Представлен краткий аналитический обзор, посвященный распространению, этиологии, патогенезу, профилактике и лечению заболеваний COVID-19 и свиного гриппа, вызвавших пандемии в XXI веке. Обе пандемии вызваны респираторными вирусами, но относящимися к разным семействам, Coronaviridae (SARS-CoV-2) и Orthomyxoviridae (вирус гриппа A(H1N1)pdm09). Чаще входными воротами обоих патогенов являются эпителиальные клетки верхних дыхательных путей. Иногда эти вирусы инфицируют эпителий кишечного тракта. Поскольку симптомы гриппа и COVID-19 схожи, постановка диагноза должна обязательно базироваться на результатах лабораторных анализов, в первую очередь данных ПЦР о наличии РНК вируса в клиническом материале. Описаны различия и сходство в иммунопатогенезе заболеваний. Указываются основные, на взгляд автора, особенности в протекании пандемий, вызванных коронавирусом SARS-CoV-2 и вирусом гриппа A(H1N1)pdm09. Наличие гриппозной вакцины и этиотропных химиопрепаратов, а также предсуществующего иммунитета к вирусу гриппа у пожилых людей в 2009 году оказали существенное влияние на заболеваемость и смертность во время пандемии гриппа. Наличие антител к вирусу A(H1N1)pdm09 в сыворотках пожилых людей до начала пандемии объясняется тем, что вирус А(H1N1), циркулировавший до 1957 года, по антигенным свойствам был похож на вирус A/California/07/09 (H1N1)pdm09. В связи с этим заболеваемость и смертность среди людей старше 65 лет (основная группа риска) была низкой, а чаще болели дети и молодые взрослые. Ситуация с COVID-19 противоположная: смертность значительно выше среди пожилого населения, дети и молодые взрослые, как правило, переносят инфекцию бессимптомно или в легкой форме. Высказывается предположение о наличии иммунитета к вирусу SARS-CoV-2 у жителей Юго-Восточной Азии: возможно, коронавирусы, по антигенным свойствам подобные пандемическому, циркулировали в этом регионе, бессимптомно инфицируя людей, пока один или несколько вирусных вариантов не стали причиной тяжелого заболевания, вызвав вспышку COVID-19 в Ухани.

В последние годы увеличивается частота офтальмологических осложнений при аутоиммунных заболеваниях, как в связи с ростом числа аутоиммунной патологии во всем мире, так и в связи с появлением новых диагностических возможностей. По оценкам ВОЗ на 2010 год во всем мире число пациентов всех возрастов с нарушениями зрения оценивается в 285 миллионов человек, из которых 39 миллионов являются слепыми. Среди аутоиммунных болезней существуют нозологии, при которых офтальмологическая патология встречается более часто, такие как сахарный диабет 1-го типа, саркоидоз и болезнь Бехчета. К наиболее распространенным осложнениям со стороны глаз при данных болезнях относятся увеит и синдром сухого глаза. Цель – описать осложнения со стороны глаз при сахарном диабете 1-го типа, саркоидозе и болезни Бехчета. Обозначить важность исследования данных болезней и разработки единых критериев оказания помощи больным офтальмологического профиля. В обзоре рассмотрены основные звенья патогенеза, этнические и генетические факторы возникновения глазных патологий, основные вопросы своевременной диагностики и применение различных схем консервативной терапии. В ходе анализа литературы были представлены исследования, демонстрирующие возможную аутоиммунную природу таких глазных патологий, как увеит и синдром сухого глаза при таких заболеваниях, как сахарный диабет 1-го типа, саркоидоз, болезнь Бехчета. Несмотря на проводимые исследования, в изучении патогенеза остается много нерешенных вопросов, как и в назначении терапии. Поэтому на сегодняшний день лечение аутоиммунных болезней глаз представляет собой сложную задачу, включая в себя купирование основного заболевания и местную терапию органа зрения. В связи с тем, что иммунопатологические нарушения, лежащие в основе описанных выше аутоиммунных заболеваний, требуют дальнейшего изучения, в настоящий момент не представляется возможным точно прогнозировать течение болезни глаз, возможные осложнения и исходы. В настоящее время нет достаточных сведений для создания единых критериев лечения увеита и синдрома сухого глаза при аутоиммунных болезнях. Их дальнейшая разработка может способствовать корректировке принципов оказания медицинской помощи для улучшения качества лечения и качества жизни пациентов. Необходимы дальнейшие исследования и накопление данных по изучаемому вопросу.

