Preview

Медицинская иммунология

Расширенный поиск
Том 20, № 5 (2018)
Скачать выпуск PDF
https://doi.org/10.15789/1563-0625-2018-5

ОБЗОРЫ

613-620 267
Аннотация

Т-клетки памяти необходимы для развития иммунного ответа и представляют собой одну из наиболее многочисленных популяций Т-лимфоцитов человека. Регуляторные Т-клетки (Treg), напротив, выполняют функцию завершения адаптивного иммунного ответа и обеспечения толерантности к собственным антигенам. Эти группы клеток представлены разными субпопуляциями и присутствуют в организме в течение всей жизни. Однако сегодня еще нет ясного понимания того, как формируются взаимосвязи между этими группами клеток. В работе рассматриваются возможные пути развития и поддержания CD4+ Т-клеточной памяти с участием Treg-клеток. Обсуждаются разные механизмы дифференцировки Т-клеток памяти, Treg-клеток и недавно открытых Treg-клеток памяти, сравниваются их функциональные и молекулярно-генетические характеристики. Разделение клеток по функциональному профилю позволяет отметить параллели между T-клетками памяти и Treg-клетками: и те и другие представлены центральными циркулирующими популяциями (Tc), эффекторными, которые мигрируют в ткани (Te), и тканево-резидентными (Tr), пребывающими в тканях на периферии. Сходная структурная организация Tregs и Т-клеток памяти, существование переходных форм тканево-резидентных субпопуляций Tregs со свойствами клеток памяти может свидетельствовать о тесной взаимосвязи между данными группами лимфоцитов. Одним из вариантов такой связи может быть существование конверсии CD4+T-клеток памяти с образованием Treg-клеток, экспрессирующих транскрипционный фактор FoxP3. Treg-клетки памяти, обладающие свойствами и Т-клеток памяти, и Treg-клеток, могут представлять собой переходный этап дифференцировки. С другой стороны, Treg-клетки могут дифференцироваться независимо от Т-клеток памяти и накапливаться в течение жизни в виде Treg-клеток памяти, так как их супрессорная функция является столь же постоянно необходимой, как и готовность Т-клеток памяти развивать иммунный ответ. Возможно, часть Treg-клеток уже в тимусе проходит отбор и конститутивно экспрессирует антигенраспознающие рецепторы TCR, имеющие сродство с периферическими тканями. В дальнейшем эти коммитированные клетки могут расселяться в соответствующих тканях и становятся тканево-резидентными Treg-клетками, которые поддерживают региональную Т-клеточную память. Система Tregклеток может представлять собой зеркальное отражение структурной организации Т-клеток памяти, но с обратным знаком – знаком супрессии. Количественное соотношение Тreg-клеток и Т-клеток памяти (CD4+CD45RO+CD25hiFoxP3+/CD4+CD45RO+CD25-FoxP3-), возможно, является важным критерием для оценки функционального состояния иммунной системы. Поддержание баланса между этими функционально противоположными типами клеток должно обеспечивать устойчивое функционирование иммунной системы.

621-638 161
Аннотация
В настоящее время выявлено существование широкого спектра субпопуляций CD8+Тлимфоцитов, среди которых выделяют субпопуляции наивных клеток, клеток памяти, регуляторных. Кроме клеток с высоким уровнем цитотоксической активности, выявлены субпопуляции, обладающие выраженной регуляторной активностью. Каждая субпопуляция характеризуется совокупностью продуцируемых медиаторов, поверхностных и внутриклеточных маркеров, позволяющих предположить их различную функциональную активность в условиях in vivo. В настоящем обзоре описана классификация CD8+Т-лимфоцитов, учитывающая их морфофункциональные признаки. Традиционно считается, что CD8+Т-лимфоциты являются популяцией лимфоцитов, обладающей высокой цитотоксической активностью, что имеет чрезвычайное значение в условиях инвазии полуалогенных плодовых клеток в эндометрий при беременности. Доля CD8+Т-лимфоцитов в децидуальной оболочке довольно велика. В обзоре обсуждаются известные на сегодняшний день механизмы регуляции дифференцировки, избирательной миграции и функциональной активности CD8+Т-лимфоцитов в децидуальной оболочке и плаценте при беременности. Основными факторами цитотоксического действия CD8+Т-лимфоцитов являются перфорин и гранзим. К регуляторным медиаторам CD8+Тлимфоцитов относят цитокины IL-2, IL-5, IL-13, IFNγ, IL-17, TGF-β и IL-10. Для развития эффекторных свойств CD8+Т-лимфоцитов необходима антигенная стимуляция, которую обеспечивает взаимодействие CD8+Т-лимфоцитов с активированными CD4+Т-лимфоцитами или дендритными клетками, воздействие цитокинов. Условия специфической дифференцировки CD8+Т-лимфоцитов формируются за счет различного характера микроокружения. В децидуальной оболочке при беременности наблюдается концентрация CD8+Т-лимфоцитов, но их фенотип и функциональная активность отличаются от CD8+Т-лимфоцитов периферической крови. В настоящее время продолжается изучение механизмов избирательной миграции CD8+Т-лимфоцитов с регуляторными свойствами в децидуальную оболочку. Полагают, что это обеспечивается при участии хемокиновых рецепторов CXCR3 и CCR5, цитокинов IL-6 и IL-15. Характер активности CD8+Т-лимфоцитов и продукция ими цитокинов CSF2, IFNγ, IL-1β, IL-2, IL-6, IL-8,IL-10, IL-12 и TNFα в децидуальной оболочке имеют решающее значение для успешной инвазии клеток трофобласта. В свою очередь, клетки трофобла ста и плаценты способствуют формированию пула регуляторных CD8+Т-лимфоцитов в децидуальной оболочке, способны индуцировать апоптоз CD8+Т-лимфоцитов. Таким образом, взаимодействие CD8+Т-лимфоцитов матери и трофобласта в зоне маточно-плацентарного контакта является важным звеном в формировании иммунологической толлерантности в системе мать-плод.

