Preview

Медицинская иммунология

Расширенный поиск
Том 21, № 1 (2019)
Скачать выпуск PDF
https://doi.org/10.15789/1563-0625-2019-1

ПЕРЕДОВАЯ

ОБЗОРЫ

9-20 8735
Аннотация

Тромбоцитам принадлежит ведущая роль в сопряжении тромбоза, воспаления и врожденных иммунных реакций. Тромбоциты устанавливают стабильное адгезионное взаимодействие с иммунными клетками. Активированные тромбоциты экспрессируют CD40L (CD154), мембранный гликопротеин семейства фактора некроза опухоли (TNF), причем тромбоциты представляют собой главный источник sCD40L в плазме крови. Тромбоцитарный CD154 может взаимодействовать с рецептором CD40 на эндотелии, вызывая воспалительный ответ, и В-лимфоцитах, усиливая продукцию ими иммуноглобулинов. CD154 тромбоцитов в комплексе с другими сигналами может вызвать созревание и активацию дендритных клеток (ДК). Тромбоциты обладают функциональными рецепторами TLR2, TLR4, TLR7 и TLR9. На тромбоцитах присутствуют Fc-рецепторы, в том числе FcγRIIA, FcεRI и FcαRIA. FcγRIIA на тромбоцитах может вовлекать их в защиту от бактерий. Перекрестная связь FcαRI на тромбоцитах приводит к продукции ими протромботических и провоспалительных медиаторов, таких как тканевой фактор и IL-1β. Активация тромбоцитов через FcεR1 вызывает высвобождение хемокина RANTES и серотонина, которые способствуют провоспалительному ответу других иммунных клеток. Тромбоциты обладают рецепторами для активированных компонентов комплемента (CR2, CR3, CR4, C1qR) и C1-ингибитора, факторов D и H. Активированные тромбоциты способствуют активации системы комплемента через высвобождение протеинкиназ и ATФ, а также путем фосфорилирования C3 и C3b. В α-гранулах тромбоцитов хранятся хемокины, которые представляют и самую многочисленную группу антимикробных белков тромбоцитов (киноцидины), а в цитоплазме тромбоцитов имеется антимикробный белок семейства дефензинов – hBD-1. Продуктами тромбоцитов, относящимися к семейству цитокинов и их рецепторов, признаны лиганд и рецептор суперсемейства TNF (TRAIL и LIGHT), хемокин SDF-1 (CXCL12), интерлейкины IL-1β, IL-8 и растворимый рецептор IL-6 (sRIL-6). Белок HMGB-1, классифицированный как воспалительный цитокин, экспрессируется в активированных тромбоцитах и вызывает формирование нейтрофилами внеклеточных ловушек. Тромбоциты являются источником многочисленных факторов роста, включая EGF-α и EGF-β1, EGF-β2, TGF-α и TGF-β1, TGF-β2, PDGF, HGF, FGF-β, IGF, про и антиангиогенные факторы, например VEGF-F и ангиопоэтины Ang-1 и Ang-2. Реализация иммунных функций тромбоцитов осуществляется при их взаимодействии с лейкоцитами, которые привлекаются к месту инфекции и воспаления и удерживаются при формировании «иммунного тромба» в условиях высокого напряжения сдвига. Тромбоциты могут не только поддерживать и направлять иммунный ответ, но и инициировать его. Они способны презентировать антиген в контексте молекул MHC I класса и активировать наивные CD8+Т-лимфоциты. В обзоре рассмотрены некоторые последствия взаимодействия тромбоцитов с нейтрофилами, моноцитами, дендритными клетками и лимфоцитами.

21-38 1841
Аннотация

Все лимфоидные клетки относят к врожденному или адаптивному звену иммунитета согласно механизмам реализации иммунных реакций. Реализация функциональной активности NK-клеток не связана с процессами предварительной активации в результате контакта с антигеном, реаранжировкой генов антигенраспознающих рецепторов и клональной пролиферацией. В связи с этим NK-клетки традиционно относят к клеткам врожденного иммунитета. Ранее полагали, что единственной популяцией лимфоидных клеток врожденного иммунитета являются NK-клетки, однако в последние годы в литературе появляется все больше свидетельств существования различных популяций этих клеток, что послужило основанием для выделения общего кластера под названием «лимфоидные клетки врожденного иммунитета» (Innate Lymphoid Cells – ILC). По классификации ILC NK-клетки относят к первой группе врожденных лимфоидных клеток согласно их общим функциональным характеристикам, а также участию транскрипционного фактора T-bet в их дифференцировке. Сложность, многоэтапность и частично нелинейный характер дифференцировки NK-клеток связаны с влиянием клеточного микроокружения, последовательной экспрессией транскрипционных факторов и активацией различных внутриклеточных путей передачи сигнала в NK-клетках. В обзоре рассматривается место NK-клеток в классификации ILC, основные транскрипционные факторы, участвующие в процессе дифференцировки NK-клеток. Авторами предпринимается попытка обобщить основные пути внутриклеточной передачи сигнала в NK-клетках в зависимости от активации цитокинами, присутствующими в клеточном микроокружении и оказывающими влияние на NK-клетки. Особым объектом дифференцировки NK-клеток являются NK-клетки децидуальной оболочки при беременности. Кроме NK-клеток, в составе децидуальной оболочки присутствуют стромальные клетки, клетки трофобласта, макрофаги. В обзоре рассмотрен частный случай влияния клеток микроокружения на экспрессию транскрипционных факторов и активацию внутриклеточных мессенджеров NK-клеток на примере клеток трофобласта. Открытое в настоящее время многообразие NK-клеток, реализующееся в зависимости от микроокружения в процессе их дифференцировки, требует дальнейшего изучения.

