ГЕТЕРОГЕННОСТЬ НУКЛЕАЗНОЙ АКТИВНОСТИ ПОЛИКЛОНАЛЬНЫХ ИММУНОГЛОБУЛИНОВ ПРИ РЕВМАТОИДНОМ И РЕАКТИВНОМ АРТРИТАХ

В последние годы активно исследуются каталитические свойства иммуноглобулинов.
Установлено, что нуклеазная активность иммуноглобулинов повышается при системных аутоиммунных заболеваниях. Учитывая патогенетические особенности ревматоидного артрита и реактивного артрита, целесообразным является уточнение характера нуклеазной активности при данных заболеваниях. Этому может послужить определение ДНКазной активности иммуноглобулинов с использованием различных ДНК-субстратов и поиск специфических субстратов для конкретных нозологических единиц.
Целью работы является определение ДНКазной активности поликлональных иммуноглобулинов класса G при ревматоидном и реактивном артрите с использованием различных методов.
Для оценки нуклеазной активности используются различные методы. В настоящей работе изложены разработанные и модифицированные нами методики для определения ДНКазной активности поликлональных иммуноглобулинов класса G. Особое внимание уделено электрофоретическому методу оценки ДНКазной активности. Материалом для исследования являются поликлональные иммуноглобулины класса G, выделенные из сыворотки крови пациентов с ревматоидным артритом и реактивным артритом.
Выводы: 1. В сыворотке пациентов с ревматоидным артритом, реактивным артритом присутствуют антитела, обладающие дезоксирибонуклеазной активностью. 2. ДНКазные абзимы проявляют гетерогенную способность гидролизовать различные ДНК-субстраты. 3. Абзимный гидролиз ДНК-субстратов длиной более 700 пар оснований более выражен по сравнению с ДНК-субстратами короткой (100 пар оснований) длины.

1. Волкова М.В., Кундер Е.В., Генералов И.И. Ферментативная активность антител при ранних артритах: патогенетическая роль и диагностические перспективы // Лечебное дело, 2014. Т. 40, № 6. С. 31-40. [Volkova M.V., Kunder E.V., Generalov I.I. Enzymatic activity of antibodies in early arthritis: pathogenetic role and diagnostic perspectives. Lechebnoe delo = Medicine, 2014, Vol. 40, no. 6, pp. 31-40. (In Russ.)]

2. Волкова М.В., Кундер Е.В., Генералов И.И. Нуклеазная активность поликлональных иммуноглобулинов класса G у пациентов с ранним ревматоидным артритом // Иммунопатология, аллергология, инфектология, 2012. № 1. С. 12-18. [Volkova M.V., Kunder E.V., Generalov I.I. Nuclease polyclonal IgG activity in patients with early rheumatoid arthritis. Immunopatologiya. Immunologiya. Allergologiya = International Journal of Immunopathology, Allergology, Infectology, 2012, no. 1, pp. 12-18. (In Russ.)]

3. Конорев М.Р., Генералов И.И., Жильцов И.В., Генералова А.Г. Способ очистки иммуноглобулинов класса G из сыворотки крови и устройство для аффинной хроматографии: пат. 3205 Респ. Беларусь, МПК 6G 01 N 33/48; заявитель Витебск. гос. мед. инст-т. – заявл. 05.02.96; опубл. 30.12.99 // Оффициальный бюллетень Национального центра интеллектуальной собственности, 1999. № 3. С. 121. [Konorev M.R., Generalov I.I., Zhiltsov I.V., Generalova A.G. A method for purifying class G polyclonal immunoglobulins from blood serum and an affinity chromatography device. Patent. 3205 Belarus, 6G 01 N 33/48. Оffitsial`nyy byulleten Natsionalnogo tsentra intellektualnoy sobstvennosti = Vitebsk State Medical Institute. Applic. 05.02.96; publ. 30.12.99. Official Bulletin of National center of intellectual property, 1999, no. 3, p. 121. (In Russ.)]

4. Кундер Е.В., Волкова М.В., Генералов И.И., Невинский Г.А. Клинико-патогенетическая и диагностическая значимость дезоксирибонуклеазной активности поликлональных IgG и сыворотки крови при спондилоартритах // Медицинская иммунология, 2012. Т. 14, № 4-5. С. 337-346. [Kunder E.V., Volkova M.V., Generalov I.I., Nevinsky G.A. Clinical and diagnostic significance of deoxyribonuclease activity of polyclonal IgG and blood sera in patients with spondyloarthritis. Meditsinskaya immunologiya = Medical Immunology (Russia), 2012, Vol. 14, no 4-5, pp. 337-346. (In Russ.)] doi: 10.15789/1563-0625-2012-4-5-337-346.