ОРИГИНАЛЬНЫЕ СТАТЬИ

639-646 136
Аннотация

Цель исследования – установить роль медиаторов воспаления в патогенезе различных видов анемического синдрома у беременных с ожирением. Проведено определение концентрации IL-1, IL-6, TNFα, С-реактивного белка и гепсидина в сыворотке крови беременных с ожирением в зависимости от вида анемического синдрома: при железодефицитной анемии и анемии хронических заболеваний. Показано, что содержание IL-6 в крови у женщин с ожирением превышает значение данного показателя у здоровых беременных (p < 0,05) и не зависит от наличия анемического синдрома либо его вида. Установлено, что у беременных с ожирением повышена в крови концентрация С-реактивного белка относительно контрольных значений (p < 0,05). При этом содержание С-реактивного белка в сыворотке крови беременных с анемией хронических заболеваний достоверно выше (p < 0,05), чем у женщин с железодефицитной анемией. Отличительной особенностью группы беременных с ожирением и анемией хронических заболеваний явилась концентрация в крови гепсидина, значимо повышенная по сравнению с аналогичным показателем у здоровых беременных (p < 0,05), беременных с ожирением без анемии (p < 0,05), а также в 2 раза превышающая его содержание в сыворотке крови беременных с ожирением и железодефицитной анемией (p < 0,05). Только в группе беременных с ожирением и анемией хронических заболеваний была выявлена положительная корреляционная связь концентрации С-реактивного белка с уровнем в крови гепсидина (r = 0,733, p < 0,05) и IL-6 (r = 0,679, p < 0,05).

В статье обсуждаются механизмы развития анемии хронических заболеваний на фоне субклинического воспаления у беременных с метаболическими нарушениями. Дается заключение, что риском развития анемии хронических заболеваний у беременных является сочетание ожирения и гестационного сахарного диабета. Указывается на целесообразность проведения исследований по созданию алгоритма дифференциальной диагностики железодефицитной анемии и анемии хронических заболеваний для данной категории пациенток.

