При иммуновоспалительных ревматических заболеваниях организованными формами клеточного инфильтрата являются эктопические фолликулоподобные лимфоидные структуры и ГЗТ-гранулемы, неорганизованными формами — диффузный клеточный воспалительный инфильтрат. Неотъемлемым компонентом патогенетической динамики этих видов клеточного инфильтрата являются программируемые варианты гибели клеток, из которых наиболее значимыми являются аутофагия, апоптоз, некроптоз, пироптоз и нетоз. Существует тесная взаимосвязь между указанными формами клеточной гибели. Эта взаимосвязь сформировалась в процессе биологической эволюции, отличается выраженным консерватизмом и подчиняется общебиологическим закономерностям молекулярно-клеточных процессов в клетке. Высвобождающиеся в процессе гибели клеток «сигналы опасности» (DAMPs) индуцируют состояние аутореактивности, обусловленной в том числе модуляцией процессов гибели клеток с помощью PRR-рецепторов клеток врожденной иммунной системы. На основании анализа процесса эндоцитоза, сигнальных путей, адапторных молекул, транскрипционных факторов, свойственных каждой из указанных форм гибели клеток, представлена патогенетическая значимость изменений мембранных структур и молекулярных путей реализации программируемой клеточной гибели при иммуновоспалительных ревматических заболеваниях. В этом отношении фундаментальными являются мембран-ассоциированные клеточные процессы, формирование различных видов внутриклеточных инфламмасом, процессы кросс-презентации МНС-рестриктированных продуктов дезорганизации рыхлой волокнистой соединительной ткани и индукция аутореактивности врожденной и адаптивной иммунных систем. Причинно-следственные взаимоотношения молекулярных путей реализации указанных форм клеточной гибели позволяют идентифицировать целевые молекулярные мишени с целью модуляции продуктивного воспаления.

Секреторные фосфолипазы А2 (sPLA2) представляют собой большое суперсемейство ферментов с молекулярной массой 14-19 кДа, включающее 15 групп и более 30 изоформ, принадлежащих к четырем типам: секреторный (sPLA2), цитозольный (cPLA2), кальций-независимый (iPLA2) и липопротеин-ассоциированная фосфолипаза A2 (LP-PLA2, PAF-AH). У млекопитающих обнаружены одиннадцать секреторных sPLA2 (IB, IIA, IIC, IID, IIE, IIF, III, V, X, XIIA и XIIB), выполняющие разносторонние функции и участвующие в патогенезе широкого спектра заболеваний. С одной стороны, sPLA2, гидролизуя фосфолипиды мембран, способствуют элиминации поврежденных, апоп-тотических клеток и оказывают сильное бактерицидное, вируцидное действие, в том числе против антибиотикорезистентных штаммов микроорганизмов. В этом плане использование sPLA2 может представлять новую стратегию терапии бактериальных и вирусных инфекций. С другой стороны, в результате действия sPLA2 на ее субстраты образуются биологически активные молекулы (арахидоновая, лизофосфатидная кислоты, лизофосфолипиды, жирные кислоты, простагландины, лейкотриены, тромбоксаны), которые оказывают сильное воспалительное, детергирующее, коагулирующее действие и повышают проницаемость сосудов. Такая провоспалительная роль sPLA2 обуславливает повышение ее уровней и активности при сердечно-сосудистых, дыхательных, аутоиммунных, метаболических, онкологических, бактериальных и вирусных заболеваниях. В обзоре приводится классификация изоформ sPLA2, рассматриваются их субстраты, регулирующие факторы, биологическое значение и механизмы сильного бактерицидного, вируцидного действия, а также провоспалитель-ной активности при сердечно-сосудистых, дыхательных, аутоиммунных, метаболических, бактериальных и вирусных заболеваниях. Отдельно излагаются механизмы селективного действия sPLA2 в отношении грамположительных и грамотрицательных микроорганизмов. Обсуждаются диагностическая, прогностическая значимость, корреляции повышенных уровней и активности sPLA2 с клиническими симптомами, тяжестью и исходом пациентов с ишемической болезнью сердца (CAD), острым инфарктом миокарда (AMI), атеросклерозом, острым воспалительным повреждением легких (ALI), респираторным дистресс-синдромом (ARDS), хронической обструктивной болезнью легких (COPD), ревматоидным артритом, бронхиальной астмой, бактериальными инфекциями, сепсисом и вирусными (COVID-19) инфекциями. Рассматривается возможность использования sPLA2 в качестве биомаркера тяжести и исхода пациентов с хронической обструктивной болезнью легких, бактериальными инфекциями, сепсисом и вирусными, в том числе COVID-19, инфекциями.

Глобальная пандемия коронавирусной инфекции стала длительной кризисной ситуацией для общества, экономики и здравоохранения, которая продолжается и сейчас. Спайк-гликопротеин вируса SARS-CoV-2 является одним из первичных компонентов вирулентности, тканевого тропизма и объектов носительства. Целью работы было определение мутаций S-белка в изолятах от больных COVID-19 в Ираке. Методы: полногеномные последовательности линий вируса в Ираке получали из базы GISAID. Используя статистики сатурационного мутагенеза и другие методики биинформатики, мы изучили 20 последовательностей изолятов SARS-CoV-2 с миссенс-мутацией данного белка, выявленных в Ираке и выбранных из базы данных NCBI. Результаты: во всех линиях вируса, при сравнении с диким типом, были выявлены следующие мутации: L452R, A522V, E583D and D614G. Число мутаций этих линий было различным, в зависимости от места сбора образцов. Мутация D614G была обнаружена в 19 линиях. Одна из линий имела 3 мутации, тогда как другая относились к дикому типу вируса. Структура мутантного белка существенно изменяется из-за энергетических взаимодействий атомов в зоне стыковки, что влияет на стабильность белка. Выводы: стабильность S-белка может изменяться в зависимости от места мутации. Стыковка молекулы RBD-ACE2 нарушается по-разному при заменах аминокислот L452R and A522V.

