ОБЗОРЫ
ОРИГИНАЛЬНЫЕ СТАТЬИ
Основная задача тимуса, как центрального органа лимфоидной системы, заключается в формировании пула иммунокомпетентных аутотолерантных тимоцитов. Процесс дифференцировки лимфоцитов в тимусе во многом зависит от уровня организации животного и особенностей среды его обитания. Однако, к настоящему моменту, по причине дефицита сравнительно морфологических работ, малоизученным оказывается вопрос изменчивости морфологических показателей лимфоидного компонента тимуса у представителей различных классов наземных позвоночных животных.
Поэтому основная цель нашей работы заключалась в выявлении подобных зависимостей. В рамках данного исследования всего изучено 212 препаратов тимуса позвоночных животных, относящихся к классам: Земноводные (Amphibia), Пресмыкающиеся (Reptilia), Птицы (Aves), Млекопитающие (Mammalia), включая человека. Обнаружено, что морфологические показатели, отражающие характеристики процессов дифференцировки и созревания лимфоцитов в тимусе, в значительной степени определяются теми адаптивными изменениями, которые возникали в эволюции позвоночных во время формирования истинной наземности и теплокровности. По этой причине, при сравнении земноводных и пресмыкающихся, а также пойкилотермных позвоночных с гомойотермными, были обнаружены существенные, по мнению авторов, отличия в количестве тимоцитов разных стадий зрелости, наполняющих корковое и мозговое вещество тимуса, а также отличия в интенсивности деления тимоцитов. В свою очередь, сопоставление митотического индекса тимоцитов всех позвоночных, представленного сравнительно морфологического ряда, показало, что интенсивность пролиферации данных клеток в первую очередь зависит от энергетической емкости организма. Однако специфические адаптации, связанные с формированием определенной жизненной формы (например адаптации птиц к полету), также оказывают значительно влияние на интенсивность деления тимоцитов в тимусе. Определены морфологические особенности, характерные для тимуса человека, а также выявлены возможные причины подобных отличий. Обнаружено, что по морфологическим показателям лимфоидного компонента, тимус человека в большей степени схож с тимусом холоднокровных позвоночных, что проявляется уже на ранних стадиях онтогенеза. По мнению авторов статьи, такая ситуация связана с тем, что человек находится под воздействием пресса неблагоприятных антропогенных факторов, которые и приводят к некоторому отклонению морфологии тимуса человека от нормы, характерной для млекопитающих естественной среды обитания.
Хронический полипозный риносинусит (ПРС) – гетерогенное воспалительное заболевание полости носа и околоносовых пазух, характеризующееся воспалительной инфильтрацией слизистой оболочки с дальнейшим повреждением коллагенового каркаса, что приводит к ремоделированию слизистой и образованию полипов. Механизмы его развития до сих пор остаются невыясненными.
Для исследования направления патогенетических механизмов проведен анализ показателей клеточного иммунитета у 20 пациентов с ПРС. Наличие двустороннего полипозного риносинусита было подтверждено эндоскопическим исследованием полости носа и данными компьютерной томографии околоносовых пазух. Для определения фенотипа заболевания было проведено аллергологическое обследование и анкетирование пациентов, на основании которых пациенты с ПРС были разделены на подгруппы: ПРС + бронхиальная астма; ПРС + непереносимость НПВП; ПРС + атопия. В качестве показателей контрольной группы были использованы результаты 356 практически здоровых лиц.
Методом проточной цитометрии в периферической крови определены CD3+, CD4+, CD8+, CD16+, CD19+, CD25+, CD27+, CD45+, CD45R0+, CD45RA+, CD56+ и CD127+ субпопуляции лимфоцитов.
У пациентов с ПРС выявлено повышение числа Т-регуляторных (CD4+CD25brightCD127lowtoneg) (Treg) лимфоцитов, повышение абсолютного и относительного количества NK (CD3-CD16+CD56+) одновременно с резким повышением числа активированных NK (CD8+CD3-) в 100% случаев, повышение абсолютного числа В-клеток памяти (CD19+CD5-CD27+). При проведении сравнительного анализа иммунологических показателей периферической крови между подгруппами (ПРС + БА; ПРС + непереносимость НПВП; ПРС + атопия) с пациентами ПРС, у которых эта патология отсутствовала, мы констатировали достоверно значимое повышение абсолютного числа NKT-лимфоцитов (0,22±0,04) и снижение показателя активации Т-клеточного звена, Т-хелперы активированные к Т-клеткам памяти (CD4+CD45R0+) (24,4±1,72) у пациентов с ПРС с одновременной непереносимостью НПВП.