Показатели заболеваемости и смертности при инвазивных микозах предопределяют необходимость совершенствования методов их своевременной диагностики с оценкой иммунного статуса пациентов. Оценка иммунного статуса пациента позволяет клиницисту прогнозировать развитие и течение грибковых инфекций. В то же время выявление условно-патогенного микоза у пациента без иммунодефицита должно определять необходимость поиска скрытого иммунного дефекта. Определение причины таких иммунодефицитов может способствовать выработке эффективной стратегии как этиотропной, так и иммунной терапии пациентов с инвазивными микозами. В настоящее время функции регуляторных Т-лимфоцитов, поддерживающих иммунологическую толерантность, при грибковой инфекции продолжают оставаться не полностью изученными. В представленном обзоре продемонстрированы данные исследований на экспериментальных моделях, свидетельствующие о том, что регуляторные Т-лимфоциты способны подавлять иммунные ответы на грибки посредством стимулирования иммуносупрессивной среды. Определено, что регуляторные Т-лимфоциты используют Toll-like рецептор 2 для достижения иммуносупрессии при кандидозных инфекциях. Баланс количества и функции регуляторных Т-лимфоцитов имеет существенное значение для элиминации грибковых патогенов и защиты от постинфекционных иммунопатологических состояний. Установлено, что регуляторные Т-лимфоциты обеспечивают защиту на ранней стадии кандидозной инфекции, когда в результате подавления интерлейкина 2 (IL-2) они усиливают дифференцировку T-хелперов 17 (Th17) и клиренс грибка. При этом на более поздних стадиях инфекции регуляторные Т-лимфоциты оказывают ингибирующий эффект. Баланс между Th17 и регуляторными Т-лимфоцитами в слизистой оболочке признан основным фактором для разграничения комменсального носительства и инфекции Candida albicans. Представлены результаты исследования, свидетельствующие о том, что при диссеминированном кандидозе экспансия регуляторных Т-лимфоцитов стимулирует Th17- клеточный ответ, управляющий течением заболевания. Механизмы, контролирующие гомеостаз регуляторных Т-лимфоцитов, являются основными для обеспечения эффективной защиты от патогенов, а также для контроля иммунопатологических состояний, связанных с кандидозной инфекцией. В обзоре представлены данные, позволившие установить роль трансформирующего фактора роста бета 1 (TGF-β1) в повышении жизнеспособности регуляторных Т-лимфоцитов, что соотносится с выраженной иммуномодулирующей ролью этих клеток во время более поздней фазы кандидозных инфекций слизистой оболочки. Продемонстрированы также данные о том, что во время криптококковой инфекции индуцируются легочные регуляторные Т-лимфоциты, которые преимущественно подавляют T-хелперы второго типа (Th2), поддерживая тем самым ее течение. Экспансия регуляторных Т-лимфоцитов при введении комплекса интерлейкина 2/ антител к интерлейкину 2 (IL-2/антиIL-2) во время криптококковой инфекции приводила к снижению выработки иммуноглобулина E (IgE) и уменьшению аллергического воспаления дыхательных путей. Необходимо отметить, что уточнение прогностического значения регуляторных Т-лимфоцитов при грибковой инфекции у человека может стать основой для разработки основных принципов адресной иммунотерапии.

Бактериальные внеклеточные микровезикулы (БМВ) секретируются патогенными, непатогенными и условно-патогенными бактериями. БМВ представляют собой сферические органеллы с бислойной мембраной, содержащие различные грузы: липополисахариды, патоген-ассоциированные молекулярные паттерны (PAMP), ДНК, РНК, сигнальные молекулы, белки, факторы устойчивости к антибиотикам, факторы вирулентности и токсины, обеспечивающие различные варианты иммунного ответа и благоприятствующие выживанию и распространению патогена в организме. Функции, связанные с выделением везикул, играют важную роль в способности микроорганизмов вызывать различные заболевания. БМВ помогают бактериям уклоняться от иммунной реакции хозяина, обеспечивают коммуникацию, выживание в стрессовой среде внутри хозяина во время инфекции, участвуют в формировании биопленок, а также помогают получить питание в среде с недостатком питательных веществ. Гетерогенность механизмов биогенеза обуславливают различия переносимых БМВ и их характеристик, включая степень вирулентности. Проникновение БМВ в клетки хозяина может осуществляться с помощью нескольких механизмов и способствует активации врожденных и адаптивных иммунных реакций. Обзор сфокусирован на исследованиях взаимодействия БМВ и различных типов эукариотических клеток, включая нейтрофилы, дендритные клетки, макрофаги, эпителиальные, эндотелиальные клетки. В зависимости от вида бактерий, типа клетки-мишени и количества везикул такое взаимодействие может привести к различным ответам: неиммуногенным, провоспалительным, цитотоксическим. Представлены субклеточные и молекулярные механизмы, связанные с участием внеклеточных микровезикул, в модулировании иммунного ответа хозяина. Стимуляция иммунного ответа обеспечивается усилением секреции провоспалительных цитокинов и хемокинов. В ряде случаев БМВ используют механизмы для ускользания от иммунного надзора: синтез противовоспалительных цитокинов, нарушение и ограничение фагоцитоза и хемотаксиса макрофагов, усиление протеолитического расщепления CD14 на поверхности макрофагов, нарушение антиген-презентирующей функции дендритных клеток и подавление индукции пролиферации Т-клеток, уменьшение интенсивности синтеза провоспалительных цитокинов, избегание прямого взаимодействия с клетками иммунной системы хозяина, разрушение нейтрофильных ловушек. Это позволяет выживать клеткам бактерий в организме человека и увеличить инвазивный потенциал, а также снижать избыточность воспалительных реакций, которые могут привести как к гибели самого патогена, так и к жизнеугрожающим повреждениям тканей и органов организма-хозяина. Дальнейшие исследования этих механизмов позволят получить новые и улучшить уже имеющиеся терапевтические подходы в лечении инфекционных заболеваний.

Участие тромбоцитов в развитии сепсиса наглядно иллюстрируют гемокоагуляционные нарушения и часто регистрируемая тромбоцитопения. У больных сепсисом тромбоцитопения развивается быстро, минимальные количества пластинок регистрируются на четвертый день наблюдения, после чего количество тромбоцитов обычно повышается. Длительно регистрируемая тромбоцитопения и отсутствие относительного прироста тромбоцитов определены как предикторы смерти больных. Механизмы развития тромбоцитопении при сепсисе очень разнообразны, но преобладающими являются периферические процессы, так называемое «потребление тромбоцитов», определяемое их активацией, хемотаксисом и изоляцией в микроциркуляторном русле. Недавно выявлен механизм ускоренного удаления из циркуляции тромбоцитов с десиалированнными поверхностными гликопротеинами. Сиалидазы, также известные как нейраминидазы, широко представлены у вирусов и бактерий, причем фармакологическая ингибиция сиалидаз способна противостоять тромбоцитопении при инфекционном процессе. Выявлена ключевая роль тромбоцитов в развитии септического шока. Секвестрация тромбоцитов в микрососудах легких и мозга (которая проявляется как тромбоцитопения) сопровождается быстрым выделением серотонина, который и обеспечивает развитие основных клинических проявления, таких как снижения АД, ЧСС и увеличение проницаемости капилляров. Для противодействия резкому выбросу этого медиатора предпринимаются попытки фармакологически ингибировать транспортер SERT селективными ингибиторами обратного захвата серотонина. Тромбоциты являются ключевыми участниками патогенеза таких проявления синдрома полиорганной недостаточности, как острое почечное повреждение, острый респираторный дистресс-синдром, дисфункция миокарда и сепсис-ассоциированная энцефалопатия. Для восстановления нарушенной сосудистой проницаемости при этих состояниях, особенно сепсис-ассоциированной энцефалопатии, исследуется фармакологический миметик рецепторов S1P. В обзоре обозначены возможные патогенетически значимые мишени, которые могут быть использованы для фармакологической коррекции состояний, связанных с сепсисом и сопутствующей тромбоцитопенией.