647-656 97
Аннотация

В экспериментах на животных показано, что антитела против химических генотоксикантов окружающей среды и эндогенных стероидных гормонов способны модулировать содержание этих соединений в сыворотке крови и их биологические эффекты. Однако роль таких антител в тератогенезе у человека остается малоизученной. В частности, неизвестно их влияние на концентрации женских половых гормонов в сыворотке крови беременных женщин с врожденными пороками развития плода. Цель исследования – выявить возможные ассоциации антител, специфичных к бензо[a]пирену, эстрадиолу и прогестерону (Bp, Es, Pg) с врожденными пороками развития плода и их влияние на содержание эстрадиола и прогестерона в сыворотке крови беременных женщин при физиологической беременности и при врожденных пороках развития плода. Обследованы 182 женщины с физиологической беременностью и 101 женщина с врожденными пороками развития плода. Исследование антител к Bp, Es, Pg выполняли с помощью неконкурентного иммуноферментного анализа с использованием коньюгатов с бычьим сывороточным альбумином в качестве антигенов. Концентрацию Es и Pg в сыворотке определяли с помощью коммерческих тест-систем для иммуноферментного анализа («Иммунотех», Москва). В обеих сравниваемых группах были обнаружены прямые корреляционные связи между уровнями антител классов A и G к Es и Pg с одной стороны и антител к Bp с другой стороны. Частота случаев с высокими и низкими уровнями антител к Bp, Es и Pg оказалась одинаковой у женщин обеих групп. В то же время высокие значения соотношений IgA-Bp/IgA-Es и IgA-Bp/IgA-Pg у женщин с врожденными пороками развития плода встречались значимо чаще, чем при физиологической беременности. При этом показатели отношения шансов (OR) составляли от 2,2 (p = 0,01) до 6,8 (p < 0,0001). Выявлены положительные корреляционные связи между соотношениями концентраций гормонов Pg/Es с одной стороны и соотношениями уровней IgA-Bp/IgA-Es и IgA-Bp/IgA-Pg у женщин с врожденными пороками развития плода (rS = 0,62, p < 0,0001 и rS = 0,77, p < 0,0001) с другой. Соотношение гормонов Pg/Es коррелировало с соотношениями уровней IgG-Bp/IgG-Es и IgG-Bp/IgG-Pg у женщин с врожденными пороками развития плода (rS = 0,46, p = 0,002 и rS = 0,5, p < 0,0009), но не с физиологической беременностью. Впервые выявлены ассоциации антител против экзогенных генотоксикантов и против стероидных гормонов с врожденными патологиями развития плода, а также их совместное влияние на содержание Es и Pg в сыворотке крови беременных женщин.

657-666 130
Аннотация
Данная работа посвящена исследованию различных субпопуляций FoxP3+ регуляторных Т-клеток (Treg) в фолликулярной жидкости (ФЖ) женщин, проходивших лечение методом ЭКО, и взаимосвязи Treg с параметрами фолликуло-/оогенеза, качеством эмбрионов и исходом ЭКО. В исследование были включены 53 женщины, участвующие в программе стимуляции суперовуляции в возрасте от 25 до 46 лет. Содержание Treg в ФЖ определяли методом проточной цитофлуориметрии с использованием моноклональных антител. Исследования ФЖ выявили наличие в ней FoxP3+Т-клеток как в популяции CD4+ (CD4+FoxP3+), так и CD4(CD4-FoxP3+) лимфоцитов. При этом FoxP3-клетки определяли в популяциях CD4+CD25+ и CD4+CD25лимфоцитов. Женщины с наименьшим числом фолликулов и ооцитов характеризовались наибольшим содержанием в ФЖ CD4+CD25-FoxP3+ и CD4FoxP3+ клеток соответственно. Ретроспективный анализ также выявил сопряженность между относительным содержанием Treg и качеством ооцитов и эмбрионов. Высокий индекс оплодотворения (ИО 0,75-1,0) ассоциировался с более высоким содержанием в ФЖ CD4-FoxP3+ клеток, а высокое качество бластоцист на 5 сутки в сравнении с оппозитной группой характеризовалось более высоким содержанием в ФЖ не только CD4-FoxP3+, но и CD4+FoxP3+ клеток. При этом наступление и прогрессирование беременности также регистрировалось у женщин с наибольшим числом CD4-FoxP3+ клеток. Полученные данные свидетельствуют о наличии различных субпопуляций FoxP3+Т-клеток в ФЖ и их возможном участии в регуляции ранних этапов репродуктивного процесса. Особую роль среди различных субпопуляций Treg, по-видимому, играют СD4-FoxP3+Т-клетки, количество которых прямо сопряжено с эффективностью оогенеза, бластуляции и наступлением клинической беременности.
667-680 114
Аннотация

