Preview

Медицинская иммунология

Расширенный поиск
Том 22, № 2 (2020)
Скачать выпуск PDF

ОБЗОРЫ

207-220 271
Аннотация

Микроокружение опухоли (Tumor Microenvironment — ТМЕ) формируется в результате взаимодействия и образования перекрестных связей между опухолевой клеткой и разными типами окружающих клеток. Исследования последних лет показали, что опухоль так перепрограммирует микроокружение, что ТМЕ способствует развитию первичных опухолей, их метастазированию и становится важным регулятором онкогенеза. Под влиянием опухоли значительным изменениям, «редактированию», подвергается иммунный профиль в ТМЕ. Образуется иммунодепрессивная сеть, которая подавляет активность главного эффектора клеточного иммунитета — Т-лимфоцитов. Т-клетки в ТМЕ находятся в состоянии анергии и истощения и характеризуются повышенной экспрессией ингибирующих рецепторов, снижением секреции цитокинов и цитолитической активности. Блокирование ингибиторных рецепторов специфическими антителами может привести к восстановлению функций истощенных Т-клеток. Поэтому восстановление функциональной активности Т-лимфоцитов представляет одну из важных стратегий в иммунотерапии рака. На формирование иммунного профиля влияют накапливающиеся в опухоли генетические аберрации, которые играют важную роль в создании специфического, характерного только для данной опухоли иммунного окружения в ТМЕ. Генетические изменения опухолевых клеток приводят к фенотипическим и функциональным перестройкам лимфоцитов, что позволяет опухоли избегать реакции иммунных клеток. Поскольку многие опухоли возникают после длительного воспаления или проявляют характеристики хронического воспаления по мере прогрессирования, воспаление считается важным фактором формирования ТМЕ, оказывающим влияние на иммунный профиль. Иммунные инфильтраты из разных опухолей человека, ассоциированных с воспалением, могут содержать ценную прогностическую и патофизиологическую информацию. Так, макрофаги в ТМЕ уже стали рассматриваться как информативный маркер и как терапевтическая мишень. Одним из основных механизмов, с помощью которого опухолевые клетки перепрограммируют окружающие клетки, является выделение экзосом — мелких везикул, которые переносят и доставляют белки и нуклеиновые кислоты к другим клеткам. При поглощении экзосом-ного груза в реципиентной клетке происходят молекулярные, транскрипционные и трансляционные изменения, которые оказывают влияние на функции неопухолевых клеток в ТМЕ. Поэтому опухолевые экзосомы представляют собой эффективное средство, с помощью которого опухоль может изменять реактивность иммунных клеток в ТМЕ. Таким образом, наряду с индивидуальным молекулярным и геномным тестированием опухоли, следует обратить внимание на более глубокий анализ иммунного профиля ТМЕ, который представляет собой большой ресурс биомаркеров и мишеней для иммунотерапии.

221-230 121
Аннотация

Смертность от болезней системы кровообращения является острой проблемой современного здравоохранения. Основной вклад в развитие кардиоваскулярных осложнений вносит артериальная гипертензия (АГ), часто протекающая на фоне метаболических нарушений. Патогенез АГ в настоящее время рассматривается с позиций мультифакториальности. В условиях метаболических нарушений патогенез АГ, безусловно, имеет определенные особенности. Поэтому актуальным является обобщение источников литературы по оценке роли иммунологических нарушений, эндотелиальной дисфункции и гемостатических расстройств в генезе АГ при метаболическом синдроме (МС). Большинство авторов сходятся во мнении о существовании нескольких механизмов, обусловливающих наличие связи АГ и инсулинорезистентности. Развитие АГ у пациентов с МС является следствием иммунометаболических процессов. Важный компонент МС — абдоминальное ожирение, при гипертонии ассоциированное с хроническим воспалением висцеральной жировой ткани, чрезмерной инфильтрацией иммунными клетками и повышенной выработкой адипокинов и цитокинов (TNFα, IL-6). АГ связана со значительным увеличением Т-клеток, которые опосредуют эндотелиальную дисфункцию (ЭД) и обеспечивают связь между гипертензией и последующим атеросклерозом. Т-лимфоциты запускают каскад реакций, конечным продуктом которого является IL-17, участвующий не только в повышении артериального давления, но и способствующий развитию жесткости сосудистой стенки у пациентов с АГ. Таким образом, взаимосвязь между несколькими типами иммунных клеток приводит к воспалительным реакциям, в том числе и в сосудистой стенке, инициирующим дисфункцию эндотелия. Хроническое неспецифическое воспаление при МС, поддерживающееся системой цитокинов, является триггерным механизмом запуска ЭД. Классическими маркерами ЭД является избыточная продукция эндотелина-1 и ингибирование выработки оксида азота. Иммунное повреждение приводит к дисбалансу выработки эндотелием вазоконстрикторных и вазодилатирую-щих, пролиферативных и антипролиферативных факторов. Показано, что в патогенезе артериальной гипертензии, связанном с метаболическими нарушениями, ЭД является интегральным аспектом синдрома инсулинорезистентности и способствует ее углублению, увеличению реактивности сосудов и дальнейшему формированию АГ. Согласно современным исследованиям показано, что избыточный синтез провоспалительных цитокинов привносит нарушения в систему сосудистого гемостаза.