При сравнении иммунологических показателей группы пациентов с сопутствующей бронхиальной астмой и с остальными больными ПРС и пациентов с атопией и без нее статистически значимой разницы, кроме повышения количества эозинофилов, выявлено не было.
В структуре гинекологических заболеваний миома матки занимает «почетное» второе место после воспалительных процессов половых органов, а удельный вес ее достигает 40%. Целью исследования явилось изучение особенностей цитокинового профиля и причин дисфункции иммунной системы у больных с миомой матки, осложненной геморрагическим синдромом на фоне гормонотерапии.
Представлен детальный сравнительный анализ результатов обследования 95 женщин с миомой матки, размеры которой не превышали 12-недельную беременность, преимущественно с интрамуральной и субсерозной локализацией узлов и имеющих показания для консервативного лечения.
Основную группу составили 43 пациентки с миомой матки и клиникой геморрагического синдрома на фоне гормонотерапии (Бусерелин-депо по 3,75 мг). В группе сравнения (n = 52) лечение миомы матки гормональными препаратами не проводилось. Контрольная группа была представлена практически здоровыми женщинами (n = 27). Обследование включало комплексное ультразвуковое сканирование с допплерометрией на аппарате HITACHI-5500. Состояние иммунной системы оценивали по содержанию цитокинов (интерлейкинов IL-1β, IL-4, IL-6, IL-2, IFNγ, TNFα) и уровню маркера апоптоза Fas-лиганда в сыворотке крови методом твердофазного иммуноанализа. Для выявления возбудителей урогенитальных инфекций использовали методы ПЦР-диагностики и иммуноферментного анализа.
Установлено, что возникновение геморрагического синдрома на фоне гормонотерапии миомы матки ассоциируется с активизацией латентных форм урогенитальных инфекций, в результате потенцирующего иммуносупрессивного действия гормональных препаратов, способствующих нарушениям иммунного статуса, редукции функций Th1- и Th2-лимфоцитов, а также значительному угнетению апоптоза. В основной группе концентрации IL-1β, IL-2, IL-4, IL-6 и IFNγ уменьшались в 1,3-1,5 раза, а содержание TNFα и FasL – в 2 раза по отношению к контрольным данным. Кроме того, анализ качественных показателей маточной гемодинамики показал, что осложнения гормонотерапии миомы матки сопровождаются достоверным увеличением скорости систолического кровотока в маточных артериях (в 1,8 раза), на фоне снижения диастолического кровотока (в 2,5 раза) и повышения ИР сосудистой стенки (в 1,6 раза), в сравнении с параметрами здоровых женщин.
Полученные данные диктуют необходимость более детального обследования женщин в плане выявления хронических форм урогенитальных инфекций, с целью совершенствования способов консервативного лечения миомы матки, снижения частоты осложнений и повышения эффективности гормонотерапии.
В настоящее время гипертоническая болезнь является наиболее распространенной соматической патологией среди лиц молодого и трудоспособного возраста. Особой проблемой является развитие и прогрессирование артериальной гипертензии у лиц молодого возраста напряженных специальностей. У таких больных, на фоне хронического стресса, как правило, часто возникают эмоциональные нарушения в виде тревоги и депрессии. Прямое патофизиологическое воздействие тревожно-депрессивных расстройств на сердечно-сосудистую систему способствует развитию нарушений со стороны основных регуляторных процессов и опасных для жизни клинических форм ишемической болезни сердца и гипертонической болезни. Однако, несмотря на наличие достаточного количестваданных о влиянии тревожно-депрессивных нарушений на течение кардиологической патологии, тем не менее открытыми остаются вопросы степени изменений со стороны нейропептидно-цитокинового пула иммунной системы у лиц молодого возраста с артериальной гипертензией из группы напряженных специальностей. Кроме того, стоит проблема минимальной изученности вопросов взаимозависимости изменений в функционировании основных регуляторных систем (вегетативной нервной и иммунной) у таких больных.
В связи с чем целью данной работы явилось изучение цитокиновой активности иммунной системы и уровня продукции β-эндорфина при артериальной гипертензии, протекающей на фоне астеноневротических нарушений, у мужчин молодого возраста из группы напряженных профессий, а также исследование характера взаимовлияний между показателями функционирования надсегментарной области вегетативной нервной системы и иммунитетом у этих больных. Были сформированы группы: 1-я (n = 34) – больные с артериальной гипертензией и астено-невротическими нарушениями; 2-я (n = 20) – пациенты с артериальной гипертензией без психологических нарушений, острых и хронических стрессов в анамнезе (контроль). Нейропептидно-цитокиновый пул иммунной системы исследовали по уровню содержания в сыворотке крови цитокинов провоспалительного (TNFα, IL-1β, IL-6) и противовоспалительного (IL-4, IL-10) спектра, а также β-эндорфина.
