Субпопуляционный состав лимфоцитов цереброспинальной жидкости детей с острой респираторной вирусной инфекцией, протекающей с синдромом менингизма
https://doi.org/10.15789/1563-0625-2019-6-1033-1042
Аннотация
Актуальность изучения особенностей интратекального клеточного иммунного ответа на инфекции центральной нервной системы обусловлена ограниченностью имеющихся сведений о механизмах иммунной защиты мозга в норме и патологии. Использование в клинической лабораторной диагностике метода многоцветной проточной цитометрии позволило углубленно изучать клеточный состав биологических жидкостей, включая цереброспинальную жидкость (ЦСЖ). Однако в современной литературе данные о субпопуляционном составе лимфоцитов ЦСЖ единичны. Существенной проблемой остается получение референсных значений. Исследование состава пула лимфоцитов ЦСЖ у пациентов с подозрением на инфекционное поражение мозга, не подтвержденным проведенным обследованием, может явиться одним из возможных решений проблемы. К числу таких заболеваний относятся острые респираторные вирусные инфекции (ОРВИ), протекающие с синдромом менингиз-ма. Цель работы — охарактеризовать субпопуляционный состав лимфоцитов ЦСЖ детей с ОРВИ без менингита для получения базисных (контрольных) значений в диагностике воспалительных заболеваний ЦНС. Исследован субпопуляционный состав лимфоцитов ЦСЖ 27 детей, переносящих ОРВИ с синдромом менингизма, методом проточной цитометрии на анализаторе FACSCalibur с использованием реагентов BD MultiTEST IMK Kit и последующей обработкой данных с помощью программы FlowJo. Исследовано содержание основных: Т-клеток (CD3+), Т-хелперов (CD3+CD4+Th), цитотоксических Т-лимфоцитов (CD3+CD8+CTL), натуральных киллеров (СD3-CD16+CD56+NK), В-клеток (CD3-CD19+) и малых субпопуляций лимфоцитов: двойных позитивных (DP) (CD3+CD4+CD8+) и двойных негативных (DN) (CD3+CD4-CD8-) Т-клеток, NKT (СD3+CD16+CD56+), CD3+CD8bright, CD3+CD8dim, CD3-CD8+NK. Статистическая обработка данных выполнена с использованием стандартной программы GraphPad Prism 5. Среди основных популяций в ЦСЖ выявлено доминирование Т-лимфоцитов (96,2%) и их субпопуляций — CD4Th (53,4%) и CD8+CTL (28,2%) — при незначительном количестве NK (2,2%) и B-лимфоцитов (0,7%). Среднее относительное содержание малых субпопуляций — DN или DP Т-клеток и NKT-клеток — составило 5,3, 4,0 и 9% соответственно. Выявлены возрастные особенности содержания основных и малых субпопуляций. C увеличением возраста у детей в ЦСЖ нарастает относительное количество CD3+T-KneTOK и CD4+Th (как и соотношение CD4/CD8) и снижается доля NK, а также DN и CD3+CD8dimТ-лимфоцитов. Полученные результаты характеризуют особенности лимфоцитарного пула ЦСЖ у детей без воспалительного процесса в ЦНС и могут быть использованы в качестве контроля (отсутствие признаков воспаления в ЦСЖ) при изучении иммунопатогенеза нейроинфекций и других воспалительных заболеваний ЦНС у детей разных возрастных групп.
Ключевые слова
Об авторах
А. А. ЖирковФГБУ Детский Научно-Клинический Центр Инфекционных Болезней ФМБА России, Санкт-Петербург, Россия
Россия
Жирков Антон Анатольевич - младший научный сотрудник отдела клинической лабораторной диагностики.
197002, Санкт-Петербург, ул. Профессора Попова, 9, Тел.: 8 (911) 932-55-32
Конфликт интересов: нет
Л. А. Алексеева
Россия
Алексеева Лидия Аркадьевна – доктор биологических наук, руководитель, ведущий научный сотрудник отдела клинической лабораторной диагностики.
Санкт-Петербург
Конфликт интересов: нет
Г. Ф. Железникова
Россия
Железникова Галина Федоровна - доктор медицинских наук, профессор, старший научный сотрудник отдела клинической лабораторной диагностики.
Санкт-Петербург
Конфликт интересов: нет
Н. Е. Монахова
Россия
Монахова Нина Евгеньевна — научный сотрудник отдела клинической лабораторной диагностики.
Санкт-Петербург
Конфликт интересов: нет
Т. В. Бессонова
Россия
Бессонова Татьяна Валерьевна — научный сотрудник отдела клинической лабораторной диагностики.
Санкт-Петербург
Конфликт интересов: нет
Список литературы
1. Алексеева Л.А., Железникова Г.Ф., Жирков А.А., Скрипченко Н.В., Вильниц А.А., Монахова Н.Е., Бессонова Т.В. Субпопуляции лимфоцитов и цитокины в крови и цереброспинальной жидкости при вирусных и бактериальных менингитах у детей // Инфекция и иммунитет, 2016. Т. 6, № 1. С. 33-44. doi: 10.15789/2220-7619-2016-1-33-44.
2. Балмасова И.П., Венгеров Ю.Я., Раздобарина С.Е, Нагибина М.В. Иммунопатогенетические особенности бактериальных гнойных менингитов // Эпидемиология и инфекционные болезни, 2014. Т. 19, № 5. С. 17-22.
3. Скрипченко Н.В., Алексеева Л.А., Железникова Г.Ф. Ликвор и его клиническое значение при инфекционных заболеваниях нервной системы // Педиатр, 2011. Т. 2, № 3. С. 21-31.
4. Хайдуков С.В., Байдун Л.В. Современные подходы к оценке клеточной составляющей иммунного статуса // Медицинский алфавит, 2015. Т. 2, № 8. С. 44-51.
