Preview

Медицинская иммунология

Расширенный поиск
Том 23, № 3 (2021)
Скачать выпуск PDF

ОБЗОРЫ 

421-438 114
Аннотация

Орексины А и B — нейропептиды, синтезирующиеся небольшой популяцией нейронов латерального гипоталамуса. Их физиологическая функция заключается, главным образом, в регуляции цикла «сон-бодрствование», пищевого поведения, энергетического гомеостаза. Аксоны орек-син-содержащих нейронов проецируются во многие структуры головного и спинного мозга, что обеспечивает разнообразие их физиологических эффектов. Кроме того, компоненты орексинергической системы идентифицированы в различных периферических органах и тканях. Эффекты орексинов реализуются двумя рецепторами (OX1R и OX2R), связанными с G-белками (GPCRs). Классический путь передачи сигнала в нейрональных клетках через орексиновые рецепторы включает в себя увеличение концентрации внутриклеточного кальция в результате открытия мембранных каналов типа TRPC и каналов эндоплазматического ретикулума (ЭПР) типа IP3. Помимо этого, классического сигналинга орексиновых рецепторов, существует альтернативный путь, передача сигналов по которому приводит к апоптозу опухолевых клеток. Этот путь, вероятно, обусловлен структурной особенностью орексиновых рецепторов по сравнению с другими GPCRs — наличием иммунорецепторного мотива ингибирования на основе тирозина (ITIM). Такие мотивы не свойственны GPCRs, но являются отличительным признаком иммуноингибирующих рецепторов на лимфоидных и миелоидных клетках. ITIM рекрутирует либо белковые тирозинфосфатазы SHP1 и SHP2, либо инозитолфосфа-тазы SHIP1 и SHIP2 для опосредования негативной передачи сигналов. Дальнейший механизм так называемого орексин-индуцируемого апоптоза, по-видимому, включает в себя фосфорилирование p38/MAPK и высвобождение цитохрома с из митохондрий, с последующей активацией каспаз 3 и 7 и гибелью клеток. Следует подчеркнуть, что этот альтернативный путь представлен только в опухолевых клетках определенных типов. В настоящем обзоре обобщены имеющиеся данные об орексин-индуцированном апоптозе опухолевых клеток кишечника, поджелудочной железы, желудка, предстательной железы, эндометрия, надпочечников и глии, а также рассмотрены возможные механизмы его реализации.

439-454 94
Аннотация

В обзоре анализируются данные литературы, посвященные характеристике представителя суперсемейства ядерных гормональных рецепторов PPARα — рецептору, активируемому перок-сисомным пролифератором α. Показано, что PPARa экспрессируется в различных клетках организма, включая дендритные клетки, макрофаги, В- и Т-лимфоциты. Представлены данные о структуре естественных и синтетических лигандов PPARα, охарактеризованы молекулярные и клеточные механизмы контроля PPARα за липидным и углеводным обменом клеток. Модуляция активности PPARα может изменять множественные биологические эффекты глюкокортикостероидов и инсулинорезистентность. Приведен анализ результатов нескольких рандомизированных исследований, метаанализов, посвященных оценке эффективности и безопасности применения агониста PPARα фенофибрата у больных сахарным диабетом 2 с высоким риском микрососудистых и сердечно-сосудистых осложнений. Показана хорошая переносимость монотерапии фибратами, в комбинации со статинами, эзе-тимибом, снижение частоты сердечно-сосудистых осложнений и общей смертности. Представлены данные, свидетельствующие о том, что метаболизм глюкозы и липидов играет важную роль в судьбе клеток врожденного и адаптивного иммунитета. Показано, что гранулоциты, дендритные клетки и макрофаги Ml-типа при активации зависят от метаболизма глюкозы, в то время как макрофаги M2-типа зависят от FAO. В отличие от лимфоцитов, активированные миелоидные клетки пролиферируют слабо, характеризуются повышенным гликолитическим метаболизмом, который необходим для приобретения их эффекторных функций. Подчеркивается, что модуляция метаболизма клеток иммунной системы, путем воздействия на PPARα, открывает новые возможности управления интенсивностью и продолжительностью воспаления и иммунного ответа при хронических заболеваниях. Представлен анализ работ, проведенных на моделях хронических заболеваний животных, у больных ревматоидным артритом, остеоартритом. В большинстве исследований показана клиническая эффективность агонистов PPARα и их многоцелевые эффекты: противовоспалительные, иммуномодулирующие, эффект снижения содержания липидов, в первую очередь триглицеридов, и повышение холестерина липопротеинов высокой плотности. Приведенные данные литературы позволяют считать, что применение агонистов PPARα при полиморбидных заболеваниях будет эффективно в отношении основного и сопутствующих болезней, что позволит снизить частоту полипрагмазии, уменьшить затраты на лечение, поможет предупредить присоединение новых заболеваний у больного.