Как показали проведенные исследования, длительный профессиональный контакт с химическими ксенобиотиками способствует сенсибилизации иммунной системы и развитию типовых иммунопатологических процессов – аллергии и аутоиммунной патологии. Характер и выраженность нарушений иммунной системы зависит от спектра и длительности воздействия неблагоприятных факторов и особенностей профессиональной деятельности на химически опасных объектах. При исследовании структурно-функциональных изменений клеточного, гуморального и некоторых факторов врожденного иммунитета, у людей, работающих и проживающих в районах с неблагоприятной экологической обстановкой, выявлен ряд иммунологических нарушений, которые можно характеризовать как вторичные иммунодефицитные состояния, клиническими проявлениями которых является увеличение частоты острых респираторных инфекций и других хронических заболеваний. Профилактике и лечению вторичных иммунодефицитных состояний, при которых наблюдается снижение количества лимфоцитов, экспрессирующих CD3, CD4, CD8, в настоящее время уделяется большое внимание. Положительный опыт применения высокоэффективных лекарств на основе регуляторных пептидов тимуса, являющихся биорегуляторами, воздействующими на различные звенья гомеостаза для коррекции нарушений иммунитета, вызванных воздействием радиации и других отравляющих веществ, определил цель исследования. Цель исследования – оценить изменения иммунитета и эффективность иммунокоррекции с применением иммунотропных препаратов: Тимоген спрей назальный дозированный и Цитовир-3 капсулы, у людей, работающих и проживающих в условиях повышенной химической загрязненности. Обследованы 249 человек в возрасте от 18 лет до 63 лет из числа работников ГКУ «Полигон "Красный Бор"», имеющие длительный профессиональный контакт с компонентами промышленных токсичных отходов. Группу 1 составили сотрудники администрации, в группу 2 вошли водители грузового спецтранспорта. Контрольной группой были 137 работников автопредприятий Санкт-Петербурга. Продолжительность катамнестического наблюдения составила 1 год. Пациенты с выявленным снижением показателей клеточного иммунитета получили иммунотропные препараты на основе Альфа-глутамил-триптофана (Тимоген спрей назальный дозированный (Тимоген) – 62 человека и комбинированный препарат Цитовир-3 капсулы (Цитовир) – 31 человек). Через 14 дней после окончания курса проведено повторное иммунологическое исследование. В процессе иммунотропной терапии у обследуемых лиц отмечено увеличение относительного содержания субпопуляций CD3⁺, CD4⁺, CD8⁺, нормализация нарушений функциональной активности кислородзависимого метаболизма системы полиморфноядерных нейтрофильных гранулоцитов в НСТ-тесте, а также гармонизация содержания сывороточных иммуноглобулинов. Катамнестическое наблюдение в течение одного года показало высокую эффективность применения препаратов, проявлявшуюся снижением уровня острой инфекционной и обострений хронической заболеваемости органов дыхания и желудочно-кишечного тракта. В группе 1 со стажем от 1 до 5 лет у пациентов, получавших Тимоген, заболеваемость частыми ОРВИ снизилась на 37%, а бронхолегочной патологией – на 25% от исходного уровня. У пациентов 2-й группы с длительным стажем работы (более 5 лет) в неблагоприятном районе, получавших Тимоген, снижение уровня острой респираторной заболеваемости было в 4,0 раза, других заболеваний органов дыхания в 1,5 раза, органов пищеварения в 1,75 раз. У людей 1-й и 2-й групп со стажем работы до 1 года, получивших Цитовир-3, уровень заболеваемости ОРВИ снизился в 1,95 и 2,0 раза соответственно. Показано, что своевременное выявление нарушений иммунной системы, индуцированных воздействием комплекса факторов химически опасного объекта, и проведение селективной иммунокорригирующей терапии способствует снижению уровня острой и хронической заболеваемости у лиц, работающих в экологически неблагоприятных условиях.

С целью исследования иммуномодулирующих свойств оригинального комплекса биофлавоноидов при циклофосфан-индуцированных нарушениях иммунитета были изучены морфометрические показатели тимуса и селезенки, количество лейкоцитов периферической крови, пролиферативная активность клеток лимфоидных органов, выраженность реакции гиперчувствительности замедленного типа к Т-зависимому антигену, а также дифференцировочная активность гемопоэтической стволовой клетки костного мозга экспериментальных животных на фоне циклофосфан-индуцированной иммуносупрессии после курсового введения им комплекса биофлавоноидов. Суспензию комплекса биофлавоноидов принудительно вводили мышам-самцам (СВАхC57Bl/6) F1 12-14-недельного возраста из расчета 2 мг/мышь (80 мг/кг), per os, c помощью зонда в желудок, ежедневно в течение 14 суток. Цитостатическую иммуносупрессию воспроизводили однократным внутрибрюшинным введением животным циклофосфана. Пролиферативную активность клеток селезенки и тимуса определяли стандартным методом, при включению Н³ тимидина в 72-часовую культуру клеток. Клеточный иммунный ответ определяли по интенсивности развития реакции гиперчувствительности замедленного типа в ответ на введение эритроцитов барана. Количество гемопоэтических клеток-предшественников оценивали при культивировали клеток костного мозга в метилцеллюлозной среде. В результате проведенных экспериментов было показано, что на фоне курсового введения комплекса биофлавоноидов супрессивные эффекты циклофосфана нивелировались в отношении абсолютной и относительной массы лимфоидных органов и количества лейкоцитов периферической крови. При этом продемонстрировано снижение супрессивного влияния циклофосфана на спонтанную пролиферативную активность клеток селезенки, митоген-индуцированную пролиферацию тимоцитов и спленоцитов, интенсивность реакции гиперчувствительности замедленного типа, значения которых соответствовали таковым у интактных животных. У животных после курсового введения комплекса биофлавоноидов выявлено также увеличение количества ранних гемопоэтических клеток-предшественников. Установленное в настоящем исследовании нивелирование супрессивного влияния циклофосфана на клеточный иммунный ответ, пролиферативную активность клеток иммунной системы, а также стимуляция функциональной активности гемопоэтической стволовой клетки, свидетельствуют о существенном иммуно-гемопоэзмодулирующем потенциале оригинального комплекса биофлавоноидов и является экспериментальным доказательством перспективности его использования в качестве адъювантного средства при лечении больных онкологического профиля.

