,05). Также у больных РС, по сравнению со здоровыми лицами, имело место повышенное содержание наивных CD4⁺CD45RO^- и CD8⁺CD45ROТ-клеток, несущих IFNγ (p < 0,01), и увеличение CD4⁺CD45RO⁺ и СD8⁺CD45RO⁺Т-клеток памяти, продуцирующих в ответ на активацию IFNγ или IFNγ вместе с IL-4 (p < 0,01). С этими данными согласуется значительное увеличение сывороточных уровней IFNγ и IL-17 и отсутствие изменений уровня IL-4. Относительное содержание «наивных» CD4⁺CD25⁺FoxP3⁺, а также индуцированных CD4⁺CD25^- FoxP3⁺ регуляторных Т-клеток у больных РС существенно не изменялось по сравнению с донорскими значениями. Результаты оценки некоторых показателей иммунного статуса у больных РС свидетельствуют о функциональной перестройке иммунной системы в сторону Th1 типа иммунного ответа. Очевидно, что иммунотропное лечение РС должно быть направлено на инактивацию аутоиммунных Т- и В-лимфоцитов, подавление продукции провоспалительных медиаторов и усиление активности естественных и индуцированных регуляторных Т-клеток. 

Учитывая данные об ассоциации эндогенного ретровируса человека I класса субгруппы HERV-Е λ 4-1 с рассеянным склерозом, аутоиммунным заболеванием, сопровождающимся нейровоспалением, изменением уровня нейротрансмиттеров, прогрессирующей неврологической дисфункцией, а также способность данного ретровируса к репликации и продукции протеинов в потенциальными иммуномодулирующими свойствами, целью данной работы было сравнительное исследование цитокинсинтезирующей функции иммунных клеток крови условно здоровых лиц и больных рассеянным склерозом под действием синтетического 17-аминокислотного олигопептида, гомологичного консервативному региону гидрофобного трансмембранного протеина р15Е HERV-Е λ 4-1. Объектом исследования были 40 больных, 17 мужчин в возрасте 38,0 (31,0-47,0) лет и 23 женщины в возрасте 39,0 (31,0-50,0) лет с установленным диагнозом рассеянного склероза (G 35, МКБ-10), удовлетворяющим критериям McDonald 2005, в модификации 2010 г., непрерывно-прогредиентным типом течения заболевания и длительностью 17,0 (14,0-18,0) лет и 30 условно-здоровых лиц, 12 мужчин в возрасте 32,0 (23,0-43,0) лет и 18 женщин в возрасте 36,0 (29,0-46,0) лет. Было проведено открытое обсервационное одноцентровое когортное контролируемое рандомизированное исследование. Обнаружено, что под действием ретровирусного олигопептида стимулировалась спонтанная продукция IL-1β, IL-6, TNFα, IFNγ и IL-2 МНК доноров в культуре, но не изменялась таковая IL-4 и IL-10. В то же время спонтанная и митоген-стимулированная продукция всех исследуемых цитокинов не изменялась под действием контрольного олигопептида. Культивирование РНА-стимулированных МНК доноров в присутствии ретровирусного олигопептида, по сравнению с контрольным, сопровождалось увеличением высвобождения IL-1β, IL-6 и TNFα в культуральный супернатант. Больные рассеянным склерозом характеризовались более высоким содержанием IL-1β, IL-6 и IFNγ в культуральном супернатанте нестимулированных митогеном МНК, по сравнению с условно-здоровыми лицами, а также более высокой продукцией IL-6 и IFNγ в ответ на стимуляцию РНА. У больных рассеянным склерозом ретровирусный олигопептид, в отличие от контрольного, стимулировал спонтанную продукцию IL-1β, IL-6, TNFα и IFNγ, не изменяя таковой IL-4 и IL-10. Полученные результаты свидетельствуют о провоспалительных свойствах синтетического олигопептида, гомологичного консервативному региону гидрофобного трансмембранного протеина р15Е HERV-Е λ 4-1, что, вероятно, является одним из механизмов реализации патологических свойств эндогенного ретровируса человека HERV-Е λ 4-1 при рассеянном склерозе. 

В настоящее время в патогенезе привычного невынашивания особую роль уделяют иммунологическим факторам, в частности роли врожденного иммунитета. Цель исследования – оценка относительного содержания моноцитов в периферической крови, продуцирующих IL-4, IL-6, IL-10, IFNγ, а также выявление новых критериев прогнозирования исхода беременности у женщин с угрозой прерывания в ранние сроки и привычным невынашиванием. Обследовано 88 беременных в сроке гестации 5-12 недель, основную группу составили 59 женщин с привычным невынашиванием и угрожающим выкидышем на момент исследования, группу контроля – 29 женщин с неосложненным течением беременности без привычного невынашивания. Основная группа в зависимости от исходов беременности была подразделена на подгруппы: I подгруппа – 42 женщины, чья беременность завершилась своевременными родами, II подгруппа – 8 женщин с преждевременными родами, III подгруппа – 9 женщин с прерыванием беременности в сроке до 22 недель (самопроизвольный выкидыш и неразвивающаяся беременность). В группе контроля у всех женщин произошли своевременные роды. Материал исследования – периферическая венозная кровь. На проточном цитофлуориметре FACSCanto II с использованием моноклональных антител оценивали относительное содержание IL-4⁺, IL-6⁺, IL-10⁺, IFNγ⁺ моноцитов. Статистическая обработка данных проводилась с помощью пакета стандартных прикладных программ.

В группе женщин с привычным невынашиванием и угрожающим выкидышем было снижено относительное содержание IL-10⁺ и IL-4⁺ моноцитов и повышено содержание IL-6⁺ моноцитов по сравнению с группой контроля (p = 0,0001 во всех случаях). Статистически значимых различий в содержании IFNγ⁺ моноцитов в сравниваемых группах не выявлено (p = 0,069). При относительном содержании IL-4+ моноцитов равном 26,7% или менее прогнозируют преждевременные роды. При относительном содержании IL-10⁺ моноцитов равном 27,0% или менее прогнозируют прерывание беременности (самопроизвольный выкидыш или неразвивающуюся беременность) в сроке геста ции до 22 недель. Было выявлено повышение соотношения IFNγ⁺/IL-4⁺, IFNγ⁺/IL-10⁺, IL-6⁺/IL-4⁺, IL-6⁺/IL-10⁺ моноцитов в основной группе (p < 0,0001 во всех случаях).

У женщин с привычным невынашиванием во всех подгруппах уровень М1-моноцитов преобладал над уровнем М2-моноцитов. Полученные данные позволили разработать новые прогностические критерии прерывания беременности до 22 недель и преждевременных родов. 

Стеатоз в печени при ожирении увеличивает работу митохондрий по утилизации избыточных липидов. Перегрузка β-окисления жирных кислот, цикла трикарбоновых кислот и окислительного фосфорилирования приводит к снижению уровня АТФ и повышению образования активных форм кислорода. В норме, митохондрии способны эффективно удалять повышенный уровень активных форм кислорода с помощью антиоксидантной системы и метаболической адаптации клетки к измененным условиям. Целью данного исследования явилось изучение роли печеночной экспрессии SOD в патогенезе НАЖБП при ожирении. Было выявлено, что уровень экспрессии SOD1 в печени у больных ожирением с и без СД 2 типа с ИМТ > 40 кг/м2 был ниже, чем у здоровых доноров. Число копий митохондриальной ДНК (мтДНК) в печени у всех больных ожирением было ниже более чем в два раза относительно значений контрольной группы. В печени у больных ожирением без СД 2 типа уровень белка SOD1 и число копий мтДНК были взаимосвязаны между собой и отрицательно коррелировали с площадью жировых включений. Таким образом, у больных ожирением снижение антиоксидантной защиты в печени приводит к уязвимости митохондрий, что, в свою очередь, способствует прогрессированию стеатоза и инсулинорезистентности. 

Болезнь Бехчета (ББ) – системное аутовоспалительно-аутоиммунное заболевание (хронический системный васкулит) невыясненной этиологии, увеит развивается почти у 70% пациентов. Патогенез ББ сложен, среди инфекционных триггерных факторов важную роль играют герпесвирусы человека (HHV). Известна способность HHV модулировать продукцию цитокинов и уклоняться от иммунного ответа организма.

Цель работы: определить влияние Herpes simplex virus type 1 (HSV-1), Herpes simplex virus type 2 (HSV-2), Cytomegalovirus (CMV), Epstein-Barr virus (EBV) на системные уровни хемокинов, про- и противовоспалительных цитокинов при ББ с симптомами увеитов и без. Сыворотки 116 пациентов с ББ, хронически инфицированных герпесвирусами, исследовали в иммуноферментном анализе на наличие IgG-антител к предранним антигенам HSV-1,2 и раннему антигену EBV (маркеров реактивации ННV). Концентрацию IL-1β, IFNγ, MCP-1, IL-2, IL-4, IL-5, IL-6, IL-8, IL-12p70, IL-13, IL-18, TNFα, GM-CSF, Eotaxin, GRO-α, IP-10, MIP-1α, MIP-1β, SDF-1α, RANTES определяли в мультиплексном анализе, TGF-β1, TGF-β2 – в иммуноферментном анализе. В зависимости от наличия и активности увеита выделили 3 группы пациентов с ББ: 1-я группа – активный увеит, 2-я группа – увеит в ремиссии, 3-я группа – ББ без поражения глаз. По результатам серологического анализа в каждой группе выделили 2 подгруппы: а) пациенты с наличием антител-маркеров реактивации хотя бы одного из исследованных HHV, б) пациенты, хронически инфицированные HHV, без признаков реактивации. Средний уровень и частоту выявления цитокинов и хемокинов у пациентов с активными увеитами (1а, 1б) и в стадии ремиссии (2а, 2б) сравнивали с результатами обследования пациентов без поражения глаз (3а, 3б), сопоставляли подгруппы с хронической ВГЧинфекцией (подгруппа «б») и ее реактивацией (подгруппа «а»).

Достоверное повышение сывороточного содержания хемокинов MCP-1/ССL2, MIP-1α/CCL3, MIP-1β/CCL4, RANTES/CCL5), IP-10, SDF-1α, а также IFNγ, TGF-β1 и TGF-β2 отмечено у пациентов с увеитами (независимо от их активности) и маркерами реактивации HHV по сравнению с пациентами без увеитов.

Полученные данные указывают на возможное влияние реактивации хронических герпесвирусных инфекций на системную продукцию цитокинов и хемокинов у пациентов с ББ и увеитами, причем наибольшие изменения касаются хемокинов. 

На механизм адипогенеза оказывают влияние многочисленное количество факторов, важными из них являются компоненты Wnt-сигнального пути. Поиск возможных маркеров развития заболеваний, связанных с ожирением, обусловил интерес к изучению GSK-3 (glycogensyntase kinase), β-катенина. GSK-3β – внутриклеточная серин/треониновая киназа, обнаружена в цитоплазме, ядре, митохондриях, синтезируется во всех тканях организма и участвует в регуляции таких процессов, как метаболизм, клеточная пролиферация, апоптоз и другие. GSK-3β в активном состоянии фосфорилирует и ингибирует гликогенсинтазу. Когда инсулин связывается с рецептором на клетке через инозитол-3-фосфат, то активация протеинкиназа В(Akt1) активируется и, в свою очередь, фосфорилирует и ингибирует GSK-3β. Также GSK-3β участвует в регуляции обмена глюкозы. Важная функция GSK-3β – ингибирование белка β-катенина. Когда клетка GSK-3β в комплексе с белками APC и Axin покоится, то происходит связывание и фосфолирование транскрипционного фактора β-катенина, затем его убиквинтирование и деградация. Когда Wnt действует на клетку белков, то белок Dvl активируется, связывается с GSK-3β, высвобождая β-катенин, что препятствует его распаду. При этом роль GSK3α/β в воспалительной реакции адипоцитов до сих пор полностью не исследована, поэтому представляется перспективным изучение места GSK-3 в Wnt/β-catenin-сигнальном пути при ожирении.