455-468 158
Аннотация

Эмбрион, являясь наполовину «чужеродным» в антигенном отношении организмом, должен вызывать ответную реакцию иммунной системы матери. Однако в процессе эволюции сформировались механизмы, обеспечивающие успешное развитие беременности. В частности, одним из факторов, обеспечивающим иммунную толерантность при беременности, являются белки, ассоциированные с беременностью. Трофобластический β 1-гликопротеин (PSG, PSG1; SP1; PS G1) является доминантным фетоплацентарным белком, который продуцируется клетками цито- и синцитиотро-фобласта и обладает иммуносупрессивными свойствами. Наш авторский коллектив владеет собственной запатентованной методикой получения нативного препарата PSG человека из сыворотки крови беременных женщин, который представляет собой смесь PSG1, PSG3, PSG7, PSG9, а также их изоформ и прекурсоров. В данном обзоре представлен анализ собственных результатов за период с 2015 по 2020 г. Изучали иммунорегуляторный эффект полученного препарата PSG в концентрациях, сопоставимыми с беременностью (1, 10, 100 мкг/мл), объектами исследования служили клетки периферической крови, полученные от небеременных женщин. Было установлено, что PSG достоверно увеличивал уровень адаптивных Treg in vitro, а также экспрессию этими клетками CTLA-4 и GITR и продукцию IL-10. Показано, что в отношении активности индоламин-2,3-диоксигеназы (IDO) на уровне периферических моноцитов реализуется стимулирующий эффект PSG. В отношении Th17-клеток было продемонстрировано, что PSG способен подавлять дифференцировку и пролиферацию этих клеток, а также продукцию ими ключевых провоспалительных цитокинов (IL-8, IL-10, IL-17, IFNγ, MCP-1, TNF α). На уровне Т-клеток иммунной памяти PSG подавлял экспрессию CD25 и продукцию IL-2 этими клетками, одновременно снижая экспрессию генов Gfi1, hnRNPLL, препятствуя таким образом формированию «зрелой» изоформы СD45R0. Было показано, что на уровне Т-хелперов PSG препятствовал конверсии наивных Т-клеток в терминально-дифференцированную эффекторную субпопуляцию Т-хелперов. При анализе влияния PSG на цитокиновый профиль иммунокомпетентных клеток было установлено, что белок преимущественно подавляет продукцию Th1-цитокинов исследуемыми типами клеток и разнонаправленно регулирует продукцию Th2 -цитокинов. Полученные результаты согласуются с общим вектором иммуносупрессии в период беременности. Таким образом, PSG является одним из факторов, не позволяющим сформироваться и реализоваться иммунному ответу на фетоплацентарные антигены.

469-482 88
Аннотация

Диагностика аллергических заболеваний является непростой задачей, требующей решения ввиду высокой частоты встречаемости этой патологии среди населения. В обзоре делается упор на комплексную диагностику, включающую различные методы, наиболее востребованные на современном этапе. Диагностика аллергии в первую очередь включает сбор анамнеза, физикальный осмотр, инструментальные и функциональные тесты, реже используется провокационные пробы ввиду возможности тяжелых реакций при их проведении. На современном этапе растет роль лабораторной диагностики аллергии, поскольку с одной стороны наблюдается увеличение сложно диагносцируе-мых случаев, требующих привлечения всего арсенала средств современной медицины, а с другой — улучшается чувствительность и специфичность лабораторных тестов. Среди лабораторных методов наиболее значимыми являются оценка уровня специфических IgE и относительно новый тест активации базофилов, которому в обзоре уделяется основное внимание. Он является функциональным и сочетает в себе преимущества провокационных проб, при проведении которых создаются условия для взаимодействия возможного аллергена и клеток-эффекторов аллергического воспаления с безопасностью для пациента. В статье приводятся данные о жизненном цикле базофилов, экспрессии ими мембранных рецепторов, содержимом гранул, возможности синтеза дополнительных медиаторов воспалительных реакций. Рассматривается участие этих клеток в патогенезе аллергического воспаления. Обсуждаются различные механизмы активации базофилов, как IgE-опосредованные, так и IgE-независимые, схожие in vivo и in vitro. Проводится теоретическое обоснование использования теста активации базофилов in vitro для оценки сенсибилизации организма к широкому спектру аллергенов. Приводятся данные о высокой чувствительности и специфичности теста для диагностики аллергии к пищевым, бытовым, пыльцевым, инсектным и лекарственным аллергенам. Рассматривается возможность использования данного теста для оценки эффективности аллергенспецифической и анти-IgE терапии. Указываются особенности теста активации базофилов, касающиеся преаналитического, аналитического и постаналитического этапов исследования. Известны факторы, влияющие на оценку данного метода. Например, затруднения при интерпретации теста могут возникнуть на фоне приема глюкокортикостероидных гормонов, в остром периоде воспаления, при выраженных отеках. В обзоре проводится сравнение теста активации базофилов, определения специфических IgE и кожных тестов по различным параметрам, касающимся проведения и интерпретации результатов данных методов. Комплексная диагностика аллергических заболеваний, в том числе с применением патогенетически обусловленных лабораторных методов, будет способствовать адекватному лечению и вследствие этого улучшению здоровья населения.

 

483-496 91
Аннотация

Глиобластома остается наиболее распространенной и агрессивной первичной опухолью головного мозга на сегодняшний день. Из-за нейроанатомического расположения глиобластомы обычная химиотерапия и лучевая терапия имеют ограниченную эффективность у пациентов с этими опухолями. В течение последнего десятилетия противоопухолевая иммунотерапия получила широкое распространение среди современных терапевтических подходов. Значимость иммунотерапевтических методов заключается в их способности увеличивать эффективность лечения рака и предотвращать рецидивы путем усиления системного и локального иммунного ответа против опухолевых клеток.