Сложность и многофакторность реализации патогенного потенциала SARS-CoV-2 в организме человека, раскрытие все новых механизмов, посредством которых вирус запускает каскад реакций в клетках макроорганизма, ведущих к формированию полиорганной недостаточности обусловили интерес к морфофункциональному состоянию клеток крови у реконвалесцентов после перенесенного COVID-19. Цель работы — охарактеризовать морфофункциональное состояние клеток крови в различный период реконвалесценции у пациентов в зависимости от степени тяжести перенесенного COVID-19. Обследовано 55 реконвалесцентов после перенесенного COVID-19: I группа — реконвалесценты через 30 дней после болезни (п = 39); II группа — через 60 дней (п = 16); III группа — клинически здоровые добровольцы в анамнезе у которых отсутствовал факт заболевания, обусловленного SARS-CoV-2 (п = 11). Оценку состояния клеток проводили с помощью микроскопа Olympus CX41 (Olympus, Япония) и цифровой камеры VZ-C31S (VideoZavr, Россия) в программе VideoZavr (версия 1.5). Состояние популяции нейтрофильных гранулоцитов оценивали на проточном цитофлуориметре BD Accuri C6 Plus (США) в образцах цельной крови при автоматическом дифференцировании клеток от лимфоцитов и моноцитов по степени гранулярности. Продукцию цитокинов определяли с помощью коммерческих наборов для выявления IFNγ, TNFα, IL-4, IL-8, IL-10 (АО «Вектор-Бест», Россия), IL-17A (eBioscience, Австрия) на автоматическом иммуноферментном анализаторе LAZURIT (Dynex Technologies, США). Среди реконвалесцентов, перенесших средне-тяжелую форму COVID-19 (45,5% и 50% случаев соответственно), на 30-е и 60-е сутки после клинического выздоровления отмечали достоверное увеличение доли трансформированных форм эритроцитов (эхиноциты, овало-циты, дакриоциты, кодоциты) относительно III группы (p = 0,00001 и p = 0,001 соответственно). Независимо от тяжести течения болезни, в среднем у 40,6% реконвалесцентов I и II групп регистрировали умеренное нарушение морфологии нейтрофильных гранулоцитов (цитоплазматическая вакуолизация, деконденсация хроматина на стадии преднетоза, трансформация клеток по типу нетоза), а в 27,4% случаев наблюдали участки нейтрофил-тромбоцитарной агрегации. В супернатантах крови реконвалесцентов выявлено достоверное снижение концентрации IFNγ (р = 0,02), TNFα (р = 0,03), IL-10 (р = 0,04) и IL-17A (р = 0,02). Выявленные морфофункциональные изменения клеток крови у лиц, перенесших COVID-19, свидетельствуют о длительности сохранения токсических повреждений эритроцитов, нейтрофилов и лимфоцитов в течение восстановительного периода. Влияние установленных морфофункциональных нарушений клеток крови реконвалесцентов после перенесенного COVID-19, приводящих к повышению вязкости и микроциркуляции крови, формированию нейтрофил-тромбоцитарных агрегатов, вероятно, обусловливает риск развития тромботических осложнений в отдаленный период, снижение уровня регуляторных цитокинов, подтверждает медленное восстановление лимфоцитарного звена (Th1, Th2, Th17) иммунной системы.

Типирование аллельных вариантов SNPs генов может быть использовано в предиктивной медицине и при определении мишеней для наиболее эффективной стратегии лечения различных заболеваний.

Цель работы — исследовать ассоциацию однонуклеотидных полиморфизмов спектра генов воспаления - IL10 (C819T; rs1800871; C592A; rs1800872), IL4 (C589T; rs2243250), фиброза - TGFei (G915C; rs1800471), MMP1 (1607insG; rs1799750), апоптоза — TNFRSF11B (G1181C; rs2073618), вазоконстрикции — CRP (C3872T; rs1205), CYP1A1 (A2454G; rs1048943), эндотелиальной дисфункции — EDN1 (G925T; rs5370), NOS3 (C786T; rs2070744) с развитием ИБС, РМЖ, БА и угрожающего выкидыша на ранних сроках беременности у жителей Республики Адыгея.

Образцы ДНК неродственных доноров и больных (n = 74) с верифицированными в условиях лечебно-профилактических учреждений г. Майкопа Республики Адыгея (РА) диагнозами «бронхиальная астма» (n = 13), «ишемическая болезнь сердца» (n = 10), «рак молочной железы» (n = 10), угрожающим выкидышем в первом триместре беременности (n = 8) выделены из лейкоцитов периферической крови и типированы методом аллель-специфичной полимеразной цепной реакции с электрофоретической детекцией результатов на коммерческих тест-системах НПФ «Литех», Москва.