39-48 4195
Аннотация

В обзоре анализируются данные литературы, свидетельствующие об участии воспаления синовиальной ткани, субхондральной кости, гуморального и клеточного иммунного ответа к различным аутоантигенам хряща в инициации и прогрессировании первичного остеоартрита (ОА). В большинстве работ показано, что воспаление в синовиальной ткани у больных ОА менее выражено, чем у больных РА, но выше, чем у здоровых людей. Среди клеток воспалительного инфильтрата синовии больных ОА  преобладают макрофаги и T-лимфоциты. Некоторые авторы обнаружили в синовии больных ОА тучные клетки, причем содержание этих клеток было больше, чем у здоровых людей, и значимо больше, чем у больных РА. Большинство исследователей выявили в синовиальной ткани больных ОА значительное число цитокинов, связанных с клетками как врожденного, так и приобретенного иммунитета, в ряде исследований источник цитокинов не был идентифицирован. Регистрировались как провоспалительные, так и противовоспалительные цитокины: IL-1b, TNFα, IFNγ, IL-4, IL-2, IL-6, IL-8, IL-10, IL-17, IL- 18. Кроме того, некоторые исследователи выявили IL-5, IL-13, IL-19, IL-21, IL-26, IL-32, а также TGF-b. На участие адаптивного иммуного ответа в патогенезе ОА указывает наличие в синовиальной ткани, жидкости, сыворотке периферической крови больных ОА антител к антигенным детерминантам коллагенов II, IX, XI, аггрекану, фрагментам фибронектина. Результаты исследований убедительно свидетельствуют о роли хронического воспаления, изменений врожденного и адаптивного иммунитета в патогенезе ОА, что оправдывает замену прежнего названия болезни «остеоартроз» на современное «остеоартрит». Это новое понимание патогенеза ОА является принципиальным, поскольку обосновывает современные методы противовоспалительной терапии и поиск новых терапевтических мишеней. Приводятся результаты оценки эффективности и безопасности некоторых методов противовоспалительного лечения ОА. До настоящего времени терапия ОА, направленная на уменьшение воспаления, не была успешной. Так, результаты клинических испытаний применения анти-TNFα и анти-IL-1b-терапии для лечения ОА не показали клинически значимого эффекта, несмотря на многочисленные работы, свидетельствующие о большом содержании TNFα и IL-1b в синовиальной ткани, жидкости, субхондральной кости больных ОА и их предполагаемой роли в патогенезе. С другой стороны, клинический эффект был зарегистрирован при использовании ингибитора IL-1 диацереина, что, вероятно, обусловлено плейотропным действием этого препарата. Подчеркивается, что повышение эффективности антивоспалительной и иммуномодулирующей терапии может быть достигнуто за счет ее применения в начальной стадии болезни, что определяет необходимость разработки информативных маркеров «раннего» ОА.

ОРИГИНАЛЬНЫЕ СТАТЬИ

49-58 1256
Аннотация

Изучали роль трофобластического β1-гликопротеина (ТБГ) в регуляции молекулярно-генетических факторов, определяющих функциональную активность наивных Т-клеток и Т-клеток иммунной памяти в системе in vitro. ТБГ человека получали авторским запатентованным методом иммуноочистки с использованием биоспецифического сорбента с последующим освобождением от иммуноглобулиновой контаминации на колонке HiTrapTMProten G HP. В экспериментах использовали физиологические концентрации ТБГ, соответствующие его уровню в периферической крови будущей матери в период беременности: 1, 10 и 100 мкг/мл (I, II, III триместр соответственно). Объектами исследования являлись монокультуры наивных Т-клеток (CD45RA+) и Т-клеток иммунной памяти (CD45R0+), полученные методом иммуномагнитной сепарации из периферической крови женщин репродуктивного возраста.

Установлено, что на уровне наивных Т-клеток ТБГ угнетал экспрессию CD28 (1, 10, 100 мкг/ мл) и CD25 (100 мкг/мл), не влияя на продукцию этими клетками (IL-2). В то же время, на уровне Т-клеток иммунной памяти, ТБГ во всех используемых концентрациях подавлял экспрессию CD25, но повышал продукцию IL-2 этими клетками. Параллельно оценивали экспрессию генов U2af1l4, Gfi1, hnRNPLL, регулирующих альтернативный сплайсинг гена Ptprc, кодирующего CD45. Установлено, что ТБГ снижал экспрессию генов Gfi1 (1, 10, 100 мкг/мл), hnRNPLL (10, 100 мкг/мл), но повышал экспрессию гена U2af1l4 (1, 10, 100 мкг/мл) наивными Т-клетками. Показано, что на уровне Т-клеток иммунной памяти эффекты были аналогичными, причем ТБГ оказывал их во всех используемых концентрациях. Выявленные изменения в транскрипции мРНК генов U2af1l4, Gfi1, hnRNPLL в исследуемых субпопуляциях Т-клеток могут вести к снижению формирования «зрелой» изоформы СD45R0.

Таким образом, ТБГ снижает функциональную активность наивных Т-клеток и Т-клеток иммунной памяти, связанную с экспрессией молекул костимуляции/активации CD25 и CD28, и участвует в регуляции альтернативного сплайсинга гена Ptprc, определяющего соотношение вариантов рецептора CD45. По-видимому, при помощи указанных механизмов ТБГ регулирует функциональную активность циркулирующего пула T-клеток памяти, потенциально способных к осуществлению антиген-специфических цитотоксических реакций в отношении антигенов эмбрионального происхождения в ситуации in vivo. В целом полученные данные расширяют представления о роли ТБГ в регуляции молекулярно-генетических механизмов дифференцировки наивных Т-клеток и Т-клеток иммунной памяти.