Изучив проведенные исследования по влиянию метаболических нарушений на систему гемостаза, можно сделать вывод, что активация фибринолитической и плазменной цепи происходит одинаково как у мужчин, так и у женщин, с небольшими гендерными особенностями отдельных компонентов. При МС изменяются и реологические свойства крови. Систематизация имеющихся данных литературы по исследуемому вопросу может служить основой для определения прогностических критериев прогрессирования АГ и риска возникновения тромботических осложнений.

ОРИГИНАЛЬНЫЕ СТАТЬИ

231-248 110
Аннотация

Развитие ангиогенеза зависит от функционального состояния эндотелиальных клеток, а также от сбалансированной секреции цитокинов, факторов роста и хемокинов эндотелиальными клетками и клетками микроокружения. Макрофаги являются важнейшим компонентом микроокружения и принимают участие в формировании сосудов как за счет продукции цитокинов, так и за счет контактных взаимодействий с эндотелиальными клетками. Одним из важнейших цитокинов, осуществляющих контроль ангиогенеза на всех его этапах, является VEGF. В настоящее время недостаточно изучена роль VEGF в межклеточных взаимодействиях эндотелиальных клеток и макрофагов.

Целью исследования явилось изучение влияния депривации VEGF при помощи моноклональных антител на ангиогенез в условиях совместного культивирования эндотелия и макрофагов.

Для депривации VEGF использовали моноклональные антитела к VEGF-A в монокультуре эндотелиальных клеток и в сокультуре эндотелиальных клеток с макрофагами. В качестве индукторов использовали цитокины IL-1β, IL-6 и TNFα. При удалении VEGF-A из среды эндотелиальные клетки проявляют пластичность и формируют более длинные сосуды, изменяют экспрессию рецепторов к VEGF. Макрофаги играют роль регулятора активности эндотелиальных клеток за счет секреции цитокинов, в том числе VEGF, а также благодаря контактным взаимодействиям с эндотелиальными клетками. Клетки линии THP-1 повышают чувствительность эндотелиальных клеток к VEGF за счет стимуляции экспрессии VEGFR1 и VEGFR3, данный эффект является VEGF-A-независимым. Цитокины IL-1β, IL-6, TNFa самостоятельно стимулируют неразветвляющий ангиогенез, увеличивая длину сосудов. Параллельно IL-1 в увеличивает экспрессию VEGFR1 на поверхности эндотелиальных клеток, а IL-6 и TNFα, наоборот, снижают ее, тем самым регулируя чувствительность эндотелиальных клеток к VEGF. При этом эффекты данных цитокинов не зависят от VEGF-A. IL-1β, IL-6, TNFα способствуют приобретению клетками линии THP-1 антиангиогенных свойств, что не зависит от VEGF-A, а также от экспрессии его рецепторов эндотелиальными клетками. Таким образом, VEGF-A является важным, но не единственным фактором, контролирующим ангиогенез. В условиях недостатка VEGF-A либо сами эндотелиальные клетки, либо клетки микроокружения способны компенсировать его функциональную нагрузку за счет продукции других ростовых факторов.

249-268 141
Аннотация

Микровезикулы (МВ) — субклеточные структуры размером от 100 до 1000 нм, продуцируемые клетками в состоянии покоя и активации. МВ могут передавать молекулы клеткам-мишеням, регулировать физиологические процессы, участвовать в патологиях. Микровезикулы лейкоцитарного происхождения, в частности МВ NK-клеток, остаются наименее изученной популяцией МВ. NK-клетки способны изменять функциональную активность эндотелиальных клеток (ЭК), участвуют в регуляции ангиогенеза. Недостаточно изучена способность МВ NK-клеток влиять на функциональное состояние ЭК. Целью настоящего исследования явилось изучение влияния МВ, образуемых естественными киллерами линии NK-92, на фенотип, активность каспаз, пролиферацию и миграцию ЭК линии EA.Hy926. ЭК культивировали в присутствии МВ клеток линии NK-92. При помощи проточной цитофлуориметрии оценивали изменение фенотипа ЭК, передачу внутриклеточного белка из МВ в ЭК, относительную гибель ЭК. При помощи Western blot analysis оценивали экспрессию гранзима B в NK-клетках и их МВ, появление гранзима B в ЭК, экспрессию каспаз, Erk, AKT в ЭК. Также оценивали пролиферацию и миграцию ЭК в присутствии МВ клеток линии NK-92. Установлено значимое различие протеомных профилей клеток линии NK-92 и образуемых ими МВ. Контакт ЭК с МВ клеток линии NK-92 сопровождается развитием следующих событий: 1) экспрессией в ЭК гранзима В; 2) активацией каспазы-9, каспазы-3 и частичной гибелью ЭК; 3) появлением на ЭК панлейкоцитарного маркера CD45; 4) снижением экспрессии CD105 и повышением экспрессии CD34 и CD54; 5) ингибированием миграции ЭК. Передача эндотелиальным клеткам Erk, но не AKT, в составе МВ клеток линии NK-92 в концентрации в 10 раз ниже концентрации, вызывающей гибель ЭК, способствует повышению пролиферации ЭК.