5. Черепанова А.В., Тамкович С.Н., Власов В.В., Лактионов П.П. Активность дезоксирибонуклеаз крови в норме и при патологии // Биомедицинская химия, 2007. Т. 53, № 5. С. 488-496. [Cherepanova A.V., Tamkovich S.N., Vlassov V.V., Laktionov P.P. Blood deoxyribonuclease activity in health and diseases. Biomeditsinskaya Khimiya, 2007, Vol. 53, no. 5, pp. 488-496. (In Russ.)]

6. Beutin L., Kruger U., Krause G., Miko A., Martin A., Strauch E. Evaluation of major types of Shiga toxin 2E-producing Escherichia coli bacteria present in food, pigs, and the environment as potential pathogens for humans. Appl. and Environment. Microbiol., 2008, Vol. 74, no. 15, pp. 4806-4816.

7. He B., Qiao X., Cerutti A. CpG DNA induces IgG class switch DNA recombination by activating human B cells through an innate pathway that requires TLR9 and cooperates with IL-10. J. Immunol., 2004, Vol. 173, no. 7, pp. 4479-4491.

8. Krieg A.M. CpG DNA: a pathogenic factor in systemic lupus erythematosus? J. Clin. Immunol., 1995, Vol. 5, no. 6, pp. 284-292.

9. Kundzer A.V., Volkava M.V., Bogdanos P., Rodiger S., Schierack P., Generalov I., Nevinsky G.A., Roggenbuck D. DNAse activity of polyclonal IgG – a putative serological marker in patients with spondyloarthritides. Immunol. Res., 2013, Vol. 56, no. 2-3, pp. 457-464.

10. Martinez-Valle F., Balada E., Ordi-Ros J., Bujan-Rivas S., Sellas-Fernandez A., Vilardell-Tarres M. DNase 1 activity in patients with systemic lupus erythematosus: relationship with epidemiological, clinical, immunological and therapeutical features. Lupus, 2009, Vol. 18, pp. 418-442.

11. Morin N., Araceli E. Santiago, Robert K. Ernst, Stacey J. Guillot, Nataro J. Characterization of the AggR Regulon in Enteroaggregative Escherichia coli. Infect. Immun., 2013, Vol. 81, no. 1, pp. 122-132.

12. Oganesyan G., Saha S.K., Pietras E.M., Guo B., Miyahira A.K., Zarnegar B., Cheng G. IRF3-dependent type I interferon response in B cells regulates CpG-mediated antibody production. J. Biol. Chem., 2008, Vol. 283, no. 2, pp. 802-808.

13. Rudnicka W., Burakowski T., Warnawin E., Jastrzebska M., Bik M., Kontny E., Chorazy-Massalska M., Radzikowska A., Buler M., Maldyk P., Maslinski W. Functional TLR9 modulates bone marrow B cells rom rheumatoid arthritis patients. Eur. J. Immunol., 2009, Vol. 39, no. 5, pp. 1211-1220.

14. Rutz M., Metzger J., Gellert T., Luppa P., Lipford G.B., Wagner H., Bauer S.Toll-like receptor 9 binds singlestranded CpG-DNA in a sequence- and pH-dependent manner. Eur. J. Immunol., 2004, Vol. 34, no. 9, pp. 2541-2550.

15. Schourov D.V., Gololobov G.V., Makarevich O.I., Yadav R.P., Chernova E.A., Nevinsky G.A., Prokaeva T.B., Alekberova Z.S., Gabibov A.G. DNA-hydrolyzing autoantibodies in autoimmune pathologies. Ann. of the New York Academy of Sciences, 2005, Vol. 750, pp. 255-264.

16. Tsukumo S., Yasutomo K. DNase I in pathogenesis of systemic lupus erythematosus. Clin. Immunol., 2004, Vol. 113, pp. 14-18.

17. Veiko N.N,. Shubaeva N.O., Ivanova S.M., Speranskii A.I., Lyapunova N.A., Spitkovskii D.M. Blood serum DNA in patients with rheumatoid arthritis is considerably enriched with fragments of ribosomal repeats containing immunostimulatory CpG-motifs. Bull. Exp. Biol. Med., 2006, Vol. 142, no. 3, pp. 313-316.

18. Volkava M.V., Kundzer E.V., Generalov I.I. Enzymatic DNAse and hyaluronidase serum activity in patients with early arthritis. Ann. Rheum. Dis., 2013, Vol. 72, Suppl. 3, p. 376.