59-68 3995
Аннотация

Ингибиторные рецепторы CTLA-4 и PD-1 (модуляторы иммунного синапса) играют ключевую роль в регуляции иммунных реакций. Они подавляют чрезмерное развитие иммунного ответа в ответ на патогенные микроорганизмы и предотвращают аутоиммунные реакции. Модуляторы иммунного синапса представляют собой мишени современной эффективной противоопухолевой терапии на основе человеческих и гуманизированных моноклональных антител (ипилимумаб и ниволумаб, тремелимумаб, пембролизумаб и другие). При всей своей эффективности по сравнению с методами обычной химиотерапии терапия на основе блокаторов иммунных чек-пойнтов имеет существенные недостатки, а именно высокую стоимость и существенные побочные эффекты аутоиммунной природы, притом, что терапия помогает, к сожалению, не всем пациентам. Таким образом, необходимы дальнейшие исследования с целью увеличения эффективности и безопасности данного метода и выработки критериев отбора пациентов для терапии. Один из возможных подходов к снижению побочных эффектов терапии блокаторами модуляторов иммунного синапса – это использование их не системно, а ex vivo при получении препаратов активированных иммунных клеток пациентов для противоопухолевой терапии. Целью нашей работы было проследить, каким образом воздействуют блокирующие антитела на экспрессию рецепторов CTLA-4 и PD-1 в подобной системе in vitro. Во-первых, было исследовано содержание данных ингибиторных рецепторов в клетках популяции лимфоцитов периферической крови здоровых добровольцев и пациентов с распространенной меланомой. Далее было определено воздействие добавления антител к модуляторам иммунного синапса на содержание клеток, несущих CTLA-4 и PD-1, в популяции лимфоцитов при их активации в присутствии фитогемагглютинина. Наша работа показала, что присутствие терапевтических антител к любому из двух данных иммунных чек-пойнтов при активации клеток in vitro не только блокирует собственный рецептор-мишень, но и перекрестно понижает долю клеток, экспрессирующих другой ингибиторный рецептор. Таким образом, по всей видимости, введение антител либо к PD-1, либо к CTLA-4 в данных экспериментальных условиях может подавлять оба негативных сигнальных каскада одновременно. Причем ответ на антитела, блокирующие разные иммунные чек-пойнты, варьировал у разных доноров. Наши данные могут служить теоретической основой для отработки эффективных комбинаций активаторов лимфоцитов и ингибиторов иммунных чек-пойнтов in vitro для адоптивной терапии опухолей, а также служить для прогноза возможного ответа на антитела к CTLA-4 и к PD-1 для подбора персонализированного метода иммунотерапии.

69-76 3130
Аннотация

Псориатический артрит является хроническим системным прогрессирующим воспалительным заболеванием суставов и позвоночника, которое приводит к развитию эрозивного артрита, костной резорбции, множественных энтезитов и спондилоартрита. Тяжелое клиническое течение, резистентность к проводимой терапии, высокая распространенность инвалидизации, увеличение смертности больных обусловливают необходимость дальнейшего изучения заболевания. Псориатический артрит является мультифакториальным заболеванием, иммунопатогенез которого представляет собой сложный процесс взаимодействия клеточных и гуморальных звеньев иммунной системы. Важнейшим фактором активации пролиферации клеток эпидермиса и синовиальной оболочки при псориатическом артрите является дисбаланс провоспалительных и противовоспалительных цитокинов. Отмечено, что псориатический процесс имеет особенности клинического течения в зависимости от возраста. Изучение показателей иммунореактивности при псориатическом артрите в различных возрастных группах позволит выявить особенности прогрессирования патологии.

Цель исследования – изучить концентрацию провоспалительных и противовоспалительных цитокинов, показатели клеточного и гуморального звеньев иммунитета и провести сравнительный анализ у больных псориатическим артритом в молодом и зрелом возрасте.

В исследование включены больные псориатическим артритом (n = 101), которые на основании возрастной классификации ВОЗ были разделены на 2 группы: 1 группа – в возрасте от 18 до 44 лет (n = 43), 2 группа – старше 44 лет (n = 58). Контрольные группы (3 и 4 группы) составили практически здоровые люди (n = 103), сопоставимые по полу и возрасту с больными. Популяционный и субпопуляционный состав лимфоцитов крови оценивали методом проточной цитофлуориметрии с использованием моноклональных антител к CD3, CD4, CD8, CD16, CD19 (ТОО «Сорбент», Москва, Россия). Фагоцитарную активность нейтрофилов периферической крови оценивали микроскопически по поглощению латексных частиц. Концентрации иммуноглобулинов (IgA, IgM, IgG), циркулирующих иммунных комплексов, цитокинов (IL-4, IL-6, IL-10, TNFα) в сыворотке крови определяли методом твердофазного иммуноферментного анализа. Статистическую обработку полученных результатов проводили с использованием прикладных программ Statistica 6.0.

Во всех возрастных группах больных псориатическим артритом установлены общие по отношению к контролю статистически значимые различия: повышенное относительное и абсолютное количество CD3-CD16+ лимфоцитов в периферической крови, повышенная концентрация ЦИК-C1q, сниженная концентрация IgA, IgM, IgG в сыворотке крови. При анализе основных показателей клеточного и гуморального звеньев иммунитета в группах больных псориатическим артритом в зависимости от возраста выявлены статистически значимые межгрупповые различия. Так, в группе больных псориатическим артритом в молодом возрасте концентрация IL-10 ниже в сравнении с группой больных псориатическим артритом в зрелом возрасте. В группе больных псориатическим артритом в зрелом возрасте фагоцитарное число и концентрация IgG в сыворотке крови статистически значимо ниже в сравнении с группой больных псориатическим артритом в молодом возрасте.

Выявленные изменения в иммунологических показателях при псориатическом артрите в молодом и зрелом возрасте указывают на наличие как общих по отношению к контролю, так и межгрупповых различий. Проведенные ранее нами исследования не выявили статистически значимых межгрупповых различий в иммунологических показателях при псориатическом артрите в молодом и зрелом возрасте, что свидетельствует о наличии иммунных нарушений, связанных с псориатическим процессом, а не с возрастом больных. Однако с увеличением возраста больных псориатическим артритом и формированием тяжелых форм заболевания наблюдаются характерные нарушения иммунологической реактивности и в качестве маркеров прогрессирования псориатической болезни могут служить: повышенная концентрация IL-10 и сниженная концентрация IgG в сыворотке крови, сниженное фагоцитарное число.

