Представлены последние достижения в понимании механизмов, лежащих в основе предрасположенности к иммуноопосредованному увеиту (ИУ) и его патогенеза. Подробно описаны модели увеита человека на животных, среди которых наиболее охарактеризованными моделями экспериментального переднего увеита являются эндотоксин-индуцированный увеит и экспериментальный аутоиммунный передний увеит. В результате этих исследований были идентифицированы такие факторы транскрипции как STAT3, Interferon regulatory factor 4,8, регуляторные белки - Suppressor of cytokine signaling 1, 3 (SOCS1 , SOCS3 ) и пути передачи сигналов цитокинов, которые регулируют развитие ИУ и могут служить потенциальными терапевтическими мишенями для лечения. Охарактеризованы факторы риска окружающей среды способствующие развитию ИУ. Представлены данные о влиянии физической активности, курения, состояния микробиома кишечника, диеты на частоту возникновения ИУ, описаны известные и предполагаемые механизмы участия факторов риска в инициации и патогенезе болезни. В частности, изложены результаты исследований свидетельствующих о существовании двух основных механизмов участия микробиома кишечника в развитии ИУ: антигены микробиома кишечника действуют как триггеры активации Т-клеток, специфичных для антигенов сетчатки и микробиом модулирует баланс эффекторных субпопуляций Т – лимфоцитов (Th1 и Th17) и субпопуляций иммунорегуляторных клеток (Treg). Изложены сведения о том, что высокий уровень экспрессии глазных белков (межфоторецепторный ретиноид-связывающий белок - IRBP или S-антиген) в тимусе коррелировал с устойчивостью к развитию EAU, тогда как низкий уровень коррелировал с предрасположенностью к увеиту. Эти основополагающие исследования патогенеза ИУ позволило дать объяснение избирательной восприимчивости к аутоиммунному увеиту и предположить, что резистентность к увеиту регулируется, по крайней мере частично, способностью сохранять центральную толерантность к аутоантигенам сетчатки. Описано, что увеитогенные Т-клетки памяти перемещаются из сетчатки и периферических лимфоидных тканей в костный мозг, находясь там в состоянии покоя до повторной стимуляции, превращаясь в различные субпопуляции эффекторных клеток. Анализ результатов иммунологических исследований на модели увеита у мыши и перферической крови пациентов с увеитом человека выявил патогенетическую роль Th17-лимфоцитов и активатора транскрипции STAT3 в развитии аутоиммунного увеита и сигнальный белок STAT3 является потенциальной терапевтической мишенью при неинфекционном увеите.

Иммунные контрольные точки (ИКТ) – это обширный комплекс стимулирующих и ингибирующих сигнальных путей, играющих важную роль в точной регулировке иммунных реакций. Традиционно ИКТ считались исключительно связанными с клеточной мембраной системами рецепторов и лигандов, способными запускать или блокировать функционирование иммунных клеток, однако за последнее десятилетие доказано их существование в виде растворимых форм (растворимые молекулы иммунных контрольных точек, или sИКТ). sИКТ – биологически активные регуляторы, участвующие в паракринной и системной модуляции иммунных реакций, подобно цитокинам. В периферической крови здоровых людей присутствуют sИКТ, обладающие свойствами как стимуляторов, так и ингибиторов иммунной системы, и их баланс может нарушаться при многих онкологических заболеваниях, COVID-19, ВИЧ-инфекции. Имеется много данных о связи наличия sИКТ с различными заболеваниями, однако ряд ключевых аспектов их биологии до конца не уточнен. Наиболее широко изучаемыми являются молекулы PD-1 (programmed death receptor-1) и его лиганды PD-L1 и PD-L2, а также CTLA-4 (cytotoxic T lymphocyte antigen-4), TIM-3 (T cell immunoglobulin and mucin-domain containing-3), VISTA (V-domain Ig-containing suppressor of T cell activation). Механизмы образования растворимых форм сложны и разнообразны и включают альтернативный сплайсинг, отщепление мембранных эктодоменов, протеолитическое расщепление. Среди молекулярных механизмов, лежащих в основе синтеза и высвобождения sPD-1 и sPD-L1, наиболее важными являются альтернативный сплайсинг мРНК и трансляция изоформ, лишенных трансмембранных доменов, а образование растворимой формы TIM-3 происходит путем разрезания внеклеточных участков трансмембранных белков посредством протеазы ADAM10. В обзорной статье приведены данные об основных sИКТ, включая sPD-1, sPD-L1, экзосомальный sPD-L1, sCTLA-4 и ряд других. Описаны молекулярные механизмы их образования, биологические функции в поддержании иммунного гомеостаза, а также прогностическое значение изменения их содержания у больных злокачественными новообразованиями (включая немелкоклеточный рак легкого, гепатоцеллюлярный рак, рак молочной железы, рак почки, рак кожи, рак желудка и ряд других), а также при злокачественных заболеваниях системы крови (включая лимфомы, хронический лимфолейкоз, острый миелобластный лейкоз, множественную миелому).

Цель работы – обосновать эффективность терапии антифосфолипидного синдрома (АФС) у беременных с использованием плазмафереза и имммуноглобулинов для внутривенного введения.

Обследованы 92 женщины с диагностированным АФС и 47 женщин без АФС с физиологически протекающей беременностью. АФС был установлен в соответствии с Сиднейскими диагностическими критериями (2006). Пациентки с АФС были разделены на группы в зависимости от применяемого способа лечения: только стандартная терапия, плазмаферез в дополнение к стандартной терапии, иммуноглобулины для внутривенного введения (ВВИГ) в дополнение к стандартной терапии, и комплексное лечение – плазмаферез и ВВИГ в дополнение к стандартной терапии. В сыворотках и плазме периферической крови определяли содержание суммарных антифосфолипидных антител и параметров гемостаза, а также Р-селектина, до и после лечения.