 Химиотерапия является одним из основных методов лечения распространенных форм рака молочной железы. Установлено, что клиническая эффективность различных химиопрепаратов во многих случаях зависит не только от их прямого цитостатического и/или цитотоксического действия на опухолевые клетки, но и от их способности модулировать фенотип опухолевых клеток и воздействовать на противоопухолевый иммунный ответ. При этом решающее значение имеет исходное состояние иммунной системы организма и ее реакция на проводимое лечение. В ответе на опухоль участвуют клетки врожденного и адаптивного иммунитета (NK-, NKT-, Т-клетки). Эти популяции являются гетерогенными и содержат в своем составе как клетки с противоопухолевой активностью, так и регуляторные (супрессорные) клетки, подавляющие иммунный ответ и способствующие опухолевой прогрессии. Целью настоящей работы явилось определение связи исходного состояния клеточного иммунитета больных с местно-распространенным раком молочной железы с тройным негативным фенотипом и клиническим эффектом химиотерапии (цисплатин + доксорубицин/паклитаксел), а также изучение влияния проведенного лечения на субпопуляционный состав лимфоцитов периферической крови пациенток. Отмечался момент наступления прогрессирования заболевания, определялись общая выживаемость и выживаемость без прогрессирования. У 25 из 53 (47,2%) включенных в исследование пациенток в течение периода наблюдения (35,5 месяцев) заболевание прогрессировало. У 28 из 53 (52,8%) прогрессирования заболевания не наблюдалось. Иммунологическое обследование пациенток включало иммунофенотипирование лимфоцитов периферической крови и определение цитотоксической активности NK-клеток до и после химиотерапии. Определяли процентное содержание эффекторных и регуляторных популяций лимфоцитов. Полученные результаты показали, что до начала лечения отмечались различия в отклонениях процентного содержания клеток некоторых популяций лимфоцитов от контроля между группами без прогрессирования и с прогрессированием заболевания. Наиболее значительные различия касались NKT-клеток и лимфоцитов, экспрессирующих активационный маркер CD25. Снижение количества NKT-клеток и акти вированных CD25+ лимфоцитов до начала химиотерапии ассоциировалось с повышением вероятности прогрессирования заболевания. Cнижение процента NKT-клеток по отношению к контролю отмечалось у 56% больных в группе с прогрессированием заболевания (ПЗ) и только у 21,4% в группе без прогрессирования болезни (БПЗ). Отношение шансов (ОШ) = 4,6 (95% ДИ 1,4-15,4). Процент CD25+ лимфоцитов был снижен у 68,2% пациенток с ПЗ и у 28,6% БПЗ. ОШ = 5,4 (95% ДИ 1,6-18,1). У 26 из 53 пациенток до лечения исследовалась взаимосвязь общей выживаемости (ОВ) с процентом перфоринсодержащих NK-, NKTи T-клеток и плотностью экспрессии перфорина (MFI) в этих лимфоцитах. Обнаружена положительная статистически значимая корреляция ОВ с плотностью экспрессии перфорина в клетках всех трех изученных популяций. У эффективно леченных больных после химиотерапии наблюдалась нормализация измененных до лечения показателей и повышение количества Т-клеток.

681-690 137
Аннотация

В настоящее время в группу предраковых поражений протоков молочной железы, согласно Международному агентству по изучению рака, включена только протоковая карцинома in situ. Однако, исходя из данных литературы, помимо протоковой карциномы in situ, к предраковым изменениям можно отнести склерозирующий аденоз, внутрипротоковые пролиферативные поражения и радиальный рубец. Многообразие как доброкачественных, так и злокачественных процессов в молочной железе, особенности роста новообразований и возраст пациентов требуют новых подходов к изучению процесса канцерогенеза в молочной железе. Исходя из известной роли цитокинов в патогенезе злокачественных новообразований, целью исследования явилась оценка цитокинпродуцирующего ресурса иммунокомпетентных клеток крови при злокачественных, доброкачественных заболеваниях и предраковых изменениях молочной железы. Для оценки цитокинпродуцирующего ресурса иммунокомпетентных клеток крови пациентов изучали индекс влияния поликлональных активаторов на продукцию цитокинов иммунокомпетентными клетками крови пациентов с инвазивным протоковым раком, являющимся по гистологическому типу аденокарциномой (I группа), и пациентов с незлокачественными новообразованиями молочной железы (II группа). В дальнейшем пациенты с незлокачественными новообразованиями молочной железы была разделены на группу только с фиброаденомой и мастопатией (III группа) и на группу, в которую вошли пациенты с пред-раковыми заболеваниями – склерозирующим аденозом и межпротоковыми пролифератами (IV груп-па). С помощью твердофазного иммуноферментного анализа определяли концентрацию IL-2, IL-6, IL-8, IL-10, IL-17, IL-18, IL-1β, IL-1ra, TNFα, IFNγ, G-CSF, GM-CSF, VEGF и MCP-1. При сравнении I и II групп были получены более высокие индексы влияния поликлональных активаторов на продукцию G-CSF и GM-CSF у пациентов с инвазивным протоковым раком. Более высокие зна-чения при сравнении индексов влияния поликлональных активаторов на продукцию цитокинов пациентов I и III групп были получены у больных с инвазивным протоковым раком по продукции IL2, G-CSF и GMCSF, а у пациентов с фиброаденомой и мастопатией – по продукции IL-18 и TNFα. При сравнении пациентов I и IV групп были получены более высокие индексы влияния поликлональных активаторов только на продукцию IL-1ra, G-CSF и VEGF при инвазивном протоковом раке. При сравнении индексов влияния поликлональных активаторов на продукцию цитокинов III и IV групп были получены более высокие показатели у пациентов с доброкачественными изменениями последующим цитокинам: IL-8, IL-18, IL-1β, IL-1ra и TNFα. Более низкие индексы влияния поликлональных активаторов на продукцию ряда цитокинов пациентов с предраковыми изменения-ми по сравнению с пациентами со злокачественными и доброкачественными опухолями молочной железы не свидетельствуют о снижении функциональной активности иммунокомпетентных клеток крови, а обусловлены высоким уровнем спонтанной продукции цитокинов при склерозирующем аденозе и межпротоковых пролифератах.