Целью исследования явилась оценка активности компонентов Wnt-сигнального пути у пациентов с ожирением посредством определения уровня GSK-3 и β-катенина в сыворотке крови. В исследование были включены 32 пациента, у которых было определено ожирение I-III степени с прогрессирующими формами, сахарный диабет отсутствует. Чтобы определить концентацию GSK-3α, GSK-3β и β-катенина в сыворотке крови, был использован метод иммуноферментного анализа. Данные представлены в виде абсолютного и относительного (%) числа больных; среднего арифметического; медианы, 1-го и 3-го квартилей – Ме (Q_0,25-Q_0,75). В сыворотке крови пациентов, страдающих ожирением, выявлено повышение уровня GSK-3α (785 (371-1317,5) пг/мл) в 7,5 раз по сравнению со здоровыми лицами 105 (102,5-110) пг/мл, (р < 0,001), также повышение уровня GSK – 3β в сыворотке крови, уровень которого у пациентов с ожирением составил 295 (190-695) пг/мл, что на 18,3% превышало аналогичные показатели, полученные у здоровых лиц 241 (218,75-287,5) пг/мл, р = 0,111. Была отмечена тенденция к увеличению количества GSK-3 в зависимости от степени ожирения, при этом часто наблюдается снижение β-катенина, что согласуется с исследованиями ряда авторов. Эти данные можно рассматривать в качестве прогностического критерия течения патологических процессов при ожирении. 

В связи с общей тенденцией изменения реактивности при многих экзогенных и эндогенных заболеваниях, в настоящее время все большее внимание уделяется изменению иммунологической реактивности при наркомании. Целесообразность оценки состояния иммунных механизмов при опийной наркомании определяется необходимостью прогнозирования их течения и исхода. Цель исследования – изучение иммунологической реактивности организма у больных опийной наркоманией в состоянии абстиненции. С этой целью были проведены клинико-иммунологические исследования у 80 больных, употребляющих препараты опийной группы. Длительность заболевания колебалось в пределах 0,5-19 лет. Из них давность заболевания до 3 лет – у 28 больных (I группа), а свыше 3 лет – 52 больных (II группа). Количество исследуемых в контрольной группе составляло n = 50. Была проведена оценка психического, наркологического, соматического, неврологического статуса. Исследованы общие клинические, биохимические и иммунологические показатели. В результате данного исследования, было установлено, что у больных I группы наблюдалась более выраженная Т-лимфоцитопения. Выявлено стойкое повышение величины сывороточного IgM как в динамике абстиненции, так и в зависимости от давности заболевания, что может говорить о напряжении гуморального звена иммунитета при опийной наркомании. Кроме того, по мере увеличения длительности хронической наркотизации отмечается тенденция к повышению относительного количества В-лимфоцитов. Таким образом, можно сделать такие выводы, что у больных опийной наркоманией в состоянии абстиненций развивается Т-лимфоцитопения; с увеличением длительности заболевания наблюдается повышение в 2-2,6 раза уровня IgM; выявленные изменения иммунологической реактивности организма предполагают необходимость включения иммунокорригирующей терапии в комплекс лечебных мероприятий при опийной наркомании. 

Транскрипционный фактор NF-κB контролирует экспрессию генов, ответственных за реализацию клеточного цикла, апоптоза и ряда других иммунорегуляторных функций. После обнаружения возможности блокирования опухолевого роста через подавление активности NF-κB был обнаружен ряд неспецифических ингибиторов NF-κB, применение которых, однако, было осложнено множественными побочными эффектами, такими как системное воспаление, вызванное чрезмерной экспрессией интерлейкина-1β, или не связанными с иммунитетом осложнениями, которые могут быть следствием ингибирования субъединицы p65 NF-κB, играющей центральную роль в органогенезе и воспалении. Ингибирование же субъединицы c-Rel приводит к ограничению роста опухоли за счет модуляции свойств Т-регуляторных клеток.

В 2017 году Grinberg-Bleyer и соавт. проверили гипотезу о том, что субъединицу c-Rel можно избирательно ингибировать пентоксифиллином, регулируя тем самым активность Treg в ходе опухолевого роста. Авторы показали, что пентоксфиллин действительно может вызывать избирательную деградацию c-Rel, не влияя на p65, и предположили, что подобное воздействие может быть эффективным для подавления опухолевого роста. В связи этим нами была поставлена цель исследовать in vitro влияние пентоксифиллина на функции и противоопухолевый цитотоксический потенциал Т-клеток пациентов со злокачественными опухолями.

В качестве объекта исследования использовались мононуклеарные клетки периферической венозной крови 25 пациенток с первичным РМЖ (отсутствие метастаз), 15 пациенток с прогрессирующим РМЖ (наличие метастаз), а также 25 условно здоровых женщин без диагностированной патологии молочных желез. Исследование проводилось с добровольного информированного согласия доноров и пациентов. Исследование одобрено локальным этическим комитетом НИИФКИ.

В результате исследования было показано, что использование пентоксифиллина для ингибирования транскрипционного фактора NF-κB in vitro усиливает проапоптотический и цитотоксический противоопухолевый ответ, приводя к повышению экспрессии TRAIL на Т-лимфоцитах, в основном у здоровых доноров и пациентов с метастатическим раком молочной железы, как на интактных Т-клетках, так и в ответ на клетки опухолевой линии карциномы молочной железы человека ZR-75-1. У здоровых доноров в присутствии пентоксифиллина появляется популяция высокоэкспрессирующих TRAIL CD4 и CD8 Т-клеток. 

В иммунопатогенезе саркоидоза и механизмах образования гранулем принимают участие различные клетки иммунной системы и продуцируемые ими цитокины. В настоящее время активно изучается роль хемокинов, идет поиск ключевых молекул, важных для привлечения клеток иммунной системы в очаги поражения и формирования гранулем, а также влияющих на исходы процесса гранулемообразования. Целью исследования явилось определение уровней CCL17/TARC и CCL22/ MDC хемокинов в плазме крови больных саркоидозом, не получавших иммуносупрессивную терапию. Что является актуальной задачей для уточнения ряда аспектов иммунопатогенеза заболевания, а также для поиска информативных клинико-лабораторных критериев оценки активности и прогноза заболевания. Были исследованы образцы плазмы крови больных саркоидозом (n = 52). У 37% (19/52) отмечалось острое, а у 63% (33/52) – хроническое течение заболевания. Контролем служили образцы периферической крови, полученные от 22 практически здоровых добровольцев. Концентрации хемокинов (пг/мл) определялись методом мультиплексного анализа по технологии xMAP (Luminex), тестсистемы Milliplex MAP (Millipore, США). У обследованных больных обнаружено достоверно повышенное содержание хемокинов относительно здоровых лиц: CCL17 – 78,24 пг/мл против 26,24 пг/мл, p < 0,001; CCL22 – 660,60 пг/мл против 405,00 пг/мл, p < 0,001. Анализ клинико-лабораторной значимости уровней хемокинов в плазме крови обследованных больных саркоидозом выявил параметры их чувствительности и специфичности. У больных с острым течением саркоидоза они составили: для CCL17 – 63% и 78%, CCL22 – 63% и 91%; при хроническом: CCL17 – 58% и 83%, CCL22 – 67% и 86% соответственно. У больных с хроническим течением заболевания установлена прямая положительная связь между уровнем ангиотензин-превращающего фермента (АПФ) и концентрацией хемокинов: для CCL17 (r = 0,530; p = 0,003), для CCL22 (r = 0,446; p = 0,014). У больных саркоидозом с признаками системности заболевания был достоверно повышен уровень CCL17: 102,82 пг/мл против 32,72 пг/мл, p = 0,011. Уровни хемокина CCL17 были достоверно повышены у больных с признаками гепатомегалии по сравнению с больными, не имеющими изменений данного органа: 130,73 пг/мл против и 51,60 пг/мл, p = 0,022. При наличии спленомегалии относительно больных без таких признаков отмечалось повышение концентраций хемокинов: CCL17 – 249,18 пг/мл против 46,87 пг/мл, p = 0,002; CCL22 – 1271,40 пг/мл против 660,63 пг/мл, p = 0,003. Таким образом, уровни хемокинов CCL17 и CCL22 при саркоидозе могут быть использованы в качестве дополнительных прогностических маркеров при хроническом течении саркоидоза с разной степенью активности клинических особенностей, в том числе, с наличием или отсутствием системных проявлений заболевания. 

Цель: роль факторов врожденного и адаптивного иммунитета в развитии внутриутробной генерализованной цитомегаловирусной инфекции.

Под наблюдением находилось 47 новорожденных детей с врожденной генерализованной цитомегаловирусной инфекцией, которые составили I группу. На основании данных клинико-лабораторного обследования все исследуемые новорожденные были разделены на две подгруппы. Подгруппу 1.1 (29 человек) составили новорожденные с тяжелой формой ЦМВИ и подгруппу 1.2 (18 человек) – новорожденные со среднетяжелым течением ЦМВИ. В контрольную группу вошли 26 новорожденных без герпесвирусной инфекции. Определение количества моноцитов, экспрессирующих Toll-рецепторы (TLR), проводили методом лазерной проточной цитометрии (Beckman Coulter) с использованием реагентов Beckman Coulter, HyCultBiotechnology: FITC-СD282+, СD284+, CD286+ и PE-CD14+. Концентрацию IFNγ, IFNα, IL-6, IL-8 в сыворотке крови новорожденных определяли методом ИФА с использованием тест-систем BenderMedsistems.

Внутриутробная генерализованная ЦМВИ с полной клинической симптоматикой у новорожденных характеризовалась снижением количества моноцитов, экспрессирующих TLR-2 и TLR-6, что было сопряжено со снижением уровня IFNα, IFNγ, повышением уровня IL-6, IL-8 и MCP-1. Подгруппа с неполной клинической симптоматикой ЦМВИ характеризовалась снижением уровня IFNα, в сочетании с повышением уровня IL-6. Выявленные иммунные нарушения приводят к редукции противовирусного иммунного ответа, определяют тяжесть заболевания у перинатально инфицированных новорожденных. 

Болезнь Альцгеймера (БА) – в настоящее время наиболее частая причина деменции. Значительная роль в патогенезе БА принадлежит активации механизмов врожденного иммунного ответа ЦНС и нейровоспалению. Существует гипотеза, что в развитии и поддержании воспалительной реакции на ранних стадиях БА могут иметь значение хронические инфекции. Целью настоящего исследования являлось изучение частоты выявления и уровня ДНК герпесвирусов, а также их возможной связи с уровнем основных цитокинов врожденного и адаптивного иммунного ответа и с клиническими показателями при БА у больных с ранним и поздним началом заболевания. В исследование вошли 30 больных БА на стадии умеренной деменции и 33 здоровых добровольца. Количественное определение ДНК герпесвирусов (CMV, EBV, HHV-6, HHV-7) в слюне и в крови проводили методом ПЦР с гибридизационно-флуоресцентной детекцией в режиме «реального времени». Уровень цитокинов и растворимого антагониста IL-1β (IL-1ra) в крови определяли методом ИФА. Герпесвирусную инфекцию с повышенной вирусной нагрузкой определяли, учитывая предыдущие данные, полученные авторами, при наличии хотя бы одного из 2 критериев: 1) уровень ДНК вирусов EBV и/или HHV-6 более 10 000 копий/мл в слюне; 2) наличие ДНК хотя бы одного из вирусов EBV, HHV-6, HHV-7 в крови. Выявлено, что при раннем начале достоверно чаще обнаруживался HHV-6 в слюне и крови, а при позднем – EBV в слюне. При раннем начале в подгруппе больных с повышенной вирусной нагрузкой было достоверно более выраженное повышение уровней ряда основных цитокинов: провоспалительных цитокинов IL-8 и IL-12p40p70, цитокина Th2-звена адаптивного иммунного ответа IL-4, цитокина адаптивного иммунного ответа IL-2, хотя уровень противовоспалительного белка IL-1ra был достоверно ниже, чем в контрольной группе. Учитывая отсутствие выраженного роста уровня основного цитокина Th1-звена адаптивного ответа IFNγ, эти изменения могут свидетельствовать о нарушении реакций противовирусной защиты, с активацией системного воспаления и Th2- звена иммунитета. Также при раннем начале повышенная вирусная нагрузка была связана с более низкими баллами Бостонского теста называния, отражающего сохранность номинативной функции речи. Представленные результаты свидетельствуют, что при исследованиях механизмов БА и поиске прогностических маркеров болезни важным является учет неоднородности заболевания по генетическим факторам предрасположенности, факторам риска, особенностям иммунитета и клиническим данным, что необходимо для последующей разработки персонализированных подходов к профилактике и лечению БА. 