269-280 119
Аннотация

Циркулирующие моноциты представляют собой гетерогенную популяцию клеток, часть которых, наряду с классическим моноцитарным маркером CD14, экспрессирует молекулу CD16. Различия в фенотипе между субпопуляциями моноцитов могут сказываться на их функциональной активности, а также способности к дальнейшей дифференцировке в дендритные клетки (ДК), которые представляют собой профессиональные антигенпрезентирующие клетки и обеспечивают активацию иммунного ответа или, наоборот, поддерживают состояние иммунологической толерантности. Целью настоящего исследования явилось изучение взаимосвязи между субпопуляционной принадлежностью моноцитов и функциональной активностью генерируемых из них дендритных клеток, а также их чувствительности к толерогенному действию дексаметазона. ДК генерировали в присутствии GM-CSF и IFNα из полученной методом магнитной сепарации обогащенной популяции CD14+ моноцитов периферической крови с деплецией (CD16-Mo-ДК) и без деплеции CD16+ клеток (CD16+Мо-ДК). CD16+Мо-ДК характеризовались более низкой способностью поглощать FITC-меченный декстран и более высокой способностью индуцировать пролиферативный ответ Т-клеток на аллоантигены по сравнению с CD16-Mo-ДК. Кроме того, CD165+Мо-ДК проявляли более выраженную апоптоз-индуцирующую активность против аутологичных CD4+T-лимфoцитoв и против аллогенных CDS+Т-лимФоцитов, но были сопоставимы с CD16-Mo-ДК по способности индуцировать апоптоз в аллогенных CD4+T-лимфoцитаx. Уровень продукции TNFa, сходный для обоих типов ДК, находился в обратной взаимосвязи с аллостимуляторной активностью CD16-Mo-ДК и прямо коррелировал с апоптоз-индуцирующей активностью CD16+Мо-ДК против аллогенных CD4+T-клетoк. CD16-Mo-ДК и CD16+Мо-ДК были также сопоставимы по уровню продукции IL-10, который обратно коррелировал с показателями аллостимуляторной активности обоих типов ДК. CD16-Mo-ДК и CD16+Мо-ДК были подвержены супрессорному эффекту дексаметазона, который проявлялся увеличением фагоцитарной активности, снижением способности стимулировать пролиферацию аутологичных и аллогенных Т-клеток и подавлением продукции TNFα. При этом в популяции CD16+Мо-ДК регистрировались более выраженное увеличение эндоцитозной активности и снижение способности ДК стимулировать пролиферацию CD4+T-клеток в ауто-СКЛ. Кроме того, обработка дексаметазоном CD16+Мо-ДК сопровождалась увеличением проапоптогенной активности ДК против аутологичных CDS+Т-лимФоцитов. Таким образом, присутствие в пуле моноцитов CD16+ клеток влияет на свойства генерируемых из них IFNα-индуцированных ДК и их чувствительность к иммунорегуляторному действию дексаметазона.

281-290 77
Аннотация

Дискордантный ответ на антиретровирусную терапию у ВИЧ-инфицированных пациентов характеризуется неэффективным восстановлением численности CD4+Т-лимфоцитов. Роль регуляторных Т-клеток в развитии дискордантного ответа на лечение остается малопонятной как из-за отсутствия специфических и надежных маркеров регуляторных Т-клеток, так и из-за неоднородности их популяции. В настоящей работе нами были обследованы ВИЧ-инфицированные пациенты с подавленной на фоне антиретровирусной терапии репликацией вируса (уровень ВИЧ менее 50 копий в мл крови), ответивших (n = 22) и не ответивших (n = 19) приростом численности CD4+Т-лимфоцитов на фоне более чем двухлетнего приема вирусологически эффективной терапии. Контрольную группу обследованных составили неинфицированные добровольцы (n = 23). Субпопуляционный состав CD4+ Т-лимфоцитов и регуляторных Т-клеток был исследован методом многоцветной проточной цитометрии. Было установлено, что у инфицированных ВИЧ больных с неэффективным восстановлением иммунитета на фоне проводимого лечения по сравнению с ВИЧ-позитивными субъектами, дающими стандартный ответ на антиретровирусную терапию, абсолютное число CD4+Т-лимфоцитов, так же как и входящих в их состав регуляторных Т-клеток, было снижено во всех субпопуляциях различной степени зрелости: наивных клетках, лимфоцитах центральной памяти, клетках эффекторной памяти и терминально дифференцированных эффекторах. Это отличало их от пациентов, дающих эффективный ответ на лечение, у которых дефицит регуляторных Т-лимфоцитов был выявлен только среди наивных клеток и клеток центральной памяти. Важно отметить, что у зараженных ВИЧ больных с дискордантным ответом на терапию процентное содержание регуляторных Т-клеток эффекторной памяти — лимфоцитов, обладающих наибольшей супрессорной активностью — было существенно повышено по сравнению с таковым в остальных субпопуляциях CD4+Т-лимфоцитов. По-видимому, несмотря на дефицит регуляторных Т-лимфоцитов, размер пула этих клеток у больных с дискордантным ответом на лечение является достаточным для контроля над активацией CD4+Т-лимфоцитов. В то же время численности регуляторных Т-клеток может не хватать для подавления избыточной активации иммунокомпетентных клеток, не относящихся к популяции CD4+Т-лимфоцитов. Этим можно частично объяснить повышенный уровень иммунной активации у больных с дискордантным ответом на терапию по сравнению с таковым у лиц, стандартно отвечающих на лечение.