Многие патогенные микроорганизмы экспрессируют аргининдеиминазу – фермент, который катализирует гидролиз L-аргинина в цепи биохимических реакций, направленных на синтез АТФ в бактериальных клетках. L-аргинин является условно заменимой, протеиногенной аминокислотой и играет важную роль в регуляции функций клеток иммунной системы в организме млекопитающих. Истощение L-аргинина может приводить к ослаблению иммунной защиты. Многие патогенные микроорганизмы используют стратегию истощения L-аргинина в микроокружении клеток организма хозяина для улучшения условий диссеминации. Бактериальная аргининдеиминаза может являться фактором патогенности, действие которого направлено на дисрегуляцию процессов воспаления и иммунного ответа. В целом влияние аргининдеиминазы на клетки иммунной системы может быть обусловлено нарушением продукции регуляторных провоспалительных молекул, таких как NO, и, связанными с этим, нарушениями активации, миграции и дифференцировки отдельных популяций лейкоцитов. Цель данного исследования состояла в изучении влияния аргининдеиминазы на формирование воспалительного клеточного инфильтрата при стрептококковой инфекции в модели воздушного кармана у мышей. Исследование проводили с использованием S. pyogenes M49-16, экспрессирующего аргининдеиминазу и его изогенного мутанта S. pyogenes M49-16delArcA с инактивированным геном аргининдеиминазы. В работе с помощью методов проточной цитометрии на разных сроках инфекции проводили анализ субпопуляционного состава воспалительного инфильтрата у мышей, зараженных исходным штаммом S. pyogenes M49-16 и его изогенным мутантом S. pyogenes M49-16delArcA. Было показано, что воспалительная реакция достигала пика развития через 6 часов и была выражена сильнее у мышей, инфицированных мутантным штаммом, о чем свидетельствовало одновременное и более выраженное повышение абсолютного количества лейкоцитов всех популяций в очаге воспаления у этой группы мышей по сравнению с мышами, инфицированными исходным штаммом. Несмотря на снижение абсолютного количества лейкоцитов в составе воспалительного инфильтрата в обеих группах мышей на сроке 24 часа, в группе мышей, зараженных мутантным штаммом, эта тенденция была выражена сильнее. Сравнение формирования воспалительного инфильтрата у мышей, зараженных исходным и мутантным штаммами, показало, что аргининдеиминаза может являться фактором патогенности, приводящим к дисрегуляции защитных реакций врожденного иммунитета за счет нарушения миграции лейкоцитов в очаг инфекции.

В последнее время активно изучаются механизмы распознавания и эффекторных реакций звеньев иммунной системы в инициации и поддержании иммуно-медиированнного воспаления и повреждения ткани при воспалительных заболеваниях кишечника, к которым относятся болезнь Крона и язвенный колит. Имеющиеся данные свидетельствуют о том, что аномальный иммунный ответ против микроорганизмов кишечной флоры является причиной заболевания у генетически восприимчивых людей. Несмотря на накопившиеся данные об особенностях иммунных нарушений при язвенном колите и болезни Крона, остаются открытыми вопросы вовлечения минорных популяций лимфоцитов и различных функционально активных молекул, которые играют фундаментальную роль в распознавании и инициации иммунного ответа и могут рассматриваться как биомаркеры патологического процесса при воспалительных заболеваниях кишечника. Наибольший интерес представляют популяции Т-лимфоцитов с γδТ-клеточным рецептором, В1-клетки и NKT-лимфоциты; среди функционально активных молекул рассматриваются TLRs (toll-like receptors), CD89, CD314 и др. Принимая во внимание прогресс в изучении природы распознавания и активации клеток иммунной системы, в работе представлена фенотипическая и функциональная характеристика основных и минорных популяций лимфоцитов периферической крови 25 пациентов с воспалительными заболеваниями кишечника, находившихся на стационарном лечении в хирургическом отделении учреждения здравоохранения «Минская областная клиническая больница» (Республика Беларусь) в период 2018-2020 гг. Выявленные изменения в фенотипе лимфоцитов периферической крови пациентов с воспалительными заболеваниями кишечника позволяют предположить различный иммунологический профиль, превалирующий в механизмах повреждения при болезни Крона и язвенном колите: у пациентов с болезнью Крона в патогенез заболевания вовлекаются В1-лимфоциты с фенотипом CD19⁺CD5⁺, NK-клетки в сочетании с увеличением CD56^bright популяции и NK-Т-клетки с провоспалительной/регуляторной направленностью, в то время как при язвенном колите патогенетическую роль в поддержании хронического воспаления играют Т-, В-, NK-лимфоциты с провоспалительным фенотипом и Т-лимфоциты с γδ Т-клеточным рецептором. Учитывая функциональную значимость активационных рецепторов, количество TLR4- и CD89-позитивных клеток может использоваться для разработки иммунологических критериев/биомаркеров оценки терапевтической эффективности новых лекарственных средств. Изучение взаимодействия между различными компонентами врожденной и адаптивной иммунной системы откроет новые перспективы в понимании иммунологических нарушений, связанных с хроническим воспалением желудочно-кишечного тракта.