Одним из наиболее перспективных направлений в современной иммунотерапии является CAR-T-терапия или адоптивная клеточная терапия с использованием генномодифицированных Т-лимфоцитов. Функциональное преимущество CAR-T-терапии заключается в ее способности генетически модифицировать лимфоциты, приводя к их активации in vitro.

В настоящем обзоре рассматриваются ключевые принципы CAR-T-терапии и анализируются опубликованные результаты клинических испытаний для лечения глиобластомы с использованием некоторых модификаций CAR-T-клеток.

ОРИГИНАЛЬНЫЕ СТАТЬИ 

497-508 91
Аннотация

Рост заболеваемости язвенным колитом (ЯК), патогенез которого связан с дизрегуляцией иммунного ответа, ограниченная эффективность применения средств базисной терапии ЯК являются предпосылкой для поиска новых терапевтических подходов, прежде всего, с возможностью локального воздействия на участок повреждения в толстой кишке. Витамин D3 обладает антиоксидантными, противовоспалительными, иммуномодулирующими и другими свойствами, продемонстрировал эффективность при некоторых аутоиммунных заболеваниях, что является предпосылкой для изучения его влияния на иммунный статус при ЯК. Цель: изучить влияние витамина D3 в составе оригинальных ректальных суппозиториев на клиническую картину и показатели иммунного статуса при экспериментальном ЯК. ЯК у крыс моделировали 3%-ным раствором оксазолона. Суппозитории витамина D3 (1500 ME) массой 300 мг вводили per rectum каждые 12 часов в течение 6 суток. На 2-е, 4-е и 6-е сутки ЯК оценивали клиническую картину, определяли в крови количество популяций лейкоцитов, количество CD3+, CD45RA+, поглотительную и НСТ-редуцирующую способности нейтрофилов крови, в сыворотке исследовали концентрацию IgM, IgG, IL-6 и IL-8 методом.

При ЯК повышается DAI, в крови увеличивается количество нейтрофилов, их поглотительная и НСТ-редуцирующая активность, увеличивается общее количество лимфоцитов, включая CD3+, CD45RA+, повышается концентрация в сыворотке IgM, IgG, IL-6, IL-8. Локальное применение витамина D3 при ЯК снижает DAI, снижает в крови количество нейтрофилов, снижает и частично восстанавливает поглотительную и НСТ-редуцирующую способности нейтрофилов, снижает общее количество лимфоцитов в крови, частично восстанавливает количество CD3+ и CD45RA+, снижает и частично восстанавливает концентрацию в сыворотке IgM, IgG, IL-6, IL-8. Установлена ассоциация клинических признаков с показателями иммунного статуса при ЯК в условиях применения витамина D3.

Протекторный эффект витамина D3 при ЯК может быть опосредован его антиоксидантным действием, изменением продукции иммунорегуляторных цитокинов, модуляцией Th1-, Th2-, Th17-зависимых реакций и активности Treg и является предпосылкой для проведения дальнейших исследований по уточнению механизма иммунотропного действия витамина D3 при ЯК с возможностью применения в клинической практике.

509-522 83
Аннотация

Секвенирование следующего поколения позволяет проводить полногенное типирова-ние генов HLA с разрешением на уровне отдельного аллеля. Цель настоящего исследования — изучить частоту и разнообразие HLA-аллелей у доноров гемопоэтических стволовых клеток регистра ФГБУ «НМИЦ гематологии» Минздрава России, самоопределившихся как русские, включая вариации в регионах генов, не типируемых в рутине. В исследование включены 1510 доноров. HLA-генотипирование проводили методом секвенирования следующего поколения. Библиотеки готовили с помощью набора AllType NGS Amplification Kits (One Lambda, США). Секвенирование проводили на платформе MiSeq (Illumina, США). Анализ последовательностей HLA-генов проводили при помощи компьютерной программы TypeStream Visual Software (One Lambda, США), версия V2.0.0.68 и базы данных IPD-IMGT/HLA 3.40.0.1. Частоты аллелей, гаплотипов, соответствия равновесию Хар-ди-Вейнберга определяли с помощью компьютерной программы Arlequin 3.5 методом максимального правдоподобия с использованием алгоритма максимизации ожидания результатов. Выявлено 82 HLA-A аллеля, 156 HLA-В аллелей, 85 HLA-С аллелей с разрешением на уровне 4-го поля. Также определено 45 HLA-DRB1 аллелей и 18 аллелей HLA-DQB1 (с разрешением на уровне 2-3-го полей). Установлено, что доноры регистра ГСК «НМИЦ гематологии», самоопределившиеся как русские, характеризуется значительным разнообразием HLA-аллелей. Об этом свидетельствуют: большое число аллелей каждого HLA-гена; значительный процент аллелей, выявленный только один раз; существенное число новых аллелей, которые отсутствуют в базе данных IPD-IMGT/HLA. Значительным HLA генетическим разнообразием популяция русских обязана аллелям с низкой встречаемостью. От 25% до 32% HLA-аллелей класса I выявлялись только по одному разу. Новые аллели были связаны с единичными нуклеотидными заменами, которые имели место как в экзонах, так и в интронах. Наиболее распространенные HLA-аллели на уровне 4-го поля это: A*02:01:01:01 (27,1%), C*07:02:01:03 (13,1%), A*03:01:01:01 (13,0%), B*07:02:01:01 (13, 0%), A*01:01:01:01 (11,6%) и C*07:01:01:01/16 (10,4%). Установлено, что распространенные HLA-аллели у русских не всегда относятся к распространенным / хорошо документированным аллелям имеющихся каталогов. Полученные в исследовании данные могут быть использованы в качестве референсных для оценки частоты встречаемости HLA-аллелей в русской популяции, для правильной оценки распространенности тех или иных HLA-аллелей при поиске донора для трансплантации аллогенных гемопоэтических стволовых клеток, а также при проведении изучения ассоциаций HLA-аллелей с различными заболеваниями и при популяционных исследованиях.