Установлено, что достоверно более высокая частота благоприятных исходов беременности – 96,3% (срочные роды) – была в группе пациенток с АФС, получавших сочетанную терапию. Частота недоношенности и гипотрофии плода была достоверно ниже в группе пациенток с АФС, получавшим сочетанную терапию. Установлено, что наиболее значимое снижение уровня антифосфолипидных антител наблюдалось в группе с сочетанным применением плазмафереза и ВВИГ на фоне традиционной терапии. У женщин с физиологически протекающей беременностью без антифосфолипидных антител экспрессия Р-селектина была достоверно ниже по сравнению с беременными с АФС.

Применение комплексного подхода с использованием плазмафереза, иммуноглобулинов для внутривенного введения на фоне стандартной терапии является наиболее эффективным методом лечения невынашивания беременности, связанного с АФС. Использование данного метода позволило добиться сокращения частоты акушерских осложнений и улучшить исходы беременности за счет увеличения частоты срочных родов, а также наиболее низких показателей патологии новорожденного. Определение уровня Р-селектина до и после лечения позволяет оценить уровень активации тромбоцитов, эффективность проводимых методов терапии и обосновывает необходимость медикаментозной коррекции неблагоприятных показателей тромбоцитарного звена гемостаза в ходе терапии.

Целью данной работы было исследование способности Т-клеток, иммунных к SARS-CoV-2 людей, продуцировать IFNγ, являющийся одним из маркеров Т-клеточного иммунитета, в ответ на стимуляцию пептидным пулом в цельной крови.

Исследовали образцы цельной крови 80 добровольцев с известным анамнезом, полученные в 2021 году и 258 добровольцев, полученные в сентябре – октябре 2022 года. В данном исследовании использовали 2 метода – 1) твердофазный иммуноферментный анализ для определения антител класса G к RBD SARS-CoV-2; 2) IGRA-тест, для определения IFNγ, вырабатываемого антиген-специфическими лимфоцитами в ответ на их стимуляцию вирусным антигеном.

Параметры IGRA-теста были оптимизированы на выборке из 80 образцов добровольцев. Было определено пороговое значение уровня IFNγ (4,85 пг/мл), диагностическая специфичность – 100% (80,6-100%); диагностическая чувствительность – 92,19% (83-96,62%), ДИ 95%.

Затем было проведено исследование выборки из 258 добровольцев, у 28,7% которых по результатам IGRA-теста превышения порогового уровня IFNγ после стимуляции выявлено не было, при этом у всех добровольцев были обнаружены антитела класса G к RBB SARS-CoV-2. Корреляции между уровнем антител и уровнем интерферонового ответа во всей группе выявлено не было. При сравнении уровней антител IgG и амплитуды превышение уровня IFNγ над базовым уровнем у групп выборки, отличающихся временем последней вакцинации медианные значения параметров были незначительно выше для части выборки, прошедшей ревакцинацию за 1-2 месяца до проведения исследования, при этом достоверная разницы между двумя выборками была выявлена только при оценке IFNγ, пг/мл (критерий Манна–Уитни, р = 0,0321).

По результатам исследования можно предположить, что все пациенты выборки, прошедшие вакцинацию и перенесшие инфекцию COVID-19, имели гуморальный иммунитет, но примерно у трети из них отсутствовал клеточный иммунитет к SARS-CoV-2. Корреляции между уровнем антител и уровнем интерферонового ответа выявлено не было (критерий Спирмена). Показано, что ревакцинация в предшествующие 1-2 месяца способствовала увеличению амплитуды интерферонового ответа.

Лейомиомы матки (ЛМ) являются доброкачественными опухолями матки. Гипертрофическое нарастание мышечной массы при ЛМ сопровождается развитием сосудистых сетей, которые регулируется балансом проангиогенных факторов, одним из которых является VEGF-A. Кроме того, проангиогенным эффектом обладает ряд воспалительных молекул, наиболее значимые из которых IL-1β, IL-8 и др. Спектр их активности может перекрываться и регулироваться другими цитокинами. Цель – оценить уровень концентрации цитокинов, принимающих активное участие в регуляции роста сосудистой сети в периферической крови пациенток с множественной миомой матки в сопоставлении с данными по группе условно здоровых женщин.

В обследование вошли 178 женщин. Из них 89 женщин (23-60 лет) с ЛМ и 89 условно здоровых женщин аналогичного возраста (22-61 год). Уровни TNFα, IL-1β, IL-4, IL-6, IL-8, IL-10 и VEGF-A определялся методом ИФА (АО «Вектор-Бест», Россия). Статистическая обработка результатов проводилась с использованием пакета прикладных программ IBM SPSS Statistics 23 (США).

Концентрации IL-6, TNFα и IL-8 в сыворотке крови выше среди пациенток при сравнении со здоровыми женщинами. Установлена достоверная зависимость содержания VEGF от количества миоматозных узлов. При множественных выявленных узлах уровень VEGF выше. У здоровых женщин повышение концентрации TNFα, прямо коррелирует с повышением сывороточных концентраций IL-6. Корреляция с концентрацией VEGF носит слабо отрицательный характер. При лейомиоме характер этих взаимосвязей сохраняется: для IL-6, IL-8, VEGF. Для всех пациенток картина корреляционных отношений остается неизменной.

Полученные данные имеют практическое значение не только в качестве основы для разработки прогностических критериев развития ЛМ на доклиническом этапе, но и в качестве дифференциально диагностических дополнительных лабораторных признаков. В частности, при дифференциации лейомиомы матки, наиболее частой доброкачественной миоматозной опухоли матки, от злокачественных лейомиосарком матки.