Рак мочевого пузыря (РМП) является седьмым по частоте злокачественным новообразованием у мужчин и одиннадцатым в мире. У 75% больных РМП выявляется рак, не инвазирующий мышечный слой (РНИМС). Иммунотерапия БЦЖ (бациллой Кальметта-Герена) остается стандартным методом интравезикальной терапии при РНИМС. Точный механизм профилактики рецидивов посредством БЦЖ остается неизвестным. Целью данного исследования была оценка экспрессии гена NLR4 и уровней IL-1β в качестве возможных прогностических показателей рецидивов РНИМС и неудач БЦЖ-терапии и выявление различий в их уровнях между раком, инвазирующим мышечный слой (ИМС) и РНИМС, что может помочь в первичной дифференциальной диагностике. Данное исследование проводили в группе из 30 больных РНИМС и 17 пациентов с ИМС. Образцы мочи брали до операции в стерильные сосуды. У пациентов с РНИМС брали еще 4 образца (как указано ниже). Определение экспрессии гена NLR4 проводили в дооперационном материале при ИМС и в 4 образцах при РНИМС, т.е. в дооперационном образце, в материале, взятом через 4 часа после 3-й инстилляции БЦЖ и в образцах, собранных при дальнейшем наблюдении (3 и 6 мес. после операции). Отмечено статистически значимое повышение уровней экспрессии гена NLRP4 при РНИМС (CT=0,87±1,48), по сравнению ИМС (CT=2,82±2,07). Насколько нам известно, не найдено публикаций относительно сравнительной экспрессии генов при РНИМС и ИМС. Экспрессия генов в предоперационных пробах мочи была более высокой в случаях рецидивов, чем при их отсутствии. Далее, уровень экспрессии повышался до 21-кратного (по сравнению с предоперационным) в образцах, взятых после введения 3-й дозы БЦЖ Этот показатель значительно снижался до 1-кратного повышения над уровнем до операции через 3 мес. наблюдения и лишь в 0,9 раз к 6 мес. Экспрессия гена до операции в случаях отсутствия метастазов была намного ниже, нежели в случаях рецидивирования РМП. Отмечено 11-кратное повышение экспрессии гена после 3-й инстилляции БЦЖ и последующее снижение до 5,6-кратного в образцах, взятых через 3 мес. по сравнению с дооперационными образцами. Уровни IL-1β определяли при РНИМС и ИМС в образцах мочи до операции и при терапии БЦЖ в случаях РНИМС до и через 4 часа после 3-й дозы БЦЖ и на протяжении 3-месячного наблюдения этих случаев для анализа их возможного применения в первичном дифференциальном диагнозе между РНИМС и ИМС, а также в качестве прогностического фактора возможного рецидивирования при РНИМС. В целом уровень IL-1β был выше в дооперационных образцах (0,62±0,12 пг/мл) по сравнению с уровнями перед 3-й дозой индукционной БЦЖ-терапии (0,53±0,13 пг/мл). Его уровень был существенно выше через 4 часа после назначения 3-й дозы БЦЖ (1,96±0,62 пг/мл), нежели предыдущие значения. Эти показатели снижались до предоперационных уровней к 3 мес. наблюдения (0,57±0,099 пг/мл). Уровни IL-1β в образцах, собранных через 4 часа после 3-й дозы БЦЖ, были повышенными в случаях последующего метастазирования, нежели в случаях отсутствия метастазов. Эти значения снижались в обоих случаях и становились выше в нерецидивирующих случаях (0,64±0,05 пг/мл) по сравнению со больными, у которых уже были диагностированы метастазы к 3 мес наблюдения (0,45±0,05 пг/мл). В заключение, при отслеживании экспрессии гена NLRP4 и уровней IL-1β в ходе лечения БЦЖ в 30 случаях метастазирующего и неметастазирующего РНИМС отмечено достоверное статистическое различие обоих показателей в образцах, взятых после 3-й дозы БЦЖ, с повышением у пациентов с последующим развитием метастазов через 3 и 6 мес. Если эти предварительные результаты будут подтверждены в последующих больших когортных исследованиях, они станут перспективными для прогнозирования таких случаев с возможностью раннего планирования индивидуализированного лечения, избегая БЦЖ-терапии у пациентов, более подверженных рецидивам, от вероятных побочных эффектов лечения БЦЖ. Определение экспрессии NLRP4 и уровней IL-1β поможет в прогнозировании неудач БЦЖ-терапии, что сграет существенную роль для своевременного радикального хирургического вмещательства. При сравнении экспрессии NLRP4 и уровней IL-1β при РНИМС и ИМС были отмечены повышение значения в неинвазивных случаях. Этот результат может служить в качестве возможного диагностического подхода, что является существенной проблемой. Поэтому здесь необходимо установить граничные диагностические значения экспрессии генов и уровня цитокинов.