523-532 124
Аннотация

Одним из важнейших генетических факторов человеческого организма, определяющих ответ на инфекцию, является главный комплекс гистосовместимости — система HLA (Human Leukocyte Antigens). Ключевая роль, которую молекулы HLA играют в иммунном ответе, презентируя пептиды патогенов, и огромная молекулярная вариабельность аллелей HLA в человеческих популяциях явились факторами, вызвавшими пристальное внимание, и стали основанием для проведения многочисленных исследований, направленных на изучение роли HLA-генотипов в индивидуальных особенностях ответа на новую инфекцию, вызванную β-коронавирусом SARS-CoV-2 и получившую международное обозначение COVID-19. Многие исследования сосредоточены на обнаружении конкретных аллелей, ассоциированных как с восприимчивостью, так и с устойчивостью к этому заболеванию. Уже показаны отдельные закономерности, однако они могут быть как универсальными для нескольких популяций, так и весьма своеобразными, поскольку распределение HLA-генов различается у разных народов, складываясь в зависимости от условий существования, в том числе для защиты от окружающих патогенов. В связи с этим понятно, что изучение влияния индивидуального HLA-генотипа на возникновение и течение SARS-CoV-2 инфекции должно выполняться в сравнении с обычным распределением генов HLA среди жителей соответствующего региона. Целью настоящего исследования явилось сравнение распределения групп аллелей HLA-А*, B*, DRB1* и анализ частот трехлокусных гаплотипов HLA-A-B-DRB1 в группе лиц, перенесших COVID-19 (138 человек), по сравнению с данными контрольной группы, состоящей из жителей Северо-Западного региона России (1456 человек). Наиболее значимые различия у лиц, перенесших COVID-19, по сравнению с группой популяционного контроля, выявлены при изучении групп аллелей HLA-А*: значимо снижена частота HLA-A*02 (39,86% против 51,72%, χ2 = 7,58), и А*26 (4,35% против 9,07% соответственно, χ2 = 4,17). Одновременно более чем в 2 раза увеличена частота HLA-A*29 (5,80% у перенесших заболевание и 2,47% в группе сравнения, χ2 = 4,03). Это позволяет считать, что группы аллелей А*02 и А*26 снижают вероятность заболевания, в то время как А*29, по-видимому, является фактором, предрасполагающим к развитию заболевания. Установлено, что HLA-гаплотипы, включающие группу аллелей А*02, реже встречаются у лиц, перенесших COVID-19, и занимают четвертое, седьмое и десятое место по частоте, в то время как среди контрольной группы такие HLA-гаплотипы занимают третье, четвертое, седьмое и восьмое место в этом ранжире. Дальнейшее изучение полиморфизма генов HLA-системы позволит понять предопределенную иммуногенетическую основу восприимчивости, а впоследствии и тяжести течения COVID-19.

533-540 67
Аннотация

Известно, что в когортах лиц, подвергшихся воздействию ионизирующего излучения, повышен риск сердечно-сосудистых заболеваний. В настоящее время активно исследуется роль иммунной системы в патогенезе атеросклероза. В то же время роль иммуномодулирующего влияния облучения в патогенезе атеросклероза у лиц, подвергшихся облучению, пока недостаточно ясна. Целью данного исследования было изучение влияния ионизирующего излучения на субпопуляции лимфоцитов, играющих роль в патогенезе атеросклероза. Субпопуляции лимфоцитов были исследованы в периферической крови работников, подвергавшихся профессиональному хроническому облучению, и в контрольной группе. В исследование были включены 72 работника российского ядерного предприятия Производственного Объединения «Маяк» (средний возраст 72,1±10,9 лет) и 72 человека контролей (средний возраст 70,7±9,2 лет). Все работники подверглись хроническому сочетанному (внешнему гамма- и внутреннему альфа-) облучению. Средняя суммарная поглощенная в красном костном мозге доза внешнего гамма-излучения составила 0,750±0,699 Гр; средняя суммарная поглощенная в красном костном мозге доза внутреннего альфа-излучения — 0,072±0,092 Гр). Определение относительного и абсолютного количества субпопуляций лимфоцитов (общие Т-клетки, Т-хелперы, Т-цитотоксические, общие В-клетки, NK-клетки и T-NK-клетки) проведено методом проточной цитофлюориметрии. Выявлено, что у лиц, подвергшихся профессиональному хроническому облучению, по сравнению с контролем статистически значимо ниже абсолютное содержание CD3+CD19+ Т-лимфоцитов (1658,8±694,3 х 106/л и 1988,4±1045,4 х 106/л соответственно). Относительное содержание CD3+CD4+Т-хелперов и CD3+CD8+Т-цитотоксических лимфоцитов у лиц, подвергшихся профессиональному хроническому облучению, было статистические значимо выше. Относительное содержание Т-хэлперов у лиц основной группы составило 42,4±8,8%, а у лиц контрольной группы — 35,3±8,7%; относительное содержание Т-цитотоксических лимфоцитов 27,6±9,5% и 23,3±6,5% соответственно. Выявлена статистически значимая отрицательная корреляция абсолютного содержания Т-лимфоцитов с суммарными поглощенными в красном костном мозге дозами внешнего гамма-излучения (коэффициент корреляции г = -0,53565, p = 0,000001) и внутреннего альфа-излучения (коэффициент корреляции г = -0,54804, p = 0,0000006). Наличие корреляционной зависимости от дозы может указывать на связь изменений (снижения абсолютного содержания Т-лимфоцитов) с профессиональным облучением. Полученные данные о повышении относительного содержания хелперов и цитотоксических Т-лимфоцитов позволяют предположить, что специфические антигены вызывают усиленный иммунный ответ при развитии атеросклероза у облученных лиц.