77-88 1716
Аннотация

Целью исследования явилось изучение зависимости состояния респираторного взрыва нейтрофилов от активности их внутриклеточных ферментов у больных с разной степенью тяжести острого деструктивного панкреатита (ОДП). Обследовано 50 больных ОДП средней (17 пациентов) и тяжелой (33 пациента) степени тяжести. В качестве контроля обследовано 47 здоровых людей. Состояние респираторного взрыва нейтрофильных гранулоцитов исследовали с помощью хемилюминесцентного анализа. Исследование активности NAD(P)-зависимых дегидрогеназ в нейтрофилах крови проведено с помощью биолюминесцентного анализа. Установлено, что независимо от степени тяжести заболевания выявляется снижение спонтанного и индуцированного синтеза нейтрофилами супероксид-радикала. У больных с тяжелой степенью ОДП также нарушена кинетика синтеза первичных АФК. У больных со средней степенью тяжести повышается уровень синтеза нейтрофилами вторичных АФК, тогда как при тяжелой степени заболевания наблюдаются нарушения в кинетике синтеза вторичных АФК нейтрофилами, находящихся в состоянии относительного покоя, и повышение уровня синтеза при дополнительной индукции зимозаном. Метаболизм нейтрофилов у больных ОДП характеризуется активацией пластических процессов (за счет продуктов пентозофосфатного цикла) и аэробной энергетики (повышение интенсивности субстратного потока по циклу трикарбоновых кислот). Однако у больных со средней степенью тяжести нейтрофильный пул NADPH дополнительно поддерживается ферментативными реакциями маликфермента и NADP-зависимой глутаматдегидрогеназой. У больных с тяжелой степенью ОДП выявляется активация перекисных процессов, для компенсации которых требуется NADPH. Состояние энергетических процессов в нейтрофилах крови у больных ОДП характеризуется отсутствием изменений активности гликолиза и увеличением интенсивности субстратного потока по циклу трикарбоновых кислот. У больных со средней степенью тяжести заболевания активность аэробных процессов поддерживается продуктами аминокислотного обмена (через глутаматдегидрогеназы), тогда как при тяжелой степени ОДП – продуктами липидного катаболизма. С помощью корреляционного анализа исследована зависимость респираторного взрыва нейтрофилов от состояния их метаболизма. Установлено, что у лиц контрольной группы интенсивность и кинетика респираторного взрыва нейтрофилов зависит только от активности NADP-зависимых дегидрогеназ. У больных со средней степенью тяжести ОДП изменение активности внутриклеточных метаболических процессов привело к нарушению их регуляторного влияния на состояние респираторного взрыва нейтрофилов. У пациентов с тяжелой степенью заболевания респираторный взрыв нейтрофилов стимулируется реакциями восстановительного аминирования α-кетоглутарата, но ингибируется внутриклеточными перекисными процессами.

89-98 2488
Аннотация

Хроническая обструктивная болезнь легких (ХОБЛ) является социально значимым заболеванием. В основе ХОБЛ лежит хронический воспалительный процесс респираторного тракта, определяющий неуклонное прогрессирование обструкции бронхов. Актуальной современной проблемой является изучение роли цитокинов в иммунопатогенезе ХОБЛ. Биологические медиаторы определяют местное, системное воспаление и патофизиологические эффекты внесистемных проявлений патологического процесса. В работе проведено изучение спонтанной и индуцированной продукции цитокинов IL-4, IL-6, IL-8, IL-10 лейкоцитами крови у больных хронической обструктивной болезнью легких среднетяжелого и тяжелого течения вне обострения. Показано, что ведущая роль в формировании воспалительного процесса при ХОБЛ принадлежит цитокинам IL-6, IL-8. Установлено, что у пациентов наблюдалось значимое повышение как спонтанной, так и индуцированной продукции IL-6, IL-8 (p < 0,05). Индуцированная продукция цитокинов в большей степени отражает резервные возможности иммунокомпетентных клеток в ответ на действие патогенного фактора. С IL- 6, IL-8 в первую очередь связано формирование нейтрофильного типа воспаления, выражающегося в активации гранулоцитов, прежде всего нейтрофилов, в ответ на токсические (в частности, курение) и бактериальные патогены. Полученные результаты отражают тип и интенсивность воспаления дыхательных путей у больных хронической обструктивной болезнью легких и его персистирующее течение.

Высокие значения изучаемых цитокинов подтверждают их роль в ремоделировании бронхов и вносят свой вклад в необратимость обструкции при данной патологии. Выявлена взаимосвязь спонтанной и индуцированной продукции изучаемых цитокинов с клиническими показателями течения заболевания. У пациентов с высокими значениями спонтанной и индуцированной продукции IL-6, IL-8 отмечено статистически значимое повышение частоты рецидивов ХОБЛ (более 2 в течение года, р < 0,05) и наблюдались низкие значения ОФВ(р < 0,05). Возможно, это связано с персистирующим течением нейтрофильного воспаления респираторного тракта и прогрессирующей обструкцией бронхов. IL-6 и IL-8 вносят значимый вклад в патогенетические механизмы, определяя клиническое течение хронической обструктивной болезни легких, и могут служить маркерами тяжести патологического процесса. Несомненно, иммунные механизмы патологического воспаления при ХОБЛ сложны и многогранны. Изучение роли и значимости индуцированной продукции ведущих цитокинов поможет врачу в определении выбора и продолжительности необходимой терапии. Персонифицированный подход к терапии больных с ХОБЛ определяется фенотипом патологии, типом, выраженностью и интенсивностью воспаления.

99-106 1102
Аннотация

В настоящее время активно исследуется роль механизмов врожденного иммунитета в патогенезе бронхиальной астмы, в частности TLRs и цитокинов. В исследование были включены 42 пациента с бронхиальной астмой тяжелой степени в возрасте от 3-х до 12-ти лет и 67 здоровых детей того же возраста. Методом ПЦР-РВ оценивалась экспрессия генов TLR2, TLR4, TLR9 в соскобах со слизистых полости носа; методом иммуноферментного анализа оценивались цитокины (IL-33, TSLP, IL- 4, TGF-β1 и IL-28B) в назальных смывах. В результате проведенного исследования в соскобах со слизистой полости носа пациентов с бронхиальной астмой по сравнению со здоровыми детьми показано повышение экспрессии генов TLR2, TLR4, TLR9. Параллельно проведен анализ содержания важных цитокинов, секретируемых эпителием респираторного тракта при активации TLRs. При исследовании концентрации IL-33, TSLP, IL-4 в назальных смывах было выявлено достоверное повышение значений концентраций этих цитокинов в группе больных тяжелой степенью БА относительно группы контроля. Исследование уровня TGF-β в смывах из полости носа выявило выраженное, достоверное снижение уровня данного регуляторного цитокина в группе больных детей с БА. Важно отметить, что при оценке содержания противовирусного цитокина IL-28B в группе больных БА тяжелой степени выявлена тенденция к снижению в сравнении с показателями контроля.