В ходе проведенного клинико-лабораторного обследования авторами установлено, что у пациентов с артериальной гипертензией и астено-невротическими нарушениями, имеет место активация уровня провоспалительных цитокинов (TNFα, IL-1β, IL-6), подавление противовоспалительных цитокинов (IL-4, IL-10), а также снижение β-эндорфина в крови. Кроме того, выявлены нарушения во взаимовлиянии между вегетативной нервной и иммунной системами у этих больных.
До настоящего времени нет четкого понимания причин возникновения генерализации инфекции у детей. Генерализация инфекции также может быть обусловлена особенностями иммунного ответа, который определяется и генетическими маркерами.
Цель исследования – изучить особенности распределения аллелей HLA-DRB1 и HLA-DQB1 у детей с генерализованным туберкулезом.
Обследовано 40 детей в возрасте от 1 до 15 лет с генерализованным туберкулезом. После проведения стандартного фтизиатрического комплекса обследования с включением молекулярно-генетических методов диагностики операционного материала, МСКТ, иммунологических методов выполнено HLA-DRB1 и DQB1 типирование. Проведено сравнение распределения аллелей HLA-DRB1 и DQB1 с группой здоровых доноров (n = 100).
У пациентов основной группы и группы сравнения не найдено достоверных различий в распределении аллелей HLA-DQB1, тогда как при сравнении результатов типирования по локусу HLA-DRB1 отмечается достоверно низкая встречаемость HLA-DRB1*01 (12,5% против 31,0%, χ2 = 4,08; р <0,05), который может считаться протективным, а также повышенная частота HLA-DRB1*14 (7,5% против 1,0%, χ2
= 3,67, р <0,05), что свидетельствует о его предрасполагающей роли. Кроме того, в фенотипе пациентов по сравнению с контролем выявлены достоверные различия в частоте встречаемости отдельных аллельных сочетаний, что также подтверждает ключевую роль иммуногенетических факторов в развитии и характере течения туберкулеза.
Выводы: полученные данные свидетельствуют о важной роли иммуногенетических факторов, в частности HLA-DRB1, DQB1 фенотипа, в предрасположенности к развитию генерализованной формы туберкулеза у детей, а также о целесообразности дальнейших исследований в этом направлении.
Врожденные пороки сердца являются доминирующей патологией среди всех врожденных пороков плода и новорожденного. Нарушения иммунных взаимодействий в системе «мать – эмбрион» могут быть следствием тератогенеза. HLA-G является основной молекулой, посредством которой формируется толерантность материнского иммунного микроокружения к полуаллогенному эмбриону. Полиморфный вариант гена HLA-G 3‘UTR 14-bp ins/del влияет на устойчивость и экспрессию матричной РНК и тем самым на эффективность блокирования иммунного отторжения полуаллогенного эмбриона. Цель исследования была связана с поиском ассоциативных связей между носительством женщинами одного из полиморфных вариантов гена HLA-G 3‘UTR 14-bp ins/del с репродуктивными потерями и рождением детей с врожденными пороками сердца.
Обследовано 103 женщины, имеющие детей с врожденными пороками сердца, 21 женщина с репродуктивными потерями до 9 недель беременности и 101 женщина, имеющая двух и более здоровых детей.
Выявлено, что маркером ранних репродуктивных потерь у женщин являлся минорный гомозиготный генотип HLA-G 3’UTR 14-bp ins/14-bp ins (OR = 5,25; 95%CI = 1,31-21,11) и аллель HLA-G 3’UTR 14-bp ins (OR = 2,34; 95%CI = 1,13-4,84). При носительстве женщиной гетерозиготного вариантного генотипа 14-bp ins/14-bp del HLA-G 3’UTR значимых ассоциаций с рождением детей с ВПС не определено.
В последние годы активно исследуются каталитические свойства иммуноглобулинов.
Установлено, что нуклеазная активность иммуноглобулинов повышается при системных аутоиммунных заболеваниях. Учитывая патогенетические особенности ревматоидного артрита и реактивного артрита, целесообразным является уточнение характера нуклеазной активности при данных заболеваниях. Этому может послужить определение ДНКазной активности иммуноглобулинов с использованием различных ДНК-субстратов и поиск специфических субстратов для конкретных нозологических единиц.