291-300 77
Аннотация

Гепатит В — инфекционное вирусное заболевание, при котором происходит повреждение либо разрушение ткани печени и способное переходить в хроническую форму. При хроническом гепатите В (ХГВ) гепатоциты по мере гибели заменяются соединительной тканью, вследствие чего развивается фиброз, а затем цирроз печени. Ранняя диагностика фиброза печени является актуальной задачей при развитии ХГВ. Уже на этом этапе заболевания происходит активация иммунной системы, которая играет ведущую роль в повреждении печени при ХГВ. Основными регуляторами иммунных процессов выступают цитокины, которые опосредуют межклеточные взаимодействия. Отдельной группой цитокинов являются хемокины — белки клеточной миграции, при ХГВ они отвечают за инфильтрацию ткани печени активированными лейкоцитами. Цитокины и хемокины являются активными участниками фиброгенеза, поэтому они могут служить биомаркерами развития фиброза печени, в том числе и на ранних стадиях. Целью настоящего исследования стал анализ содержания некоторых цитокинов/хемокинов в периферической крови больных ХГВ для поиска потенциальных биомаркеров начальных стадий фиброза печени. В исследование включено 30 пациентов с подтвержденным диагнозом «ХГВ» со стадиями фиброза печени F0-F1 по шкале Metavir, 36 пациентов с диагнозом «хронический гепатит С» (F0-F1) и 37 условно здоровых лиц в качестве контрольной группы. Были определены концентрации следующих цитокинов/хемокинов: IFNγ, TNFα, CCL2/ MCP-1, CCL8/MCP-2, CCL20/MIP-3α, CXCL9/MIG, CXCL10/IP-10, CXCL11/I-TAC методом мультиплексного анализа по технологии xMAP (Luminex, США). В результате проведенного исследования установлено, что у пациентов с ХГВ в плазме крови содержание цитокина TNFα и хемокинов CCL2/MCP-1, CXCL9/MIG и CXCL10/IP-10 повышено, а хемокина CCL8/MCP-2 - снижено, что указывает на возможность использования этих цитокинов/хемокинов в качестве биомаркеров повреждения печени при ХГВ. В обследованной группе пациентов с ХГВ не выявлено зависимости концентраций цитокинов и хемокинов в плазме крови от вирусной нагрузки, что может объясняться ее низким уровнем. Для цитокинов плазмы крови у пациентов с ХГВ обнаружены корреляции между содержанием TNFa и хемокинов CCL2/MCP-1 и CCL8/MCP-2, чего не наблюдается в контрольной группе. В то же время в контрольной группе обнаружена корреляция между содержанием TNFa и хе-мокина CXCL9/MIG, что не выявлено в группе больных. Для обеих групп обнаружена корреляция между содержанием хемокинов CXCL9/MIG и CXCL10/IP-10. На основании данных исследования разработан алгоритм, который позволяет установить в качестве причины развития начальной формы фиброза F0-F1 хронический гепатит В либо хронический гепатит С по содержанию в плазме крови цитокинов IFNγ, ССL2/MCP-1 и CCL8/MCP-2 с диагностической эффективностью 89,4%.

301-310 104
Аннотация

Диабетическая ретинопатия (ДР) имеет многофакторную природу с участием множества цитокинов и факторов роста. Изучение уровней цитокинов в биологических жидкостях представляется актуальным с целью углубленного понимания патогенеза заболевания. Цель работы — сравнительный анализ системных (сыворотка крови (СК)) и локальных (стекловидное тело (СТ)) уровней 45 цитокинов у пациентов с осложненной пролиферативной ДР, а также при различных особенностях клинической картины заболевания. Содержание цитокинов протестировано в 53 пробах СК и 32 пробах СТ 53 пациентов с сахарным диабетом 1-го и 2-го типа с тяжелым течением пролиферативной ДР. Использовали метод мультиплексного анализа на платформе хМАР в программе Luminex xPONENT 3.1, с помощью наборов 45 plex (ProcartaPlex, eBioscience, Австрия). В пределах уровней чувствительности тест-системы в значительном количестве тест-проб СК выявлялись 25, а СТ — 27 цитокинов. В пробах СТ средние уровни 7 медиаторов — IL-6, IL-8, IP-10, MCP-1, HGF, LIF и VEGF-A — оказались достоверно выше, чем в СК, что является доказательством их локальной интраокулярной продукции. Показаны корреляционные связи между содержанием в СТ ростового фактора VEGF-A и ряда цитокинов, в том числе участвующих в воспалительных реакциях, что свидетельствует о взаимосвязи звеньев патогенеза: воспаления и неоангиогенеза. Определены особенности интраокулярного содержания цитокинов при различных проявлениях диабетических изменений глаз. Показана связь гемофтальма с повышением IL-8 и IP-10, рубеоза радужки — с повышением LIF, активности пролиферативной ДР — с увеличением MCP-1, крайне тяжелых изменений — с ростом IL-6 и EGF. Тестирование цитокинов в биологических жидкостях информативно при изучении механизмов воспаления, неоангиогенеза, а также защитных реакций в патогенезе ДР.