В культуре клеток мышиных гистиоцитов J774 и in vivo на мышах линии Balb/c исследовано влияние двуспиральной РНК (дсРНК) из дрожжей Saccharomyces cerevisiae на уровень экспрессии макрофагами генов, кодирующих рецептор TLR3, интерфероны альфа и бета (IFNα, IFNβ), ферменты 2’,5’-олигоаденилатсинтетазу (OAS) и протеинкиназу R (PKR). Продемонстрировано избирательное активирующее действие дсРНК в отношении генов рецептора TLR3 и противовирусных белков IFNα, IFNβ и OAS как в условиях in vitro, так и in vivo. В культуре клеток J774 наиболее высокая кратность индукции наблюдалась в отношении гена IFNβ – в 365-802 раза. Эффект стимуляции возрастал в зависимости от дозы дсРНК в диапазоне от 16,9 до 125 мкг/мл. Препарат в меньшей степени усиливал активность генов IFNα (более чем в 10 раз), TLR3 и OAS (в 3-4 раза), при этом уровень экспрессии данных генов существенно не зависел от дозы препарата. В перитонеальных макрофагах мышей стимулирующее влияние дсРНК носило дозозависимый характер. Максимальный активирующий эффект препарата был обнаружен при введении эффективной противовирусной дозы (0,5 мг/кг по дсРНК). Через 5 ч после внутрибрюшинного введения дсРНК наиболее высокий уровень синтеза мРНК был отмечен в отношении генов IFNα (в 54 раза), OAS (в 43 раза) и TLR3 (в 28 раз). Экспрессия гена IFNβ возрастала в меньшей степени (в 9 раз). Увеличение дозы препарата до 1,5 мг/кг приводило к снижению эффекта стимуляции. Уровень экспрессии генов IFNα, TLR3 и OAS в этом случае снижался в 2-4 раза по сравнению с меньшей дозой, а экспрессия гена PKR – в 5 раз относительно контроля. Через сутки после введения дсРНК наблюдалась тенденция к снижению транскрипции генов макрофагов по сравнению с первым сроком в обеих опытных группах. Ослабление генной активности у животных, получавших препарат в дозе 1,5 мг/кг, было выражено в меньшей степени. Более высокими в этот период оставались показатели транскрипции генов IFNβ, OAS и TLR3 (в 5-10 раз выше контрольных значений). Динамика транскрипции гена PKR значительно отличалась от экспрессии других генов в обеих экспериментальных системах. Препарат дсРНК в использованных дозах не оказывал выраженного стимулирующего влияния на экспрессию данного гена. Умеренное по величине повышение активности гена PKR в макрофагах мышей было отмечено лишь через сутки после внутрибрюшинного введения препарата. Как известно, критическими факторами активации гена PKR являются концентрация и длина молекул дсРНК. Способность к повышению экспрессии гена проявляется при низких концентрациях дсРНК (10-7 г/мл и ниже), при этом высокополимерные дсРНК ослабляют генную активность. Поскольку в проведенных нами экспериментах дозы и концентрации препарата дсРНК значительно отличались от вышеуказанных, в совокупности это могло повлиять на регуляцию транскрипции гена PKR в сторону ослабления стимулирующего эффекта.

В статье представлены результаты пятилетней работы лаборатории молекулярной диагностики клинико-диагностического центра «Охрана здоровья матери и ребенка» по диагностике первичных иммунодефицитов в Свердловской области. Лаборатория была организована в 2009 для верификации диагноза моногенных наследственных заболеваний, входящих в Программу массового неонатального скрининга в РФ: фенилкетонурия, муковисцидоз, классическая галактоземия. Со временем спектр диагностируемых нозологий расширялся, и с 2014 года лаборатория включила в работу новую группу заболеваний – врожденные ошибки иммунитета. Ежегодно областной регистр пациентов с первичными иммунодефицитами пополняется на 20-70 человек, что составляет от 15 до 43% всероссийского регистра. На 01.03.2020 в регистре пациентов с клиническим диагнозом «первичный иммунодефицит» состояло 526 человек, более половины из них (275) – дети до 18 лет. По расчетам специалистов частота выявленных случаев ПИД в Свердловской области составила 1:10 480 жителей, что свидетельствует не только о высоком уровне существующей службы клинической иммунологии, но и ожидаемо высокой частоте распространенности ПИД в регионе. Верификация диагноза «первичный иммунодефицит» у пациентов Свердловской области до 2014 года традиционно проводилась в московских клиниках (НМИЦ им. Д. Рогачева, МГНЦ). За 6 лет сотрудничества иммунологической службы области с медико-генетическим центром 47 детей получили молекулярно-генетическое подтверждение диагноза врожденных ошибок иммунитета в лаборатории областного клинико-диагностического центра «Охрана здоровья матери и ребенка». В статье показаны данные регионального регистра пациентов с разделением на нозологические формы иммунозависимой патологии и дано подробное описание выполненной верификации диагнозов у пациентов с различными ПИД. У 43 человек обнаружена делеция 22-й хромосомы (синдром Ди Джорджи), у 7 пациентов и 6 членов их семей найдены мутации в гене Btk (Х-сцепленная агаммаглобулинемия), у 1 ребенка подтвержден синдром Ниймеген, разрешен трудный для диагностики семейный случай дефицита аденозиндезаминазы. Результаты исследования вдохновляют авторов на дальнейшее расширение спектра диагностируемой патологии и дают уверенность в том, что развитие региональных лабораторий подобного уровня может изменить к лучшему алгоритм диагностического процесса ПИД в России в целом: от пренатального и неонатального скрининга до разработки генной терапии отдельных форм иммунозависимой патологии.

Тромбоциты являются центральным медиатором гемостаза, а также вносят вклад в воспаление и иммунные реакции организма. Известно, что тромбоциты оказывают непосредственное влияние на процесс формирования нейтрофилами экстрацеллюлярных сетей. При этом у пациентов с системной красной волчанкой наблюдаются разнонаправленные нарушения в функциональной активности тромбоцитов и нейтрофилов. Изменения в воспалительных и тромботических событиях могут рассматриваться предикторами неблагоприятного течения при системной патологии. Целью исследования являлась оценка возможной роли тромбоцитов в поддержании повышенной нетотической активности нейтрофилов у пациентов с системной красной волчанкой. Материалом для исследования служили тромбоциты и лейкоциты крови 29 пациентов с системной красной волчанкой. Исследовали влияние тромбоцитов in vitro на формирование аутологичными нейтрофилами экстрацеллюлярных сетей в условиях сокультивирования в течение 30 минут (витальный нетоз) и 150 минут (суицидальный нетоз), а также взаимосвязь между содержанием тромбоцитов в крови пациентов, их активностью и количеством сетей. Установлено, что выраженность и направление эффекта тромбоцитов на нетоз в культурах in vitro зависит от степени активности заболевания: при 1-й степени активности эффект тромбоцитов не отличается от здоровых лиц (интактные тромбоциты подавляют нетоз (р = 0,002), а индуцированные АДФ – эффекта не оказывают); при 2-й степени активности как интактные, так и активированные тромбоциты повышают нетотическую активность (р = 0,03 и р = 0,04 для интактных и активированных тромбоцитов соответственно); при 3-й степени активности заболевания тромбоциты не влияют на формирование NETs. У пациентов с системной красной волчанкой выявлена гиперактивация тромбоцитов, наиболее ярко выраженная при второй степени активности заболевания. Однако значимых взаимосвязей между количеством тромбоцитов в организме пациентов, их функциональной активностью (по результатам теста агрегации с АДФ) и показателями нетоза не выявлено. В то же время количество нейтрофильных сетей в кровотоке зависело от концентрации С-реактивного белка (r = 0,58; р = 0,02), титра аутоантител (anti-SS-A и anti-SS-B) (r = 0,66; р = 0,04 и r = 0,76; р = 0,02 соответственно), ревматоидного фактора (r = 0,73; р = 0,007) и циркулирующих иммунных комплексов (r = 0,68; р = 0,02). Полученные результаты указывают, что тромбоцитарнонейтрофильные взаимодействия не являются ведущей причиной повышения количества NETs при СКВ, значительно больший вклад вносят растворимые факторы аутоагрессии.