Целью работы является определение ДНКазной активности поликлональных иммуноглобулинов класса G при ревматоидном и реактивном артрите с использованием различных методов.
Для оценки нуклеазной активности используются различные методы. В настоящей работе изложены разработанные и модифицированные нами методики для определения ДНКазной активности поликлональных иммуноглобулинов класса G. Особое внимание уделено электрофоретическому методу оценки ДНКазной активности. Материалом для исследования являются поликлональные иммуноглобулины класса G, выделенные из сыворотки крови пациентов с ревматоидным артритом и реактивным артритом.
Выводы: 1. В сыворотке пациентов с ревматоидным артритом, реактивным артритом присутствуют антитела, обладающие дезоксирибонуклеазной активностью. 2. ДНКазные абзимы проявляют гетерогенную способность гидролизовать различные ДНК-субстраты. 3. Абзимный гидролиз ДНК-субстратов длиной более 700 пар оснований более выражен по сравнению с ДНК-субстратами короткой (100 пар оснований) длины.
В работе представлены результаты клинической апробации аутологичных клеток стромально-васкулярной фракции (СВФ) у пациентов с деформирующим остеоартрозом (ДОА) коленных суставов II-III стадии по Kellgren–Lawrence. В пилотное исследование были рекрутированы 6 больных с ДОА коленных суставов (3 мужчин и 3 женщины; медиана возраста 64 года) с давностью заболевания 7 лет. Пациентам однократно, под УЗИ-навигацией, вводили аутологичные клетки СВФ в средней дозе 16,8±0,9 × 106 /сустав. Внутрисуставное введение клеток СВФ не вызывало развития аллергических, токсических или воспалительных реакций. Анкетирование пациентов через 1 мес. после введения клеток СВФ выявило снижение выраженности болевого синдрома, оцениваемого по визуально-аналоговой шкале (ВАШ) и специализированной 100-балльной шкале KOOS (подшкала «Боль») (p < 0,05 по обеим шкалам). Более того, пациенты отметили улучшение функциональной активности суставов и качества жизни, связанного с пораженными суставами по шкале KOOS (p < 0,05).
Положительная клиническая динамика сохранялась при наблюдении до 6 мес. УЗИ суставов продемонстрировало увеличение толщины гиалинового хряща через 3 (в 73% случаев) и 6 мес. (в 82%).
Проведенное нами пилотное исследование показало безопасность и хорошую переносимость внутрисуставного введения аутологичных клеток СВФ у пациентов с выраженными проявлениями ДОА.
Полученные результаты свидетельствуют также о значительном противовоспалительном эффекте аутологичных клеток СВФ жировой ткани, проявляющемся на ранних этапах клеточной терапии.
Потенциальную возможность стимулирующего влияния клеток СВФ на регенерацию поврежденных суставов предполагается оценить при дальнейшем наблюдении.
КРАТКИЕ СООБЩЕНИЯ
Исследованы показатели IgE-опосредованной иммунологической реакции людей с нарушениями углеводного обмена и при диабете, имеющих разные группы крови 0(I), А(II), В(III) (n = 93).
Определены: общий IgE; уровень глюкозы и процент гликозилированного гемоглобина (HbA1c) в сыворотке крови; группы крови (в системе АВ0). Анализ этих параметров в 0(I) и А(II), В(III) группах крови продемонстрировал разную реактогенность в зависимости от степени нарушения углеводного обмена и группоспецифичности антигенных детерминант гликопротеинов крови. Наблюдалась сильная прямая корреляционная зависимость (r = 0,8) антигенов 0(I) группы крови и заболеваемости сахарного диабета 2 типа. Наибольшая степень корреляции прослеживалась между группой крови A(II) и возникновением диабета 1 типа (r = 1,0). Наименьший процент СД и наименьшая корреляционная зависимость (r = 0,67) наблюдались у пациентов, имеющих В(III) группу крови. При выраженном нарушении углеводного обмена представители 0(I) и А(II) групп крови имели показатели общего IgE 43,61±15,12 кМЕ/л и 86,2±42,61 кМЕ/л соответственно, что в среднем в 4 раза ниже, чем представители В(III) группы крови, у которых общий IgE при диабете 2 типа увеличивался в 2 раза верхней границы нормы и составлял 209,65±52,5 кМЕ/л.