Дегенеративно-дистрофические заболевания сетчатки, в частности возрастная макулярная дегенерация (ВМД), в настоящее время считаются ведущей причиной слепоты и слабовидения в развитых странах, имеют тенденцию к неуклонному росту. В публикациях последних лет представлены доказательства участия воспалительных механизмов в развитии и прогрессировании ВМД, расшифрованных благодаря успехам в области исследований врожденного и адаптивного иммунитета. Однако иммунопатогенез атрофической формы ВМД – «географической атрофии» (ГА) остается практически неизученным. Целью работы явилось исследование локальной экспрессии мРНК воспалительных цитокинов IL-1β, IL-18, CCL2/MCP-1 в модели атрофии РПЭ, индуцированной субретинальным введением 0,9%-ного раствора хлорида натрия в эксперименте у кроликов. Исследования выполнены в образцах тканевого комплекса сетчатки-РПЭ-хориоидеи (ТК), выделенного из глаз 23 кроликов породы новозеландских альбиносов, на которых моделировалась атрофия РПЭ путем субретинального введения 0,9%-ного раствора хлорида натрия, и 5 здоровых кроликов без глазных поражений. Животным опытной и контрольной групп за неделю до оперативного вмешательства, в раннем периоде, в сроки формирования устойчивой атрофии (РПЭ) проводились оптическая когерентная томография (ОКТ) и аутофлюоресценция глазного дна (АФ). Оценка уровней экспрессии генов провоспалительных цитокинов в ТК выполнялась методом ОТ-ПЦР. Показано, что субретинальное введение 0,01 мл 0,9%-ного раствора хлорида натрия, индуцирующее развитие атрофии РПЭ у кроликов в эксперименте, ассоциируется с разнонаправленными изменениями экспрессии mRNA генов IL-1β, IL-18, МСР-1/CCL2 относительно нормы. Охарактеризованы три типа ответа в тканевом комплексе хориоидея / РПЭ / сетчатка, формируемые во время развития атрофических изменений и определяемые величиной локальной экспрессии генов цитокинов: 1) гипо/ареактивность – снижение/отсутствие экспресии; 2) нормореактивность – умеренное повышение; 3) гиперреактивность – гиперэкспрессия. У 69,6% животных при формировании устойчивой атрофии отмечалось повышение (от умеренного до гиперответа) локальной экспрессии mRNA МСР-1/CCL2, а в трети случаев – значительное усиление экспрессии mRNA IL-1β – факторов, повреждающих гематоретинальный барьер и способствующих нарушению иммунной привилегии заднего отрезка глаза. Полученные данные могут быть полезны в изучении различных видов атрофии РПЭ и при разработке новых стратегий лечения офтальмопатологии, в доклинических исследованиях. 

Лечение детей раннего возраста с атипичными или рецидивирующими гнойными инфекциями мягких тканей (ГЗМТ), которые не демонстрируют хорошего ответа на хирургическое лечение и антибактериальные препараты, является наиболее сложным. ГЗМТ возникают на фоне нарушений функционирования иммунной системы и в первую очередь системы нейтрофильных гранулоцитов (НГ). Векторный эффект иммунотропной терапии на конкретную субпопуляцию NG может позволить корректировать дисфункции NG без ущерба для защиты хозяина, включая стратегии усиления, подавления или восстановления их функций.

Цель исследования: оценить в системе in vitro модулирующие эффекты влияния аргинил-альфа-аспартил-лизил-валил-тирозил-аргинин (ГП) на трансформированный фенотип 4 субпопуляций НГ, а также на функциональную активность НГ детей с гнойно-воспалительными заболеваниями мягких тканей. Исследованы образцы периферической крови (ПК) детей раннего возраста 2-4 лет: 17 детей с нетипично протекающими острыми ГЗМТ и 10 условно здоровых детей. На I этапе проведена сравнительная оценка содержания и фенотипа 4 субпопуляций НГ CD16⁺CD62L⁺СD63^- , CD16⁺CD62L⁺СD63⁺, СD64^- CD16⁺CD32⁺CD11b⁺, СD64⁺CD16⁺CD32⁺CD11b⁺, фагоцитарной и микробицидной функции НГ. На II этапе в системе in vitro определены эффекты ГП на НГ детей с ГЗМТ по изучаемым параметрам. Методом проточной цитометрии (FC500, Beckman Coulter, (США), конъюгаты МкАТ Beckman Coulter International S.A. (Франция)), определялось относительное количество НГ исследуемых субпопуляций и плотность экспрессии рецепторов (MFI). Для оценки фагоцитарной функции НГ использован микробиологический метод с оценкой завершенности фагоцитоза со S. аureus (штамм 209). Активность NADРН-оксидазы НГ исследовали в НСТ спонтанном тесте (НСТсп.) и в нагрузочном в системе in vitro (НСТст.). Сравнительное изучение образцов ПК условно здоровых детей и детей с ГЗМТ позволило выявить различные варианты трансформации фенотипа изучаемых субпопуляциях НГ, сопряженных с дефектами их функциональной активности. В системе in vitro были продемонстрированы эффекты ГП, проявляющиеся снижением количества CD16⁺CD62L⁺CD63⁺НГ и повышением CD16⁺CD62L⁺CD63^- НГ, модуляцией негативно измененного фенотипа субпопуляций CD64^- CD32⁺CD16⁺CD11b⁺НГ и CD64⁺CD32⁺CD16⁺CD11b⁺НГ, направленные на восстановление фагоцитарной функции и поддержания напряженности NADPH-оксидаз. В результате исследования установлено иммуномодулирующее действие ГП, которое проявляется в переориентации НГ с провоспалительного фенотипа на противовоспалительный, что может быть использовано в будущем при создании персонализированной таргетной иммунотерапии. Направлена на коррекцию неполноценного функционирования НГ у детей раннего возраста, страдающих ГЗМТ. 

Черепно-мозговая травма (ЧМТ) является одной из наиболее распространенных патологий центральной нервной системы в мире, а применение методов структурной нейровизуализации – компьютерной томографии (КТ) и магнитно-резонансной томографии (МРТ) – зачастую не позволяет оценить тяжесть, полученной при травме головного мозга. Это предопределяет необходимость поиска новых методов дифференциальной диагностики степени тяжести и прогнозирования риска последствий. Одно из таких перспективных направлений является изучение иммунного статуса, так как черепно-мозговая травма характеризуется высокой частотой осложнений.

Помимо этого известно, что тяжесть при ЧМТ в значительной степени определяется вовлеченностью иммунокомпетентных клеток. Реакции со стороны иммунной системы, которые развиваются после травмы мозга и, возможно, направлены против собственных антигенов, в раннем периоде заболевания имеют отношение к повреждению нервной ткани. Однако, по последним имеющимся данным, впоследствии способны стимулировать процессы репарации и регенерации в ткани головного мозга. При повреждении нервной ткани в ответ на эндогенные молекулы, которые образуются при разрушении клеток и внеклеточного матрикса, будут активироваться клетки иммунной системы.

Современные данные указывают, что Т-клетки иммунной системы играют роль как в формировании вторичных повреждений, так и в механизмах восстановления. Они способны защищать нейроны посредством продукции нейротрофических факторов, таких как нейротрофический фактор мозга (BDNF), который стимулирует рост нейронов и формирование синапсов. С помощью многоцветного цитофлуометрического анализа было проведено исследование по определению количества основных субпопуляций лимфоцитов среди CD45RA-negative CD3⁺CD4⁺-клеток. Относительное количество Th17 (CXCR5- CXCR3- CCR6+CCR4- ) и Th17/Th22 (CXCR5^- CXCR3^- CCR6⁺CCR4⁺), Th1/Th17 (CXCR5^- CXCR3⁺CCR6⁺CCR4^- ) среди общего количества CD45RA-negative CD3⁺CD4⁺-клеток у пациентов с ушибом головного мозга достоверно повышено в сравнении со значениями в контрольной группе в свою очередь, а относительное количество Th1 (CXCR5^- CXCR3⁺CCR6^- CCR4^- ) среди общего количества CD45RA-negative CD3⁺CD4⁺Т-клеток достоверно снижено в сравнении со значениями в контрольной группе. Полученные к настоящему времени результаты позволяют рассматривать иммунные ответы среди ключевых звеньев патогенеза ушиба головного мозга. И, возможно, комплексное иммунологическое обследование пострадавших в первые сутки после травмы позволит определить параметры, которые помогут прогнозировать характер возможных осложнений у пациентов с ушибом головного мозга. 

Искусственные материалы, применяемые в регенеративной медицине, при имплантации индуцируют развитие воспалительной реакции, необходимой для эффективной регенерации поврежденной костной ткани. Контакт имплантата с тканями сопровождается осаждением белков крови и интерстициальной жидкости на его поверхности, что способствует активации системы комплемента, компонентов врожденного иммунитета и инициирует коагуляционный гемостаз, приводящий к образованию фибринового сгустка. На поверхности имплантата образуется внеклеточный матрикс на основе фибрина, коллагена и эластина, что обеспечивает основу для формирования тканевой структуры посредством адгезии стволовых клеток на формирующуюся костную мозоль до образования костного регенерата. Для предотвращения развития постоперационных патологических состояний, вызванных гиперкоагуляционным синдромом, используют терапевтические стратегии с применением антикоагулянтов (гепарин, варфарин). Однако их использование ограничивает нормальное образование сгустка фибрина in vivo. Это может привести к замедлению миграции мезенхимных стволовых клеток (МСК) и нарушить формирование костной мозоли, что ингибирует процессы остеоинтеграции имплантата и заживление кости. Целью исследования явилось изучение влияния гепарина в градиенте низких и высоких концентраций на миграционную активность и стволовость МСК человека в условиях культивирования in vitro. По результатам проточной цитометрии было выявлено, что высокие концентрации гепарина (130, 260 IU/ml) в 2D-модели культивирования способствуют увеличению количества клеток, экспрессирующих поверхностные маркеры CD73 и CD90, что свидетельствует о сохранении МСК высокого клоногенного потенциала. 3D-модель культивирования in vitro с добавлением гепарина и остеозамещающих имплантатов, несущих КФ покрытие с индексом шероховатости R_a = 2,6-4,9 мкм, способствовала сохранению «стволовости» МСК через экспрессию поверхностных маркеров CD73 и CD90. Согласно результатам, полученным с помощью системы xCELLigence, гепарин в поздние сроки (с 20-40 ч) повышает инвазию МСК через микропоры, симулирующие состояние стенки кровеносных сосудов. Однако в присутствии наночастиц ГАП, имитирующих процессы ремоделирования минерального костного матрикса и/или резорбции костного цемента, эффект гепарина был выражен в меньшей степени. Результаты могут быть использованы в области регенеративной медицины, связанной с введением МСК. Данные могут служить предпосылкой для разработки новых терапевтических стратегий для пациентов хирургического профиля с высоким риском развития послеоперационных тромбозов после проведения остеосинтеза. 