Цель исследования – изучение роли антител к каталазе в патогенезе, диагностике, прогнозе при склеродермическом процессе. Было обследовано 30 практически здоровых лиц, 38 больных системной склеродермией. Данные больные давали информированное согласие на участие в обследовании, которое проводилось в соответствии с принципами Хельсинкской декларации Международной медицинской ассоциации пересмотра 2013 года (ACR/ EULAR). Донорам и больным исследовали кровь на наличие антител к каталазе иммуноферментным методом с использованием магнитосорбентов при поступлении в стационар и перед выпиской. Было обнаружено, что у больных системной склеродермией наблюдается снижение оксидазной активности каталазы, а также повышение уровня антител к ней по сравнению с контрольной группой. Обнаружена статистически значимая закономерность зависимости концентрации иммуноглобулинов к каталазе от активности и характера течения основного заболевания. Для оценки активности патологического процесса при системной склеродермии применена комплексная оценка двух показателей: ферментативной активности и содержания антител к ней. Определено, что аутоантитела к каталазе чаще выявляются у больных системной склеродермией с высокой активностью болезни, подостром и острым течением заболевания, а также при вовлечении в патологический процесс легких, кожи, почек, суставов, нервной системы, что убедительно подтвердил корреляционный анализ. Особенно важно, что антитела к каталазе определяются на ранних начальных стадиях развития склеродермического процесса и имеют особенное диагностическое значение, а их динамика может лечь в основу оценки эффективности проводимой терапии. Изменение биохимической активности каталазы, увеличение титра антител к ней, являются дополнительными критериями диагностики системной склеродермии. Мониторинг этих показателей в условиях стационара способствует оценке эффективности и возможной коррекции терапии, что подтверждает включение в комплекс лечения экстракорпоральных методов лечения, таких как плазмаферез, а исследование в системе биохимической активности каталазы и антителообразования к ней развивают наши знания о развитии склеродермического процесса и ставят перед нами новые направления в этих исследованиях.

При вакцинации происходит стимуляция В-клеток, и в кровотоке на короткое время появляются активированные В-лимфоциты, которые относятся к плазмобластам. Плазмобласты также наблюдаются при некоторых вирусных инфекциях. Количество плазмобластов может являться показателем успешности вакцинации или диагностическим признаком продолжающейся инфекции. Как правило, плазмобласты представлены немногочисленной популяцией клеток, определение которой встречает некоторые трудности. В исследовании приняли участие 15 здоровых добровольцев, которые были однократно иммунизированы рекомбинантной вакциной против гепатита В. Для определения плазмобластов были использованы меченные антитела, ранее полученные в нашей лаборатории. Использованные реагенты показали свою применимость для подсчета плазмобластов. Было проведено сравнение различных стратегий гейтирования плазмобластов. При окрашивании лимфоцитов иммунизированных добровольцев набором антител CD19-PE, CD3/CD14/CD16-FITC, CD27-PC5.5 и CD38-PC7 наблюдался отчетливый кластер плазмобластов с фенотипом CD27⁺⁺CD38⁺⁺. Включение в панель антитела CD20-FITC приводило к увеличению доли CD27⁺⁺CD38⁺⁺ плазмобластов среди CD19⁺ лимфоцитов до 60% и более. При замене антитела CD38 на антитело CD71 также обнаруживался отчетливый кластер плазмобластов, содержавший около 5% В-лимфоцитов. Две стратегии гейтирования плазмобластов с использованием комбинаций CD27/CD38 и CD27/CD71 мы сравнили в динамике на лимфоцитах одного вакцинированного добровольца. При использовании сочетания CD27/CD38 на 7-й день после вакцинации регистрировался острый и выраженный пик количества плазмобластов. Применение комбинации CD27/CD71 приводило к растягиванию пика на период с 7-го по 14-й день после вакцинации. Таким образом, временная динамика популяции CD27⁺CD71⁺ отличалась от появления классических плазмобластов с фенотипом CD27⁺⁺CD38⁺⁺. Это наталкивает на мысль, что в популяцию CD27⁺⁺CD71⁺ входят не только плазмобласты, но также и другие типы активированных В-клеток. Был получен препарат малого поверхностного антигена гепатита В, меченного фикоэритрином (HBsAg-PE), с помощью которого было определено количество антигенспецифических плазмобластов. Результаты определения антигенспецифических клеток с помощью комплекса HBsAg-PE согласовались c данными, полученными методом ELISpot. Отработанная стратегия гейтирования плазмобластов в настоящее время используется нами для определения активированных В-клеток при инфекции, вызываемой вирусом SARS-CoV-2. На следующем этапе исследования эта методика будет использоваться для сортировки антигенспецифических В-лимфоцитов, что позволит провести секвенирование генов Ig и приступить к созданию новых человеческих антител против вирусных антигенов.