Таким образом, можно заключить, что у больных тяжелой формой БА имеются нарушения в системе врожденного иммунитета на локальном уровне, проявляющиеся в гиперэкспрессии генов TLRs, увеличении выработки провоспалительных и эпителиальных цитокинов, снижении продукции противовирусного цитокина IL-28В и TGF-β1.

107-120 8389
Аннотация

В работе представлены данные по 41 пациенту с хроническим гепатитом С (1 генотип) и разной степенью фиброза печени, которые были получены в процессе противовирусной терапии с использованием интерферонсодержащих схем: пегилированный интерферон плюс рибавирин и пегилированный интерферон, рибавирин плюс ингибитор NS3/4A сериновой протеазы вируса гепатита С. В плазме крови измеряли концентрацию цитокинов/хемокинов: TNFα, CCL2/MCP-1, CCL20/ MIP-3α, CXCL9/MIG, CXCL10/IP-10, CXCL11/ITAC с помощью xMAP мультиплексного анализа, также проводили проточную цитофлуориметрию для определения экспрессии CCR6 и CXCR3 на популяциях лимфоцитов. Анализ результатов осуществляли с применением программы для статистического анализа данных R. Из 41 пациента 36 достигли вирусологического ответа, а 5 не ответили на терапию. Ответившие на лечение были разделены на две группы: без фиброза печени и с фиброзом 1, 2 и 3. В группе пациентов без фиброза печени в процессе терапии наблюдалось снижение концентрации CXCL11/ITAC и нарастание TNFα, а также увеличение содержания CTL CXCR3+ к 12 неделе терапии и увеличение содержания NK CXCR3+ к окончанию лечения. Наряду с этим в данной группе к концу лечения наблюдалось снижение содержания В-лимфоцитов с CXCR3+ рецептором. У пациентов с различной степенью фиброза печени было отмечено увеличение концентрации CCL2/MCP-1 в процессе лечения по сравнению с исходным уровнем. Также к окончанию терапии было выявлено увеличение относительного содержания NK CXCR3+ и TNK CCR6+ . Исследования подтверждают роль цитокинов/хемокинов TNFα, CCL2/MCP-1 и CXCL11/ITAC в процессе активации клеточного звена иммунитета и элиминации вируса гепатита С из организма. Они свидетельствуют о том, что активация Т-клеточного звена иммунитета у пациентов обеих групп и снижение В-лимфоцитов с CXCR3-рецептором у пациентов первой группы является прогностически положительным фактором в отношении эффективности терапии с использованием интерферонов. Два из исследованных цитокинов/хемокинов (TNFα и CCL20/MIP3α) различались на старте терапии у пациентов, ответивших и не ответивших на лечение. По результатам статистического анализа перед лечением концентрация TNFαдемонстрировала тенденцию к различию, а CCL20/MIP3α – достоверное различие у пациентов этих групп. При этом концентрация CCL20/MIP3α в плазме крови пациентов, не ответивших на лечение, была более чем в 4 раза выше, чем у пациентов, достигших вирусологического ответа. Таким образом, данное исследование дает возможность предложить на роль предиктора исхода терапии хемокин CCL20/MIP3α.

121-128 1194
Аннотация

У 66 пациентов с активным РА, получающих стабильные дозы DMARD, сравнивалась клиническая эффективность и безопасность применения симвастатина в дозе 40 мг однократно в сутки в течение 12 недель (33 больных – 1 группа) и фенофибрата 145 мг в сутки в течение 12 недель (33 больных – 2 группа). Первичной конечной точкой было изменение индекса активности болезни с 28-суставным счетом (Disease Activity Score with 28 joint count, DAS28). Симвастатин и фенофибрат статистически значимо снижали показатели DAS28 к концу лечения, умеренный EULAR-ответ и ACR20-ответ при приеме фенофибрата выявлялись в полтора раза чаще, чем при приеме симвастатина. Серьезных нежелательных явлений в обеих группах больных не зарегистрировано. Клинический эффект был ассоциирован с плейотропным действием как симвастатина, так и фенофибрата. Оба препарата, помимо противовоспалительного действия, снижали уровень иммунологических маркеров атеросклероза – СРБ и IL-6. У пациентов, принимавших симвастатин по окончании курса терапии, зарегистрировано снижение уровня сывороточного IL-17. В обеих группах больных содержание IL-8, TNFα, IFNγ в сыворотке ПК в конце лечения не изменилось. Прием препаратов не влиял на уровень общего холестерина сыворотки, терапия симвастатином снижала содержание холестерина липопротеидов низкой плотности и увеличивала содержание холестерина липопротеидов высокой плотности. У больных, получавших фенофибрат, отмечено снижение уровня триглицеридов. Заключается, что симвастатин и фенофибрат у больных РА с высоким риском развития атеросклероза, не адекватно отвечающих на прием стандартных DMARD, являются препаратами выбора. Разработка показаний для приема каждого из них требует более масштабных сравнительных исследований.