311-318 56
Аннотация

Воздействие физических и химических факторов, ожирение, нарушение липидного обмена, сахарный диабет оказывают влияние на состояние эндотелия сосудов, процессы тромбообразования, фибринолиза и повышают риск развития сердечно-сосудистых заболеваний. Можно предположить, что развитие и протекание патологических процессов в сердечно-сосудистой системе, обусловленных вибрационной болезнью в условиях отягощения сахарным диабетом, будут претерпевать изменения. Целью исследования являлось изучение уровней специфических аутоантител к антигенам сердечной ткани у пациентов с вибрационной болезнью, отягощенной сахарным диабетом 2 типа. Обследованы пациенты с вибрационной болезнью (группа I), больные сахарным диабетом 2 типа (II группа) и лица, имеющие вибрационную болезнь в сочетании с сахарным диабетом 2 типа (группа III). В обследование включены лица, не имеющие в анамнезе ишемической болезни сердца, инсульта и инфаркта миокарда. Изучены сывороточные уровни специфических аутоантител к антигенам кардиомиоцитов. Выявлено, что содержание аутоантител к β1-адренергическим рецепторам у пациентов группы I было выше, чем у лиц группы II. Относительное содержание аутоантител к компонентам мембраны и цитоплазмы клеток миокарда у больных I-III групп не различалось. Установлено, что повышенные уровни аутоантител к компонентам мембраны и цитоплазмы клеток миокарда, кардиомиозину и β1-адренергическим рецепторам наблюдались чаще у пациентов с вибрационной болезнью в сочетании с сахарным диабетом, а также без такового, чем у лиц с сахарным диабетом. Среди пациентов с вибрационной болезнью (I и III группы) не выявлено лиц с пониженным содержанием аутоантител к β1-адренергическим рецепторам. У лиц с вибрационной болезнью изменения в уровнях специфических аутоантител могут свидетельствовать о развитии функционально-метаболических и структурных изменениях в сердце, нарушениях его электрической активности, которые еще не манифестировались в виде патологического процесса. Для пациентов с сахарным диабетом 2 типа, не имеющих вибрационной болезни, более низкие уровни аутоантител к β1-адренорецепторам могут быть обусловлены повышением уровней катехоламинов, которое характерно для больных диабетом. Для подтверждения выдвинутых нами предположений необходимо проведение дальнейших исследований, включающих клинические данные и показатели функциональной диагностики.

319-326 68
Аннотация

Большой научный интерес к проблемам облитерирующего атеросклероза сосудов нижних конечностей обусловлен увеличением заболеваемости данной патологией и мультидисциплинарным подходом в диагностике и лечении. Цель исследования — изучить взаимосвязи между количеством циркулирующих микрочастиц лимфоцитарного происхождения и развитием критической ишемии нижних конечностей. Выполненное исследование относилось к когортным проспективным исследованиям. Были сформированы две исследуемые группы: 1 группа включала в себя 75 пациентов с ишемией IIB степени по классификации Покровского-Фонтейна; 2 группа включала 75 пациентов с клиническими проявлениями критической ишемии. Также была сформирована группа контроля из 75 практически здоровых лиц, не имеющих признаков облитерирующих заболеваний сосудов нижних конечностей. Для объективизации оценки степени ишемии измеряли лодыжечное артериальное давление, лодыжечно-плечевой индекс, пальцевое артериальное давление, транскутанное напряжение кислорода в пальцах стопы. Для оценки кровотока в артериях нижних конечностей использовали ультразвуковую доплерографию артерий нижних конечностей и КТ-ангиографию. Исследование проводили при поступлении пациента в стационар до начала терапии. Лимфоциты и циркулирующие микрочастицы определяли в соответствии со стандартным протоколом. У практически здоровых лиц из контрольной группы число циркулирующих микрочастиц лимфоцитарного происхождения составляло 385 (260-479) на 100 лимфоцитов. В 1 группе этот показатель был в 2 раза выше и составлял 728 (654-836) (p1 = 0,002). Во 2 группе было в 5 раз выше, чем в группе контроля и достоверно отличалось от показателя 1 группы (1570 (1124-2120) (p1 < 0,001, р2 = 0,002)). Коэффициент корреляции между числом циркулирующих микрочастиц и лодыжечным артериальным давлением составлял rS = -0,82 (p = 0,003). Корреляция между лодыжечно-плечевым индексом и числом микрочастиц была равна rS = -0,92 (p < 0,001). Пальцевое артериальное давление имело средней силы отрицательную корреляцию с числом микрочастиц. Транскутанное напряжение кислорода и число микрочастиц имели коэффициент корреляции равный rS = -0,89 (p = 0,002). Коэффициент корреляции между просветом общей бедренной артерии и числом микрочастиц лимфоцитарного происхождения составлял rS = -0,44 (p = 0,016). Коэффициент корреляции между просветом поверхностной бедренной артерии и числом микрочастиц rS = -0,64 (p = 0,002). Высокими отрицательными являлись корреляции числа микрочастиц с сохраненным просветом подколенной артерии — rS = -0,79 (p < 0,001), и задней большеберцовой артерии — rS = -0,86 (p < 0,001). Очень высокий отрицательный коэффициент корреляции был между сохраненным просветом передней большеберцовой и числом микрочастиц лимфоцитарного происхождения rS = -0,91 (p = 0,003). Выявленные высокие и очень высокие корреляционные связи между числом циркулирующих микрочастиц лимфоцитарного происхождения и показателями состояния артериального кровотока нижних конечностей, и сохраненным просветом артерий нижних конечностей позволяют говорить о перспективах использования микрочастиц как патогенетического маркера критической ишемии нижних конечностей.