691-698 123
Аннотация

Маточные лейомиомы являются распространенными доброкачественными опухолями, развивающимися из гладкомышечных тканей, зачастую приводящими к бесплодию и рецидивирующим абортам. Беременность и развитие миомы матки характеризуются необычайной скоростью роста миометрия, гиперпродукцией внеклеточного матрикса и повышением уровня экспрессии рецепторов для ряда ростовых факторов. Целью настоящего исследования явилось определение концентрации ряда основных ростовых факторов (IL-5, IL-7, IL-9, FGF-β, G-CSF, VEGF и PDGF) в сыворотке крови женщин с миомой матки. Концентрацию 27 цитокинов определяли с использованием набора фирмы Bio Rad (США) – Bio-Plex Pro™ Human Cytokine 27-plex Assay методом проточной флуориметрии на двухлучевом лазерном анализаторе Bio-Plex 200. Под наблюдением находились 36 пациенток с верифицированным диагнозом миомы тела матки, которым в дальнейшем проводилось оперативное лечение в объеме лапароскопической миомэктомии. Результаты проведенного исследования показали наличие тенденции к снижению в сыворотке крови женщин с миомой матки таких ростовых факторов, оказывающих стимулирующее воздействие на процессы гемопоэза и ангиогене-за, как IL-9 и FGF. Концентрация IL-5, IL-7 и G-CSF оказалась достоверно снижена относительно характерного для содержания в сыворотке крови здоровых женщин европеоидного происхождения. Наиболее значимо оказалось снижение концентраций таких проангиогенных факторов, как VEGF и PDGF. Их концентрация в сыворотке крови женщин с лейомиомой оказалась сниженной, соответственно, в 3 и в 6 раз. Снижение концентрации G-CSF оказалось не только значительно выраженным относительно здоровых женщин, но тесно скоррелировано с изменениями концентраций таких факторов, как IL5, IL-7 и IL-9, коэффициент корреляции которых составляет, соответственно, 0,723, 0,637 и 0,504. Можно заключить, что несмотря на то, что, по литературным данным, при развитии миомы матки отмечается значительное возрастание содержания ростовых факторов, участвующих в процессах гемопоэза и ангиогенеза в тканях миометрия и растущей лейомиомы, оно сопровождается, согласно полученным нами данным, снижением в той или иной степени концентраций этих регуляторных белков в сыворотке крови.

699-710 130
Аннотация

Миелопероксидаза является ключевым фактором, отвечающим за развитие окислительного/галогенирующего стресса при воспалении. Ранее в плазме пациентов с воспалительными заболеваниями различной этиологии, в том числе при атеросклерозе, нами были обнаружены комплексы, образованные миелопероксидазой и ее физиологическим ингибитором, церулоплазмином. Анализ регуляции активности миелопероксидазы церулоплазмином показал, что при воспалении могут возникать условия, при которых церулоплазмин будет модифицирован хлорноватистой кислотой, HOCl – специфическим продуктом катализа миелопероксидазы. Целью данного исследования был анализ связи между активностью миелопероксидазы и концентрацией церулоплазмина, модифици-рованного HOCl (хлорированного церулоплазмина), в образцах плазмы крови пациентов с сердечно-сосудистыми заболеваниями. Были получены специфические антитела против миелопероксидазы, церулоплазмина, в том числе модифицированного HOCl, отработаны условия твердофазного иммуноферментного анализа. С помощью комбинации сорбции антигенов на твердой фазе и последующего выявления их собственной активности либо пероксидазной активности меченых антител были разработаны высокочувствительные методы определения миелопероксидазы (концентрация, пероксидазная и галогенирующая активность), концентрации церулоплазмина, в том числе модифицированного HOCl. Обнаружена положительная корреляция между концентрацией миелопероксидазы, ее активностью и концентрацией церулоплазмина, модифицированного HOCl. Выводы: впервые в плазме крови пациентов с сердечно-сосудистыми заболеваниями обнаружен церулоплазмин, модифицированный HOCl. Получена достоверная положительная корреляционная зависимость между концентрацией хлорированного церулоплазмина и активностью миелопероксидазы. Предполагается, что физиологический ингибитор миелопероксидазы, церулоплазмин, претендует на роль мишени для продукта ее катализа – HOCl.