Бенз(а)пирен – ароматическое соединение первого класса опасности, обладающее канцерогеннным, мутагенным, гематотоксическим, в том числе иммунотропным, эффектами. Изучение клеточных кластеров в условиях воздействия экзогенных гаптенов in vivo с использованием в качестве модельного объекта белых нелинейных мышей позволяет расширить наши знания о механизмах и особенностях иммунотропных эффектов бенз(а)пирена, что определяет актуальность данного исследования. В эксперименте участвовали 12 самок беспородных (нелинейных) белых мышей. Концентрация бенз(а)пирена при однократном поступлении составила 6 мкг/л, в качестве нейтрализатора его эффектов и адаптогена использован концентрат Chlorella growth factor (CGF), последовательно поступавший в течение 4 недель в количестве 60-70 млн/мл живых клеток, оба вещества вводились через пероральный зонд в объеме 1 мл. Исследование фагоцитарной активности клеток проводили по методике Каплина В.Н. Анализ общего количества лейкоцитов и лимфоцитов проводили с использованием унифицируемых общеклинических методов анализа на гематологическом анализаторе. Изучение кластеров клеточной дифференцировки проводилось методом проточной цитометрии (CD25, CD95, CD11а, CD309). Для статистической обработки результатов исследования применяли методы математической статистики с помощью программы Microsoft® Office Excel, Statistica 6.0. Установлено, что субхроническая (подострая) интоксикация бенз(а)пиреном в условиях эксперимента in vivo приводила к значимой модификации клеточного иммунитета по сравнению с контролем, фенотипом которой выступали дефицит факторов врожденного клеточного иммунитета (система гранулоцитарного фагоцитоза) и дисбаланс адаптивного клеточного иммунитета с преимущественным угнетением апоптотической активности (CD95⁺) и моделированием интегрин- и VEGF-опосредованных сценариев (CD11a, CD309). Причем последовательное поступление природного модификатора Chlorella growth factor характеризовалось нормализацией фагоцитарной активности и отменой индуцированных бенз(а)пиреном эффектов. Ограничения исследования, полученных результатов и выводов обусловлены малым (ограниченным) объемом выборки. В результате изучения in vivo особенностей фагоцитоза и кластеров клеточной дифференцировки иммуноцитов мышей, в условиях последовательной экспериментальной субхронической экспозиции техногенных и природных модификаторов, выявлен дисбаланс показателей неспецифического и адаптивного клеточного иммунитета, сопряженный с формируемыми бенз(а)пиреном гранулоцитарной альтерацией и нарушением контроллинга клеточной пролиферации, отменяемые CGF. Последовательное поступление комплекса CGF приводило к оптимизации работы иммунной системы по ряду его показателей, позитивной модификации иммунотропных эффектов бенз(а)пирена, снимая супрессию гранулоцитарного и сопряженного с интегрином лимфоцитарного ростков крови, оказывая преимущественно фагоцитоз-протективные эффекты, а также антиапоптотическое и интегрин-миметическое действие.

Поступление алкоголя в организм во время беременности может отразиться на нормальном ходе эмбрионального развития плода, что приведет к формированию симптомов фетального алкогольного спектра нарушений (ФАСН). Имеются сведения о том, что при ряде пренатальных патологических состояниях наблюдаются изменения в регуляции механизмов экспрессии ряда про- и противовоспалительных цитокинов. В нашем исследовании мы сосредоточили внимание на изучении уровня экспрессии ряда генов про- и противовоспалительных цитокинов в переднем и височном отделах мозга крысят в постнатальном периоде развития при моделировании пренатального воздействия алкоголя (ПВА). Также оценили уровень экспрессии генов, которые ассоциированы с регуляцией экспрессией генов про- и противовоспалительных цитокинов. Кроме того, в задачи нашего исследования входило произвести фармакологическую коррекцию наблюдаемых изменений потенциальным фармакологическим агентом – рифампицином, который по данным других исследований оказывал нейропротекторный эффект. Моделирование ПВА осуществлялось путем спаивания беременных самок крыс 15%-ным раствором этанола на протяжении всей беременности. Инъекции выполнялись крысятам с 1-го по 7-й постнатальные дни. Забор структур мозга для анализа экспрессии генов осуществлялся на 8-е постнатальные сутки. Результаты исследования показали наличие изменений в экспрессии генов Tlr3 и Tlr4 на 8-е сутки постнатального развития в передней и височной долях головного мозга. Экспрессия генов Myd88 и Ticam имела разнонаправленные изменения среди исследуемых структур мозга крысят с ПВА. Отмечен повышенный уровень мРНК провоспалительных генов. Применение Rif в эксперименте показало способность Rif (50 мг/кг) корректировать наблюдаемые долгосрочные патологические изменения в экспрессии исследуемых генов. Представляется интересным изучение в будущем дозозависимого эффекта, а также исследование выявленных изменений белковыми методами. Кроме того, представляется важным в будущем изучение системы TLR-сигнализации в других структурах мозга с ПВА, а также на разных сроках постнатального развития в онтогенезе.

Псориаз является наиболее распространенным воспалительным заболеванием кожи, которым страдает в среднем 2-4% населения Земли. Согласно современным представлениям, псориаз является мультифакториальным заболеванием, возникающим у генетически предрасположенных лиц под воздействием различных факторов окружающей среды, которые запускают нарушение иммунного ответа с серией сложных воспалительных каскадов. Заболевание инициируется и поддерживается взаимным взаимодействием клеток врожденного и адаптивного иммунитета, прежде всего дендритных клеток, Т-лимфоцитов и кератиноцитов, ведущая роль которых на разных стадиях заболевания чередуется и заключается в основном в IL-23/Th17-пути. На сегодняшний день описано множество полиморфизмов генов (SNP), связанных с развитием псориаза. Для понимания патофизиологии псориаза, как сложного аутовоспалительного заболевания, представляется интересным изучение межгенных взаимодействий полиморфных вариантов генов цитокинов и С-реактивного белка в отношении риска развития псориаза. Цель работы – изучить межгенные взаимодействия полиморфных вариантов генов IL1β (rs16944), IL6 (rs1554606), IL8 (rs2227306), IL10 (rs1800896), TNFα (rs361525), СRP (rs1205) связанных с риском развития псориаза у жителей Кемеровской области. Обследовано 175 пациентов с обыкновенным папулезно-бляшечным псориазом, с прогрессирующим течением в средней степени тяжести. Контрольная группа (n = 155) сформирована из условно-здоровых доноров того же возрастного интервала. Генотипирование осуществляли с помощью метода ПЦР с использованием TaqMan зондов (Thermo Fisher Scientific, США) на детектирующем амплификаторе ViiA^TM 7 Real-Time PCR System (Life Technologies, США) следующих полиморфных вариантов генов: IL1β (rs16944), IL6 (rs1554606), IL8 (rs2227306), IL10 (rs1800896), TNFα (rs361525), СRP (rs1205). Анализ межгенных взаимодействий осуществляли при помощи метода сокращения многофакторной размерности (Multifactor Dimensionality Reduction, MDR). Установлено, что детерминирование обыкновенного папулезно-бляшечного псориаза связано как с отдельными полиморфными вариантами генов цитокинов и С-реактивного белка, так и ген-генными взаимодействиями. Для отдельных полиморфных вариантов генов сила (% энтропии) ассоциации с обыкновенным папулезно-бляшечным псориазом была следующая: TNFα_rs361525 (16,99% энтропии), IL1β_rs16944 (6,40% энтропии), CRP_rs1205 (2,55% энтропии), IL6_rs1554606 (1,11% энтропии), IL10_rs1800896 (0,57% энтропии), IL8_rs2227306 (0,30% энтропии). Выявлено, что выраженным синергизмом обладали IL6 (rs1554606) и IL8 (rs2227306); умеренным синергизмом CRP (rs1205) и IL10 (rs1800896) и выраженным антагонизмом IL1β (rs16944) и TNFα (rs361525).