129-136 810
Аннотация

Проведено исследование иммунных показателей у больных впервые выявленным инфильтративным туберкулезом легких в процессе специфической противотуберкулезной терапии. Исследование проводилось в три этапа: при госпитализации до начала терапии, через 2 месяца и 4 месяца лечения. В зависимости от вида лечения больные были разделены на две группы: группа сравнения, принимающая стандартную противотуберкулезную терапию (СПТ, n = 33), и группа антистрессовой нейротехнологической коррекции (НТК, n = 35), которой, наряду со стандартным лечением, дополнительно проводили сеансы аудио-визуально-вибротактильной стимуляции (АВВС, 2-3 сеанса в неделю по 30 мин на протяжении 4 месяцев). Клинические группы наблюдения сравнивались с группой контрольных испытуемых (КИ). Показано, что на момент госпитализации и до лечения по совокупности исследуемых иммунных показателей группы пациентов достоверно не различались между собой. Установлено, что пациенты обеих групп при поступлении в стационар характеризовались снижением количества и активности фагоцитирующих моноцитов и гранулоцитов по сравнению с группой КИ. Важным является факт, что в процессе терапии к концу 4-го месяца наблюдений в группе НТК по сравнению с группой СПТ достоверно увеличивались количество и активность фагоцитирующих моноцитов (p < 0,01) и фагоцитирующих гранулоцитов (p < 0,05). Одновременно в группе НТК полости распада закрылись терапевтическим путем у 90,5% пациентов, а в группе СПТ – у 45%. Полученные результаты свидетельствуют об обоснованности комплексного применения антистрессовых нейротехнологий наряду со специфической химиотерапией при лечении больных впервые выявленным инфильтративным туберкулезом легких.

КРАТКИЕ СООБЩЕНИЯ

137-140 992
Аннотация

Высокорегулируемую форму запрограммированной смерти клетки с характерными морфологическими и биохимическими признаками определяют как апоптоз. Разнообразные факторы, в том числе и металлы, способны оказывать воздействие на интенсивность протекания реакции запрограммированной клеточной гибели. Цель работы – моделирование в системе in vitro апоптоза в условиях экспозиции стабильным стронцием. Обследовали детское население, потребляющее питьевую воду с повышенным содержанием стронция (Sr2+) (n = 49). Уровень апоптоза лимфоцитов определяли на проточном цитометре с помощью окрашивания аннексином V, конъюгированным с FITC (AnnV-FITC), и пропидиум йодидом (PI), определяли AnnV-FITC+PI- – ранний апоптоз, AnnV-FITC+PI+ – поздний апоптоз и некроз. Лейкоциты, выделенные у обследуемого контингента, инкубировали со Sr2+ в концентрации 7,0 мг/дм3 (концентрация, соответствующая ПДК для воды водных объектов) в течение 4 часов при 37 ºС. Экспрессию маркеров апоптоза CD95 и р53 проводили методом проточной цитометрии с использованием меченых моноклональных антител. Экспозиция стронцием in vitro характеризовалась достоверным снижением уровня экспрессии регуляторных факторов апоптоза мембранного маркера CD95 и внутриклеточного транскрипционного белка р53 в 1,56 раза и в 1,68 раза соответственно. Одновременно отмечено достоверное уменьшение в 4,68 раза количества AnnV-FITC+PI- клеток, а также статистически значимое повышение в 1,35 раза процентного содержания AnnV-FITC+PI+ клеток. Кроме того, во всех пробах количество AnnV-FITC+PI- лимфоцитов было ниже физиологической нормы и контрольных значений, а количество проб, где содержание AnnV-FITC+PI+ лимфоцитов превышало установленные нормативы и контрольные значения, составляло 30,8%. Таким образом, экспериментально доказано, что стронций в концентрации, соответствующей ПДК для водных объектов, с высокой степенью достоверности ингибирует гибель клетки по пути апоптоза с переключением на реализацию клеточной гибели путем некроза по критерию содержания фосфатидилсерина, выявляемого в тесте с аннексином V. Полученные данные выявили способность стронция оказывать существенное воздействие на показатели регуляции и поддержания клеточного гомеостаза, влияя на интенсивность протекания процесса апоптоза смещением баланса в сторону реализации клеточной гибели путем некроза и снижая экспрессию регуляторных факторов. Результаты исследования могут использоваться для идентификации и обоснования маркерных показателей нарушений иммунного ответа при оценке внешнесредового воздействия стронция на здоровье населения в условиях специфического факторного окружения.

141-148 914
Аннотация

Целью работы было изучение ассоциаций полиморфных аллельных вариантов 3954C>T (rs1143644) и -511 C>T (rs16944) гена IL1B в группах пациентов с преимущественно сенсорной хронической воспалительной демиелинизирующей полиневропатией (ПС-ХВДП) из Красноярского края и Республики Саха (Якутия). Всего обследовано 95 человек, разделенных на 2 группы по территории проживания. Первую группу составили 42 пациента, проживающие на территории Республики Саха (Якутия), в возрасте от 15 до 62 лет. Вторая группа включала 53 пациента, проживающих на территории Красноярского края, в возрасте от 5 до 78 лет. Установлено, что в локусе 3954C>T носительство гомозиготного генотипа CC чаще выявляется у пациентов из Республики Саха (Якутия), а носительство генотипа TT характерно исключительно у пациентов из Красноярского края. По частоте встречаемости различных генотипов в локусе -511C>Т между двумя группами пациентов статистически значимые различия не выявлены. Носительство генотипа СС в локусе 3954C>T статистически значимо повышает шанс заболевания у пациентов из Республики Саха (Якутия), в то время как носительство генотипов CT и TT в локусе 3954C>T и генотипа TT в локусе -511C>T, напротив, повышает риск болезни среди пациентов Красноярского края. По частоте встречаемости носительства различных генотипов в локусах 3954С>T и -511C>T гена IL1B среди пациентов из Республики Саха (Якутия) превалировала ассоциация генотипов СС/СТ (р = 0,005), у пациентов из Красноярского края с равной частотой выявлено преобладание генотипов СС/СС и СС/CT (р = 0,023). Однако статистически значимого различия по частоте встречаемости отдельных генотипов в двух изучаемых группах не выявлено. При анализе частоты носительства высокопродуцирующих аллелей 3954С и -511C у пациентов ПС-ХВДП показано, что они статистически значимо чаще встречались как среди пациентов из Республики Саха (Якутия), так и среди пациентов из Красноярского края по сравнению с низкопродуцирующими аллелями 3954Т и -511Т. При этом аллель 3954С чаще встречался в якутской группе (р = 0,001), а аллель -511C – в красноярской группе пациентов (р = 0,05). Наличие аллелей 3954Cи -511Сповышает вероятность развития ПС-ХВДП у пациентов из Республики Саха (Якутия), а наличие аллеля 3954Т – у пациентов из Красноярского края.

