Preview

Медицинская иммунология

Расширенный поиск

ПОЛУЧЕНИЕ И СВОЙСТВА АНТИИДИОТИПИЧЕСКИХ МОНОКЛОНАЛЬНЫХ АНТИТЕЛ МЫШИ, РАСПОЗНАЮЩИХ ПЕРВИЧНЫЕ ПОЛИКЛОНАЛЬНЫЕ АНТИТЕЛА КРОЛИКА К ПРОИЗВОДНЫМ МОРФИНА

https://doi.org/10.15789/1563-0625-2019-5-987-996

Полный текст:

Аннотация

Антиидиотипические антитела (Ab2), согласно сетевой теории Ерне, представляют собой иммуноглобулины второго поколения, которые вырабатываются на идиотип антитела к определенному антигену. Несмотря на большое количество работ, посвященных исследованию свойств этих белков, их роль в регуляции иммунной системы организма до конца не известна. Она может заключаться в поддержании или блокировании минимального иммунного ответа на антиген. Исследование Ab2 имеет большую практическую и научную значимость. Особые свойства Ab2, а именно способность частично воспроизводить структуру первичного антигена и при иммунизации индуцировать появление третичных антител, которые, подобно антителам первого поколения, связываются с антигеном, нашли применение в создании на их основе вакцин, в частности для лечения опухолей. В свете наличия ряда ограничений на проведение исследований, связанных с психоактивными веществами, перспективной представляется также разработка на основе Ab2 вакцин против наркотической зависимости. В литературе описаны антиидиотипические антитела, полученные с этой целью, обладающие кокаин-подобной структурой. В данной работе были получены мышиные моноклональные антиидиотипические антитела (mAb2), имитирующие структуру различных производных морфина. В качестве первичных антител для иммунизации были использованы выделенные методом аффинной хроматографии кроличьи поликлональные антитела к 6-гемисукцинильному производному морфина, конъюгированному с бычьим сывороточным альбумином. В результате слияния лимфоцитов иммунизированных мышей с клетками миеломы мыши линии Sp2/0 по методике Мильштейна–Кёлера были получены четыре гибридомных клона. После наработки в животных продуцируемые клетками гибридом mAb2 были аффинно очищены. Нами исследованы физико-химическике и антигенные свойства выделенных антител. Показано, что полученные mAb2 отличаются по иммунологической специфичности, в различной степени конкурируя с производными морфина за связывание с антителами первого поколения. Проверена возможность использования полученных mAb2 в качестве аналогов антигенов при постановке твердофазного иммуноферментного анализа с целью определения титра первичных антител к морфину в сыворотках крови лабораторных животных, иммунизированных производными морфина. На основе полученных антиидиотипических антител предполагается разработка тест-систем по определению антител, специфичных к опиатам, в сыворотке крови людей при проведении специфической вакцинации с лечебной или профилактической целью без применения в анализе наркотических препаратов как антигенов, иммобилизованных на твердой фазе.

Об авторах

А. В. Трофимов
ФГУП «Государственный научно-исследовательский институт особо чистых биопрепаратов» ФМБА России
Россия

Трофимов Александр Викторович, руководитель группы лаборатории биохимии белка 

197110, Россия, Санкт-Петербург, ул. Пудожская, 7.

Тел.: 8 (904) 632-07-27.



А. М. Ищенко
ФГУП «Государственный научно-исследовательский институт особо чистых биопрепаратов» ФМБА России
Россия

к.б.н., заведующий лабораторией биохимии белка

Санкт-Петербург


А. Я. Рак
ФГУП «Государственный научно-исследовательский институт особо чистых биопрепаратов» ФМБА России; ФГБОУ ВО «Санкт-Петербургский государственный университет»
Россия

младший научный сотрудник лаборатории биохимии белка; аспирант

Санкт-Петербург


В. Е. Сергеева
ФГУП «Государственный научно-исследовательский институт особо чистых биопрепаратов» ФМБА России
Россия