Существует прямая взаимосвязь между выраженностью функционального, морфологического и биохимического атипизма клеток опухоли и степенью ее злокачественности. Выделяют пять молекулярно-генетических подтипов рака молочной железы. При этом известно, что наиболее агрессивным течением характеризуются нелюминальные подтипы, в особенности – тройной негативный рак молочной железы. Целью работы явилось определение сопряженности между относительным содержанием клеток различной степени дифференцировки с продукцией цитокинов биоптатами рака молочной железы при люминальных и нелюминальных подтипах рака молочной железы. Материалом исследования служили биоптаты 49 женщин с инвазивной карциномой молочной железы неспецифического типа, средний возраст которых составил 59 лет. Пациенты были разделены на три группы в зависимости от принадлежности к тому или иному молекулярно-генетическому подтипу опухоли. В I группу включены пациенты с люминальным подтипом А, во вторую – с люминальным В и в III – с нелюминальными подтипами рака молочной железы. Изучали спонтанную и стимулированную поликлональными активаторами продукцию цитокинов. Значение цитокинпродуцирующего резерва биоптатов выражали с помощью индекса влияния поликлональных активаторов ввиду его точности, позволяющей избежать ошибки за счет одинаковых размеров биоптата каждого пациента и условий их инкубирования. Относительное содержание опухолевых клеток различной степени дифференцировки в образцах оценивали с помощью светооптической микроскопии с учетом Ноттингемской градирующей системы. При оценке спонтанной и стимулированной продукции цитокинов, а также степени дифференцировки клеток образцов опухоли выявлены прямые и обратные корреляционные связи между исследуемыми группами. Наиболее важным показателем оказался индекс влияния поликлонального активатора на продукцию биоптатами IL-10 и VEGF-А. Благодаря этому мы можем представить персонифицированные сведения по каждому пациенту по этим двум цитокинам еще до начала лечения. Анализ ROC-кривых показал хорошее качество и оптимальные значения точек отсечения концентраций цитокинов и относительного содержания низкодифференцированных клеток, которые могли бы наилучшим образом предсказать наличие неблагоприятных нелюминальных подтипов рака молочной железы. Основываясь на полученных нами данных, можно сделать вывод о том, что цитокинпродуцирующий резерв сопряжен с клеточной дифференцировкой и зависит от молекулярно-генетического подтипа опухоли.

Несмотря на множество разнообразных методов выделения нейтрофилов из периферической крови, сохраняется актуальной проблема получения достаточного количества жизнеспособной клеточной популяции высокой степени чистоты для количественного определения нейтрофильных цитокинов и экспрессии их мРНК. Рекомендуемые многоэтапные способы очистки нейтрофилов значительно увеличивают по времени продолжительность процесса выделения, могут приводить к активации или апоптозу клеток и сопровождаются их значительными потерями. Наиболее критичным по продолжительности и количеству дополнительных разнообразных манипуляций с клетками является этап предварительной очистки нейтрофилов. В связи с этим актуальным вопросом является сравнение различных методов предварительной изоляции нейтрофилов и выбор наиболее оптимального из них для получения достаточного количества жизнеспособных периферических нейтрофилов, что и явилось целью данной работы. Нами были изучены особенности влияния трех различных протоколов предварительного выделения клеточной взвеси (центрифугирование цельной крови на одинарном градиенте плотности с последующим осаждением эритроцитов декстраном; центрифугирование цельной крови на двойном градиенте плотности; быстрое выделение лейкоцитов с использованием реагента, способствующего агрегации эритроцитов) на количество и жизнеспособность нейтрофилов, очищенных на заключительном этапе с использованием негативной иммуномагнитной селекции. Установлено, что процедура предварительного выделения нейтрофилов для последующей иммуномагнитной изоляции влияет на их количество и жизнеспособность: максимальное количество жизнеспособных нейтрофилов получается при их выделении традиционным методом центрифугирования крови на градиенте плотности с последующим осаждением эритроцитов декстраном. В то же время исследуемые нами три разных метода предварительного выделения нейтрофилов не показали статистически значимых различий по количественному выходу жизнеспособных клеток после иммуномагнитной изоляции, что предполагает использование любого из этих методов в зависимости от возможностей и предпочтений исследователей. В целом наша работа подтверждает данные литературы о том, что многоступенчатый процесс изоляции нейтрофилов позволяет получить клеточную взвесь высокой степени чистоты (> 99,1%), которую можно использовать в дальнейшем для исследования их цитокин-секретирующей активности. Однако такая многоступенчатая изоляция значительно снижает количество нейтрофилов, что может быть критичным при исходно малых объемах крови.

Куриное яйцо является одним из наиболее важных источников аллергенов, сенсибилизация пациентов к которым чаще всего проявляется в виде пищевой аллергии (ПА) и/или атопического дерматита (АтД). Иммуногенными факторами куриного яйца являются молекулы, которые присутствуют как в белке, так и желтке.