Развитие и прогрессирование сердечной недостаточности связано с различными патофизиологическими механизмами, особый интерес представляет изучение воспалительной реакции, как фундаментального звена в патогенезе ХСН и ее основного компонента – декомпенсации. Проведено открытое, нерандомизированное, проспективное исследование по изучению клинико-морфологических особенностей субклинического воспаления у больных с острой декомпенсацией ишемической хронической сердечной недостаточностью со сниженной фракцией выброса. В исследование были включены 25 больных с декомпенсацией ишемической ХСН с ФВ левого желудочка < 40% в возрасте от 35 до 75 лет (60,12±9,3) с подписанным информированным согласием. В данном исследовании изучалась динамика содержания в сыворотке крови С-реактивного белка (СРБ), N-концевого фрагмента белка-предшественника мозгового натрийуретического пептида (NT-proBNP), растворимого ST2 (sST2), рецептора инсулиноподобного фактора роста 1 (IGF-1R), интерлейкина-6 (IL-6), интерлейкина-10 (IL-10), фактора некроза опухоли-α (TNFa) на Multiplex Instrument FLEXMAP 3D Luminex Corporation. Все обследованные пациенты были разделены на две группы в зависимости от диагностированного миокардита: пациенты без признаков миокардита и пациенты с миокардитом. Установлено, что в группе пациентов с диагностированным миокардитом наблюдалось повышенное содержание СРБ, IGF-1R, IL-6 и IL-10, TNFa по сравнению с группой пациентов без миокардита. Средние концентрации NT-proBNP и sST2 в обеих группах не различались. При последующем визите через год наблюдалось снижение содержания СРБ, NT-proBNP, IL-6 в обеих группах. В группе больных миокардитом наблюдалось повышение содержания sST2, IGF-1R, IL-10. Таким образом, проведенное в динамике исследование выявило достоверные различия в изменении сывороточной активности про- и противовоспалительных цитокинов и биомаркеров сердечно-сосудистого риска у пациентов с декомпенсированной сердечной недостаточностью с систолической дисфункцией при диагностированном миокардите и при его отсутствии. 

Одно из самых распространенных осложнений беременности – преэклампсия (PE) может возникать начиная с 20 недель гестации и завершается только с полным удалением последа. Традиционно PE принято подразделять на раннюю, возникающую до 34 недель беременности включительно (EOPE), и позднюю – после 34 недель гестации (LOPE). Клинические проявления в том и другом случае одинаковы, однако факторы риска и степень тяжести ПЭ различны. Установлено, что EOPE определяется нарушением инвазии трофобласта и трансформации спиральных артерий матки в ранние сроки беременности, а позднее начало PE связывают со оксидативным стрессом синцитиотрофобласта, возникающим вторично, при ограниченном газообмене и недостаточном поступлении питательных веществ. Многочисленные исследования отмечали значительный вклад иммунных реакций в патогенез преэклампсии, однако состояние В-лимфоцитов при EOPE и LOPE не исследовалось. Проводилась комплексная оценка состояния женщин при раннем (до 34 недель беременности включительно) и позднем (после 34 недель) развитии преэклампсии с учетом клинических и анамнестических характеристик, особенности формирования структурных компонентов плаценты, а также определением характера дифференцировки и функциональной активности В-лимфоцитов. В периферической венозной крови исследовали содержание CD19⁺, CD20⁺, CD19⁺CD27⁺IgD^±, CD19⁺СD20^- СD38⁺, CD20⁺CD5⁺-клеток и сывороточный уровень IL-5, IL-9, IL-13. Морфологическое исследование включало макроскопическое описание, органометрию, обзорную гистологию и трансмиссионную электронную микроскопию. В группе женщин с ранней преэклампсией в анамнезе чаще имелись перинатальные потери, преждевременные роды и медицинские аборты, а в текущей беременности внутриутробное инфицирование, маловодие, плацентарная недостаточность и задержка роста плода. При поздней преэклампсии чаще отмечался метаболический синдром, анемия, а в анамнезе артериальная гипертензия. В периферической крови всех женщин с преэклампсией отмечалось повышение содержания CD20+CD5+-клеток по сравнению с показателями при неосложненной беременности, более выраженное при позднем начале преэклампсии. Только у женщин с ранней преэклампсией в крови повышалось содержание CD19⁺CD20^- CD38⁺ и CD19⁺CD27⁺IgD^±-клеток, IL-5, IL-9 и IL-13. Исследования последа при ранней преэклампсии свидетельствовали о нарушении имплантации и патологической плацентации с развитием первичной плацентарной недостаточности, переходящей в хроническую форму. При поздней преэклампсии развитие фетоплацентарной недостаточности определяли хронические расстройства материнской и плодовой гемоциркуляции с повышенным отложением фибрина и фибриноида в базальной пластинке и в зонах некроза эпителия ворсин. Проведенное исследование показало, что сроки манифестации преэклампсии определяются действием факторов клинического анамнеза, структурной перестройкой в плаценте и иммунными реакциями В-лимфоцитов тесно взаимосвязанными между собой. 

Функционирование секреторных органов тесно связано с деятельностью иммунной системы. Как хорошо известно, это участие проявляется в том, что на определенных стадиях активности, мигрирующие в орган лимфоидные клетки, могут включаться в процесс регуляции секретообразования. Кроме того, продукты деятельности иммунной системы и даже ее клеточные элементы могут становиться составляющими ряда секретов. Молозиво и молоко содержит большое количество клеток широкого спектра (до 1/3 объема), из них численность лимфоцитов составляет до 16% от лейкоцитов. Лимфоциты в иммунологически активной форме, попадая с молозивом в организм новорожденного, активизируют систему клеточного иммунитета. Некоторую роль в этом процессе играет транспорт медиаторов лимфокининов. Микрофаги, Т- и В-лимфоциты, проникая по межклеточным пространствам в лимфоидный слой кишечника передают иммунорецепторы пролимфоцитам новорожденного, «вооружая» их активностью к распознаванию генетически чужеродного. Лимфоциты, содержащиеся в молозиве, являются клетками иммунной системы, обеспечивающими клеточный и гуморальный иммунитет. Они представлены в большей степени Т-клетками, В-клетками и клетками киллерами. Т-клетки молока вырабатывают весь спектр иммунорегуляторных белков, таких как интерферон, фактор некроза опухоли-альфа. Эти клетки являются клетками иммунной памяти. Новорожденные, получившие первую порцию молозива не позже, чем через час после рождения, отличаются повышенной численностью лейкоцитов, более выраженными фагоцитозом, что свидетельствует о стимуляции гемо- и лимфоцитоза. При проведении просвечивающей и сканирующей электронной микроскопии в эпителиальном слое кишечника обнаружены клеточные элементы, которые попали туда из просвета кишечника. На микросрезах видно, как клетки лимфоидной природы, раздвигая структуры эпителиального пласта, минуют естественные барьеры и сохраняют при этом свою физиологическую полноценность. Возможность проникновения иммунокомпетентных клеток молозива матери в кровоток детенышей доказывается при использовании естественной метки клеток самки – полового хроматина. Естественно, что меченные по половому хроматину клетки искали у новорожденных мужского пола. Обнаружение молозивных клеток в кишечной стенке и кровеносном русле детеныша примерно составляет 25% в крови, 1% в лимфе и около 70% в кишечнике. Несомненно, что лейкоциты молозива имеют исключительное значение в создании иммунитета у новорожденных животных. 

В настоящее время выявлено существование широкого спектра субпопуляций CD8⁺Тлимфоцитов, среди которых выделяют субпопуляции наивных и эффекторных клеток, а также клеток памяти. Считается, что CD8⁺Т-лимфоциты являются популяцией лимфоцитов, обладающей высокой цитотоксической активностью, что имеет чрезвычайное значение во время беременности. Учитывая, что каждая субпопуляция характеризуется совокупностью продуцируемых медиаторов, поверхностных и внутриклеточных маркеров, можно предположить их роль в патогенезе преждевременных родов. Это определило необходимость исследования роли наивных клеток, эффекторных клеток и клеток памяти в развитии спонтанных преждевременных родов. Данные о содержании наивных CD8⁺-лимфоцитов в периферической крови женщин с угрожающими преждевременными родами практически отсутствуют. Установлено, что инфильтрация CD8⁺-лимфоцитов в зоне маточно-плацентарного контакта была связана с развитием своевременных родов. Хронический хориоамнионит является наиболее распространенным состоянием при идиопатических преждевременных родах и характеризуется инфильтрацией материнских CD8⁺Т-клеток в хориоамниотические мембраны. В настоящее время считается, что хронические воспалительные поражения плаценты представляют собой материнское антифетальное отторжение. Это послужило поводом для исследования роли этих клеток в патогенезе преждевременных родов.

Цель – установить возможный патогенетический механизм преждевременных родов у женщин с угрожающими преждевременными родами на основании выявленных особенностей дифференцировки и функциональной активности СD8⁺-лимфоцитов на системном уровне.

Обследование женщин производилось на базе Федерального государственного бюджетного учреждения «Ивановский научно-исследовательский институт материнства и детства имени В.Н. Городкова» Министерства здравоохранения России. Всего было обследовано 126 женщин, которые ретроспективно были подразделены на 2 основные группы – женщины с угрожающими преждевременными родами (n = 68), которые была подразделена на 2 подгруппы – с исходом беременности преждевременные роды (n = 30) и своевременные роды (n = 38). В группу контроля вошли 58 женщин с неосложненным течением беременности и родившие своевременно. В популяции CD8⁺-лимфоцитов определяли содержание центральных – Tcm (CD45RACD62L⁺), претерминально-дифференциро ванных – Tem (CD45RACD62L^- ) и терминально-дифференцированных – Temra (CD45RA⁺CD62L^- ) клеток памяти. Во всех популяциях клеток памяти определяли содержание клеток, внутриклеточно продуцирующих Granzyme B. Исследования проводили с помощью моноклональных антител (мАТ) методом проточной цитофлюориметрии на цитометре FACSCanto II с использованием программного обеспечения FACSDiva (Becton Dickinson, США).

Проведен анализ особенностей относительного содержания СD8+-лимфоцитов в основной группе женщин в зависимости от исхода беременности. При сравнении пациенток, имеющих клинику угрожающих преждевременных родов, беременность которых завершилась преждевременно, выявлено более высокое содержание СD8⁺-лимфоцитов, чем в группе женщин, родивших своевременно, что свидельствует о высокой стимуляции цитотоксических Т-лимфоцитов у этой группы женщин. При угрожающих преждевременных родах происходит повышение содержания в периферической крови наивных СD8⁺-лимфоцитов. Данные о содержании наивных CD8⁺-лимфоцитов в периферической крови женщин с угрожающими преждевременными родами практически отсутствуют. Повышение уровня CD8⁺Tn более выражено в подгруппе женщин с благоприятным исходом беременности. Учитывая этот факт, можно предположить, что у женщин с развившимися преждевременными родами более низкий CD8⁺ Tn связан с их усиленной дифференцировкой в эффекторные Т-лимфоциты, с последующей их миграцией в зону плацентации. Этот процесс мог определять отмеченное нами снижение уровня терминально-дифференцированных гранзим-продуцирующих СD8⁺-лимфоцитов в подгруппе женщин с исходом беременности преждевременные роды, что совпало с литературными данными. 

Во время течения хронических вирусных инфекций или роста опухоли из-за постоянного присутствия антигена и воспаления наступает дисфункциональное состояние Т-клеток, называмое истощением (exhaustion). К факторам, связанным с истощением Т-клеток, относят повышение экспрессии различных ингибиторных рецепторов, известных также как checkpoint-молекулы, которое приводит к подавлению пролиферации и продукции таких медиаторов, как IL-2, IFNγ и TNFα.