149-156 1553
Аннотация

Заболеваемость туберкулезом легких (ТБ) приобретает широкие масштабы в связи с расширением спектра резистентности Mycobacterium tuberculosis (МБТ) к противотуберкулезным средствам и высокой вирулентностью инфицирующих штаммов МБТ. Антигены МБТ способны вызывать дисфункцию рецепторного аппарата и модулировать цитокинсекреторную функцию иммунокомпетентных клеток. Полиморфизм генов провоспалительных цитокинов, которые вовлечены в механизмы защитных реакций врожденного иммунитета, определяет степень резистентности индивида к микобактериальной инфекции, а также тяжесть и продолжительность заболевания в случае его клинической манифестации. Цель работы: исследование связи аллельного полиморфизма генов TNFA, IL2, IFNG c изменениями in vitro секреции TNFα, IL-2, IFNγ мононуклеарными лейкоцитами у пациентов с впервые выявленным туберкулезом легких в зависимости от клинической формы заболевания.

Обследовано 334 больных (220 мужчин и 114 женщин) в возрасте от 23 до 50 лет с впервые выявленным инфильтративным ТБ (ИТБ) и диссеминированным ТБ (ДТБ). Группу сравнения составили 183 здоровых донора (130 мужчин и 53 женщины) аналогичного возраста. Материалом исследования являлись ДНК, экстрагированная из цельной крови, и супернатанты культуральных суспензий мононуклеарных лейкоцитов, выделенных из венозной крови у здоровых добровольцев и больных ТБ. Оценку секреции цитокинов осуществляли путем измерения их концентрации в культуральных супернатантах мононуклеарных лейкоцитов методом твердофазного иммуноферментного анализа (ЕLISА). Для исследования полиморфных участков генов цитокинов использовали полимеразную цепную реакцию (ПЦР). Анализ полученных данных осуществляли с помощью программы Statistica for Windows Version 6.0 (StatSoft Inc., США).

Дисбаланс секреции провоспалительных цитокинов у больных TБ ассоциирован с носительством полиморфных вариантов их генов. Продемонстрировано, что гипосекреция IL-2 определяется носительством аллеля G и генотипа GG (T-330G) гена IL2 как в контрольной группе, так и у больных ТБ вне зависимости от клинической формы. У больных ДТБ – носителей гомозиготного генотипа ТТ (T-330G) гена IL2 – установлена повышенная секреция белка. Максимальная секреция TNFα регистрировалась у лиц с генотипом АА (G-308A) гена TNFA в контрольной группе и у больных ИТБ, минимальная концентрация TNFαсвязана с носительством гомозиготного генотипа GG (G-308A) гена TNFA во всех обследованных группах. У больных ИТБ и ДТБ повышение секреции IFNγ мононуклеарными лейкоцитами крови не связано с носительством полиморфизма +874A/T гена IFNG.

Снижение секреции IL-2 и TNFα у больных ТБ ассоциировано с полиморфизмами их генов – (T-330G) гена IL2 и (G-308A) гена TNFA соответственно. Полиморфизм (+874A/T) гена IFNG не оказывает модулирующего влияния на секрецию IFNγ при ТБ вне зависимости от клинической формы болезни.

157-164 943
Аннотация

Рак прямой кишки – одно из самых распространенных злокачественных заболеваний не только в России, но и во всем мире, составляет 5-6% всех злокачественных опухолей человека. Нейтрофильные гранулоциты активно вовлекаются в реализацию противоопухолевого ответа. Ключевую роль в регрессии опухоли отводят активным формам кислорода, продуцируемым нейтрофилами.

В связи с этим целью нашей работы явилось изучение особенностей спонтанной и индуцированной хемилюминесцентной активности нейтрофильных гранулоцитов у больных раком прямой кишки до начала патогенетической терапии и в динамике.

В работе приведены результаты лабораторного исследования показателей функциональной активности нейтрофильных гранулоцитов 36 больных раком прямой кишки, больные находились на разных стадиях онкологического процесса. Контрольная группа состояла из 112 практически здоровых добровольцев, сопоставимых по полу и возрасту с группой обследованных больных. Объектом исследования служила венозная кровь, которую брали у пациентов из локтевой вены в вакуумные пробирки с литий-гепарином утром натощак до проведения оперативного лечения и на 7 сутки после операции. Оценку спонтанной и индуцированной хемилюминесценции осуществляли в течение 90 минут на 36-канальном хемилюминесцентном анализаторе “CL 3606” (Россия). Определялись следующие характеристики: время выхода кривой на максимум интенсивности хемилюминесценции (Tmax), максимальное значение интенсивности хемилюминесценции (Imax), площадь под кривой хемилюминесценции (S). В качестве усилителя хемилюминесценции использовали люминол. Индуктором респираторного взрыва служил опсонизированный зимозан. Усиление хемилюминесценции, индуцированной опсонизированным зимозаном, оценивали по соотношению площади индуцированной (Sинд.) к площади спонтанной (Sспонт.) хемилюминесценции и обозначали индексом активации.

Анализ хемилюминесцентной активности нейтрофильных гранулоцитов показал достоверное увеличение активности спонтанной хемилюминесценции на III и IV стадиях заболевания. Индуцированная опсонизированным зимозаном продукция активных форм кислорода нейтрофильными гранулоцитами повышается во всех исследуемых группах относительно контрольных параметров. Площадь под кривыми спонтанной и индуцированной хемилюминесценции у больных раком прямой кишки на всех стадиях онкологического процесса меньше по отношению к контрольной группе, что, несмотря на высокие показатели максимальной активности хемилюминесценции, может свидетельствовать о недостаточной суммарной продукции активных форм кислорода. Показатели времени выхода на максимум кривых хемилюминесценции у больных раком прямой кишки на всех стадиях заболевания не имели статистически значимых различий от группы контроля.