Цель нашей работы состояла в сравнении частоты и интенсивности IgE-ответа на различные компоненты куриного яйца у детей в зависимости от их возраста и пола. Нами обследованы 3070 детей с симптомами пищевой аллергии и атопического дерматита, проведен анализ IgE-ответа на экстракт аллергенов белка куриного яйца (f1) и экстракт аллергенов желтка куриного яйца (f75) с учетом возраста и пола детей. Уровень IgE определен методом иммунофлюоресценции с помощью автоматического анализатора ImmunoCAP250. Нами выявлена высокая частота сенсибилизации к куриному яйцу у детей с ПА и АтД: 31,07% (n = 954) пациентов имели клинически значимые уровни IgE. Частота сенсибилизации к белку была статистически значимо выше частоты сенсибилизации к желтку: 31,04% (n = 953) и 13,13% (n = 403) соответственно. Максимальная распространенность положительных IgE-ответов на белок и желток куриного яйца и выраженность сенсибилизации отмечалась у детей первого года жизни, а у детей старших возрастных групп наблюдалось значимое снижение этих показателей. В старших возрастных группах также наблюдалось уменьшение числа косенсибилизированных пациентов, в то время как число случаев моносенсибилизации к белку куриного яйца возрастало в группах детей 2-6 лет, а затем снижалось у детей старше 6 лет. У детей обоих полов частота позитивных IgE-ответов на экстракты аллергенов белка и желтка куриного яйца значимо не отличалась и имела сходную возрастную динамику. Статистически значимые различия между IgE-ответом мальчиков и девочек выявлены только в группах детей старше 14 лет и только в отношении IgE-ответа на аллергены белка куриного яйца. Нами показана крайне низкая частота моносенсибилизации к желтку: клинически значимые уровни IgE к желтку при отсутствии антител к белку куриного яйца обнаружены у 0,1% пациентов с пищевой аллергией и атопическим дерматитом.

Высокая частота сенсибилизации к куриному яйцу у детей первых лет жизни свидетельствует о крайне раннем контакте пациента с аллергеном. Иммуногенная способность аллергенов белка и желтка различна, более выраженный IgE-ответ наблюдается в отношении белка куриного яйца. Снижение числа случаев положительного IgE-ответа на аллергены куриного яйца у детей может свидетельствовать о формировании иммунологической толерантности как к желтку, так и к белку к возрасту 8-10 лет. Однако остается открытым вопрос изучения иммунных механизмов аллергических реакций, поскольку, несмотря на значительное снижение распространенности аллергии на куриное яйцо у детей старшего возраста, ряд пациентов так и не достигает толерантности к данному пищевому продукту.

В настоящей работе было определено содержание антител к липопротеинам низкой плотности, модифицированным малоновым диальдегидом, концентрация холестерина циркулирующих иммунных комплексов и количество перекисно-модифицированных липопротеинов низкой плотности в крови здоровых лиц и пациентов с различными проявлениями атеросклероза. Кроме того, изучалось влияние антител к липопротеинам низкой плотности, модифицированным малоновым диальдегидом на взаимодействие таких липопротеинов с макрофагами. Всего обследовано 253 человека: здоровые лица (59 человек), пациенты с доклиническим атеросклерозом (25 человек) и пациенты с ишемической болезнью сердца (169 человек). Установлено, что у пациентов с ишемической болезнью сердца по сравнению со здоровыми лицами и пациентами с доклиническим атеросклерозом повышена концентрация холестерина циркулирующих иммунных комплексов в крови, тогда как содержание окисленных липопротеинов низкой плотности не различалось между группами обследованных. При этом у пациентов с атеросклерозом выявлена положительная корреляция между уровнями в крови окисленных липопротеинов низкой плотности и холестерина циркулирующих иммунных комплексов. Содержание в крови антител класса IgG к липопротеинам низкой плотности, модифицированным малоновым диальдегидом, достоверно снижено у больных с ишемической болезнью сердца по сравнению со здоровыми лицами и пациентами с доклиническим атеросклерозом, тогда как концентрация таких антител класса IgM практически не изменялось у пациентов с атеросклерозом, независимо от его тяжести. Было показано, что специфичные антитела к липопротеинам низкой плотности, модифицированным малоновым диальдегидом, значительно снижали цитотоксичность таких ЛПНП, а также их способность вызывать накопление эфиров холестерина в макрофагах, полученных из мононуклеаров периферической крови человека. Таким образом, полученные данные свидетельствуют о том, что антилипопротеиновые антитела могут оказывать защитное действие, предупреждая гибель клеток и снижая накопление эфиров холестерина в макрофагах при их взаимодействии с модифицированными липопротеинами низкой плотности, т. е. предупреждать формирование пенистых клеток.

Были проведены исследования образцов крови у пациентов до 1 года с катарактой, глаукомой и ретинопатией недоношенных и у доношенных, соматически здоровых детей до 1 года, с целью количественного определения Т-регуляторных клеток CD4⁺CD25^highFoxP3⁺CD127^low. Объединены и структурированы данные собственных исследований, представленные в ранее опубликованных статьях по отдельным патологиям, для полноценного сравнения их в комплексе наиболее распространенных глазных заболеваний у детей до 1 года, какими являются катаракта, глаукома и ретинопатия недоношенных.

Целью исследования явилось сравнительное исследование количества Т-регуляторных клеток (CD4⁺CD25^highFoxP3⁺CD127^low) в крови детей до 1 года жизни с РН, катарактой, глаукомой и здоровых доношенных детей (по данным собственных исследований в ранее опубликованных работах по отдельным патологиям).

Всего был обследован 131 ребенок (262 глаза) в возрасте до 1 года. Из них 79 детей (158 глаз) – с ретинопатией недоношенных, 12 детей (20 глаз) – с катарактой, 13 детей (21 глаз) – с глаукомой, 9 парных глаз детей – с катарактой и глаукомой и 27 здоровых доношенных детей (54 глаза) того же возраста. Детям было проведено стандартное офтальмологическое обследование. Особое внимание нами было уделено исследованию количества Т-регуляторных клеток CD4⁺CD25^highFoxP3⁺CD127^low. Произведено иммунофенотипирование клеток периферической крови, включая Т-регуляторные клетки.