5. Alvermann S., Hennig C., Olaf S., Heinz W., Stangel M. Immunophenotyping of cerebrospinal fluid cells in multiple sclerosis in search of biomarkers. JAMA Neurology, 2014, Vol. 71, no. 7, pp. 905-912.
6. Campbell J.P., Guy K., Cosgrove C., Florida-James G.D., Simpson R.J. Total lymphocyte CD8 expression is not a reliable marker of cytotoxic T-cell populations in human peripheral blood following an acute bout of high-intensity exercise. Brain. Behav. Immun., 2008, Vol. 22, no. 3, pp. 375-380.
7. d’Acquisto F., Crompton T. CD3+CD4-CD8- (double negative) T cells: saviours or villains of the immune response? Biochem. Pharmacol., 2011, Vol. 82, no. 4, pp. 333-340.
8. Das G., Augustine M. M., Das J., Bottomly K., Ray P., Ray A. An important regulatory role for CD4+CD8aa T cells in the intestinal epithelial layer in the prevention of inflammatory bowel disease. PNAS, 2003, Vol. 100, no. 9, pp. 5324-5329.
9. de Graaf M.T., Smitt P.A., Luitwieler R.L., van Velzen C., van den Broek P.D., Kraan J., Gratama J.W. Central memory CD4+T cells dominate the normal cerebrospinal fluid. Cytometry Part B (Clinical Cytometry), 2011, Vol. 80, no. 1, pp. 43-50.
10. Eller M.A., Goonetilleke N., Tassaneetrithep B., Eller L.A., Costanzo C., Johnson S., Betts M.R., Krebs S.J., Slike B.M., Nitayaphan S., Rono K., Tovanabutra S., Maganga L., Kibuuka H., Jagodzinski L., Peel S., Rolland M., Marovich M.A., Kim J.H., Michael N.L., Robb M.L., Streeck H. Expansion of inefficient HIV-specific CD8+ T cells during acute infection. J. Virol., 2016, Vol. 90, no. 8, pp. 4005-4016.
11. Ichiyama T., Kajimoto M., Matsushige T., Shiraishi M., Suzuki Y., Furukawa S. Mononuclear cell subpopulations in CSF and blood of children with bacterial meningitis. J. Infect., 2009, Vol. 58, no. 1, pp. 28-31.
12. Kitchen S.G., Jones N.R., LaForge S., Whitmire J.K., Vu B.A., Galic Z., Brooks D.G., Brown S.J., Kitchen C.M., Zack J.A. CD4 on CD8+ T cells directly enhances effector function and is a target for HIV infection. PNAS, 2004, Vol. 101, no. 23, pp. 8727-8732.
13. Subira D., Castanon S., Aceituno E., Hernandez J., Jimenez-garofano C., Jimenez A., Jimenez A.M., Roman A., Orfao A. Flow cytometric analysis of cerebrospinal fluid samples and its usefulness in routine clinical practice. Am. J. Clin. Pathol., 2002, Vol. 117, no. 6, pp. 952-958.
14. Svenningsson A., Andersen O., Edsbagge M., Stemme S. Lymphocyte phenotype and subset distribution in normal cerebrospinal fluid. J. Neuroimmunol., 1995, Vol. 63, no 1, pp. 39-46.
Дополнительные файлы
![]() |
1. Метаданные | |
Тема | ||
Тип | Исследовательские инструменты | |
Скачать
(13KB)
|
Метаданные |
![]() |
2. Титульный лист | |
Тема | ||
Тип | Исследовательские инструменты | |
Скачать
(27KB)
|
Метаданные |
![]() |
3. Резюме (рус.) | |
Тема | ||
Тип | Исследовательские инструменты | |
Скачать
(33KB)
|
Метаданные |
![]() |
4. Резюме (англ.) | |
Тема | ||
Тип | Исследовательские инструменты | |
Скачать
(29KB)
|
Метаданные |
![]() |
5. Рисунок 1. Последовательность выделения основных и малых субпопуляций лимфоцитов | |
Тема | ||
Тип | Исследовательские инструменты | |
Скачать
(62MB)
|
Метаданные |
![]() |
6. Подпись к рисунку 1 | |
Тема | ||
Тип | Исследовательские инструменты | |
Скачать
(11KB)
|
Метаданные |
![]() |
7. Таблица 1 | |
Тема | ||
Тип | Исследовательские инструменты | |
Скачать
(18KB)
|
Метаданные |
![]() |
8. Таблица 2 | |
Тема | ||
Тип | Исследовательские инструменты | |
Скачать
(15KB)
|
Метаданные |
|
9. Подписи авторов | |
Тема | ||
Тип | Исследовательские инструменты | |
Посмотреть
(1MB)
|
Метаданные |
![]() |
10. Литература | |
Тема | ||
Тип | Прочее | |
Скачать
(18KB)
|
Метаданные |
Рецензия
Для цитирования:
Жирков А.А., Алексеева Л.А., Железникова Г.Ф., Монахова Н.Е., Бессонова Т.В. Субпопуляционный состав лимфоцитов цереброспинальной жидкости детей с острой респираторной вирусной инфекцией, протекающей с синдромом менингизма. Медицинская иммунология. 2019;21(6):1033-1042. https://doi.org/10.15789/1563-0625-2019-6-1033-1042
For citation:
Zhirkov A.A., Alekseeva L.A., Zheleznikova G.F., Monakhova N.E., Bessonova T.V. Subsets of cerebrospinal fluid lymphocytes in acute pediatric respiratory viral infection with meningeal syndrome. Medical Immunology (Russia). 2019;21(6):1033-1042. (In Russ.) https://doi.org/10.15789/1563-0625-2019-6-1033-1042