В исследовании на примере жителей РА экспериментально доказана статистическая значимость «нормального» Arg25-аллельного варианта гена TGFβ1 (p < 0,05; F = 0,038; OR = 3,231; 95% CI = 1,0819,656) в развитии бронхиальной астмы. Для групп с сердечно-сосудистыми, онкологическими заболеваниями и нарушениями гестационного процесса достоверных различий по SNP rs1800471 гена TGFβ1 не выявлено (p > 0,05). Распределение частот аллельных вариантов C786T гена NOS3, G1181С гена TNFRSF11B, 1607insG гена MMP1, G925T гена EDN1 и A2454G гена CYPM1 у обследованных больных с ИБС, РМЖ и в контрольной группе достоверно не различаются (р > 0,05). Статистическая значимость частот аллельных вариантов rs1799750 гена MMP1 при угрозе раннего выкидыша в I триместре и у женщин с физиологическим течением беременности (F = 0,096; р < 0,05%: OR = 6,0) приближается к достоверной, но с доверительным интервалом, пересекающим единицу (95% CI = 0,98036,716), что требует дальнейших исследований.

Полученные данные позволяют не только диагностировать предрасположенность к БА, но и разработать комплекс профилактических мероприятий с учётом индивидуальных особенностей каждого больного.

Известно, что эффективность гормональной терапии рака молочной железы (РМЖ) зависит от наличия в ткани опухоли рецепторов эстрадиола и прогестерона (ER и PR). Экспрессия стероидных рецепторов снижается при прогрессии РМЖ. Механизмы конверсии ER⁺/PR⁺ опухолей молочной железы в ER⁺/PR^- и ER^-/PR^- остаются неизвестными. Очевидно, снижение экспрессии стероидных рецепторов зависит от действия генотоксических метаболитов химических канцерогенов окружающей среды (в частности бензо[а]пирена, Bp) и эндогенных стероидных гормонов (в частности эстрадиола, E2), образование которых регулируется ферментами биотрансформации. С другой стороны, образование аддуктов генотоксических метаболитов с ДНК может индуцировать синтез специфических антител. Ранее было показано, что превышение уровней сывороточных антител класса А против Bp и E2 над уровнями антител против прогестерона (IgA-Bp/IgA-Pg > 1 и IgA-E2/ IgA-Pg > 1), обозначенное как иммунологический дисбаланс, ассоциировано с высоким риском возникновения РМЖ.

Цель исследования — выявить предполагаемые ассоциации конверсии ER⁺/PR⁺ опухолей в ER⁺/ PR^- и ER^-/PR^- с иммунологическим дисбалансом у больных РМЖ с различными генетическими вариантами ферментов биотрансформации: CYP1A1*2A (rs4646903), CYP1B1 (rs1056836), CYP19A1 (rs2470152), GSTT1 (del), GSTP1 (rs1695).

Исследование IgA-Bp, IgA-E2 и IgA-Pg в сыворотке крови 1321 некурящей женщины с диагнозом РМЖ проводили с помощью неконкурентного твердофазного иммуноферментного анализа. Конъюгаты Bp, E2 и Pg с бычьим сывороточным альбумином использовали в качестве адсорбированных на пластике антигенов и меченные пероксидазой хрена козьи антитела против IgA — для проявления связавшихся с гаптенами антител. Генетические полиморфизмы ферментов биотрансформации исследовали с помощью ПЦР в режиме реального времени. Наличие в ткани опухоли ER и PR определяли с помощью стандартного иммуно-гистохимического анализа.

У больных РМЖ I стадии (N = 534) ER⁺/PR⁺ опухоли обнаружены в 68,7% случаев, ER⁺/PR^- в 15,6%, ER^-/PR^- в 15,7%. У больных II-IV стадий (N = 787) частота ER⁺/PR⁺ опухолей снижалась до 60,2%, частота ER⁺/PR^- не изменялась (15,8%), частота ER^-/PR^- возрастала до 24,0% (p < 0,0001). Такие изменения статуса стероидных рецепторов имели место только у больных с высокими значениями индивидуальных соотношений IgA-Bp/IgA-Pg > 1 и IgA-E2/IgA-Pg > 1 (p < 0,001). У больных с низкими значениями указанных соотношений не было разницы между I и II-IV стадиями по удельному весу ER⁺/PR⁺, ER⁺/PR^- и ER^-/PR^- (p = 0,28).

У гомозигот TT CYP19A1 частота ER⁺/PR⁺ опухолей при I стадии была выше (77,1%), чем при II-IV стадиях (60,1%). Соответственно у больных II-IV стадий повышалась частота ER^-/PR^- опухолей (с 11,8% до 26,1%, p < 0,001). У носителей генотипа GSTT1 «+» ER⁺/PR⁺ опухоли обнаружены в 68,7% при I стадии и в 58,6% при II-IV стадиях, соответственно ER^-/PR^- обнаружены в 16,6% и в 24,5% случаев (p < 0,004). У гомозигот GG GSTP1 ER⁺/PR⁺ опухоли обнаружены в 57,1% при I стадии и в 60,7% при II-IV стадиях, частота ER+/PR- опухолей была ниже (14,3% против 20,2%), а ER^-/PR^- — выше (28,6% против 19,0%, p < 0,001). Удельный вес низких или высоких значений соотношений IgA-Bp/ IgA-Pg и IgA-E2/IgA-Pg был одинаковым при любом генотипе исследованных генов.

Таким образом, конверсия стероидных рецепторов опухоли у больных РМЖ независимо ассоциирована с иммунологическим дисбалансом и с полиморфизмом некоторых генов ферментов биотрансформации.