541-556 66
Аннотация

В научной медицинской литературе накоплено большое количество данных, свидетельствующих, о том, что важнейшими составными частями патогенеза ишемической болезни сердца и гипертонической болезни являются сложные пусковые процессы нейро-иммунных и нейро-эндо-кринных взаимодействий. Факторы риска сердечно-сосудистых заболеваний на начальных этапах формирования атеросклероза инициируют эндотелиальную дисфункцию и запускают каскад иммунного воспаления в коронарных сосудах, в основе которого лежит сдвиг иммунного ответа в сторону активации лимфоцитов с преобладанием клеточных реакций. Итогом, как правило, является ремоделирование сосудистой стенки с участием провоспалительных цитокинов, сдвиг липидного баланса крови в сторону атерогенности, дестабилизация атеросклеротической бляшки, развитие тромбозов и острого коронарного синдрома. В связи с чем, целью настоящей работе явилась разработка методов лечения, позволяющих, с участием эндогенных регуляторов иммунной системы, менять через их взаимодействия структуру проатерогенных звеньев на начальных этапах формирования атеросклеротического процесса при хронической ишемической болезни сердца и гипертонической болезни.

Для достижения цели, поставленной в настоящей работе, провели обследование 80 пациентов (мужчин) из числа морских специалистов плавсостава, проходящих службу в условиях Арктических широт и Крайнего Севера с ишемической болезнью сердца, 1-й стадией гипертонической болезни и астено-невротическими расстройствами с тревожными и депрессивными проявлениями. Сформированы группы пациентов: 1-я группа (n = 31) — пациенты, которым проводилась стандартная терапия кардиотропными препаратами; 2-я группа (n = 29) — обследуемые, которым в комплексе стандартной кардиотропной терапии проводилась медикаментозная коррекция малыми транквилизаторами; 3-я группа (n = 34) — стандартная терапия с применением медико-психологической реабилитации и цифровой психофизиологической терапии. Эффективность проводимого лечения изучали путем оценки динамики параметров, объективизирующих нейропетидно-цитокиновый статус иммунной системы, маркеров, используемых в диагностике атеросклероза, а также парно-связанных между ними показателей. Лабораторная часть работы была представлена набором диагностикумов, включающих маркеры атеросклеротического процесса и тест-системами по определению в сыворотке крови β-эндорфина, цитокинов провоспалительного (TNF α, IL-1 β, IL-6), а также противовоспалительного (IL-4, IL-10) спектра.

Авторами установлено, что применение медико-психологической реабилитации и цифровой психофизиологической терапии способствует оптимизации на уровне нейропептидно-цитокиных взаимодействий эффективности применения препаратов кардиотропного действия в виде коррекции взаимосвязей внутри проатерогенных структур иммунной системы и патогенетических звеньев, участвующих в формировании атеросклеротического процесса при полиморбидной сердечно-сосудистой патологии у морских специалистов из группы напряженных профессий.