Рецептор TIM-3 представляет собой иммунорегуляторный рецептор, открытый в 2002 г., который экспрессируется на различных иммунных клетках, включая дендритные клетки, макрофаги и Т-клетки, и опосредует супрессивную активность на иммунных клетках. Устойчивая экспрессия рецептора PD1 на Т-лимфоцитах также ассоциирована с фенотипом истощения, при этом остается неясным, как экспрессия данных ингибиторных рецепторов в норме отличается от таковой в патологических состояниях организма, для которых характерно увеличения числа истощенных Т-клеток.

Целью настоящего исследования стало определение относительного и абсолютного количества Т-клеток, экспрессирующих PD-1 и Tim-3, а также количества молекул PD-1 и Tim-3 на поверхности CD4⁺ и CD8⁺T-клеток у здоровых людей и пациентов с раком молочной железы (РМЖ). Группа пациентов с РМЖ была условно разделена на две группы в зависимости от степени прогрессии заболевания на пациентов с первичным (отсутствие метастаз) и прогрессирующим РМЖ (наличие метастаз).

В результате исследования показано, что у больных раком молочной железы наблюдается увеличение абсолютного количества PD-1-позитивных CD4⁺Т-клеток. Абсолютное количество молекул на клетку также выше у пациентов с РМЖ по сравнению со здоровыми донорами. Для больных показана тенденция к увеличению абсолютного количества TIM3-позитивных CD4⁺Тклеток по сравнению со здоровыми донорами и в ряду от первичного заболевания к прогрессирующему РМЖ.

Таким образом, различия в характере экспрессии checkpoint-молекул TIM-3 и PD1 наблюдаются при сравнении нормы и злокачественной патологии молочной железы, и могут стать важным маркером функционального состояния Т-лимфоцитов у больных РМЖ. 

Воздействие алкоголя вызывает дисбаланс нейроиммунной функции и приводит к нарушению развития мозга. Алкоголь активирует сигнальные пути врожденного иммунитета в мозге. Нейроиммунные молекулы, экспрессируемые и секретируемые глиальными клетками головного мозга (микроглия, олигодендроглия), изменяют функцию нейронов и стимулируют в дальнейшем развитие алкогольного поведения. В передаче нейроиммунных сигналов участвуют различные сигнальные пути и клетки мозга. Глиальные клетки являются основными источниками иммунных медиаторов в головном мозге, которые отвечают на иммунные сигналы в центральной нервной системе и выделяют их. Целью настоящего исследования было изучение нейрональных элементов: морфометрических параметров глиобластов, синаптических структур и свойств синаптосомальных ГАМКА-бензодиазепиновых рецепторов нейроиммунной системы в эмбриогенезе мозга человека при перинатальном воздействии алкоголя. Выявлены изменения глиобластов в ткани мозга эмбрионов и плодов человека в условиях хронической пренатальной алкоголизации с увеличением срока беременности по сравнению с контрольными подгруппами: достоверное увеличение среднего количества глиобластов, длины периметров пресинаптических терминальных структур, постсинаптической плотности, пресинаптические терминальные области были значительно меньше (p < 0,01) в исследуемой группе, чем в контрольной группе сравнения. Воздействие этанола приводит к снижению аффинности ГАМКАбензодиазепиновых рецепторов, что влияет на нейрональную пластичность, связанную с развитием и дифференцировкой клеток-предшественников (глиобластов и нейробластов) в период эмбриогенеза головного мозга человека и приводит к подавлению ГАМКергической функции в головном мозге. Это вызывает нарушение взаимосвязей эмбриональных клеток в головном мозге, приводит к чрезмерным явлениям апоптоза из-за активации глиальных клеток нервной ткани, нарушению нейроиммунной функции в развивающемся мозге, изменениям нейрональных цепей, а также к изменению баланса возбуждающих и тормозных эффектов, что оказывает влияние на функциональную активность в центральной нервной системе. Активация глии – это компенсаторная реакция, вызванная нейропластическими изменениями, направленная на адаптацию развивающегося мозга эмбриона и плода в условиях нейротоксичности и гипоксии под воздействием пренатальной алкоголизации материнского организма и влияния этанола на плод. Динамика изменений глиальных элементов и рецепторной активности в нервной ткани эмбрионов и плодов человека в условиях пренатального воздействия алкоголя свидетельствует о более выраженном влиянии алкоголя на самые ранние стадии развития эмбриона человека, что имеет большое практическое значение при планировании беременности и недопустимость алкоголизации матери во избежание негативных последствий у потомства. 

У больных ожирением выявлены взаимосвязи содержания химерина в плазме крови с экспрессией генов TFAM, Drp1, MFN2, SOD, BAX, ответственных за контроль качества митохондрий, в инсулинзависимых тканях (жировая ткань, печень). Установлены тканеспецифические особенности экспрессии генов (TFAM, Drp1, MFN2, SOD, BAX), числа копий мтДНК в исследуемых депо у больных ожирением. Доказано, что изменение (снижение) числа копий мтДНК в инсулинзависимых тканях может оказывать протекторное действие на митохондрии, в условиях повышенного окислительного стресса.

Выявлено, что у больных без СД 2-го типа повышение продукции химерина способствует активации антиоксидатной системы в висцеральной жировой ткани, но не в печени. Напротив, у всех больных ожирением с СД 2 типа регистрировалось снижение (в сравнении с больными без СД 2 типа) плазменного уровня химерина.

Таким образом, низкое содержание химерина в плазме крови у больных с СД 2-го типа опосредует формирование дисфунции митохондрий в инсулинзависимых тканях (жировая ткань, печень). 

Изучение патогенеза бронхиальной астмы является актуальной проблемой в связи с ее высокой распространенностью и зачастую бесконтрольным развитием тяжелых форм, в том числе в детском возрасте. Первые признаки развития астмы обычно возникают в детстве, что приводит к ухудшению качества жизни пациента и ранней инвалидизации. Поскольку астма является генетически опосредованным процессом, предполагается, что тяжесть заболевания зависит от наличия определенного аллельного варианта в медиаторных (таких как цитокины) генах, участвующих в патогенезе БА. Целью данного исследования был поиск иммуногенетических маркеров тяжелого течения астмы у детей славянского происхождения, проживающих в г. Красноярск. Впервые с помощью метода мультиплексного анализа (xMAP) определены количественные показатели Th1/Th2/ Th17-цитокинового профиля у больных бронхиальной астмой (БА) детей с различной степенью тяжести заболевания, в зависимости от полиморфизма генов цитокинов. Изменения цитокинового фона у больных БА укладываются в концепцию о том, что при тяжелых формах астмы возрастает доля нейтрофильного эндотипа заболевания, осуществляющего свои функции посредством Th1 и Th17-лимфоцитов. Кроме этого, получены данные цитокинового профиля в зависимости от наличия сопутствующих острых респираторных инфекций: показан дисбаланс уровня цитокинов, с тенденцией сохранения защитных функций иммунной системы у больных в состоянии ремиссии. Получено распределение в генах цитокинов: аллельные варианты IL12В rs321220*G, IL13 rs1800925*С, IL31 rs7977932*C и IL33 rs7044343*T являются наиболее часто встречающимися в популяционной выборке г. Красноярска. Изучена вероятность ассоциации генотипов полиморфных генов цитокинов (IL12В, IL13, IL31, IL33) с состоянием иммунной системы при бронхиальной астме с различной степенью тяжести заболевания у детей: показана достоверная ассоциация генотипа TT IL12B rs3212220 с низкой концентрацией IL-12B. Полученные данные можно использовать в комплексе с полученными нами ранее иммуногенетическими маркерами тяжелой степени и неконтролируемого течения астмы у детей с целью персонифицированного прогноза характера заболевания. 

Отсроченные осложнения сахарного диабета 1-го типа (СД1) у детей и подростков являются важной проблемой современной медицины. В последние годы активно обсуждается роль иммунных механизмов, в частности хронического воспаления в развитии как СД1, так и его микрососудистых осложнений. Активация Toll-like рецептора 2 (TLR2) и Toll-like рецептора 4 (TLR4) приводит к индукции синтеза провоспалительных цитокинов, хемокинов, молекул адгезии, участвующих в формировании диабетических микрососудистых осложнений. При этом наличие генетического полиморифизм TLR2 и TLR4 изменяет иммунное реагирование в ответ на их стимуляцию эндогенными лигандами, что может повышать риск возникновения диабетических микроангиопатий. Цель исследования – изучить распределение частот генотипов и аллелей генов TLR2 и TLR4 и определить содержание TNFα, IL-1, VCAM-1, фракталкин, эндотелин-1 у подростков с СД1 и микрососудистыми осложнениями. Обследовано 139 подростков с СД1 от 14 до 18 лет и 56 здоровых подростков. Пациенты с СД1 распределены на две группы: I группа – пациенты с декомпенсацией СД1, (HbA1C > 9,0%), (n = 64); II группа – пациенты с удовлетворительным гликемическим контролем СД1 (HbA1C ≤ 9,0%), (n = 75). В зависимости от наличия осложнений выделены 4 подгруппы: Iа (n = 49), IIа (n = 38) – подростки с микрососудистыми нарушениями: Iб (n = 15), IIб (n = 37) – с неосложненным течением заболевания. Определение аллельных вариантов генов TLR проводили с использованием тест-систем ГосНИИ генетика (Москва). Определение содержания цитокинов в сыворотке крови осуществлялось методом твердофазного иммуноферментного анализа BIOSCIENCE. Обработка данных проводилась с использованием пакетов прикладных программ Statistica 6.0. При изучении распределения полиморфизмов TLR2 (Arg753Gln) и TLR4 (Thr399Ile) не было выявлено достоверных различий между исследуемыми подгруппами и контролем. Отмечено, что вариант Asp299Gly в Iа и IIа подгруппах (с осложненным течением) встречался достоверно реже, чем в Iб, IIб подгруппах и контролем. Установлено, что наличие аллеля Gly в гене TLR4 влияет на уровень экспрессии TNFα и VCAM-1 в сыворотке крови и может считаться протективным по развитию микрососудистых осложнений. 

TNFα – плейотропный цитокин, относящийся к важным воспалительным медиаторам ряда заболеваний и реализующий свои биологические функции через два его различных рецептора, TNFR1 и TNFR2. Важное значение в реализации ответа клетки на действие TNFα имеет изменение соотношения данных типов рецепторов, способствующее смещению баланса между проапоптотическими и пролиферативными сигнальными путями. Протекающие в организме патологические процессы могут изменять уровень экспрессии TNFR1 и TNFR2 на клетках, вовлеченных в развитие заболевания.

Цель исследования – изучение уровня коэкспрессии рецепторов 1-го и 2-го типа к TNFα на основных субпопуляциях клеток периферической крови у больных ревматоидным артритом и бронхиальной астмой.

Для оценки уровня коэкспрессии рецепторов 1-го и 2-го типа к TNFα использовалась цельная кровь условно-здоровых доноров больных ревматоидным артритом и бронхиальной астмой. Оценка фенотипических характеристик проводилась методом проточной цитометрии. Для одновременного определения количества рецепторов TNFα типов 1 и 2 на различных субпопуляциях проводили двойное мечение парных образцов. После цитометрического анализа подстчитывли количество рецепторов 1-го и 2-го типа, а также процент каждой фракции.

Наиболее выраженными изменениями в соотношении процента клеток, экспрессирующих TNFR1 и TNFR2, отличалась популяция В-лимфоцитов. Для популяции Т-лимфоцитов характерны были различия по проценту клеток, экспрессирующих только TNFR1, у больных РА и БА по сравнению со здоровыми донорами и между собой. Для моноцитов характерен больший процент дубль отрицательных клеток при БА и РА по сравнению со здоровыми донорами. Полученные данные свидетельствуют о различии в профиле коэкспрессии рецепторов 1-го и 2-го типа к TNFα при РА и БА как по сравнению со здоровыми донорами, так и между данными заболеваниями.