научный сотрудник лаборатории биохимии белка

Санкт-Петербург


А. С. Симбирцев
ФГУП «Государственный научно-исследовательский институт особо чистых биопрепаратов» ФМБА России
Россия

д.м.н., профессор, член-корр. РАН, научный руководитель

Санкт-Петербург 



Н. Б. Гамалея
ФГБУ «Национальный медицинский исследовательский центр психиатрии и наркологии имени В.П. Сербского» Министерства здравоохранения РФ
Россия

д.м.н., профессор, заведующая лабораторией иммунохимии

Москва 



А. Г. Берзина
ФГБУ «Национальный медицинский исследовательский центр психиатрии и наркологии имени В.П. Сербского» Министерства здравоохранения РФ
Россия

к.м.н., старший научный сотрудник лаборатории иммунохимии

Москва 



Н. В. Станкова
ФГБУН «Научный центр биомедицинских технологий» ФМБА России
Россия

к.б.н., заведующая лабораторией спортивной медицины и экстремальных состояний

Санкт-Петербург



Л. И. Ульянова
ФГБУ «Национальный медицинский исследовательский центр психиатрии и наркологии имени В.П. Сербского» Министерства здравоохранения РФ
Россия

д.б.н., ведущий научный сотрудник лаборатории иммунохимии

Москва 



Т. А. Климова
ФГБУ «Национальный медицинский исследовательский центр психиатрии и наркологии имени В.П. Сербского» Министерства здравоохранения РФ
Россия

к.б.н., специалист лаборатории иммунохимии

Москва 



Список литературы

1. Берзина А.Г., Гамалея Н.Б., Сергеева В.Е., Трофимов А.В., Кротов Г.И., Ульянова Л.И. Получение поликлональных и моноклональных антител к двум производным морфина // Вопросы наркологии, 2016. № 11-12. С. 39-54.

2. Берзина А.Г., Ульянова Л.И., Гамалея Н.Б., Станкова Н.В., Капанадзе Г.Д. Изучение иммунного ответа у мини-свиней светлогорской популяции к двум производным морфина // Биомедицина, 2018. № 2. С. 15-21.

3. Гамалея Н.Б., Берзина А.Г., Шестаков К.А., Капанадзе Г.Д., Ревякин А.О., Фокин Ю.В. Иммуноген для лечения и профилактики зависимости от опиатов. Патент на изобретение RU № 2548802, 2015.

4. Гамалея Н.Б., Берзина А.Г., Ульянова Л.И. Методологические основы создания вакцины для иммунотерапии зависимости от опиатов // Вопросы наркологии, 2017. № 4-5. С. 32-56.

5. Кулаев Д.В., Насибов С.М., Маркин С.С., Бобков Ю.Г., Семенов М.П. Хроматографический способ выделения альфа-фетопротеина // Патент на изобретение RU № 2094078, 1997.

6. Barucca A., Capitani M., Cesca M., Tomassoni D., Kazmi U., Concetti F., Vincenzetti L., Concetti A., Venanzi F.M. Recombinant DNA technology for melanoma immunotherapy: anti-Id DNA vaccines targeting high molecular weight melanoma-associated antigen. Mol. Biotechnol., 2014, Vol. 56, no. 11, pp. 1032-1039.

7. Basak S., Eck S., Gutzmer R., Smith A.J., Birebent B., Purev E., Staib L., Somasundaram R., Zaloudik J., Li W., Jacob L., Mitchell E., Speicher D., Herlyn D. Colorectal cancer vaccines: antiidiotypic antibody, recombinant protein, and viral vector. Ann. N.Y. Acad. Sci., 2000, Vol. 910, Iss. 1, pp. 237-252.

8. Bellati F., Napoletano C., Ruscito I., Antonilli M., Gasparri M.L., Zizzari I.G., Rahimi H., Rughetti A., Benedetti Panici P., Nuti M. Past, present and future strategies of immunotherapy in gunecological malignancies. Curr. Mol. Med., 2013, Vol. 13, no. 4, pp. 648-669.