В последние годы отмечен рост распространенности бронхиальной астмы, в связи с чем ее лечение остается актуальной проблемой в аллергологии. Наряду с врожденной атопией, значимую роль в формировании и развитии заболевания играет гиперреактивность бронхов, которая во многом связана с состоянием мембран эпителия бронхов. Однако получение клеток бронхиального эпителия осуществляется путем бронхоскопии с биопсией, это инвазивная процедура, а гиперреактивность бронхов является относительным противопоказанием к ней. В то же время существует метод интегральной оценки клеточных мембран организма посредством анализа трансформации мембран эритроцитов, которые, не имея собственного метаболизма, являются показательной моделью состояния клеточных мембран организма в целом. Нами обследовано 52 человека в возрасте от 2 до 17 лет, из них 20 детей с бронхиальной астмой и группа сравнения составила 32 здоровых ребенка, рандомизированных по возрасту и половому составу. Им проводилась оценка спонтанной трансформации эритроцитов, путем микроскопирования под световым микроскопом в нативном мазке взвеси цельной крови.
Выявлена более частая встречаемость деструктивных форм эритроцитов у детей с бронхиальной астмой (2,6%) в сравнении со здоровыми (0,8%) (р < 0,05), с преобладанием сфероцитов (0,55% и 0,1%), которых более чем в пять раз больше у детей с бронхиальной астмой (р < 0,05). Соответственно, переходные формы достоверно чаще (р < 0,05) встречаются в группе сравнения (39,9% против 34,12%).
Для бронхиальной астмы характерен стоматоцитарный путь трансформации клеток. Интегральным критерием возможностей мембраны вернуться к норме является показатель компенсаторной трансформации (ПКТ) – соотношение переходных и деструктивных форм. В наших исследованиях показано снижение ПКТ у детей, страдающих бронхиальной астмой (р < 0,05), в сравнении с практически здоровыми (2,1 и 3,5 соответственно). Как объективный параметр, определяющий степень тяжести бронхиальной астмы, выбрана оценка функции внешнего дыхания. Показана достоверная сильная обратная корреляционная связь (R = -0,82) между показателем ОФВ1 и количеством сфероидов (переходные формы), а также достоверная сильная прямая корреляционная связь (R = 0,76) между уровнем ОФВ1 и ПКТ. Таким образом, у больных с бронхиальной астмой отмечаются нарушения трансформации эритроцитов по сравнению со здоровыми детьми. Имеется прямая зависимость между степенью тяжести заболевания и выраженностью изменений трансформации мембран эритроцитов.
Патогенез пародонтита большинство авторов связывают с нарушением микробиоты ротовой полости и механизмов местного иммунитета. Можно полагать, что успехи в развитии концепции патогенеза, диагностики и лечения заболевания могут быть связаны с иммунологическими исследованиями ротовой жидкости. Цель – дать характеристику цитокинового статуса ротовой жидкости у больных хроническим пародонтитом.
Работа основана на исследовании 101 человека, которые на основании ретроспективного анализа были распределены на две группы: основная группа – 69 больных с пародонтитом средней и тяжелой степени, контрольная группа – 32 практически здоровых добровольца.
В контрольной группе уровни цитокинов соответствовали значениям нормы. У больных пародонтитом концентрация IL-2, IL-4 повышалась. Это дает основание предположить, что цитокиновый баланс при пародонтите характеризуется преобладанием Th2 продуцируемых факторов, то есть активация «противовоспалительных» иммуноопосредованных механизмов. Поскольку в патогенезе пародонтита наряду с иммунными сдвигами важны и нарушения микроциркуляторного русла, в ротовой жидкости определяли уровень VEGF. Его содержание в ротовой жидкости также имело тенденцию к повышению. Нами было установлено, что наиболее высокую диагностическую ценность имеет уровень IL-4 в ротовой жидкости при пародонтите: диагностическая чувствительность 88%, диагностическая специфичность 99%, AUC = 0,95.
Получены данные, соответствующие представлениям о том, что развитие хронического пародонтита сопровождается нарушением локальных иммунных механизмов. Это проявляется дисбалансом продукции цитокинов, прежде всего – активацией продукции IL-4. Можно полагать, что данный цитокин реализует свои патогенетические (иммуноопосредованная деструкция тканей) и протективные эффекты (стимуляция противомикробного иммунитета) при пародонтите. Их соотношение определяет, скорее всего, скорость прогрессирования и развитие осложнений заболевания. Определение содержания IL-4 в РЖ может рассматриваться как потенциальный инструмент лабораторной диагностики заболеваний тканей пародонта в качестве маркера активности патологического процесса.
ПРАВИЛА ДЛЯ АВТОРОВ
УКАЗАТЕЛИ
ISSN 2313-741X (Online)