Антинуклеарные антитела (АНА) – это семейство аутоантител, направленных против различных клеточных структур, включая ядро, ядерную мембрану, митотический аппарат, компоненты цитоплазмы и органеллы клетки, а также клеточные мембраны. Выявление АНА лежит в основе аутоиммунной лабораторной диагностики и представляет незаменимый инструмент ранней идентификации основных системных аутоиммунных заболеваний, аутоиммунных заболеваний печени, ревматических заболеваний в педиатрии и ряде других состояний. Основным методом обнаружения АНА является иммунофлюоресцентный тест на перевиваемой клеточной линии аденокарциномы гортани человека HEp-2, в отечественной литературе получивший название «антинуклеарный фактор». Результат АНФ содержит информацию о конечном титре АНА, а также о типе свечения ядра. Тип свечения АНФ обусловлен аутоантителами, которые реагируют с антигенами, расположенными в ядре и цитоплазме клеток линии HEp-2. Для стандартизации названий и описания различных типов свечения антинуклеарного фактора (АНФ) в 2014 году была создана Инициатива Международной Согласительной группы по типам свечения АНФ (International Consensus on ANA Patterns (ICAP) group – англ.). Цель ICAP заключается в разработке единой номенклатуры типов свечения АНФ, базы микрофотографий, а также классификации в зависимости от компетенции специалистов при оценке типов свечения. Информация об основных характеристиках, а также клинических ассоциациях типов свечения АНФ размещены на интернет-ресурсе www.ANApatterns.org. В классификационной схеме АНФ типы свечения обозначены буквенно-цифровым кодом #AC (anti-cell pattern) и подразделены на ядерные, цитоплазматические и митотические группы. В зависимости от клинической значимости и/или простоты распознавания в данной номенклатуре делается акцент на различие между типами свечения, описываемые специалистами компетентного и экспертного уровней. Из ядерных типов свечения наиболее значимыми являются гомогенный, гранулярный, плотный мелкогранулярный, центромерный, ядрышковый, свечение точек в ядре, для цитоплазматических типов свечения – фибриллярный, гранулярный, митохондриальный, свечение комплекса Гольджи, палочки и кольца. По поручению руководителей ICAP для перевода номенклатуры на русский язык была утверждена группа экспертов во главе с академиком РАН, профессором А.А. Тотоляном под эгидой Российского научного общества иммунологов (РНОИ). В данной статье мы представляем русскоязычную адаптацию номенклатуры ICAP для обеспечения унификации и стандартизации формулировок результатов обследования пациентов с аутоиммунными заболеваниями.

Наследственный ангионевротический отек (НАО) – это орфанное генетическое заболевание с аутосомно-доминантным типом наследования, распространенность которого составляет примерно 1:50 000 без достоверных различий в разных этнических группах. Основными клиническими проявлениями НАО являются рецидивирующие отеки слизистых оболочек и глубоких слоев дермы различной локализации, в том числе жизнеугрожающей. Немаловажно отметить то, что отеки при НАО не сопровождаются уртикарными высыпаниями и зудом, так как в развитии данного заболевания задействованы совершенно иные патогенетические механизмы и медиаторы. К развитию отеков приводит повышенное высвобождение медиатора брадикинина (низкомолекулярного нанопептида, вызывающего увеличение проницаемости сосудистой стенки и экстравазацию плазмы) вследствие дефицита (НАО 1-го типа) или нарушения функциональной активности (НАО 2-го типа) ингибитора С1-эстеразы (С1-ИНГ). При этом около 20% случаев НАО обусловлены спонтанной мутацией. Также описаны единичные случаи НАО, обусловленные мутациями генов ангиопоэтина, плазминогена или фактора Хагемана. Симптомы данного заболевания, как правило, манифестируют в детстве, ухудшаются в подростковом возрасте и персистируют на протяжении всей жизни. Наиболее часто триггерами отеков при НАО являются стрессы, травмы и медицинские вмешательства, однако приступы могут возникать спонтанно, без связи с теми или иными провоцирующими факторами. Беременность может оказывать различное влияние на течение заболевания. В результате гормональных изменений у женщин во время беременности возможно ухудшение течения заболевания с учащением приступов ангионевротических отеков, отсутствие значимой динамики течения НАО или достижении клинической ремиссия даже в условиях полной отмены терапии. У пациенток с НАО при беременности антифибринолитическая терапия имеет низкую эффективность, а использование аттенуированных андрогенов и антагонистов брадикининовых рецепторов противопоказано, что существенно сужает круг терапевтических возможностей. В настоящее время, несмотря на отсутствие рандомизированных клинических исследований, в качестве первой линии терапии НАО при беременности рекомендуется использовать нативный С1-ингибитор в связи с его высокой эффективностью и безопасностью. С1-ингибитор является препаратом выбора как для купирования приступов, так и для краткосрочной/долгосрочной профилактики. Данное клиническое наблюдение демонстрирует вариант ухудшения течения наследственного ангионевротического отека у пациентки во время беременности. В статье описан успешный опыт долгосрочной профилактики НАО нативным С1-ингибитором во время беременности, родов и раннего послеродового периода у пациентки, прежде не получавшей лечение.

Фактор некроза опухолей (TNF) – важный провоспалительный и иммунорегуляторный цитокин с несколькими уникальными защитными и гомеостатическими функциями. Поскольку он является медиатором нескольких патологий и участником «цитокинового шторма», то его значение для клинической иммунологии состоит в том, что именно этот цитокин является мишенью широко применяемой антицитокиновой терапии аутоиммунных и воспалительных заболеваний. В научной литературе и многих учебниках TNF часто проходит под обозначением TNFα (альфа), что предполагает существование хотя бы TNFβ (действительно, этим термином в течение примерно 10 лет в 80-90 гг. прошлого века называли лимфотоксин). Однако еще 25 лет назад такое обозначение лимфотоксина было отменено «по научным показаниям». Следовательно, термин «TNF» и по-русски, и по-английски должен использоваться без добавки «альфа». Реагенты на TNFb, продвигаемые различными фирмами, просто вводят исследователей в заблуждение.