Основные популяции иммунных клеток активно вовлечены в патогенез как ревматоидного артрита, так и бронхиальной астмы и полученные результаты могут свидетельствовать о возможностях этих клеток по-разному отвечать на действие TNFα при изменении соотношения процента и количества рецепторов на их поверхности. 

В данной статье проведен ретроспективный анализ историй болезни с целью выработки индивидуализированного подхода к лечению COVID-19. Поставлены вопросы о целесообразности всеобщего проведения иммуносупрессивной терапии, о необходимости назначения глюкокортикостероидов только с учетом цитокинового профиля больных, взаимосвязи глюкокортикостероидной терапии и нарушений углеводного обмена, как одних из наиболее часто встречающихся осложнений фармакотерапии COVID-19 у изученных нами больных. Неоправданная иммуносупрессия в стадии активной борьбы с инфекционным агентом как фактор хронизации процесса и снижения реактивности организма, а также нейтрализация иммуносупрессивной терапией мобилизованных на борьбу с возбудителем факторов защиты врожденного неспецифического иммунитета. Важность учета вероятности тромбообразования с рассмотрением показателей коагулограммы и маркеров тромбообразования (D-димер, продукты деградации фибрина) не исключает риск геморрагических осложнений при назначении высоких доз антикоагулянтов. Антибактериальная терапия при неосложненных вирусных инфекциях не является ни этиологическим, ни патогенетическим вариантом лечения, однако зачастую приводит к появлению резистентных штаммов микроорганизмов в результате мутационной изменчивости и эволюционных адаптаций бактерий, что усложняет выбор эффективного антибактериального препарата. Антитромботическая, глюкокортикостероидная и антибактериальная терапия должны быть клинически и лабораторно оправданы в каждом отдельно взятом случае. В статье освящается безопасность назначения противоподагрических средств в лечении COVID-19 как противовоспалительных. В обзоре рассмотрены все вышеперечисленные аспекты терапии COVID-19 с ссылкой на зарубежные исследования, описаны варианты патофизиологического развития инфекции. Учитывая масштаб коронавирусной инфекции и тяжелые социально-экономические последствия пандемии, изучение основных этиопатогенетических аспектов, корреляции проводимого лечения с главными звеньями патогенеза, эффективности различных вариантов фармакотерапии COVID-19, поиск наиболее безопасной в отдаленной перспективе терапии – основная задача медицинского сообщества, так как вирусы имеют множество стратегий обхода защитных механизмов иммунной системы. Гарантом эффективности проводимого лечения является воздействие на основные патогенетические звенья, соответственно, проводимая терапия должна быть основана не только на клинических данных, но и подкреплена изменениями лабораторных показателей и соотноситься со степенью тяжести рентгенологической картины. Отмечаем необходимость разработки систематизированных данных о коронавирусе, изменениях, которые возбудитель индуцирует в организме. Это позволит выработать инновационные и эффективные терапевтические стратегии для лечения коронавирусной инфекции. 

Известно, что совместное использование вакцин, цитокинов и различных иммуномодулирующих препаратов способствует развитию полноценного иммунного ответа. Такой подход позволяет усилить иммуногенность современных вакцин и направить развитие иммунных реакций по гуморальному или клеточному типу в зависимости от свойств возбудителя той или иной болезни. Совершенствование профилактических средств за счет их сочетанного применения с цитокинами и иммуномодуляторами увеличивает напряженность иммунитета, повышает уровень продукции специфических иммуноглобулинов, протективность антигенов, а также снижает проявление побочных реакций, приводящих к поствакцинальным осложнениям.

Иммуномодуляторы уже успешно используются в препаратах, предназначенных для терапии и профилактики хронической герпетической инфекции и противогриппозной вакцине. Многочисленные экспериментальные и клинические данные свидетельствуют о положительном эффекте применения иммуномодулирующих препаратов при вакцинопрофилактике различных вирусных и бактериальных инфекций, в том числе и особо опасных.

Совершенствование специфической профилактики холеры может быть достигнуто за счет иммуномодулирующих средств, способных стимулировать формирование местного и системного иммунного ответа.

Нами проведена сравнительная оценка целесообразности сочетанного применения вакцины холерной бивалентной химической (ФКУЗ РосНИПЧИ «Микроб» Роспотребнадзора) и иммуномодуляторов с целью повышения эффективности вакцинопрофилактики холеры.

Так как холерная вакцина вызывает активацию гуморального иммунного ответа, оценивали выработку специфических иммуноглобулинов в организме привитых экспериментальных животных и влияние иммуномодуляторов на этот процесс в разные сроки поствакцинального периода.

Способность иммуномодуляторов повышать протективную активность холерной вакцины изучали, заражая животных вирулентным штаммом холеры через месяц и семь месяцев после вакцинации.

Выявлено, что иммуномодуляторы повышают иммуногенность и протективность антигенов, входящих в состав противохолерной вакцины. Использование всех иммунопрепаратов увеличивает продукцию специфических иммуноглобулинов в сыворотке вакцинированных экспериментальных животных. Показано, что в первый месяц после вакцинации наиболее эффективно стимулировал образование антител полиоксидоний, однако ликопид способствовал более длительному сохранению противохолерных иммуноглобулинов в сыворотке вакцинированных кроликов. Сочетанное применение вакцины и ликопида предотвращало развитие холеры у всех взятых в эксперимент животных, в том числе вакцинированных сниженной дозой. В отдаленные сроки поствакцинального периода этот иммуномодулятор повышал протективность противохолерной вакцины в три раза. Полиоксидоний и деринат также увеличивали защитный эффект противохолерной вакцины, но несколько уступали в этом ликопиду. Совместное применение противохолерной вакцины и иммуномодуляторов, особенно ликопида, может быть использовано для совершенствования специфической профилактики холеры. 

Аллергический ринит и бронхиальная астма – широко распространенные респираторные аллергические заболевания. На некоторых территориях РФ доминирующей причиной поллиноза является амброзия. Целью исследования было оценить клиническую и иммунологическую эффективность АСИТ аллергеном Ambrosia artemisiifolia у пациентов, сенсибилизированных Ambrosia trifida в Самарской области. Пациентам с подтвержденной сенсибилизацией к амброзии трехраздельной была проведена иммунотерапия аллергоидом амброзии полыннолистной предсезонно. После лечения у пациентов было отмечено снижение степени выраженности симптомов аллергического ринита по ВАШ (p = 0,00001), снижение потребности в медикаментозных средствах (p = 0,0003), а также потребности в ГКС на фоне проводимой терапии с 34,6% до 0% (p = 0,00001). В 8% случаев результат лечения был хороший, в 69% – удовлетворительный, в 23% – неудовлетворительный. В группе контроля не было отмечено изменений степени выраженности симптомов (p = 0,858). Также в группе контроля потребность в лекарственных препаратах осталась без изменений и 14,3% пациентов продолжали использовать ГКС.

После АСИТ наблюдалось снижение уровня IL-4 (p = 0,002), и снижение соотношения IL-4/IL-10 (p = 0,0063); при этом изменения уровня остальных цитокинов (IL-10; IFNγ) оказались статистически незначимыми (p > 0,05). До лечения уровни IL-4/IL-10 в обеих группах были сопоставимы, а после лечения различия стали статистически значимы (p = 0,031). Мы не получили статистически-значимого изменения уровня IgG4 Amb a 1, IgG4 Amb trifida. Зависимости (корреляции) между уровнем отдельных цитокинов и результатами лечения получено не было. В результате проведенной АСИТ были получены положительные клинические и иммунологические результаты. У большинства пациентов заболевание приобрело контролируемое течение. При этом отсутствие отличных и низкое число хороших результатов АСИТ, вероятно, связано с внутривидовыми аллергенными свойствами амброзии. 

Целью исследования явилось сравнение эффективности различных схем фармакотерапии при бесплодии трубно-перитонеального генеза. Под постоянным наблюдением находились 96 пациенток, направленных в стационар для проведения диагностической лапароскопии по поводу бесплодия трубно-перитонеального генеза, разделенных поровну на 4 группы в зависимости от способов фармакологического лечения: 1-я группа получала базовую фармакотерапию (БФТ) после эндоскопического операционного вмешательства (антибактериальная, притивогрибковая, витаминотерапия). Пациентки 2-4-й групп, кроме БФТ, соответственно получали гепон, циклоферон или лавомакс. Контрольная группа была сформирована из 38 гинекологически здоровых женщин. Лабораторное обследование осуществляли в течение 24 часов после операции и на 30-е сутки после БФТ. В вагинально-цервикальном смыве и в плазме крови оценивали активность процессов перекисного окисления липидов, состояние антиоксидантной системы, выявляли уровень стабильных метаболитов оксида азота, неоптерина, С-реактивного белка, цитокинов (TNFα, IL-1β, IL-8, IFNγ, IL-18, G-CSF, IL-4, IL-10), иммуноглобулинов (IgМ, IgG, IgА, sIgA), компонентов системы комплемента (С3, С4, С5, С5А), фагоцитарную и кислородзависимую активность полиморфноядерных лейкоцитов крови. Установлено , что применение в БФТ препаратов с иммуномодулирующей и антивирусной активностью по степени возрастания эффективности в коррекции иммунометаболических лабораторных параметров на системном и местном уровне при бесплодии трубно-перитонеального генеза представляет собой следующую последовательность: базовая фармакотерапия < базовая фармакотерапия + гепон < базовая фармакотерапия + циклоферон < базовая фармакотерапия + лавомакс. 

В настоящее время одним из частых осложнений, регистрируемых у 9-65% пациентов после кардиохирургического вмешательства, является постперикардиотомический синдром (ПКТС). Несмотря на широкую распространенность, механизмы развития ПКТС до сих пор мало изучены. Особенный интерес представляет использование колхицина, являющегося мощным противовоспалительный препаратом. Предполагаемые механизмы действия данного препарата обусловлены способностью колхицина ингибировать мобилизацию сборки инфламмасомы NLRP3, подавлять активацию каспазы-1 и, как следствие, предотвращать высвобождение провоспалительных цитокинов. На сегодняшний день имеются противоречивые данные об использовании колхицина и его влиянии на развитие ПКТС в рамках системного воспалительного ответа после кардиохирургических вмешательств. В связи с этим актуальным представлялось изучить динамику сывороточного содержания IL-6, IL-10, IL-1β, TNFα у пациентов перед аортокоронарным шунтированием (Т1), через 6 ч (Т2), на 10-е сутки (Т3) после операции и оценить влияние колхицина на развитие постперикардиотомического синдрома. Анализ цитокинового профиля показал, что в обеих группах через 6 ч после операции отмечался пик высвобождения в кровоток IL-10 с последующим снижением к 10-м суткам, но в группе 1 уровень IL-10 оказался выше исходных значений, чем в группе 2. В обеих группах содержание IL-6 многократно повышалось на Т2 и значимо снижалось к Т3, при этом уровни IL-6 в группе 2 оставались выше по сравнению с исходными значениями. Частота развития плеврита была ниже в группе пациентов, принимающих колхицин. Только в группе 1 показаны положительные корреляционные связи между IL-6 и TNFα. У пациентов без признаков плеврита уровень IL-10 напрямую ассоциировался с повышенным содержанием TNFα. Не было выявлено значимых межгрупповых отличий сывороточного уровня IL-1β и TNFα, а также значимых изменений IL-1β между этапами наблюдения. Анализ экспрессии TNFα выявил в группе 1 значимые отличия содержания TNFα между этапами Т1-Т3 и Т2-Т3 (р < 0,05). В обеих группах были установлены множественные позитивные ассоциации между изучаемыми показателями. Таким образом, полученные данные свидетельствуют о противовоспалительном эффекте колхицина у кардиохирургических больных. Клинически это выражалось в тенденции к меньшей частоте развития плевритов и сопровождалось повышенной экспрессией IL-10, обладающего противовоспалительным и иммуномодулирующим действием на фоне приема препарата в послеоперационном периоде. 