327-334 69
Аннотация

Обследовано 40 больных женщин с гонартрозом: 19 больных опытной группы, у которых остеоартрит (ОА) сочетался с метаболическим синдромом (МС), 21 больная ОА без МС. Установлено, что метаболический фенотип гонартроза — ОА в сочетании с метаболическим синдромом — отличается от ОА без МС большей выраженностью боли по визуальной аналоговой шкале (ВАШ) (65 мм в опытной группе и 47 мм в группе контроля, р = 0,001) и других симптомов ОА по шкале исходов остеоартрита Knee Osteoarthritis Outcome Scale (KOOS) (43,2 баллов в опытной группе и 76,1 балла в группе контроля, р = 0,001). Эти основные отличительные характеристики ассоциируются с низким уровнем качества жизни в соответствии с неспецифическим опросником для оценки качества жизни пациента Short Form-36 (SF-36) (30 баллов в опытной группе и 40 баллов в группе контроля) и клинически значимыми признаками депрессии, регистрируемыми с помощью шкалы оценки здоровья пациента Patient Health Questionnaire-9 (PHQ-9) (12 баллов в опытной группе и 7 баллов в группе контроля). Метаболический тип гонартроза характеризуется лабораторными признаками системного вялотекущего воспаления, о чем свидетельствует увеличение содержания СРБ (11,4 мг/мл в опытной группе и 3,2 мг/мл в группе контроля, р = 0,03), IL-6 (2,6 пг/мл в опытной группе и 0,7 пг/мл в группе контроля, р = 0,001), IL-18 (196,6 пг/мл в опытной группе и 61,4 пг/мл в группе контроля, р = 0,001) в сыворотке ПК, а также повышением содержания антител к Col2 (27,1 нг/мл в опытной группе и 5,5 нг/мл в группе контроля, р = 0,01) и дислипидемией — увеличением уровня холестерина ЛПНП (5,5 ммоль/л в опытной группе и 59 ммоль/л в группе контроля, р = 0,032) и триглицеридов (2,026 ммоль/л в опытной группе и 1,36 ммоль/л в группе контроля, р = 0,02 ). Заключается, что фенотип ОА в сочетании с МС обусловлен их патогенетическим сходством (синтропия), основу которого составляет вялотекущее воспаление. Этот субтип ОА характеризуется малоизученным патогенезом и требует разработки новых принципов терапии этой коморбидности как единой болезни.

335-346 73
Аннотация

При помощи метагеномного анализа (16 S rRNA) выявлены особенности соcтава кишечного микробиоценоза у больных синдромом раздраженного кишечника (СРК): 1) увеличение представительства Actinobacteria, в том числе Bifidobacterium spp., Firmicutes, в том числе принадлежащих к семействам Streptococcaceae (Streptococcus), Lachnosperaceae (Dorea), Veillonellaceae (Dialister), Proteobacteria (семейства Enterobacteriaceae и Desulfovibrionaceae); 2) уменьшение популяции Bacteroidetes, в том числе представителей семейств Prevotellacea (Prevotella spp.), Bacteroidaceae (Bacteroides spp.), фирмикутных бактерий, относящихся к семействам Clostridiaceae и Ruminococcaceae (Fecalibacterium spp.). Проточная цитометрия при исследовании субпопуляционного состава T регуляторных (Тreg) лимфоцитов выявила у больных СРК увеличение количества CD45R0+CD62L+ клеток центральной памяти (СМ), способных регулировать процессы созревания и дифференцировки лимфоцитов в лимфоидной ткани. Обнаружено снижение экспрессии экзонуклеаз CD39 и CD73, что может оказывать существенное влияние на их активность. Отмечено снижение эффекторных клеток памяти (ЕМ) Тreg.

Изменения в уровне экспрессии экзонуклеаз CD39 и CD73 находились в обратной корреляционной связи с содержанием протеобактерий и представительством родов Bifidobactrium и Faecalibacterium. Количественное содержание СМ Treg находилось в прямой корреляционной связи с содержанием Dorea spp.

Полученные результаты могут указывать на нарушения в процессах дифференцировки Тreg, которые тесно связаны с изменениями ключевых компонентов кишечного микробиоценоза при СРК.