711-720 97
Аннотация

Недостаточность локального иммунитета может играть немаловажную роль в патогенезе сепсиса, а значит, и септического (острого) инфекционного эндокардита (ИЭ). В работе исследовали содержание секреторного иммуноглобулина А (sIgA) в сыворотке крови пациентов обоего пола с сепсисом (26 женщин и 32 мужчины), острым (11 женщин и 23 мужчины) и подострым (7 женщин и 13 мужчин) ИЭ в зависимости от локализации очага инфицирования (ангиогенный или неангиогенный), исхода заболевания и носительства генотипических вариантов локуса гена глутатион-Sтрансферазы Пи1 (GSTP1Ile105Val). В качестве группы контроля обследовали лиц, не имеющих признаков очаговой и системной инфекции и не страдающих артериальной гипертензией и ишемической болезнью сердца (25 женщин и 24 мужчины). В работе применяли иммуноферментный анализ и аллель-специфическую полимеразную цепную реакцию. Найдено, что при большой индивидуальной вариабельности концентрации sIgA в сыворотке крови при сепсисе и ИЭ у большинства больных наблюдается значительное (в среднем в 4 раза) ее повышение в сравнении с контролем, как у мужчин, так и у женщин, особенно выраженное при остром течении ИЭ (в среднем в 5 раз в сравнении с контролем). Подострый ИЭ характеризуется меньшим количеством sIgA в циркуляции, чем острый ИЭ и сепсис, что можно использовать при ранней дифференциальной диагностике данных нозологий. Гендерных различий в содержании sIgA не обнаружено. При сепсисе с неангиогенным источником инфекции уровень sIgA был выше, чем при ангиогенном инфицировании. Не обнаружено его связи с выживаемостью (летальностью), что исключает тестируемый показатель из числа прогностических маркеров сепсиса и ИЭ. Носительство гетерозиготного генотипа GSTP1Ile105Val усиливает риск развития сепсиса и ИЭ независимо от варианта его течения, а гомозиготный генотип GSTP1Ile105Ile предрасполагает к более высокому содержанию иммуноглобулина в циркуляции, чем генотип GSTP1Val105Val. Таким образом, широкий диапазон индивидуальной вариабельности уровня sIgA в циркуляции при сепсисе и инфекционном эндокардите может быть обусловлен локализацией очага инфицирования и генетическими факторами.

721-730 109
Аннотация

В работе проведено исследование популяций лимфоцитов периферической крови у детей с воспалительными заболеваниями кишечника, которым впервые была назначена терапия блокатором TNFα (инфликсимабом), с целью определения прогностической информативности иммунологических показателей в оценке эффективности лечения. Проведено комплексное обследование 70 детей с ВЗК в возрасте от 12 до 18 лет в динамике заболевания на фоне проводимого лечения (49 детей с БК, 21 ребенок с ЯК). Группу сравнения составили 50 практически здоровых детей аналогичного возраста, прошедших комплексное профилактическое обследование. В зависимости от терапевтического ответа к году применения биологической терапии, пациенты были разделены на две группы – со стойким положительным эффектом препарата и с нестабильным эффектом терапии. Определяли содержание основных и малых популяций лимфоцитов периферической крови до первого введения инфликсимаба. Иммунофенотипирование проводили методом многоцветной проточной цитофлуориметрии (FC 500) с использованием маркеров CD45, CD3, CD4, CD8, CD19, CD16, CD56, HLA-DR, CD5, CD161, CD127, CD25, CD294.
Получено: содержание В-лимфоцитов было достоверно снижено у детей с нестабильным эффектом терапии, у детей со стойким положительным эффектом уровень В-лимфоцитов не отличался от группы сравнения. Анализ состава В-лимфоцитов показал дисбаланс в соотношении В1и В2-клеток с уменьшением содержания В1-клеток у пациентов с ВЗК относительно группы сравнения. При этом у пациентов с нестабильным эффектом выявлено значимое снижение популяции В2-клеток относительно группы сравнения и относительно группы со стойким эффектом. Количество NK-клеток у пациентов с ВЗК было снижено относительно группы сравнения. Оценка содержания субпопуляций Т-лимфоцитов выявила ряд особенностей у пациентов с минимальным терапевтическим эффектом – увеличение уровня активированных Т-хелперов (CD4+CD25+CD127high) и Th17-лимфоцитов CD3+CD4+CD161+) относительно детей со стойким эффектом терапии и группы сравнения. Кроме того, у детей с минимальным эффектом терапии уровень Treg в составе Т-хелперов оказался достоверно выше, чем в группе сравнения. Проведенный ROC-анализ выявил наиболее информативные показатели для групп с минимальным и стойким эффектом терапии и показал хорошее качество разделительной модели для относительного количества Th17-лимфоцитов, активированных Т-хелперов и В-лимфоцитов. Количество Тh17-лимфоцитов (% от CD3+CD4+лимфоцитов) с высокой долей вероятности позволяет прогнозировать эффект терапии блокатором TNFα. Проведенные исследования позволяют рекомендовать включение оценки состояния клеточного иммунитета в мониторинг состояния пациентов с ВЗК.