9. Jerne N.K., Cocteau J. Idiotypic networks and other preconceived ideas. Immunol. Rev., 1984, Vol. 79, no. 1, pp. 5-24.

10. Hermanson G.T. Bioconjugate techniques. Academic Press, 2008, 1323 p.

11. Schabacker D.S., Kirschbaum K.S., Serge M. Exploring the feasibility of an anti-idiotypic cocaine vaccine: analysis of the specificity of anticocaine antibodies (Ab1) capable of inducing Ab2β anti-idiotypic antibodies. Immunology, 2000, Vol. 100, no. 1, pp. 48-56.

12. Pandey S. Hybridoma technology for production of monoclonal antibodies. Int. J. Pharm. Sci. Res., 2010, Vol. 1, no. 1, pp. 88-94.

13. Walker J.M. Gradient SDS polyacrylamide gel electrophoresis. Methods Mol. Biol., 1984, Vol. 1, pp. 57-61.


Дополнительные файлы

1. Метаданные
Тема
Тип Данные
Скачать (14KB)    
Метаданные
2. Титульный лист
Тема
Тип Данные
Скачать (14KB)    
Метаданные
3. Резюме
Тема
Тип Исследовательские инструменты
Скачать (27KB)    
Метаданные
4. Рисунок_1
Тема
Тип Данные
Скачать (114KB)    
Метаданные
5. Рисунок_2
Тема
Тип Данные
Скачать (28KB)    
Метаданные
6. Таблица_1
Тема
Тип Данные
Скачать (23KB)    
Метаданные
7. Таблица_2
Тема
Тип Данные
Скачать (11KB)    
Метаданные
8. Таблица_3
Тема
Тип Данные
Скачать (20KB)    
Метаданные
9. Таблица_4
Тема
Тип Данные
Скачать (23KB)    
Метаданные
10. Таблица_5
Тема
Тип Данные
Скачать (21KB)    
Метаданные
11. Подписи авторов
Тема
Тип Прочее
Скачать (1MB)    
Метаданные
12. Литература
Тема
Тип Прочее
Скачать (19KB)    
Метаданные
13. Названия рисунков
Тема
Тип Прочее
Скачать (18KB)    
Метаданные
14. исправленное резюме
Тема
Тип Прочее
Скачать (28KB)    
Метаданные

Для цитирования:


Трофимов А.В., Ищенко А.М., Рак А.Я., Сергеева В.Е., Симбирцев А.С., Гамалея Н.Б., Берзина А.Г., Станкова Н.В., Ульянова Л.И., Климова Т.А. ПОЛУЧЕНИЕ И СВОЙСТВА АНТИИДИОТИПИЧЕСКИХ МОНОКЛОНАЛЬНЫХ АНТИТЕЛ МЫШИ, РАСПОЗНАЮЩИХ ПЕРВИЧНЫЕ ПОЛИКЛОНАЛЬНЫЕ АНТИТЕЛА КРОЛИКА К ПРОИЗВОДНЫМ МОРФИНА. Медицинская иммунология. 2019;21(5):987-996. https://doi.org/10.15789/1563-0625-2019-5-987-996

For citation:


Trofimov A.V., Ischenko A.M., Rak A.Y., Sergeeva V.E., Simbirtsev A.S., Gamaleya N.B., Berzina A.G., Stankova N.V., Ulyanova L.I., Klimova T.A. PREPARATION AND PROPERTIES OF MURINE ANTI-IDIOTYPIC MONOCLONAL ANTIBODIES RECOGNIZING PRIMARY RABBIT POLYCLONAL ANTIBODIES AGAINST MORPHINE DERIVATIVES. Medical Immunology (Russia). 2019;21(5):987-996. (In Russ.) https://doi.org/10.15789/1563-0625-2019-5-987-996

Просмотров: 107


Creative Commons License
Контент доступен под лицензией Creative Commons Attribution 4.0 License.


ISSN 1563-0625 (Print)
ISSN 2313-741X (Online)