Целью исследования явилась оценка экспрессии гена β-дефенсина-З человека (hBD-3) в поверхностном эпителии слизистой оболочки ЛОР-органов. Исследовали 210 образцов операционного материала, полученных при наиболее частой хирургической патологии 5 анатомо-функциональных областей: нос и околоносовые пазухи, среднее ухо, носоглотка, ротоглотка, гортань. Контролями служили: 1) нижние носовые раковины, 2) нормальная слизистая среднего носового хода. Оценку экспрессии генов hBD-3 и β-актина проводили методом обратной транскрипции и ПЦР в режиме реального времени. В слизистой оболочке носа и околоносовых пазух очень низкая экспрессия выявлена в 14,29-33,33% случаев, наиболее часто в ткани полипов среднего носового хода и решетчатого лабиринта (53,84%), отсутствовала в гипертрофических нижних носовых раковинах. В полости среднего уха частота детекции экспрессии гена hBD-3 варьировала от 7,69% в слизистой суперструктур стремени до 53,85% образцов слизистой при наличии холестеатомы. Экспрессия гена hBD-3 детектирована в большинстве образцов тканей с высоким микробным обсеменением: небные миндалины 100%, гипертрофия аденоидов 84,62%, аденоиды при гипертрофии аденоидов и небных миндалин 87,5%, фиброзно-сосудистые полипы гортани 87,5%, другая патология гортани 77,78% образцов. Самые высокие уровни экспрессии гена hBD-3 выявлены в гортани при фиброзно-сосудистых полипах. Полученные данные свидетельствуют о двух функционально различных типах иммунного ответа слизистой ЛОР-органов. В анатомо-функциональных областях, выстланных мерцательным эпителием (средний и нижний носовые ходы, верхнечелюстные, решетчатые пазухи, среднее ухо) детектированы достоверно низкие частота (точный тест Фишера, p < 0,05 до p < 0,001) и уровни (тест Манна-Уитни, p < 0,05 до p < 0,001) экспрессии гена hBD-3, за исключением ткани полипов среднего носового хода и решетчатого лабиринта и слизистой барабанной полости при холестеатоме, что, возможно, связано с характером патологического процесса. В зонах, выстланных плоским эпителием или сочетанием плоского и реснитчатого эпителиев, экспрессия гена hBD-3 детектирована практически повсеместно и на достоверно более высоких уровнях. В контексте хронического воспаления и связанных с инфекцией заболеваний ЛОР-органов, помимо прямой микробоцидной активности hBD-3 на первой линии защиты, возможно нарушение регуляции пептида и даже неблагоприятные патогенетические эффекты hBD-3: повышенная чувствительность к инфекциям, патологические изменения состава комменсалов, фиброзное ремоделирование.

Неоспоримо ведущая роль диабетической ретинопатии, как основной причины снижения остроты зрения в трудоспособном и пожилом возрасте, определяет ее актуальность изучения, в том числе иммунологических аспектов патогенеза для улучшения диагностики и лечения данной офтальмологической патологии. В настоящее время недостаточно изучены изменения интерлейкинов слезной жидкости у пациентов пожилого возраста, страдающих диабетической ретинопатией. Цель исследования — изучение содержания провоспалительных и противовоспалительных интерлейкинов в слезной жидкости у пациентов пожилого возраста с диабетической ретинопатией. Указанные интерлейкины слезной жидкости анализировались в двух клинических группах — в основной, представленной 72 пациентами пожилого возраста с диабетической ретинопатией, и в контрольной — 64 пациента того же возраста с сахарным диабетом 2-го типа без диабетической ретинопатии. Определение диагноза диабетической ретинопатии осуществлялось на основании критериев Клинических рекомендаций «Сахарный диабет, ретинопатия диабетическая, макулярный отек диабетический» общероссийской ассоциации врачей-офтальмологов по результатом комплексного офтальмологического обследования. В слезной жидкости обеих групп пациентов исследовали содержание различных провоспалительных и противовоспалительных интерлейкинов твердофазным иммуноферментным анализом и с применением тест-систем R&D Diagnostic Inc. (США). Рассчитывали средние арифметические значения, их ошибки, величины относительного риска и доверительные интервалы, оценивали достоверность. Установлено статистически значимое повышение большинства провоспа-лительных интерлейкинов в слезной жидкости пациентов, имеющих диабетическую ретинопатию. Особенно увеличилась экспрессия IL-6 до 142,9±7,8 пг/мл среди пациентов с диабетической ретинопатией против 6,8±0,7 пг/мл в контрольной группе, IL-3 до 2,4±0,3 пг/мл против 0,3±0,05 пг/мл соответственно (р < 0,001). Повысилась также продукция и других провоспалительных интерлейкинов на локальном уровне, за исключением IL-7. Однако концентрация IL-4 и IL-10 достоверно снизилась у пациентов с диабетической ретинопатией и в большей степени IL-10 до 4,3±0,5 пг/мл против 11,7±2,3 пг/мл (р < 0,001). Величины относительного риска оказались наивысшими для IL-6 — 7,824 при достоверном доверительном интервале 7,538-8,261, IL-3 — 3,269 при достоверном доверительном интервале 3,084-3,721. Высокие значения относительного риска установлены, кроме того, для IL-8, IL-5 и IL-1α₂. Относительный риск развития диабетической ретинопатии повышают увеличение содержания в слезной жидкости IL-8 практически в 2 раза при статистически значимом доверительном интервале 1,728-2,432 (р < 0,01), IL-5 — в 1,748 раза при доверительном интервале 1,462-2,194 (р < 0,01), IL-1α₂ — в 1,718 раза при достоверном доверительном интервале 1,524-2,137 (р < 0,001). Это указывает на ассоциацию вышеназванных интерлейкинов с развитием диабетической ретинопатии. Установленные закономерности расширяют современные представления об иммунопатогенезе диабетической ретинопатии и участии интерлейкинов слезной жидкости.