КРАТКИЕ СООБЩЕНИЯ

731-738 90
Аннотация
Патогенетические механизмы лейомиомы матки, аденомиоза и сочетанной патологии сложны и не до конца изучены, дифференциальная диагностика лейомиосаркомы матки затрудни тельна. Цель исследования – cравнительный анализ сывороточного содержания α2-МГ, АБГ, некото рых цитокинов, половых стероидов, а также показателей экспрессии генов стероидных рецепторов при различных вариантах пролиферативных заболеваний матки для уточнения их патогенетической роли, диагностической и прогностической значимости. При аденомиозе экспрессия генов эстрогеновых рецепторов в узлах в 1,5-2 раза выше, чем при лейомиоме, сочетанная патология демонстрирует промежуточные значения, при лейомиосаркоме экспрессия генов ER и PGR минимальна. При клеточной лейомиоме экспрессия генов рецепторов ER в окружающем миометрии в 2-3 раза выше, чем при простой. При этом концентрация эстрогена и прогестерона в крови сопоставима между группами и с нормой. У всех больных обнаруживается де фицит иммуномодуляторного α2-МГ (12-13% при лейомиоме, 20% при аденомиозе и 23% при злока чественной патологии), при сочетанной патологии и лейомиосаркоме увеличена концентрация им муносупрессивного АБГ. Параллельно растет содержание IL-6 и TNFα, уровень фактора роста VEGF превышает норму в 4-4,5 раза при лейомиоме, в 5,5 при сочетанной патологии, в 6,5 при аденомиозе и в 10 при лейомиосаркоме. Полученные результаты подтверждают, что иммуномодуляторные белки, цитокины и усваиваемые клетками гормоны оказывают взаимозависимое влияние друг на друга при изученных заболеваниях, а их достоверные изменения могут использоваться в диагностике и прогнозе.
739-746 98
Аннотация

В настоящей работе была исследована частота генотипов и аллелей генов хемокинов (CXCL12 rs1801157, CCL2 rs1024611), рецепторов хемокинов (CCR5 del32, CX3CR1 rs3732378), гена белков острой фазы воспаления SAA rs1136743 и гена CD14 rs2569190 у женщин-татарок из Республики Башкортостан, страдающих ожирением и избыточной массой тела.
Группу пациенток составили неродственные между собой женщины с ожирением ИМТ ≥ 30 кг/м2 (n = 225), женщины с избыточной массой тела ИМТ 25,0-29,9 кг/м2 (n = 184) и женщины контрольной группы (n = 327) ИМТ < 25,0 кг/м2. Генотипирование выполнено методом ПЦР-ПДРФ анализа. Группы пациенток и контроля отличались по таким показателям, как масса тела (р = 0,00001), уровень индекса массы тела (р = 0,001) и уровень глюкозы натощак (р = 0,0001).
При проведении исследования была выявлена ассоциация с ожирением генотипов AG-AA (p = 0,007) и аллеля A (р = 0,003) полиморфного локуса rs3732378 гена CXCR1 и генотипа ТТ (p = 0,027) и аллели Т (р = 0,021) полиморфного локуса rs1136743 гена SAA. Показано, что генотип AA полиморфного локуса rs3732378 гена CX3CR1 ассоциирован с повышенной массой тела (р = 0,002) и повышенным уровнем ИМТ (р = 0,018); генотип GG полиморфного локуса rs1024611 гена CCL2 ассоциирован с повышенным уровнем глюкозы натощак (р = 0,001).
На основе клинико-генетических данных и с использованием логистической регрессии выявлены статистически значимые различия, позволяющие прогнозировать развитие ожирения у женщин-татарок.

747-752 93
Аннотация

Цитолитические молекулы системы врожденного иммунитета гранулизин и кателицидин являются важными защитными факторами при инфицировании микобактериями туберкулеза. Нами получены данные о высоких показателях гранулизина и кателицидина у группы инфицированных МБТ детей и подростков. У больных туберкулезом органов дыхания показано низкое содержание сы вороточного кателицидина при деструктивных формах, а гранулизина – при «малых» формах тубер кулеза до начала специфической химиотерапии. Проведенная химиотерапия не оказывала влияния на содержание гранулизина и кателицидина в сыворотке у больных с деструктивным туберкулезом, тогда как у больных «малыми» формами (ТВГЛУ/очаговый туберкулез) выявлено достоверное увели чение содержания гранулизина через 6 месяцев лечения и кателицидина – через 3 месяца химиотера пии с последующим возвращением к исходному уровню.