557-568 70
Аннотация

Одним из факторов развития преждевременного разрыва плодных оболочек (ПРПО) является воспаление которое в условиях физиологического иммунного дисбаланса беременности модифицирует свое течение и еще больше может изменить иммунный ответ. Индикаторы могут быть количественными и функциональными. В качестве интегрального показателя функционального состояния иммунокомпетентных клеток крови (ИКК) использовалось определение мембранного потенциала митохондрий (МПМ, Ау). Обследовано 159 женщин на сроках 8-14 недель гестации, они наблюдались до 34-36 недель. Из них 121 женщина образовали группу сравнения. Основную группу (n = 46) составили беременные на сроке 28-33 недели с ПРПО. Обследование проводилось по действующим медицинским стандартам, с информированного согласия и одобрено этическим комитетом Хабаровского филиала ДНЦ ФПД — НИИ ОМиД. Дополнительно определялись МПМ и популяции лимфоцитов методом проточной цитометрии. Степень нарушения энергообеспеченности ИКК оценивалась по данным одномоментного определения количества лимфоцитов, гранулоцитов и моноцитов со сниженным МПМ (заявка на изобретение №2020115963), выявляя 3 степени энергодефицита: 1 — моновариантные композиции ИКК со сниженным МПМ; 2 — бивариационные, 3 — тотальные. В группе беременных с ПРПО отмечалось снижение CD3, относительное и абсолютное (72% vs 78% и 1624 vs 1980), CD8 (28% vs 33% и 651 vs 851), рост CD19 (14% vs 9% и 304 vs 219). При оценке МПМ ИКК отмечено снижение доли женщин без энергодефицита от 1-го триместра ко 2-му (от 41% до 30%) за счет 3-й степени (от 17% до 26%), перераспределение страдающих пулов при 2-й степени в пользу лимфоцитарно-гранулоцитарной ассоциации (с 7% до 25%) от лимфоцитарно-моноцитарных (с 73% до 50%). От второго триместра к третьему отмечалось перераспределение пулов к гранулоцитам при 1-й степени (от 0% до 8%) и от лимфоцитарно-гранулоцитарной ассоциации (25% и 5%) к моноци-тарно-гранулоцитарной (25% и 40%). В группе с ПРПО — снижение доли беременных без энергодефицита (13% и 27%), а также с 1-й и 2-й степенью (17% vs 31% и 9% vs 17%), за счет 3-й степени (61% и 26%) относительно группы сравнения. Пулы ИКК в основной группе перераспределились при 1-й степени в пользу гранулоцитов (25% и 8%), при 2-й — в пользу лимфоцитарно-моноцитарной ассоциации (100% и 55%) от гранулоцитарно-моноцитарной (0% и 40%). Подобный дисбаланс биоэнергетических процессов в ИКК может быть важным элементом патологически текущего воспаления. Нарушения, возможно, обусловлены как большей встречаемостью у таких пациентов инфекций, так и аллоиммунными взаимодействиями матери и плода, но могут и сами обуславливать патологическое течение воспаления, замыкая порочный круг. Преждевременные роды, которыми обычно заканчивается ПРПО, мультифакторное патологическое состояние. Однако, какими бы ни были тригерные факторы, изменения энергообеспеченности ИКК как минимум могут служить значимым биомаркером вероятности этой патологии.

569-576 84
Аннотация

Изолированные переломы бедренной кости составляют более 10% от всех дорожных травм. Травматическое повреждение бедренной кости на системном уровне запускает каскад взаимосвязанных реакций нейроэндокринной системы, прежде всего гипоталамо-гипофизарно-надпо-чечникового комплекса, системных реакций иммунной системы, инициируемых поступлением в системный кровоток продуктов тканевой деградации, цитокинов и других медиаторов повреждения. К специфическим клеточным реакциям в ответ на травматическое повреждение костной ткани относят включение врожденных и адаптивных реакций иммунного реагирования. В этой связи востребованными являются сведения об изменении субпопуляционного состава лимфоцитов в крови у больных с ИПБК до и после оперативного вмешательства. Цель исследования — изучить субпопуляционный состав лимфоцитов в крови после закрытого изолированного перелома диафиза бедренной кости (ЗИПБК) средней трети со смещением в динамике хирургического вмешательства — востребована для изучения патогенеза, разработки диагностических критериев и создания инновационных методов лечения. Исследование выполнено с участием 20 условно здоровых мужчин и 36 мужчин с ЗИПБК 32А и 32В по клинической классификации AO/ASIF, шифр по МКБ-10 S72.3. Критериями исключения являлись обострение хронической сопутствующей патологии, заболевания лимфатической системы и органов кроветворения, онкологические заболевания, наличие остеопороза. Субпопуляционный спектр лимфоцитов крови оценивали на 5-е, 7-е сутки (сразу после оперативного вмешательства) и на 18-е сутки после ЗИПБК. Установлено, что на 5-е сутки после ЗИПБК на фоне лейкоцитоза в крови увеличивается количество Т-регуляторных клеток, клеток с маркерами ранней (CD25+) и поздней активации (HLA-DR+), снижается представительство NK-клеток. На 7-е сутки после ЗИПБК сразу после оперативного вмешательства в крови сохраняются лейкоцитоз, увеличение количества Т-регуляторных клеток, CD3+ клеток с маркерами ранней и поздней активации. На 18-е сутки после ЗИПБК в крови восстанавливается общее количество лейкоцитов, Т-лимфоцитов, Т-хелперов, Т-регуляторных клеток, Т-лимфоцитов клеток с маркером ранней активации, значимо увеличивается число Т-лимфоцитов, экспрессирующих молекулы HLA-DR+.

577-584 66
Аннотация

Возрастные изменения иммунитета слизистой оболочки ротовой полости, включающие в себя снижение содержания в слюне секреторных иммуноглобулинов и противомикробных пептидов, наряду с изменением баланса про- и противовоспалительных цитокинов, чреваты развитием гнойно-воспалительных или аллергических заболеваний ротовой полости. Так, протезный стоматит (ПС), вызываемый Candida albicans, наблюдается примерно у 30-70% пользователей зубных протезов. Цель настоящего исследования заключалась в изучении состояния секреторного иммунитета слизистых оболочек ротовой полости у больных с Candida-ассоциированным протезным стоматитом.