Очаговая алопеция представляет собой аутоиммунное заболевание, характеризующееся нерубцовым выпадением волос с сохранением волосяного фолликула. Выпадение волос при очаговой алопеции может быть как очаговым с появлением четко ограниченных очагов алопеции, так и диффузным или полным выпадением волос на любых участках кожного покрова, где присутствуют волосяные фолликулы. Данные о роли пищевой аллергии в развитии очаговой алопеции и характере спектра сенсибилизации крайне немногочисленны. Цель работы — изучить особенности спектра сенсибилизации к пищевым и пыльцевым (перекрестно-реагирующим) аллергенам у больных очаговой алопецией.

В исследовании приняли участие больные очаговой алопецией (n = 17), которые с учетом возраста были разделены на группы: 1-я группа — дети (п = 9) и 2-я группа — взрослые (п = 8). Всем больным проводилось специфическое аллергологическое обследование: сбор аллергологического анамнеза, кожное prick-тестирование с пищевыми и пыльцевыми аллергенами (Allergopharma, Германия).

Анализ спектра сенсибилизации к пищевым аллергенам больных очаговой алопецией выявил особенности в зависимости от возраста. Так, в группе больных детей отмечена наибольшая частота встречаемости сенсибилизации к цельному куриному яйцу, пищевым злакам, дрожжам, сое и белкам коровьего молока. В группе взрослых с очаговой алопецией наиболее значимыми пищевыми аллергенами являлись: белок куриного яйца, ржаная мука, овес. Среди пыльцевых аллергенов в первой группе больных наиболее распространенными были аллергены смеси пыльцы сорных и злаковых трав, во второй группе — смеси пыльцы луговых трав. Всем больным с учетом аллергологического тестирования назначалась индивидуальная элиминационная диета с исключением причинно-значимых аллергенов с учетом перекрестнореагирующих аллергенов. Эффект элиминации оценивался через 2 месяца от начала элиминационной диеты. 70% больных отметили клиническое улучшение: в очагах алопеции отмечался рост веллюса — пушковых депигментированных волос, а также терминальных пигментированных волос. Полный регресс очагов алопеции в среднем происходил в течение 3-6 месяцев от начала терапии.

Установленная нами сенсибилизация к пищевым и пыльцевым (перекрестно-реагирующим) аллергенам больных очаговой алопецией и положительный эффект элиминационной диеты доказывает роль пищевой аллергии в развитии патологии. Следовательно, изучение причинно-следственной взаимосвязи пищевой аллергии и очаговой алопеции представляет особую актуальность и создает предпосылки для открытия новых диагностических и терапевтических возможностей.

Хроническое стерильное низкоинтенсивное воспаление является важнейшим механизмом развития и прогрессирования атеросклероза. В условиях персистирующего неразрешающего-ся (non-resolving) воспаления, наблюдающегося в сосудистой стенке и атеросклеротической бляшке (АСБ), происходит постоянное повреждение тканей, приводящее к повышенному образованию эндогенных молекулярных паттернов, ассоциированных с опасностью (danger associated molecular patterns, DAMP). Один из прототипических DAMP является негистоновый хромосомный белок HMGB1. Попадая во внеклеточное пространство, HMGB1 действует как DAMP и индуцирует воспаление путем связывания с паттерн-распознающими рецепторами (TLR2, TLR4, RAGE, CD36 и т.д.). В целом ряде клинических исследований было установлено повышение уровня HMGB1 в крови у пациентов с ишемической болезнью сердца и атеросклеротическим заболеванием артерий нижних конечностей, а также его взаимосвязи с бременем атеросклероза коронарных артерий. В то же время механизмы прогрессирования атеросклероза, опосредованные HMGB1, на сегодняшний день изучены лишь частично.

Цель исследования — изучить взаимосвязь между уровнем сывороточного HMGB1 и субпопуляционным составом циркулирующих моноцитов у пациентов с субклиническим атеросклерозом в возрасте 40-64 лет.

В исследование включали пациентов в возрасте 40-64 лет с субклиническим атеросклерозом периферических артерий. Концентрацию HMGB1 в сыворотке крови определяли с использованием наборов для иммуноферментного анализа (Human HMGB1/HMG-1 ELISA Kit, NBP2-62766, Novus Biologicals, США). Порог определения содержания HMGB1 в сыворотке крови составлял 18,75 пг/мл, диапазон измерения — 31,25-2000 пг/мл. Фенотипирование субпопуляций циркулирующих моноцитов проводили методом проточной цитометрии на аппарате Navios 6/2 (Beckman Coulter, США).

Увеличение концентрации HMGB1 в сыворотке крови ассоциировалось с уменьшением количества классических М2-моноцитов и увеличением промежуточных и М1-моноцитов. Кроме того, увеличение концентрации HMGB1 было связано с увеличением количества классических, промежуточных и неклассических моноцитов, экспрессирующих CD36 и TLR2. По мере увеличения концентрации HMGB1 от Q1 до Q4 наблюдалось увеличение количества классических (p = 0,001) и промежуточных моноцитов (p = 0,006), но не неклассических (p = 0,147). По мере увеличения концентрации HMGB1 от Q1 до Q4 происходило увеличение количества классических (p < 0,0001), промежуточных (p < 0,0001) и неклассических (p < 0,0001) моноцитов, экспрессирующих CD36. Также было установлено увеличение количества промежуточных (p = 0,022; p_{1, 4} = 0,034) и неклассических (p = 0,002; p_{1, 4} = 0,035) моноцитов, экспрессирующих TLR2. По данным корреляционного анализа было установлено, что концентрация IL-1β прямо коррелировала с количеством М1-моноцитов (г = 0,268; p = 0,035) и обратно — с количеством М2-моноцитов (г = -0,376; p = 0,003).