753-762 265
Аннотация

Лабораторная диагностика антифосфолипидного синдрома (АФС) состоит в выявлении антифосфолипидных антител (АФА) методом иммуноферментного анализа (ИФА), а именно в детекции антикардиолипиновых (аКл) антител и антител к бета-2-гликопротеину (aβ2GP1). Использование классических ИФА тест-систем затруднено их недостаточной стандартизацией. Новым подходом к детекции антифосфолипидных антител является использование мультиплексного лайн-блоттинга (ЛБ), преимуществом которого является сорбция антигенов на гидрофобной PVDF-мембране и детекция спектра АФА.
Целью данного исследования является анализ диагностической ценности нового ЛБ в постановке серологического диагноза АФС.
Нами была собрана коллекция образцов сывороток 45 пациентов с некардиоэмболическими ишемическими инсультами, 19 пациентов с рецидивирующими тромбозами глубоких вен нижних конечностей и 44 пациента с привычным невынашиванием беременности, а также 50 клинически здоровых доноров. В данных сыворотках были измерены аКл IgG, аКл IgM, aβ2GP1 методом ИФА с помощью тест-систем фирм Euroimmun (ПР1) и Orgentec Diagnostica (ПР2) и аКл IgG, аКл IgM, aβ2GP1, а также некритериальные АФА – методом иммуноблоттинга на тест-системе фирмы Medipan (ПР3).
При использовании ИФА тест-систем ПР1 аКл и aβ2GP1 детектировались у 30,5 % пациентов. ИФА методом на тест-системах ПР2 АФА были обнаружены у 38% пациентов. Методом ЛБ аКл и aβ2GP1 были выявлены у 30% пациентов. Встречаемость средних и высоких титров АФА, измеренных методом ИФА на тест-системах ПР1 и ПР2, составила 12 и 11% соответственно, а методом ЛБ – 16,6%. При анализе спектра АФА методом ЛБ чаще всего обнаруживались aβ2GP1, аФс, аКл, аАн V, аФк.
Метод мультиплексного лайн-блоттинга ЛБ показывает более высокую чувствительность при детекции средних и высоких титров АФА, а также позволяет выявить пациентов с множественной АФА позитивностью.

ИММУНОЛОГИЧЕСКИЕ МЕТОДЫ

763-774 144
Аннотация

Цитокины являются важнейшими факторами патогенеза инфекционных, аллергических, аутоиммунных и лимфопролиферативных заболеваний и иммунопатологических процессов и служат важнейшими мишенями иммунодиагностики широкого круга заболеваний человека. Для решения диагностических задач обычно проводится определение уровней цитокинов в различных биологических жидкостях с использованием иммунохимических методов.
Проведенный нами анализ отечественной научной литературы иммунологического профиля на примере двух российских журналов «Медицинская иммунология» и «Инфекция и иммунитет» показал, что наибольшее распространение при проведении клинико-иммунологических исследований с определением содержания цитокинов в сыворотке/плазме крови получил твердофазный ИФА и мультиплексный иммуноанализ в формате хМАРи СВА-технологий.
Значения нормы некоторых цитокинов в плазме/сыворотке крови практически здоровых лиц, полученные с использованием этих технологий и реагентов различных фирм-производителей, варьируются в достаточно широких пределах. Границы нормы, полученные с использованием CBAтехнологии, значительно выше границ нормы, полученных методом ИФА и xMAP-технологии. В большинстве исследований присутствовала небольшая контрольная группа, насчитывающая обычно 15-20 человек. В большинстве работ материалом для исследований служила сыворотка крови и лишь в единичных – ЭДТА-плазма крови.
Сделано заключение, что результаты определения цитокинов в сыворотке/плазмы периферической крови практически здоровых лиц колеблются в широком диапазоне и зависят от исследуемого материала, применяемой технологии, используемой тест-системы и особенностей анализируемой выборки: число обследованных, их возраст, пол, географический фактор и т.д. Все вышеизложен ное обосновывает необходимость проведения широкомасштабных мультицентровых клинических исследований по стандартизации оценки содержания цитокинов в периферической крови человека и определения их нормативных значений.

ПРАВИЛА ДЛЯ АВТОРОВ

УКАЗАТЕЛИ



Creative Commons License
Контент доступен под лицензией Creative Commons Attribution 4.0 License.


ISSN 1563-0625 (Print)
ISSN 2313-741X (Online)