По данным ранее произведенных нами исследований и при сопоставлении результатов в представленном исследовании у детей до 1 года были обнаружены достоверные различия по количеству Т-регуляторных клеток (CD4⁺CD25^highFoxP3⁺CD127^low) между недоношенными и доношенными детьми, а также внутри групп пациентов по весовой категории при катаракте и глаукоме. Авторам удалось определить различия между стадиями ретинопатии недоношенных по количеству Т-регуляторных клеток (CD4⁺CD25^highFoxP3⁺CD127^low), выделяя заднюю агрессивную ретинопатию недоношенных в особую форму данной патологии.

Данное исследование является подтверждением возможного участия аутоиммунного ответа в патогенезе прогрессирующих стадий ретинопатии недоношенных. Об этом свидетельствует выявленное достоверное уменьшение количества Т-регуляторных клеток CD4⁺CD25^highFoxP3⁺CD127^low. Прогрессирующие стадии ретинопатии недоношенных сопровождаются более низкими значениями Т-регуляторов, чем стационарные. Выявлены достоверные различия по количеству Т-регуляторных клеток при основных офтальмологических заболеваниях детей в возрасте до 1 года – катаракте, глаукоме и ретинопатии недоношенных.

Геморрагическая лихорадка Ласса – острое инфекционное заболевание человека с высокой летальностью и пандемическим потенциалом. Геморрагическая лихорадка Ласса ежегодно уносит жизни тысяч людей. На сегодняшний день в мире нет одобренных средств для специфической терапии или профилактики заболевания. Целью данной работы было конструирование, изучение иммунобиологических свойств и доклинической безопасности кандидатной вакцины для профилактики геморрагической лихорадки Ласса на основе рекомбинантных аденовирусных векторов. В ходе работы использовались стандартные генно-инженерные, молекулярно-биологические, вирусологические методы и методы работы с лабораторными животными. В результате работы была сконструирована и охарактеризована комбинированная векторная кандидатная вакцина для профилактики геморрагической лихорадки Ласса – «ГамЛассаВак». Вакцина представлена двумя компонентами для гетерологичной иммунизации в режиме прайм-буст на основе рекомбинантных репликативно-дефектных аденовирусных векторов. Первый компонент вакцины – рекомбинантный аденовирус человека 26- го серотипа, второй компонент – аденовирус человека 5-го серотипа. Оба рекомбинантных вектора несут кодон-оптимизированную последовательность гликопротеина вируса Ласса. В GMP-условиях произведены и проанализированы две экспериментальные серии кандидатной вакцины. Приведены результаты исследований экспериментальных серий на соответствие требованиям, предъявляемым к вирусным векторным вакцинам. В доклинических исследованиях на мышах показана индукция антиген-специфических IgG при введении компонентов вакцины индивидуально и в режиме прайм-буст, а также динамика развития гуморального иммунного ответа на 42-й, 77-й, 119-й и 147-й дни после вакцинации. При этом, несмотря на 100%-ную сероконверсию, вируснейтрализующие антитела не были обнаружены ни в одном из образцов, полученных от иммунизированных мышей. В исследовании биораспределения показано, что через 24 часа после внутримышечного введения компонентов кандидатной вакцины ДНК аденовирусных векторов детектируется только в месте инъекции и региональных лимфатических узлах. В результате доклинических исследований безопасности (острая токсичность, хроническая токсичность, иммунотоксичность, аллергизирующие свойства, репродуктивная токсичность) не выявлено противопоказаний для получения разрешения на клинические исследования кандидатной вакцины. В совокупности результаты демонстрируют, что кандидатная вакцина для профилактики геморрагической лихорадки Ласса на основе рекомбинантных аденовирусных векторов 26-го и 5-го серотипов является перспективным препаратом для специфической иммунопрофилактики.

Вакцинация против гриппа способствует благоприятному течению и исходу COVID-19. Цель исследования – изучить влияние вакцин против гриппа и пневмококка на уровень IgG антител (АТ) к SARS-CoV-2 среди медицинского персонала в начале пандемии COVID-19.

Представлена оценка иммунного ответа к вирусу гриппа и SARS-CoV-2 у 266 медицинских работников через 6 мес. после иммунизации против гриппа и/или против пневмококковой инфекции (без прививок против COVID-19) в сезоне 2020-2021 гг. со сравнительной характеристикой у 281 сотрудников не имеющие в анамнезе вакцинаций.

Установлено, что доля медицинских работников с защитным (≥ 1:40) уровнем к вирусу гриппа через 6 месяцев после вакцинации по группам участников достигает протективного (≥ 70%) значения только у лиц, получавших моновакцину против пневмококковой инфекции (78,6%), в сравнении с лицами, которые были привитыми моновакциной против гриппа (61,7%) (p < 0,001), а также с группой работников иммунизированных против гриппа в сочетания с вакциной против S. pneumoniae (68,9%) (p < 0,01). Т. е. вакцина против пневмококка способна индуцировать синтез IgG-АТ к вирусу гриппа, достигающих протективных значений.

Анализ результатов серопозитивных (≥ 1:10) IgG-АТ к штаммам вируса гриппа и их сопоставимости с серопревалентными к COVID-19 лиц показал, что среди медицинского персонала, вакцинированного против сезонного гриппа через 6 месяцев, доля серопозитивных лиц (свидетельствующая о вероятной перенесенной бессимптомной формы COVID-19) выше и составляет от 65,4% (p = 0,026) в группе привитых моногриппом до 64,5% (p = 0,04) в группе привитых сочетано гриппом и пневмококком в сравнении с неиммунизированными работниками – 48,8%.

Результаты показывают, что вакцинация против гриппа выступает в роли индуктора гуморального иммунитета не только к вирусу гриппа, но и к недавно перенесенной инфекцию SARS-CoV-2.