Увеличение концентрации HMGB1 в сыворотке крови пациентов с субклиническим атеросклерозом ассоциировалось с уменьшением количества классических и М2-моноцитов, и увеличением — промежуточных и М1-моноцитов, а также с увеличением количества промежуточных и неклассических моноцитов, экспрессирующих CD36 и TLR2. Уровень IL-1β прямо коррелировал с концентрацией HMGB1 и количеством М1-моноцитов.

Метаболический синдром представляет собой серьезную медико-социальную проблему в связи с высокой распространенностью, отсутствием единых подходов к диагностике и лечению. Несомненный научный интерес вызывает исключение реакций пищевой дезадаптации и изучение механизмов контроля иммунной толерантности к пищевым антигенам как одного из доступных противовоспалительных инструментов коррекции повышенной проницаемости эпителия кишечника и эндотелия сосудов, связанного с развитием метаболического синдрома.

Пищевая дезадаптация — это несоответствие рациона питания человека, опосредованного генофенотипическими особенностями пищеварительных ферментов и контролем иммунной системы за эффективным пищеварением.

Иммунологический контроль пищеварения, включая динамическое сохранение толерантности к пищевым антигенам, осуществляется на двух уровнях организации иммунной системы: врожденной с функциональным участием микробиоты и адаптивной, представленной клеточно-гуморальными механизмами, связанными с молекулярными эпитопами и критической массой персистирующих пищевых антигенов, оказавшихся в иммунологических компетентных зонах тонкого кишечника в результате изменения проницаемости кишечного барьера и процессов трансцитоза.

С целью оценки вклада рациона питания в иммуно-биохимический и реологический дисбаланс у лиц с повышенной массой тела обследовано 170 добровольцев обоего пола в возрасте 20-55 лет в зависимости от индекса массы тела: более 27,0 кг/м² (клиническая группа, n = 120) и не более 25,0 кг/м² (контрольная группа, n = 50). Выявлено статистически значимое повышение концентрации IL-6, IL-17, холестерина, глюкозы, гликозилированного гемоглобина, инсулина, индексов инсулинорези-стентности и атерогенности, а также специфических IgG к ряду пищевых антигенов для испытуемых в клинической группе. В ходе исследования нами были выявлены статистически достоверные связи между общим количеством тромбоцитов (p < 0,05; r = 0,213), эритроцитов (p < 0,05; r = -0,211), средним объемом эритроцита (MCV) (p < 0,05; r = 0,339) и концентрацией IgG к казеину в крови, а также между концентрацией sIgG к сое и количеством тромбоцитов (p < 0,05; r = 0,231).

При этом была найдена взаимосвязь между установленными значениями IgG к пАГ казеина и риском развития атерогенных изменений (индекс атерогенности > 3) при OR = 2,68 (1,33-5,42), а также показателями IgG к пАГ казеина (OR = 8,9 (2,6-30,5)), пАГ сои (OR = 5,6 (1,8-16,7)), пАГ глютена ((F = 0,00359. p < 0,05) и повышенным индексом массы тела.

Полученные результаты были интерпретированы как возможный срыв пищевой толерантности к ряду пищевых антигенов у лиц с высоким индексом массы тела в связи с подтверждаемым наличием корреляций между концентрацией IgG к пищевым антигенам, дисбалансом провоспалительных цитокинов, реологических и метаболических показателей. Эти данные могут служить биомаркерами риска начала метаболического синдрома.

Артериальная гипертензия (АГ) представляет одно из жизнеугрожающих заболеваний и требует постоянной антигипертензивной терапии, в том числе телмисартаном. Однако влияние тел-мисартана у пожилых пациентов с АГ на системный интерлейкиновый статус из-за ограниченного числа ранее анализированных интерлейкинов нуждается в дальнейшем изучении. Цель исследования — изучение иммунного плейотропного эффекта телмисартана у пациентов с АГ по широкому спектру провоспалительных и противовоспалительных интерлейкинов крови. Исследование базируется на обследовании 74 пациентов в возрасте 60-74 лет, страдающих АГ, получавших телмисартан по 80 мг/сут в утренние часы. Иммунный ответ на воздействие телмисартана изучен через 6 месяцев по содержанию в крови различных интерлейкинов. Последние определялись методом проточной цитометрии на аппарате Becton Dickinson FACS Canto 2 (США). Плейотропный иммунный эффект телмисартана на системный интерлейкиновый статус пациентов 60-74 лет с АГ установлен по статистически значимому изменению значительного количества провоспалительных и противовоспалительных интерлейкинов. У пациентов с АГ через 6 месяцев после применения телмисарта-на произошло статистически значимое снижение в крови IL-1P до 8,1±0,6 пг/мл против исходных 10,5±0,8 пг/мл, IL-2 до 8,6±08 пг/мл против исходных 11,8±1,1 пг/мл, IL-6 до 18,4±0,5 пг/мл против исходных 21,2±0,7 пг/мл, IL-8 до 3,5±0,6 пг/мл против 5,4±0,5 пг/мл. Статистически значимо у пациентов пожилого возраста, страдающих АГ, через 6 месяцев антигипертензивной терапии телмисарта-ном произошло уменьшение на системном уровне содержания в крови TNFa до 5,3±0,5 пг/мл против исходного 6,8±0,4 пг/мл. Одновременно на фоне реализованной антигипертензивной терапии тел-мисартаном у пациентов 60-74 лет с АГ повысился уровень провоспалительных системных интерлейкинов и особенно IL-4 с 4,6±0,5 пг/мл до 7,0±0,6 пг/мл. Все это позволяет считать, что телмисартан обладает существенным иммунным плейотропным эффектом у пациентов с АГ, установленном по изменению большинства системных интерлейкинов. Установлены плейотропные эффекты телмисарта-на у пациентов с АГ, выражающиеся в достоверном снижении уровня IL-1 в, IL-2, IL-6, IL-8, TNFα и повышении IL-4, IL-10. Полученные результаты показали значительный плейотропный эффект тел-мисартана у пациентов с АГ по большому количеству интерлейкинов, что расширяет представления об иммунном воспалении при обсуждаемой патологии и его коррекции телмисартаном.