Обследованы 42 пациента с полными акриловыми зубными протезами в течение не менее 6 месяцев (15 мужчин и 27 женщин) пожилого возраста (61-72 лет). На основании клинических и микробиологических исследований пациенты были разделены на группу с протезным стоматитом (n = 24) и группу без ПС (n = 18). Исследовали содержание в слюне ceкреторного иммуноглобулина A (sIgA) и провоспалительных (интерлейкина-1β (IL-1β), интерлейкина-6 (IL-6), интерлейкина-8 (IL-8), фактора некроза опухоли-α (TNFa)) и противовоспалительных (рецепторного антагониста интерлейкина-1 (RAIL), интерлейкина-4 (IL-4), интерлейкина-10 (IL-10)) цитокинов и противомикробных пептидов (кателицидина LL-37, лактоферрина и альфадефензинов 1-3 (HNP1-3).

Уровень sIgA в слюнной жидкости больных с ПС (0,92 (0,80-1,26) г/л) был достоверно (р < 0,05) ниже, чем у пострадавших без стоматита (1,71 (1,23-2,13) г/л). В группе с развитием ПС наблюдали достоверное повышение в слюне уровня IL-1β с одновременным снижением концентрации IL-8 по сравнению с другой группой, при отсутствии различий в концентрации TNFα и IL-6. Также отмечено повышение в слюне концентрации IL-10. Показано увеличение в 2 раза концентрации кателицидина LL-37 в слюне больных с ПС при одновременном снижении содержания альфа-дефензинов (HNP 1-3) нейтрофильного происхождения.

Развитие воспаления при протезном стоматите, обусловленном пользованием съемных акриловых зубных протезов, ассоциированном с инфекцией Candida albicans, характеризуется функциональной недостаточностью секреторного иммунитета слизистых ротовой полости, связанной со снижением секреции секреторного иммуноглобулина А и противомикробных пептидов нейтрофильного происхождения. Низкие уровни содержания альфа-дефензинов могут свидетельствовать о снижении функциональной активности нейтрофилов у пожилых людей, что может привести к более высокой восприимчивости к грибковой инфекции слизистых оболочек.

585-592 79
Аннотация

Стремительная прогрессия эстетической медицины — отличительная особенность нашего времени. Лидирующие позиции при этом занимает инъекционная косметология, что связано с возможностью патогенетического подхода к решению косметических проблем, обусловленных, прежде всего, старением кожи. К наиболее часто используемым препаратам мезотерапии, помимо гиалуроновой кислоты, относятся витамины, аминокислоты, микроэлементы. Старение кожи сопряжено, в том числе, с количественными и функциональными изменениями клеток местного иммунитета. Логично предположить наличие в данном случае эффекта пептидных комплексов на функциональный потенциал иммунокомпетентных клеток. Цель: анализ динамики функциональных параметров иммунной системы после проведения мезотерапии комплексом гиалуроновой кислоты и пептидов. Группу наблюдения составили 26 женщин, впервые получивших подобный курс процедур. Результаты объективной оценки эффекта посредством аппарата Aramo Smart Lite показали, что после мезотерапии, в сравнении с данными до манипуляций, значительно улучшается качество кожи вследствие снижения рельефа кожных заломов и морщин при формировании тенденции к снижению эффекта лишь через полгода. Сопоставление результатов иммунологического тестирования пациентов после курса процедур с данными, полученными до их начала, показало перераспределение популяционного состава лимфоидного ростка иммунопоэза в виде увеличения доли Т-лимфоцитов, снижения В-клеток и CD16+ натуральных киллеров. При этом отмечено снижение числа Т-лимфоцитов, экспрессирующих маркер ранней активации при увеличении доли периферических Т-регуляторных лимфоцитов, также выявлена активация эффекторного результата антителопродукции в виде повышения уровня всех классов сывороточных иммуноглобулинов, зафиксировано усиление спонтанной кислородпродуцирующей активности нейтрофилов. Результаты иммунологического мониторинга в динамике показали, что через три месяца ни один из параметров, использованных для характеристики количественных и функциональных потенций иммунной системы, не претерпел изменений в сравнении с результатами, отмеченными непосредственно по окончании мезотерапии. В то же время через полгода все перечисленные показатели вернулись на исходные позиции, зафиксированные до косметических процедур. Изменения в системном иммунном ответе в ответ на мезотерапию пептидными комплексами затрагивают участников как врожденного, так и приобретенного вариантов реагирования, влияя на дифференцировку популяций лимфоцитов, их регуляторный и активационный потенциал, обеспечивая модуляцию эффекторных реакций. Полное восстановление исходных позиций происходит через шесть месяцев.