Перестройка иммунной системы при беременности представляет строго контролируемый динамический процесс, в рамках которого первый и третий триместр являются провоспалительными, а второй – соответствует противовоспалительной фазе. Однако вовлеченность моноцитов в регуляцию баланса между воспалительным и противовоспалительным статусом остается мало изученной. Известно, что функциональный фенотип моноцитов зависит от их субпопуляционной принадлежности, оцениваемой по экспрессии CD14 и СD16, и сопряжен с экспрессией М1(CCR2)- и М2(CD206)- ассоциированных молекул, характеризующих, соответственно, моноциты с про- и противовоспалительной активностью. В настоящей работе методом проточной цитофлюориметрии исследована экспрессия CCR2 и CD206 в субпопуляциях классических (CD14⁺⁺CD16^- , кМо), промежуточных (CD14⁺⁺CD16⁺, пМо) и неклассических (CD14⁺CD16⁺⁺, нМо) моноцитов у беременных на различных сроках гестации в сравнении с небеременными. В исследование были включены 14 беременных в первом, 20 – во втором и 26 – в третьем триместре, а также 29 фертильных небеременных. Однофакторный дисперсионный анализ выявил существенные различия в экспрессии CCR2 и CD206 в указанных группах, которые были наиболее выражены в классических и промежуточных моноцитах и сильнее проявлялись в отношении экспрессии CD206. В целом моноциты беременных характеризовались сниженной экспрессией CCR2 и повышенной экспрессией CD206, что свидетельствовало о смещении баланса в сторону противовоспалительного профиля. Эти изменения проявлялись уже в первом триместре (повышенный уровень средней интенсивности флюоресценции [MFI] CD206 в кМо и пМо; p < 0,05) и достигали наибольшей выраженности во втором триместре, проявляясь достоверно повышенной экспрессией CD206 (% клеток, MFI) и сниженной экспрессией CCR2 (% клеток, MFI) во всех субпопуляциях моноцитов. В третьем триместре доля CD206⁺ кМо по сравнению со вторым триместром снижалась (p < 0,05), а относительное содержание CCR2⁺ клеток в кМо и пМо повышалось. Характерно, что в первом и третьем триместрах выявленные изменения сочетались с усилением провоспалительного профиля моноцитов, которое в первом триместре было рестриктировано субпопуляцией неклассических моноцитов, а в третьем триместре опосредовалось промежуточными и неклассическими моноцитами. Полученные данные свидетельствуют о вовлеченности моноцитов в регуляцию про- и противовоспалительного баланса в динамике гестации с преобладающим формированием М2-профиля в классических моноцитах в первом и третьем триместрах и всех субпопуляциях моноцитов во 2-м триместре и усилением М1-провоспалительного профиля в промежуточных и неклассических моноцитах в первом и третьем триместрах.

Развитие язвенного колита (ЯК) сопровождается активацией пуринэргического сигнального пути и повышением уровня внеклеточного аденозина. Аденозин участвует в регуляции баланса провоспалительных Т-хелперов типа 17 (Th17) и иммуносупрессорных регуляторных Т-клеток (Treg), нарушение которого, как считается, является одним из основных иммунных факторов данного заболевания. Тем не менее вопрос о том, как изменяется экспрессия генов, кодирующих транскрипционные факторы Treg-клеток и Th17 (FOXP3 и RORγ соответственно), и генов, кодирующих участников CD39/CD73/A2AR сигнального пути (ENTPD1, NT5E, ADORA2A), в периферической крови больных ЯК малоизучен. Цель исследования – изучить уровень экспрессии генов ENTPD1, NT5E, ADORA2A, FOXP3 и RORγ при язвенном колите. Обследован 41 человек, из которых 23 пациента с диагнозом «ЯК» (18 пациентов, находящихся на базисной терапии производными 5-АСК (группа ЯК1) и 5 пациентов, принимающих преднизолон (группа (ЯК2)), 18 условно здоровых людей. Тотальную РНК выделяли из лейкоцитов периферической крови (ЛПК). Уровень транскриптов генов изучали методом ПЦР в режиме реального времени. Содержание мРНК гена ENTPD1 у больных ЯК, находящихся на базисной терапии производными 5-АСК, было выше, чем у здоровых людей (p = 0,0045). Уровень транскриптов гена NT5E и ADORA2Aв ЛПК пациентов группы ЯК1 оказался выше, чем у пациентов из группы ЯК2 (p = 0,0486 и p = 0,0289 соответственно) и здоровых индивидов (p = 0,0007 и p < 0,001 соответственно). У группы пациентов ЯК1 содержание мРНК гена FOXP3 в ЛПК было выше, чем у условно здоровых людей (p = 0,0093). Уровень экспрессии гена RORγ в ЛПК пациентов из групп ЯК1 и ЯК2 был выше, чем у здоровых индивидов (p = 0,0005). В ЛПК больных ЯК, находящихся на базисной терапии, наблюдалось повышение уровня экспрессии генов FOXP3 и RORγ, представляющих собой транскрипционные факторы Treg- и Th17-клеток соответственно, тогда как уровень экспрессии этих генов у больных ЯК на преднизолоне не отличался от контроля. В контрольной группе и группе ЯК1 выявлены корреляционные связи между уровнем экспрессии некоторых из исследуемых генов.