В настоящее время в стоматологической практике широко используемым базисным материалом для изготовления съемных протетических конструкций является акриловая пластмасса на основе полиметилметакрилата. Для увеличения срока службы съемных пластиночных протезов нами разработана технология изготовления нового комбинированного базиса полного съемного протеза с применением композиционного материала на основе стекловолокна. Представляет интерес оценка вероятности активации воспалительного процесса при использовании конструкционных полимерных и композитных материалов в стоматологической практике. Цель исследований — в эксперименте ex vivo изучить изменение уровня продукции ключевых цитокинов (интерферона-Y и интерлейкина-4) мононуклеарными лейкоцитами человека, в присутствии акриловой пластмассы и композиционного материала на основе стекловолокна.

Объектом исследования служили лейкоциты периферической венозной крови, полученной от 13 практически здоровых мужчин-добровольцев (средний возраст — 24 года). Выделение лейкоцитов проводили из гепаринизированной крови путем градиентного центрифугирования. Культивирование клеток осуществляли в пластиковых круглодонных 96-луночных планшетах во влажной атмосфере с 5% СО2 при 37 °С в течение 72 ч. По окончании срока инкубации культуральную жидкость стягивали и замораживали для последующего определения концентрации цитокинов с помощью наборов реагентов для иммуноферментного определения концентрации интерферона-Y и интерлейкина-4 производства ЗАО «Вектор-Бест». В исследовании использовали образцы конструкционных материалов двух типов: из акриловой пластмассы «Фторакс», полученные по технологии компрессионного прессования методом горячей полимеризации, в заранее заготовленных формах; из композиционного материала Trinia, полученные методом компьютерного фрезерования. В качестве контроля служили образцы аналогичной формы и размера, изготовленные из стекла. Статистический анализ проводился с помощью программного пакета Statistica 7.0. Использовали критерий Стьюдента и Манна-Уитни для оценки значимости различий. Критический уровень значимости (p) при проверке статистических гипотез принимался равным 0,05.

Продукция IFNγ в присутствии материала Trinia значительно ниже, чем в пробах со стеклом и с образцами из акриловой пластмассы. При этом численность жизнеспособных клеток существенно не отличалась от таковой в контрольных пробах. Продукция IL-4 в пробах с полимерными материалами и стеклом статистически значимо не различалась. Выявлено, что при расчете индивидуальных индексов стимуляции для лимфоцитов периферической крови только одного добровольца выражено стимулирующее влияние используемых в настоящем исследовании материалов. Полученные результаты указывают, что в присутствии материала Trinia проявляется противовоспалительная активность лейкоцитов, когда уровень продукции IFNγ несколько снижается, а продукция IL-4 не меняется.

Таким образом, в ходе проведенных исследований апробирован метод персонализированной оценки реактивности полимерных материалов, использующихся в качестве конструкционных для протезирования. Отсутствие повышения продукции ключевых цитокинов лимфоцитами может рассматриваться как благоприятный признак, свидетельствующий об отсутствии активации воспалительного процесса при использовании материала Trinia в качестве компонента базисов съемных протезов.

Холодовой стресс индуцируется действием низкой температуры окружающей среды (воздух, вода) и оказывает существенное влияние на функционирование иммунной системы — модулирует пролиферацию лимфоцитов, секрецию цитокинов клетками врожденного и адаптивного иммунитета, экспрессию мРНК. Однако механизмы, ответственные за влияние холода на иммунитет остаются неясными. Ранее нами было показано, что холодовой стресс выражено модулирует реакции врожденного иммунитета — приводит к усилению секреции макрофагами активных форм кислорода, IL-10, но не влияет на продукцию провоспалительных цитокинов IL-1β и TNFα. Цель работы — оценить влияние острого холодового стресса на показатели адаптивного иммунитета: антителогенез, продукцию спленоцитами мыши IL-2, IL-4, IFNγ, а также на продукцию IL-12 и кислородных радикалов с учетом временной динамики. Объектом исследования служили белые мыши самцы. Животные были разбиты на следующие группы: 1-я — контрольная, 2-я — холодовой стресс — 20 °С 10 мин, 3-я — холодовой стресс — 20 °С 60 мин. Одну часть животных через 1 ч после окончания экспериментальных воздействий внутрибрюшинно сенсибилизировали эритроцитами барана (10⁸ клеток в 0,2 мл в 0,9% NaCl). На 5-е сутки оценивали в селезенке число антителообразующих клеток методом локального гемолиза в геле агарозы. Другую часть мышей — через 1 и 6 ч после окончания стрессорного воздействия выводили из эксперимента, выделяли селезенку и клетки перитонеальной полости. Определение концентрации цитокинов в супернатантах проводили с использованием иммуноферментных тест-систем, продукцию активных форм кислорода перитонеальными макрофагами оценивали с помощью реакции люминолзависимой хемилюминесценции. Установлено, что 10- и 60-минутный холодовой стресс не оказывали статистически значимого влияния на антителогенез, спонтанную и стимулированную продукцию IL-4 спленоцитами, на фоне 60-минутного стресса наблюдалось угнетение продукции IL-2. В то же время оба варианта стресса угнетали продукцию спленоцитами IFNγ, у животных, подвергнутых 60-минутному охлаждению, было выявлено также снижение продукции IL-12. Помимо этого, 60-минутный стресс приводил к выраженному и стойкому увеличению продукции кислородных радикалов, которые могут оказывать негативное влияние на развитие иммунных реакций. Таким образом, острый холодовой стресс приводил к угнетению продукции спленоцитами цитокинов Т-клеточного звена иммунитета.