Целью исследования явилось изучение эффективности использования иммуномодуляторов и антиоксидантов в коррекции параметров иммунного статуса у пациенток с аденомиозом. Обследовано 70 пациенток, среди которых 57 женщинам (основная группа), у которых по результатам комплексного клинического, ультразвукового и гистероскопического обследования был выставлен диагноз аденомиоз. Контрольную группу составили 23 гинекологически здоровые женщины. После верификации диагноза все пациентки ОГ получали стандартное лечение (СЛ) (клинические рекомендации МЗ РФ от 2016 года). Среди пациенток ОГ 19 женщин получали только СЛ (1-я подгруппа). 38 обследованных ОГ дополнительно к СЛ получали различные комбинации антиоксиданта, иммуномодулятора и мембранопротектора и были разделены на две подгруппы. Во вторую подгруппу вошли 20 больных дополнительно к СЛ получавших Натрия рибонуклеат; Гипоксен и фосфолипиды. В третью подгруппу вошло 18 пациенток дополнительно получавших Инозин + Никотинамид + Рибофлавин + Янтарная кислота; Меглюмина акридонацетат, и Глицирризиновую кислоту + фосфолипиды. Проводился анализ цитокинового статуса и системы комплимента на момент поступления и к 15-му дню наблюдения. Установленные нами у пациенток с аденомиозом увеличение в системной циркуляции содержания хемокинов и провоспалительных цитокинов (TNFα, IL-8, IL-1β, IL-6, IL-18) со снижением концентрации противовоспалительных цитокинов (IL-1ra, IL-4) отражает реакцию резидентных и рекрутированных клеток врожденного иммунитета на молекулярные паттерны, ассоциированные с повреждением. Выявленные изменения цитокинового статуса, активация системы комплемента, повышение кислородзависимой активности нейтрофилов периферической крови (повышенная продукция активных форм кислорода в результате респираторного взрыва) свидетельствует о наличии иммунного воспаления на системном уровне.

Недостаточная клинико-лабораторная эффективность СЛ в коррекции иммунных изменений обосновала использование в фармакологической терапии аденомиоза препаратов с иммуномодулирующими, антиоксидантными и мембранопротекторными свойствами, что было успешно использовано при лечении других заболеваний с аналогичными нарушениями. Не следует исключать и прямого положительного влияния использованных в работе препаратов на ангиогенез в очагах аденомиоза, контролируемый на локальном уровне ангиогенными факторами роста и цитокинами, секретируемыми перитонеальными макрофагами, клетками эндометроидных гетеротопий и эндотелия. Нами выявлены оптимальные сочетания иммуномодуляторов и антиоксидантов в коррекции иммуного статуса пациенток с аденомиозом. Проведенное исследование показывает эффективность коррекции нарушенных параметром иммунного статуса пациенток с аденомиозом при комбинации стандартного лечения с антиоксидантными и иммуномодулирующими средствами. 

Цель: изучение динамики количественных показателей и функциональной активности иммунокомпетентных клеток при применении глюкозаминилмурамилдипептида у детей с аллергениндуцированным фенотипом бронхиальной астмы.

Проведен комплексный анализ показателей врожденного и адаптивного иммунитета у 60 детей с аллерген-индуцированной бронхиальной астмой (БА) средней тяжести клинического течения в возрасте 3-11 лет и у 30 здоровых сверстников. Верификация фенотипа БА проводилась в соответствии с международным согласительным документом PRACTALL (2008). Критерии исключения из исследования: тяжелое течение БА и иммунокорригирующая терапия в предшествующие 6 месяцев. В проспективном параллельном открытом исследовании изучали влияние глюкозаминилмурамилдипептида на характеристики иммунокомпетентных клеток в течение трех месяцев с разделением на две группы сравнения методом случайной выборки в зависимости от проводимой терапии. В венозной крови оценку клеток проводили на проточном цитофлюориметре COULTER EPICS XL фирмы Beckman Coulter Inc. Иммуноферментным методом определяли уровни цитокинов реактивами R&D Diagnostics Inc (США) и IgЕ-реагентами «Компания Алкор Био» (Санкт-Петербург), продукцию цитокинов исследовали реагентами «Вектор-Бест» (г. Новосибирск). Статистическая обработка с использованием программы Statistica 10 с критическим уровнем значимости р < 0,05, исследование связей коэффициентом ранговой корреляции Спирмена, многомерный корреляционный анализ с построением плеяд по В.П. Терентьеву (1959) и проверку нормальности распределения значений признака (Shapiro–Wilk). Объем выполненных исследований позволил оценить результаты с достоверностью 95-99%.

Изменения в системе адаптивного реагирования у детей с аллерген-индуцированным фенотипом БА характеризовались усилением пролиферации, угнетением процессов негативной регуляции, активацией синтеза цитокинов Тh2-профиля, усилением синтеза IgE.

Выявлены нарушения обеспеченности, функциональной активности иммунокомпетентных клеток и продукции цитокинов сохранялись при терапии ингаляционными глюкокортикоидными препаратами с усугублением снижения синтеза IFNγ.

Применение при БА у детей глюкозомурамилдипептида обеспечивало снижение спонтанной и митоген-индуцированной продукции IL-4 и коррекцию девиации структурно-функциональных характеристик иммунокомпетентных клеток.

Включение глюкозаминилмурамилдипептида в схемы лечения аллерген-индуцированного фенотипа астмы у детей обеспечило нормализацию показателей клеточного звена иммунитета, коррекции дисбаланса Th1/Th2-лимфоцитов, повышение активности Th1, адекватную спонтанную и индуцированную продукцию IFNγ клетками периферической крови 

Целью исследования была разработка персонализированной фармакологической коррекции иммунных, метаболических и нейропсихических нарушений при хронической ишемии мозга (ХИМ) I и II стадии. В исследование было включено 104 пациента, из которых 76 больных женского и 28 мужского пола, с ХИМ на фоне гипертонической болезни II степени, из которых 52 больных были с I стадией и 52 со II стадией в возрасте 50±5 лет. Изучены клинические и лабораторные показатели у 22 здоровых доноров того же возраста, сформировавших контрольную группу. Рандомизация больных с ХИМ проводилась по полу, возрасту, способу лечения, сопутствующей патологии, длительности заболевания. Оценку клинико-лабораторных данных осуществляли в начале лечения и через 2 недели после его окончания. Определяли в плазме крови и эритроцитах сорбционную способность эритроцитов и сорбционную емкость гликокаликса (СЕГ), активность процессов перекисного окисления липидов, состояние антиоксидантной системы, выявляли уровень стабильных метаболитов оксида азота (SМNO), неоптерина, С-реактивного белка, цитокинов (TNFα, IL-1β, IL-8, IFNγ, IL-18, G-CSF, IL-4, IL-10), иммуноглобулинов (IgМ, IgG, IgА), компонентов системы комплемента (С3, С4, С5, С5А), фагоцитарную и кислородзависимую активность полиморфноядерных лейкоцитов крови. Установлено, что пациентам с ХИМ I с высокими значениями концентрации IL-8, IL-10, SМNO и низким показателем СЕГ, прием церетона и актовегина или цераксона и мексикора будет недостаточен для эффективной коррекции иммунометаболических нарушений, что требует дополнительного назначения иммуномодулятора. Пациентам с ХИМ II, имеющим более высокий уровень в плазме TNFα, IL-10 и низкие значения СЕГ, необходимо назначение цераксона, мексикора и глутоксима или цераксона, мексикора и полиоксидония с целью получения максимального клинико-лабораторного положительного эффекта. 

Проблема лечения онкологических заболеваний является одной из актуальных для современной медицины. Существующие подходы лечении основаны на хирургическом, лучевом, химиотерапевтическом подходе и также использовании метода иммунотерапии, направленного на маркеры и/или специфические антигены опухолей.

Подходы, основанные на механизмах клеточной и молекулярной регуляции специфического противоопухолевого иммунного ответа, показали свою высокую эффективность (например, антитела против HER2 при раке молочной железы), но эти подходы имеют ряд побочных и нежелательных эффектов, которые ограничивают их применение. Учитывая центральную роль механизмов распознавания опухолевых антигенов и их презентации цитотоксическим клеткам в эффективной элиминации опухоли, является важным поиск и разработка подходов восстановления этих механизмов при онкологической патологии. В связи с тем, что при онкологических заболеваниях нарушается созревание, дифференцировка дендритных клеток и страдает их основная функция, ведутся научные исследования по получению зрелых дендритных клеток и восстановление естественного пути презентации антигена эффекторным клеткам.

В работе были проведены ограниченные клинические исследования (13 больных колоректальным раком), ранее разработанного протокола получения антиген-праймированных дендритных клеток больных колоректальным раком и их совместной культуры с аутологичными мононуклеарными клетками в условиях in vitro. Из периферической крови онкобольных были получены дендритные клетки, праймированные аутологичными опухолевыми антигенам (лизат опухолевых клеток), которые сокультивировали с собственными мононуклеарными клетками в присутствии иммунорегуляторных цитокинов (IL-12 и IL-18). Полученные клеточные суспензии очищались от культуральной среды и цитокинов и использовались для проведения курса иммунотерапии (еженедельно по 20-30 млн клеток внутривенно, капельно), состоящего из 3-5 введений. На разных сроках проведения иммунотерапии (до начала курса иммунотерапии, через 3 месяца и через 6 месяцев после окончания иммунотерапии) оценивали в периферической крови больных иммунологические показатели (иммунограмма (CD3⁺, CD3⁺CD4⁺, CD3⁺CD8⁺, CD19, CD16⁺CD56⁺-клетки), относительное содержание Т-регуляторных клеток (CD4⁺CD25⁺FoxP3⁺-клетки), миелоидных супрессорных клеток (CD14⁺HLA^-DR^- -клетки)) и цитотоксическую активность мононуклеарных клеток периферической крови больных против клеток опухолевой линии колоректального рака человека (Colo-320).

Полученные данные показали, что у онкологических больных на фоне проводимой иммунотерапии достоверно возрастает показатель прямого цитотоксического теста, что позволяет судить об эффективной стимуляции противоопухолевого клеточного иммунного ответа. На это также указывает возрастание относительного количества CD16⁺CD56⁺-клеток (NK-клетки) через 3 месяца после иммунотерапии. Изучение иммуносупрессорных клеток в крови онкобольных показало отсутствие значимых изменений CD14⁺HLA^-DR^- -клеток и Т-регуляторных клеток.

Таким образом, проведенные ограниченные клинические исследования иммунотерапии больных колоректальным раком на основе аутологичных дендритных клеток, праймированных лизатом аутологичных опухолевых клеток, продемонстрировали повышение противоопухолевого цитотоксического иммунного ответа. 

Псориаз – хроническое аутоиммунное заболевание, при котором в патологический процесс вовлечены кожа и суставы. Установлено, что рецидив высыпаний при данном заболевании происходит за счет резидентных клеток памяти кожи. При этом количество СD4⁺CCR3⁺ эффекторных клеток памяти периферической крови коррелирует с тяжестью заболевания. Поэтому целью нашей работы является изучение фенотипа клеток памяти периферической крови пациентов с псориазом.