Цель исследования – установить влияние полиморфизма гена DEFB1-20G>A и гена DEFB1-52G>A на экспрессию DEFВ1 у пациентов призывного возраста с развитием внебольничных пневмоний. Проведено обследование 160 неродственных пациентов призывного возраста (18-20 лет) европеоидной расы. Первая группа (n = 80) – пациенты с COVID-19-инфекцией, осложненной нетяжелой пневмонией (n = 40) и тяжелой пневмонией (n = 40). Вторая группа – клинического сравнения (n = 80) – пациенты с острой респираторной инфекцией (ОРИ) негриппозной этиологии, осложненной нетяжелой пневмонией (n = 40) и тяжелой пневмонией (n = 40). Контрольная группа – 86 практически здоровых мужчин аналогичного возраста. Критерии исключения: наличие родственных связей; пациенты с острой и/или хронической сопутствующей патологией. Методы исследования: клинические; лабораторные (иммунологический – определение DEFВ1 с помощью набора реактивов ELISA Cloud-Clone Corp. (США); генетический (полиморфизм гена DEFB1-20G>A, гена DEFB1- 52G>A) – в работе использовались стандартные наборы праймеров НПФ «Литех»-«SNP» (Москва); инструментальные (компьютерная томография). Исследования осуществляли при поступлении в стационар. Статистическая обработка результатов исследования проводилась с помощью пакета программ IBM SPSS Statistics Version 25.0 (IBM, США). Установлено преобладание -20А- аллелей и генотипов -20А/А и -52А/А генов DEFB1 у пациентов с развитием тяжелой пневмонии на фоне COVID19-инфекции. Отмечено увеличение содержания DEFB1 в группе с COVID-19-инфекцией в 1,1 раза по сопоставлению с группой ОРИ и в 1,5 раза – с группой контроля. Изменение уровня DEFВ1 в зависимости от тяжести течения внебольничной пневмонии также характеризуется его повышением в 1,7 раза в группе с тяжелым течением на фоне COVID-19-инфекции и в 1,2 раза у больных с ОРИ. Концентрация DEFB1 значимо повышается при носительстве генотипа -20А/А и генотипа -52А/А гена DEFВ1. У пациентов призывного возраста с внебольничными пневмониями регистрируется повышение концентрации DEFВ1 с наибольшими значениями в группе с тяжелыми пневмониями при COVID-19. Носительство генотипа -20А/А и генотипа -52А/А гена DEFВ1 способствует увеличению содержания DEFВ1. Наличие -20А- аллелей и генотипов -20А/А и -52А/А генов DEFB1 ассоциировано с тяжелым течением внебольничных пневмоний у пациентов призывного возраста на фоне COVID-19-инфекции.

Исследования последних лет демонстрируют повышенный интерес к разработке новых лабораторных методов оценки риска возникновения ТЭО при фибрилляции предсердий. Одним из биомаркеров, проявляющим важные противовоспалительные, антикоагулянтные и антифибринолитические свойства и участвующим в поддержании сосудистого гомеостаза, является растворимый тромбомодулин (sTM).

Цель – исследование содержания растворимого тромбомодулина в сыворотке крови у больных с фибрилляцией предсердий неклапанного генеза, получающих антикоагулянтную терапию и имеющих в анамнезе тромботические осложнения и пациентов с фибрилляцией предсердий без тромботических осложнений.

В исследование были включены 60 пациентов, старше 18 лет с диагнозом «фибрилляция предсердий», верифицированным на основании клинических рекомендаций, получающих антикоагулянтную терапию. Из них у 21 пациента произошло развитие тромботических осложнений (ТО) на фоне адекватной антикоагулянтной терапии, а также в исследование было включено 22 здоровых добровольца. Исследование растворимого тромбомодулина (нг/мл) проводилось методом иммуноферментного анализа с использованием оборудования ЦКП «Медицинская геномика» Томского НИМЦ.

Все обследованные пациенты были разделены на 2 группы: группа пациентов с фибрилляцией предсердий без тромботических осложнения и группа пациентов с фибрилляцией предсердий с возникшими тромботическими осложнениями. Содержание растворимого тромбомодулина в сыворотке крови у пациентов с возникшими тромботическими осложнениями было снижено по сравнению как с группой пациентов без ТО, так и с группой практически здоровых добровольцев. Анализ уровня sTM у мужчин и женщин в группах пациентов и у здоровых добровольцев показал, что наиболее низкие значения данного биомаркера в сыворотке крови отмечены у женщин из группы пациентов с фибрилляцией предсердий с ТО по сравнению с женщинами из группы пациентов без тромбозов и со здоровыми женщинами. Также отмечается сниженное содержание растворимого тромбомодулина у мужчин с тромбозами по сравнению со здоровыми мужчинами. Сравнительный анализ уровней sТМ у женщин и мужчин во всех группах не выявил статистически значимых различий.

В изученной группе больных с фибрилляцией предсердий неклапанного генеза, получающих антикоагулянтную терапию, было отмечено снижение растворимого тромбомодулина в подгруппе пациентов с возникшими тромботическими осложнениями.

Атопический дерматит (АтД) является хроническим воспалительным заболеванием кожи, патогенез которого связан с иммунологическими нарушениями и генетически обусловленными дефектами эпидермального барьера. Воздействие аэроаллергенов, в том числе пыльцы растений, играет важную роль в обострениях и прогрессировании АтД. При контакте с пыльцевыми аллергенами у сенсибилизированных индивидуумов активируется T2-иммунный ответ, который характеризуется высвобождением цитокинов IL-4, IL-13 и IL-31, стимулирующих продукцию IgE. Это приводит к усилению воспаления, улучшению проникновения аллергенов через нарушенный эпидермальный барьер, активации кератиноцитов и дендритных клеток, дальнейшему нарушению функции барьера кожи и обострению симптомов АтД. В ранее проведенных исследованиях показано, что аллергены пыльцы могут прямо воздействовать на эпидермальный барьер, активируя протеолитические ферменты, которые разрушают межклеточные соединения в эпидермисе, увеличивая его проницаемость для аллергенов и патогенов. В данном исследовании анализируется влияние сенсибилизации к аллергенам пыльцы березы на обострение атопического дерматита (АтД) у взрослых пациентов, проживающих в Москве и Московской области. Пыльца березы является значимым аллергеном, способным вызывать обострения аллергических заболеваний, особенно в странах Северного полушария, где береза широко распространена. В исследование включено 30 взрослых пациентов с АтД, сенсибилизированных к пыльце березы. Для оценки тяжести заболевания использовали индекс SCORAD, который позволяет объединять как объективные показатели состояния кожи, так и субъективные жалобы пациентов (зуд, нарушение сна). Аллергологическое обследование проводилось с использованием аллергочипа ISAC ImmunoCAP, позволяющего определить уровень специфических IgE-антител к более чем 100 аллергенам, включая главный аллерген пыльцы березы – Bet v 1. Анализ результатов по казал, что у большинства пациентов в период цветения березы наблюдалось значительное усиление симптомов АтД, что коррелировало с уровнем специфических IgE к Bet v 1. Исследование подчеркивает клиническую значимость сенсибилизации к пыльце березы как фактора-триггера обострения АтД, подтверждая необходимость анализа сенсибилизации к пыльцевым аллергенам для разработки персонифицированных подходов к диагностике и терапии пациентов с АтД.