165-170 822
Аннотация

Исследование особенностей адаптации организма в условиях техногенного изменения среды обитания, особенно у детского населения, позволит сформировать комплекс маркерных диагностических критериев для оценки состояния здоровья и раннего выявления патологических тенденций формирования повышенной чувствительности к факторам внешнесредового окружения и повысить эффективность лечебно-профилактических мероприятий. Металлы способны изменять функциональную активность иммунной системы, оказывая, в зависимости от свойств металла, концентрации, источника и продолжительности воздействия, как иммуностимулирующее, так и супрессивное влияние на иммунную реактивность. Цель работы – исследование особенностей изменения маркеров гиперчувствительности у детей, проживающих в условиях внешнесредового воздействия алюминия. Проведено обследование детского населения школьного возраста от 7 до 11 лет (средний возраст 8,82±0,11 лет), постоянно проживающего на территории активного промышленного воздействия, связанного с загрязнением среды обитания соединениями алюминия. Группу сравнения составили дети из «условно чистого» района с допустимыми показателями качества среды обитания. Оценивали особенности формирования сенсибилизации к алюминию с вовлечением как реагинового, так и альтернативного медиаторного (лейкотриены и простагландины) механизма, а также участие цитокинов в развитии повышенной чувствительности к металлу в эксперименте ех vivo. Показано, что повышенный уровень металла в крови детей группы наблюдения, в среднем в 1,43 раза от показателей группы сравнения (группа наблюдения 0,020±0,005 мкг/мл, группа сравнения 0,014±0,003 мкг/ мл), сопровождается увеличением содержания IgЕ-антител в 2,13 раза относительно референтных значений (213,55±88,10 МЕ/мл при норме < 100,0 МЕ/мл), специфических IgG-антител к алюминию – в 1,55 раза относительно группы сравнения (группа наблюдения 0,157±0,054 у. е., группа сравнения 0,101±0,041 у. е.), а также повышением спонтанной продукции лейкотриенов С4/D4/E4 в 2,09 раза (группа наблюдения 80,60±19,44 пг/мл; группа сравнения 38,51±2,40 пг/мл), которая возрастала при экспериментальной стимуляции алюминием в 1,67 раза, при этом уровень простагландина F2α у детей группы наблюдения был повышен в 1,9 раза (группа наблюдения 892,62±97,20 пг/мл; группа сравнения 457,11±132,99 пг/мл) (р < 0,05). В условиях экспериментального воздействия металла ех vivo отмечены преимущественно угнетающие эффекты алюминия на продукцию цитокинов IL-4 в 2,13 раза по сравнению с контрольными значениями (группа наблюдения 0,64±0,23 пг/мл; группа сравнения 1,36±0,09 пг/мл), IL-17 – в 1,90 раза (группа наблюдения 1,08±0,27 пг/мл; группа сравнения 2,05±0,37 пг/мл) (р < 0,05). Исследованные показатели могут применяться в качестве маркеров повышенной чувствительности к алюминию и использоваться для мониторинга здоровья населения и прогнозирования.

ХРОНИКА

171-188 1236
Аннотация

Обзорная статья написана по материалам 11-го международного конгресса по аутоиммунитету и Первой академии аутоиммунитета, прошедших с 14 по 20 мая 2018 г. в Лиссабоне. В первой части рассматриваются и обсуждаются формирование, основные проблемы и перспективы развития аутоиммунологии как интегральной отрасли фундаментальной и клинической медицины, занятой изучением, диагностикой, лечением и профилактикой аутоиммунных болезней различных органов и систем. Этих форм патологии насчитывают до 90. Дана сводка всех проведенных в рамках Академии аутоиммунитета лекций, включая обсуждение затронутых в ходе Академии новейших и дискуссионных аспектов развития современного учения об иммунной системе, аутоиммунитете и аутоиммунной патологии. Представлены сведения о проблемах современной иммунологии, связанных с использованием больших баз клинико-лабораторных данных и с экстраполяцией на человека данных экспериментов на животных. Освещены новейшие представления о врожденном иммунитете, включая популяции врожденных лимфоидных клеток, о роли различных групп рецепторов системы врожденного иммунитета, об участии механизмов врожденного иммунитета в возникновении аутоиммунной патологии. Представлены современные концепции презентации антигенов, включая классификацию дендритных клеток, альтернативные пути активации макрофагов, костимуляторные и тормозные взаимодействия лигандов и рецепторов лимфоцитов и антигенпредставляющих клеток. Освещены новейшие представления о субпопуляциях Т-лимфоцитов и их роли, включая функции Tfh-клеток и взаимоотношения этих субпопуляций при различных иммунных ответах. Обсуждается влияние микробиоты на субпопуляции Т-клеток. Сформулированы основные закономерности явления иммунологической памяти. Освещены вопросы антителообразования и функций В-лимфоцитов с учетом недавно открытых механизмов внутриклеточного проникновения иммуноглобулинов и аффинного созревания лимфоидных клонов. Описаны связанные с воздействиями на В- и Т-лимфоциты новые терапевтические подходы в лечении аутоиммунных болезней. Освещены механизмы центральной и периферической аутотолерантности с учетом данных о функции AIRE-гена и Т-регуляторов. Рассматривается роль Т-регуляторов при плацентогенезе. По-новому трактуется роль интерлейкина-2 и его рекомбинантных аналогов в иммунных взаимодействиях, с учетом не только их иммуностимулирующего, но и, в определенных условиях, – иммуносупрессорного потенциала. Уделено значительное внимание тормозным рецепторам Т-лимфоцитов и иммунобиотерапевтическим воздействиям на них. Кратко обсуждены история и современное состояние онкоиммунологии и применение ингибиторов тормозных рецепторов Т-лимфоцитов в онкологии, включая побочные эффекты такого лечения. Даны сведения о прошедшей 21-23 сентября 2018 г. Второй Академии аутоиммунитета в Санкт-Петербурге.

ЮБИЛЕИ



Creative Commons License
Контент доступен под лицензией Creative Commons Attribution 4.0 License.


ISSN 1563-0625 (Print)
ISSN 2313-741X (Online)