347-356 73
Аннотация

Целью данного исследования явилось изучение зависимости фенотипа и активности респираторного взрыва моноцитов от количества Т-регуляторных клеток (Tregs) у больных с раком почки (РП). Больные с РП (T3N0M0, светлоклеточный тип) были обследованы до хирургического лечения. Фенотип Tregs и моноцитов крови изучали методом проточной цитометрии. Исследование состояния респираторного взрыва моноцитов проводилось путем определения активности люцигенин- и люминол-зависимой спонтанной и зимозан-индуцированной хемилюминесценции. Установлено, что количество Tregs в крови больных с РП было увеличено относительно контрольных значений (у пациентов с РП — Me = 6,3%). Все обследованные пациенты были разделены на две группы в соответствии с медианой по Tregs (менее и более 6,3%). Наиболее выраженные изменения в фенотипе моноцитов и их хемилюминесцентной активности были обнаружены у больных с РП с уровнем Tregs менее 6,3%. Только эта группа пациентов имела перераспределение в субпопуляционном составе моноцитов: уменьшение относительного количества классических моноцитов и увеличение относительного содержания неклассических (провоспалительных) моноцитов. Увеличение абсолютного количества общих моноцитов и уменьшение процентного содержания HLA-DR+ и HLA-DR+CD64+ моноцитов было обнаружено у больных РП независимо от количества Tregs в крови. Изменения в фенотипе моноцитов у больных РП сопровождались изменением состояния их респираторного взрыва. Спонтанный синтез супероксид-радикала (первичная активная форм кислорода — АФК) моноцитами у больных РП с низким уровнем Tregs в крови характеризовался более коротким временем активации НАДФН-оксидазы и более высоким уровнем ее активности, чем у пациентов с высоким содержание Tregs в крови. Индекс активации люцигенин-зависимой хемилюминесценции у больных РП был снижен, не зависел от количества Tregs в крови и определялся, по-видимому, недостаточностью метаболических резервов. Спонтанный синтез вторичных АФК в моноцитах у больных РП был снижен и не зависел от количества Tregs в крови. Индуцированный синтез вторичных АФК и индекс активации их синтеза в моноцитах были снижены только у больных РП с пониженным количеством Tregs в крови. В целом характеристики хемилюминесцентной реакции моноцитов у больных РП определяют наличие дисбаланса между синтезом первичного и вторичного АФК в моноцитах крови. Моноциты у больных РП с низким уровнем Tregs в крови характеризуются большей провоспалительной активностью благодаря быстрой активации и интенсивности синтеза первичных АФК.

357-370 97
Аннотация

Создание вакцин с широким спектром защиты является одной из приоритетных задач в области профилактики гриппа. В последнее время интерес исследователей вызывают консервативные фрагменты белков вируса гриппа (M1, M2, NP, вторая субъединица гемагглютинина HA2) как объект разработки рекомбинантных вакцин широкого спектра действия. Сложность в разработке вакцин на основе таких фрагментов заключается в их низкой иммуногенности. Однако присоединение слабоиммуногенных антигенов к белку-носителю позволяет значительно усилить их иммуноген-ность. Был разработан кандидатный вакцинный белок Flg-HA2-2-4M2e, содержащий два высококонсервативных вирусных антигена (эктодомен белка M2 — М2е и участок 76-130 второй субъединицы НА2), слитых с белком-носителем флагеллином. Флагеллин — белок жгутиков бактерий, является естественным лигандом Toll-подобного рецептора 5 (TLR-5) и обладает сильной адъювантной активностью при различных способах введения. Цель настоящего исследования состояла в оценке формирования гуморального и Т-клеточного иммунного ответа и широты протективного действия кандидат-ного вакцинного белка Flg-HA2-2-4M2e при введении мышам. Мышей иммунизировали трехкратно интраназально с двухнедельными интервалами. Через две недели после последней иммунизации животных заражали летальной дозой (5 LD50) вирусов, относящихся к обеим филогенетическим группам (A/California/07/09 (H1N1)pdm09 или A/Shanghai/2/2013 (H7N9)). Полученные результаты показали формирование выраженного М2е-специфического гуморального ответа (сывороточных IgG и IgA) у иммунизированных мышей. Иммунизация приводила также к формированию M2e- и вирус-специ-фических CD4+ и CDS+T-клеток в легких, которые продуцировали TNFα и IFNγ. Выявлено формирование антиген-специфических эффекторных и центральных Т-клеток памяти в легких мышей опытной группы. Формирование кросс-протективного защитного иммунитета у иммунизированных мышей было продемонстрировано на модели летальной гриппозной инфекции. Опытные животные были практически полностью защищены (90-100% выживаемость) от высокой дозы пандемического вируса A/H1N1pdm09 и высокопатогенного вируса гриппа птиц A/H7N9. Второй задачей была оценка иммунного ответа на сублетальную инфекцию вирусом гриппа у иммунизированных животных. Мыши контрольной и опытной групп были инфицированы дозой MID100 вируса гриппа А/Aichi/2/68 (H3N2). Было показано, что у иммунизированных мышей, по сравнению с контрольными, в ответ на сублетальное инфицирование изменился профиль иммунного ответа иммуноглобулинами — в 10 раз увеличилась доля IgG2a, более оптимальных в защите от инфекции. Полученные результаты показали, что рекомбинантный белок Flg-HA2-2-4M2e является перспективным кандидатом для разработки универсальной вакцины нового поколения, формирующий протективный гуморальный и Т-клеточный ответ на консервативные вирусные эпитопы и защищающий от вирусов гриппа А обеих филогенетических групп.