Генетические факторы играют важную роль в развитии и прогрессировании многих патологий, к числу которых относится саркоидоз легких. Это системное воспалительное гранулематозное заболевание неизвестной этиологии, характеризующееся образованием в пораженных тканях эпителиоидноклеточных гранулем. Интенсивность развития воспалительного ответа может зависеть от многих факторов, в том числе от генетического фона организма. Генетический фон может определять не только восприимчивость людей к возникновению саркоидоза легких, но также клинические характеристики протекания данного заболевания и силу развития воспалительных реакций со стороны иммунной системы. В числе генетических факторов может выступать аллельный полиморфизм генов. У носителей определенных аллельных вариаций генов можно наблюдать либо увеличение, либо уменьшение продукции провоспалительных факторов. Среди генов-кандидатов, чьи продукты могут быть вовлечены в восприимчивость людей к формированию гранулемы — гены, кодирующие Toll-подобные рецепторы (Toll-like receptors, TLRs). Сведения о связи носительства аллельных вариаций указанных генов с восприимчивостью к саркоидозу легких, а также вклад полиморфных вариантов этих генов в развитие, прогрессирование и терапию данного заболевания еще весьма малочисленны и зачастую противоречивы.

Цель исследования заключалась в изучении связи полиморфизма Arg753Gln (rs574308) гена Toll-подобного рецептора 2 (TLR2) с риском развития саркоидоза легких.

Обследовано 253 человека (122 больных русской национальности (проживающих в Республике Карелия)) с диагнозом «морфологически верифицированный саркоидоз с поражением легких» (ср. возраст — 41,00±12,56 года) и 131 здоровый донор (контрольная группа) (ср. возраст — 44,00±14,23 года). Исследовано распределение аллелей и генотипов по полиморфному маркеру Arg753Gln (rs574308) гена TLR2 в группе больных саркоидозом легких и в группе здоровых доноров. Идентификацию аллелей данного полиморфного маркера проводили методом полимеразной цепной реакции с последующим анализом длин рестрикционных фрагментов (ПЦР-ПДРФ метод).

Статистически значимых различий в распределении частот аллелей и генотипов полиморфному маркеру Arg753Gln (rs574308) гена TLR2 между контрольной группой и группой больных саркоидозом легких не выявлено: χ² = 2,0, df = 1, p = 0,158 и χ² = 2,19, df = 2, p = 0,140 соответственно.

Полиморфный маркер Arg753Gln (rs574308) гена Toll-подобного рецептора 2 не связан с риском развития саркоидоза легких у русского населения Республики Карелия.

Повышенная концентрация внеклеточной ДНК (внДНК) в циркулирующей крови человека и животных является признаком воспалительных состояний и отличительной характеристикой различных патофизиологических процессов, протекающих в организме. Цель — исследовать возможную роль фактора некроза опухоли (TNFα) в изменениях содержания внДНК периферической крови в ответ на экспериментально созданную ситуацию системного воспаления. В работе использовали 40 самок мышей-гибридов (C57Bl/6xDBA/2)F1 в возрасте 6-8 недель. Концентрацию внДНК, и ее отдельных фракций, определяли с помощью флуоресцентного красителя PicoGreen. Динамику воспалительного процесса оценивали через 4, 8, 11 и 24 часа после введения LPS.

Показан значимый рост уровня внДНК плазмы крови при одновременном падении уровня внДНК связанной с поверхностью клеток под действием липополисахарида Е. coli (LPS). Отношение количества внДНК, связанной с поверхностью клеток, к суммарной внДНК дозозависимо снижается уже через 4 часа после введения животным LPS, что позволяет считать это соотношение характерным признаком нетоза нейтрофильных гранулоцитов при развитии острого воспаления. При одновременном введении с LPS рекомбинантного белка, нейтрализующего действие TNFα, описанные эффекты существенно подавляются, в то время как увеличенное поступление нейтрофилов в ткани определяются неким иным фактором, прямо не связанным с продукцией этого цитокина.

На основании полученных данных предлагается гипотеза о том, что индукция нетоза воспалительными стимулами вызывает увеличение концентрации внДНК в плазме крови не только за счет вновь возникающей при нетозе нейтрофилов экстрацеллюлярной ДНК, но и вследствие освобождения, под действием выделяющихся при нетозе протеаз, той фракции внДНК, которая ранее была прочно связана с мембранами клеток во всех тканях организма.