В исследование включили 6 здоровых доноров: средний возраст – 45,4 (min – 29, max – 55), женщины – 3, мужчины – 3; 10 пациентов с псориазом: женщины – 4 , мужчины – 6, средний возраст – 37,3 (min – 23, max – 57), из них 5 пациентов с PASI более 10 и 5 пациентов с PASI менее 10. Критериями исключения были наличие аутоиммунных, онкологических и гематологических заболеваний, системная терапия иммуносупрессивными препаратами в течение 1 месяца. Пациенты подписали добровольное информированное согласие на участие в исследовании. Выделение мононуклеарных клеток периферической крови проводили в градиенте плотности фиколл-урографина (p = 1,082 г/л) (BioClot GmbH, Германия). Полученные клетки окашивали конъюгированными с флуорохромами моноклональными антителами к поверхностным маркерам CD4⁺ центральных (Tcm) и эффекторных (Tem) клеток памяти (CD4, CD45RO, CD197), α-цепи рецептора IL-7 (CD127) и γ-цепи рецептора IL-7 (CD132). Фенотипирование клеточных популяций проводили на клеточном анализаторе FACS CantoII. Статистический анализ полученных данных проводили с использованием пакета прикладных программ Statistica 6.0 (Statsoft, США).

Доля Tcm в периферической крови доноров составляла 33,4% (min – 18,2; max – 43,7), Tem – 28,7% (min – 13.6, max – 38,9), у пациентов с псориазом: Tcm – 28,65% (min – 13,3; max – 59,6), Tem – 21,5% (min – 9.3, max – 38.6). Среди центральных CD4⁺-клеток памяти доля CD127+CD132- -клеток составляет 26,00%, CD127⁺CD132⁺ – 1,69%, CD127⁺CD132^- – 69,00%, CD127^- CD132⁺ – 1,94%. Среди эффекторных CD4⁺-клеток памяти доля CD127⁺CD132^- -клеток составляет 23,58%, CD127⁺CD132⁺ – 1,18%, CD127⁺CD132^- – 69,84%, CD127^- CD132⁺ – 0,70%. Обнаружена прямая корреляционная связь между количеством CD127^- CD132⁺ центральных клеток памяти и значением PASI (r = 0,639, p < 0,05).

У пациентов с псориазом доля центральных клеток памяти выше, чем у здоровых доноров, при этом количество эффекторных клеток памяти – ниже. Обнаружена прямая корреляционная связь между количеством центральных клеток памяти, экспрессирующих γ-цепь рецептора IL-7, и степенью тяжести заболевания. Высокой экспрессией CD132 характеризуются активированные клетки памяти. Можно предположить, что данная популяция клеток памяти играет роль в поддержании аутоиммунного воспаления у пациентов с данным заболеванием, а также участвует в репопуляции резидентных клеток памяти кожи. 

Неуклонный рост числа аутоиммунных заболеваний и иммуноопосредованных аутовоспалительных процессов вызывает повышенный интерес врачей всех специальностей к этой теме и делает крайне актуальным вопрос раннего выявления аутоиммунных расстройств/аутоиммунного синдрома (AС). Зачастую эти нарушения развиваются на фоне атипичного течения хронических активных вирусных инфекций, вызываемых персистирующими вирусами, в частности вирусами семейства Herpesviridae (АХА ГВИ) и остаются не диагностированными вследствие полисимптомности опосредуемых ими нарушений и различными «клиническим масками» вызываемых расстройств.

Разработанный нами полуколичественный метод скрининговой оценки содержания аутоантител в сыворотке крови пациентов, страдающих АХА ГВИ, вызываемой герпес-вирусами, с использованием метода ИФА (Immunodot), является высокоспецифичным, скрининговым методом, который может позволить проводить объективную оценку динамики течения аутоиммунного процесса, а также осуществлять контроль за эффективностью проводимой комплексной противовирусной и иммуномодулирующей терапии.

Детекция аутоантител различной специфичности в сыворотке крови пациентов, страдающих атипичной хронической активной инфекцией, вызываемой герпес-вирусами (АХАИ), является ранним диагностическим маркером, необходимым, в первую очередь, для выявления аутоиммунной патологии нервной системы, которая ассоциирована с длительным течением активного микст-герпесвирусного процесса. 

Здоровье новорожденного всецело зависит от состояния организма матери на протяжении всей беременности. Обеспечение оптимальных условий содержания беременных животных базируется, в первую очередь, на полноценном кормлении и обеспечении санитарно-гигиенических условий окружающей среды. Большую нагрузку организм коровы претерпевает в транзитный период, который начинается за 3 недели до отела и продолжается в течение шести недель. При нарушении технологии кормления и содержания у коров в данный период часто возникают метаболические нарушения, которые проявляются повышенной выработкой кетонов. Известно, что становление иммунитета в ранний постнатальный период у теленка во многом зависит от своевременной выпойки молозива. Материнские иммуноглобулины из молозива попадают непосредственно в системный кровоток новорожденного в тонком отделе кишечника по тубулярной системе эпителиальных клеток путем пиноцитоза. Задача исследования – изучить влияние субклинического кетоза у коров-матерей на формирование колострального иммунитета у родившихся от них телят. Для исследования были отобраны стельные коровы 3-6 лет за 3-7 дней до родов. У коров были взяты пробы мочи и крови. С целью выявления субклинического кетоза у коров было проведено исследование мочи на содержание кетонов. По результатам исследования были сформированы две группы по 10 голов – в первой группе (подопытной) уровень кетоновых тел в моче составил от 1,8 до 3,7 ммоль/л, во второй группе (контрольной) кетоны в моче не обнаружены. Сразу после отела у коров отбирали порции молозива, а у новорожденных телят брали кровь через сутки после первой выпойки молозива. В обезжиренном молозиве и в сыворотке крови новорожденных телят исследовали содержание иммуноглобулинов. В сыворотке крови суточных телят также определяли содержание общего белка биуретовым методом, альбуминов – фотометрическим методом с бромкрезоловым зеленым.

По результатам проведенного исследования было обнаружено снижение классов иммуноглобулинов G, M и A в сыворотке крови коров перед отелом на 19,1-23,5%, в молозиве – на 23,7-34,4% и в сыворотке крови суточных телят – на 21,7-27,6%. В наибольшей степени определялось снижение концентрации IgM. На содержание в крови телят альбуминов субклинический кетоз коров-матерей практически не оказывал влияние. 

Генитальный микоплазмоз у коров – заболевание, сопровождающееся латентным течением, что затрудняет его своевременную диагностику и назначение адекватной терапии. Неспецифическая симптоматика микоплазмоза в совокупности с периодами бессимптомного течения приводит к развитию функциональных и морфологических изменений в органах половой системы коров, заканчивающихся в итоге бесплодием. Мониторинговые исследования животноводческих хозяйств Северо-Западного региона РФ показали, что инфицированность гениталий коров микоплазмами может составлять от 20% до 40% поголовья. Причем прослеживается четкая зависимость между высокой инфицированностью поголовья и низкими показателями воспроизводства. В связи с этим животноводческие предприятия несут существенный экономический ущерб. Одним из важных механизмов, предотвращающих внедрение различных патогенов в репродуктивный тракт, является резистентность слизистой оболочки влагалища. Среди этих факторов наиболее важная роль отводится вагинальной аутофлоре, десквамации эпителия, фагоцитозу, кислотности вагинального секрета, содержанию в нем иммуноглобулинов, лизоцима и ряду других неспецифических факторов защиты. Нами было проведено изучение изменения иммунобиологических характеристик вагинального секрета при субклиническом течении генитального микоплазмоза. Для исследования были отобраны здоровые коровы с отрицательным PCR-тестом на Mycoplasma spp. и инфицированные Mycoplasma spp., без клинических признаков вагинита. У обеих групп животных проводили определение в вагинальном секрете концентрации водородных ионов, активности лизоцима и иммуноглобулинов классов IgG, IgM, IgA и sIgA. Несмотря на то, что персистенция микоплазм во влагалище не сопровождается выраженными клиническими признаками вагинита, но состояние факторов защиты слизистой оболочки претерпевает значительные изменения. Проведенные исследования позволили установить, что длительное нахождение микоплазм во влагалище коров проявляется достоверным увеличением концентрации водородных ионов на 41% и снижением лизоцимной активности вагинального секрета в 2 раза, то есть наблюдается угнетение основных факторов предотвращающих колонизацию слизистой патогенной микрофлорой. Кроме того, происходит перераспределение классов иммуноглобулинов в вагинальном секрете. Это проявляется достоверным увеличением содержания IgM и sIgA на фоне тенденции к снижению IgA. Отмеченные изменения в совокупности создают благоприятные условия для внедрения секундарной микрофлоры и развитию бактериально-микоплазменных вагинитов, усугубляющих морфофункциональные изменения в репродуктивном тракте и повышающих риск возникновения бесплодия. 

Нейтрофилы образуют нейтрофильные внеклеточные ловушки (НЕТ) как средство борьбы с патогенами в очаге воспаления. Однако избыточное образование НЕТ является причиной развития многих аутоиммунных и воспалительных заболеваний. Индукция НЕТ специфическими рецепторами ведет к повышению концентрации [Са2+]i. В связи с этим применение кальциевого ионофора А23187 можно рассматривать как модель образования НЕТ. Известно, что индукция НЕТ различными стимулами зависит от образования активных форм кислорода (АФК) NADPH-оксидазой. Однако образование НЕТ, индуцированное кальциевыми ионофорами, происходит с участием митохондриальных АФК (мтАФК) или без АФК вообще.

В работе был применен широкий ингибиторный анализ. Оценка окислительного взрыва проводилась с помощью регистрации люминолзависимой хемилюминесценции, а образование НЕТ оценивалось методом флуоресцентной микроскопии.

С использованием митохондриально-направленного антиоксиданта SkQ1 было показано, что мтАФК участвуют в образовании НЕТ и окислительном взрыве, индуцированных А23187, но не активатором протеинкиназы С ФМА. Используя специфические ингибиторы, мы показали, что АФК, образованные NADPH-оксидазой, также участвуют в А23187-индуцированном НЕТозе. Таким образом, нами было впервые показано, что повышение Са2+ индуцирует взаимодействие двух источников образования АФК, NADPH-оксидазы и митохондрий. Один из механизмов образования мтАФК, опосредованного повышением [Са2+]i, может быть связан с открытием митохондриальной поры, mPTP.

Применив специфические ингибиторы поры, мы впервые показали, что mPTP участвует в передаче сигнала от митохондрий к NADPH-оксидазе, в образовании мтАФК, НЕТозе и окислительном взрыве, индуцированных А23187.

Внутриутробная герпесвирусная инфекция является одной из важнейших медико-социальных проблем неонатологии. Один из важнейших механизмов, посредством которого иммунокомпетентные клетки участвуют в защите от инфекции, вызванной вирусом герпеса, связан с продукцией интерферона-γ (IFNγ).

Цель. Изучение содержания IFNγ при тяжелой форме инфекции, вызванной вирусом герпеса 6-го типа (HHV-6), у новорожденных и в динамике заболевания как критерия тяжести заболевания.

Материалы и методы. Обследовано 58 новорожденных с инфекцией, вызванной HHV-6. Контрольную группу составили 31 здоровый новорожденный. Уровень IFNγ в сыворотке крови определялся с помощью набора реагентов для твердофазного иммуноферментного анализа ProCon If gamma (ООО «Протеиновый контур», Санкт-Петербург, Россия), на 1-м месяце жизни и в возрасте 3 месяцев.

Результаты. У детей с тяжелой формой HHV-6 на 1-м месяце жизни отмечалось статистически значимое снижение уровня IFNγ в сыворотке крови (0,8 (0,6-0,9) пг/мл) по сравнению с группой контроля (1,04 (0,95-1,5) пг/мл) (p < 0,00002). В динамике заболевания возрасте 3 месяцев отмечалось статистически значимое (p < 0,05) повышение исследуемого параметра по сравнению с 1-м месяцем жизни, однако по-прежнему отсутствовали статистически значимые различия с контрольной группой (0,9 (0,6-1,4) и 2,2 (1,6-2,8) пг/мл соответственно).

Заключение. Снижение продукции IFNγ, при тяжелой форме HHV-6 у новорожденных, сохраняющееся до 3 месяцев, свидетельствует о дефиците IFNγ и может рассматриваться как показание для длительной интерферон-заместительной терапии.