371-378 70
Аннотация

На современном этапе развития науки проблема лечения онкологических заболеваний не теряет своей актуальности. В настоящее время становится все более очевидным, что монотерапия с помощью любого метода лечения не является столь же эффективной, как применение комбинированной терапии. Это обуславливает появление работ, посвященных совершенствованию уже существующих методов лечения и разработке новых, среди которых онколитическая иммунотерапия является одной из наиболее стремительно развивающихся. Благодаря современным методам генетической инженерии, открываются новые возможности использования онколитических вирусов в комбинированной терапии рака, что обусловлено их способностью, помимо прямого цитодеструктивного действия, влиять как на чувствительность опухолевых клеток к терапевтическому воздействию, так и на организм в целом, обеспечивая преодоление механизмов, обеспечивающих иммунорезистентность опухоли. Данная работа посвящена получению рекомбинантного вируса осповакцины, являющегося перспективной основой для создания противопухолевых препаратов. При помощи генно-инженерных методов произведены модификации вирусного генома: в область гена, кодирующего вирусную тимидинкиназу, произведена встройка гена, кодирующего гранулоцитарно-макрофагальный колониестимулирующий фактор человека, вирусный ген A34R, кодирующий мембанный гликопротеин, заменен на ген A34R с двумя нуклеотидными заменами, приводящими к аминокислотным заменам D110N и K151E и обусловливающими увеличение доли внеклеточных оболочечных вирионов при репродукции вируса. Кроме того, были изучены свойства полученного вируса в экспериментах in vitro: показаны продукция гранулоцитарно-макрофагального колониестимулирующего фактора, отсутствие влияния проведенных модификаций вирусного генома на репродуктивные свойства вируса, усиленная способность вируса образовывать внеклеточные оболочечные вирионы.

СЛУЧАЙ ИЗ ПРАКТИКИ

379-382 77
Аннотация

Первичные иммунодефицитные состояния (ПИДС) — это генетически детерминированные дефекты одного или нескольких звеньев иммунной системы, препятствующие нормальному осуществлению иммунных функций.

Иммунодефициты, при которых значительно нарушено антителообразование, являются наиболее часто встречаемыми и составляют около 50% от общего количества ПИДС.

Описан клинический случай первичного иммунодефицитного состояния (ПИДС): Х-сцепленная агаммаглобулинемия у мальчика 8 лет. Результаты молекулярно-генетического исследования: ген ВТК (ex 1-19) версия генома GRCh38.p5, версия транскрипта ENST00000308731 выявлена однонуклеотидная замена с.1027С > Т в гомозиготном состоянии, приводящая к возникновению преждевременного стоп-кодона p.Gln343Ter (p.Q343*).

383-392 60
Аннотация

Эозинофильный гранулематоз с полиангиитом, ранее именовавшийся как синдром Чар-га—Стросс, представляет собой редкий вариант АНЦА-ассоциированного некротизирующего васкулита, протекающего с поражением сосудов небольшого диаметра и характеризующийся типичными изменениями иммунологических параметров, выраженной эозинофилией периферической крови, тяжелым течением бронхиальной астмы, наличием летучих инфильтратов в легких, поражением периферической нервной системы, а также вовлечением в процесс почек, более редким по сравнению с другими некротизирующими васкулопатиями.

Диагностику заболевания часто осложняет наличие сопутствующей патологии, среди которой необходимо отметить хроническую обструктивную болезнь легких у пациентов с длительным стажем курения и профессиональными вредностями.

В статье представлен клинический случай относительно типичного течения эозинофильного гранулематоза с полиангиитом, развившегося у пациента пожилого возраста на фоне ранее сформировавшейся хронической обструктивной болезни легких, что затрудняло диагностику данного эозинофильного синдрома. Дебют клинической картины был представлен симптомами одышки ин-спираторного характера при умеренной физической нагрузке и кашля с отхождением слизистой мокроты в небольшом количестве, которые возникли после длительного контакта с хлорсодержащими веществами. С учетом длительного стажа курения, пульмонологом по месту жительства было констатировано наличие хронической обструктивной болезни легких. Однако сохранение жалоб на фоне проводимой терапии, а также наличие разнонаправленной динамики при многократном выполнении компьютерной томографии (КТ) органов грудной клетки в виде мигрирующих легочных инфильтратов заставили интенсифицировать диагностический поиск системных заболеваний. В дальнейшем были выявлены клинические, лабораторные и инструментальные признаки бронхиальной астмы, а также значимая эозинофилия и поражение нервной системы в виде сенсорной полинейропатии, что в сочетании с рентгенологическими данными позволило сформировать мнение о наличии эозинофильного гранулематоза с полиангиитом, несмотря на отсутствие АНЦА.

Представленный случай показывает, что при всей важности иммунологической диагностики, особенно при отрицательных результатах анализа крови на АНЦА, требуется тщательный анализ клинических данных для выявления взаимно отягощающей коморбидной патологии. Серьезный, во многих случаях неблагоприятный прогноз при эозинофильном гранулематозе с полиангиитом, необходимость длительного лечения с использованием цитостатиков, системных глюкокортикостероидов, а в отдельных случаях ГИБТ (генно-инженерной биологической терапии) заставляют рассматривать диагноз «эозинофильный гранулематоз с полиангиитом» как основной, а коморбидную патологию как фоновое состояние. Благоприятным в данном случае является тот факт, что пациент АНЦА-не-гативен, у него отсутствует развернутое поражение почек, кожи, что улучшает прогноз.



Creative Commons License
Контент доступен под лицензией Creative Commons Attribution 4.0 License.


ISSN 1563-0625 (Print)
ISSN 2313-741X (Online)