ИММУНОЛОГИЧЕСКИЕ МЕТОДЫ 

593-604 65
Аннотация

Правильный выбор питательных сред для культивирования различных видов клеток в разнообразных приложениях является одним из важнейших аспектов современных биотехнологий, поскольку химический состав культуральных сред во многом воспроизводит необходимые метаболиты для поддержания роста определённых линий клеток вне организма. Jurkat линия лейкозных Т-лимфобластоподобных клеток человека (далее Jurkat T-клетки) активно используется для in vitro моделирования внутриклеточного сигналинга и активации нормальных Т-лимфоцитов крови, опосредованной комплексом T-клеточный рецептор/CD3/CD4, в токсикологических исследованиях иммунных и секреторных реакций на лекарственные вещества и ионы. Кроме того, Jurkat T-клетки широко применяются для ex vivo тестирования в области иммунологии, онкологии, токсикологии, ортопедии и травматологии. Существующие стандарты и многочисленные исследования основаны преимущественно на краткосрочном in vitro культивировании Jurkat T-клеток в питательной среде RPMI 1640. Вместе с тем вопросы длительного обеспечения роста культуры Jurkat T-клеток слабо представлены в научной литературе. Целью данного исследования явилось изучение активности Jurkat T-клеток в 7-14-суточной культуре in vitro и сравнительная оценка значения RPMI 1640 и αMEM для поведения иммунокомпетентных опухолевых клеток. С помощью проточной цитофлуориметрии, мультиплексного анализа и фазово-контрастной Cell-IQ микроскопии изучены доли живых и погибших клеток путем апоптоза и некроза, секреция цитокинов и хемокинов, динамика накопления клеточной биомассы. Установлено, что среда αМЕМ в составе полной питательной среды, в сравнении с RPMI 1640, в большей мере способствует in vitro поддержанию жизнеспособности (увеличение доли живых клеток на 13,5% к 14-м суткам), секреторной способности в отношении 23 из 27 тестируемых биомолекул, сокращению (на 32%) времени адаптации клеток к условиям культивирования перед пролиферацией, 5-кратному приросту клеточности культуры Jurkat Т-клеток к 7-м суткам. Обсуждается потенциальное значение химических компонентов питательных сред и секретируемых биомолекул для полученных результатов. На основании полученных результатов сделано заключение о более оптимальных свойствах среды αМЕМ для длительного in vitro культивирования Jurkat Т-клеток. Как следствие, тестирование in vitro медицинских изделий, предназначенных для долговременного контакта с организмом, в том числе у онкологических больных, на лейкозной линии Jurkat Т-клеток в среде RPMI 1640 могут обусловить ошибочный прогноз их биосовместимости и потенциальной противоопухолевой активности.

605-612 72
Аннотация

Целью данной работы является оценка влияния препарата эритропоэтина, используемого для получения иммуносорбента, на выявление IgG-антител к ЭПО иммуноферментным методом в сыворотках крови пациентов, проходящих терапию препаратами чрЭПО.

Проанализированы 294 сывороток крови пациентов, получавших препараты эритропоэтина и 127 образцов пациентов, не получавших препараты чрЭПО. Исследование проводили методом твердофазного ИФА путем связывания исследуемых препаратов чрЭПО на планшете с иммобилизованными моноклональными антителами к ЭПО.

Выявление антител к эритропоэтину проводили с использованием мышиных моноклональных антител к IgG, IgG1 и IgG4 человека, конъюгированных с пероксидазой хрена. В работе исследовали препараты: эритропоэтин рекомбинантный человеческий рчЭПО-бета (Shandong Kexing Bioproducts), европейский стандарт эритропоэтина BRP 3, коммерческие препараты Аранесп (Amgen Europe B.V), Мирцера (F. Hoffmann-La Roche, Ltd.), Эпрекс (ОО «Джонсон & Джонсон»), Эральфон (ЗАО «ФармФирма «Сотекс»).

Чувствительность характеризовали индексом позитивности (ИП), вычисляемом по формуле ИП = ОПобразца/ОПпорог., где ОПпорог. = ОПср.К- + 3SD, где ОПср.К— среднее арифметическое значение регистрируемого сигнала для выборки сывороток крови пациентов, никогда не получавших препараты эритропоэтина, SD-стандартное отклонение. Результаты оценивали как положительные с ИП > 1,1 и отрицательные с ИП < 0,9. Результаты в диапазоне 0,9 ≤ ИП < 1,1 рассматривали как неопределенные.

Из 294 проанализированных образцов при определении суммарных специфических IgG-антител 32 образца оценивали как положительные или неопределенные во всех случаях, при этом доля неопределенных была выявлена в 1,0-1,7% образцов. Из них антитела субкласса IgG1 были обнаружены у 50-56,3% пациентов, антитела субкласса IgG4 у 43,8-50% пациентов. Тест Манна-Уитни показал достоверное различие между исследуемыми образцами по сравнению с контрольной группой для всех модификаций ИФА (р = 0,001). Тест Краскела-Уоллиса не выявил существенных различий для пяти выборок данных по ИП, полученных при иммунохимической иммобилизаций различных препаратов ЭПО (р = 0,05).

Коэффициент корреляции индексов позитивности находился в диапазоне 0,99-0,96 для суммарных IgG и > 0,98 для двух подклассов антител. Коэффициент линейной регрессии был близок к единице, что указывает на незначительные различия в чувствительности сравниваемых методик.

Проведенные исследования указывают на возможность определять антитела к эритропоэтину у пациентов, получавших различные препараты чрЭПО, в одной тест-системе, что открывает возможность для разработки универсальной коммерческой тест-системы.



Creative Commons License
Контент доступен под лицензией Creative Commons Attribution 4.0 License.


ISSN 1563-0625 (Print)
ISSN 2313-741X (Online)