Проблема изучения сердечно-сосудистых заболеваний (ССЗ) на протяжении долгого времени остается чрезвычайно важной, и поэтому существует множество работ, в которых предлагаются новые способы диагностики и терапии данной группы заболеваний. Большие возможности дает изучение молекулярных взаимодействий для более точного понимания патогенеза сердечно-сосудистой патологии. Множество исследований в последнее время посвящено поиску маркеров риска развития ССЗ с целью более точной и ранней диагностики. В данной работе проведен анализ последних литературных данных, посвященных роли белка теплового шока 70 (HSP70) в сердечно-сосудистой патологии. Рассматривается его участие в таких процессах, как артериальная гипертензия, ишемическая болезнь сердца, атеросклероз. В атерогенезе большую роль играют сывороточные белки теплового шока 70. Доказано, что у пациентов с большой концентрацией циркулирующих в крови молекул белков теплового шока наблюдались увеличенные значения толщины комплекса интима-медиа сонных артерий. Отмечена важная роль антител к циркулирующим HSP70. Найдена ассоциация высоких уровней данных антител с атеросклерозом у пациентов с артериальной гипертензией в анамнезе, с инфарктом миокарда. Низкие уровни анти-HSP70-антител наблюдаются у пациентов с острым коронарным синдромом. Это доказывает сложность механизма и двоякую роль антител против сывороточных белков теплового шока 70. Таким образом, антитела против белков теплового шока 70 могут оцениваться как протективный маркер, так же как и предикторный, что требует дальнейшего изучения вопроса, а сами молекулы HSP70 могут каким-либо образом участвовать в развитии сердечно-сосудистых патологий. Большое внимание уделено роли воспалительного процесса и механизмам врожденного иммунитета при ССЗ. Так как в настоящее время считается, что эндогенные сигналы опасности (Danger-associated molecular patterns – DAMPs) вовлечены в патогенез этих патологий в контексте модели «опасности/повреждения». Согласно этой модели, пусковым фактором является стрессовое воздействие, ведущее к высвобождению DAMPs и их связыванию с рецепторами врожденного иммунитета – Toll-like receptors (TLRs). Активация TLRs запускает в клетке сигнальный каскад, ведущий к синтезу провоспалительных цитокинов. Это способствует развитию воспаления, которое может провоцировать появление новых патологических процессов в организме и ухудшать течение уже имеющихся заболеваний. Выявление новых потенциальных маркеров и знание молекулярных механизмов патогенеза ССЗ могут сыграть важную роль при разработке нового индивидуального подхода к профилактике сердечно-сосудистых заболеваний у пациентов.

В обзоре обобщены последние мировые научные данные о роли рецепторов к иммуномедиаторам в регуляции биологических эффектов, оказываемых на клетки. Для основных классов регуляторов иммунной системы (интерлейкинов, интерферонов, факторов роста и факторов некроза опухоли) представлены варианты участия рецепторов как компонентов взаимодействия цитокин/клетка на примере in vitro и in vivo исследований. Показана способность показателей экспрессии рецепторов менять характер и тип данного взаимодействия. Проанализированы данные об участии рецепторов к регуляторным молекулам в развитии иммуноопосредованных заболеваний различного генеза. Продемонстрировано, что изменение уровня экспрессии рецепторов имеет большое значение в оценке функционального ответа клетки на медиатор и в развитии патологических состояний. В исследованиях подтверждены данные о влиянии плотности рецепторов на процессы пролиферации и апоптоза, а также обменные процессы, что является триггером в развитии аутоиммунных, онкологических и дистрофических заболеваний. Для всех рассмотренных классов регуляторных молекул характерным является изменение плотности экспрессии рецепторов как одного из ключевых моментов регулирования функциональной активности клеток. Таким образом, изучение уровня экспрессии рецепторов на мембране клеток является важным в понимании патогенеза, а изменение уровня экспрессии может рассматриваться как терапевтическая мишень в лечении различных заболеваний.

На настоящий момент онкологические заболевания являются одной из основных причин смертности и заболеваемости у населения. Последние достижения в области изучения молекулярно-генетических механизмов онкогенеза и иммунного ответа организма открывают широкие возможности для создания новых эффективных средств борьбы с неопластическими заболеваниями, более специфичных к опухолевым клеткам и менее токсичных для организма. Одними из наиболее многообещающих подходов являются иммунотерапевтические противораковые вакцины и онколитические вирусы. Для проведения быстрого и надежного скрининга и доклинического тестирования необходимо использование релевантных животных моделей. Такие модели обеспечивают возможность воспроизвести микроокружение и васкуляризацию опухоли, а также, в некоторой мере, воздействие иммунной системы. Наиболее активно в исследованиях раковых заболеваний используются аллографтные и ксенографтные опухолевые модели. Аллогенная трансплантация предполагает перенос раковых клеток или фрагментов опухоли от одного организма к другому организму того же вида. Ксенопластическая трансплантация предполагает перенос опухолевых клеток или тканей между организмами, относящимися к разным биологическим видам. Для ксенотрансплантации могут быть использованы как клеточные линии, так и клетки опухоли, полученные от пациентов в результате биопсии. За последние несколько десятилетий исследователям удалось разработать целый ряд линий иммунодефицитных мышей и крыс, пригодных для использования в качестве моделей человеческих опухолей. Однако несмотря на достигнутые успехи такие модели имеют существенные ограничения, связанные с невозможностью полностью воспроизвести микроокружение опухоли, реконструировать функциональную иммунную систему человека у мышей, а также с развитием реакции отторжения трансплантата. Таким образом при планировании экспериментов необходим тщательный анализ и критическое рассмотрение достоинств и недостатков различных линий животных, используемых в экспериментальной онкологии.

С целью изучения влияния модуляторов метилирования ДНК на продукцию про- и противовоспалительных цитокинов фибробластоподобными синовиальными клетками (ФСК) использовались клетки, полученные из синовиальной ткани 8 больных активным РА после 3-7 пассажах культивирования in vitro. Показано, что фенофибрат не изменял показатели 5-метилцитозина в ФСК, генистеин и адеметионин их увеличивали на 35% а гидралазин в два раза уменьшал. Выявлена спонтанная продукция IL-6, IL-17, IL- 18 и IL-10 культурах ФСК, добавление ИЛ - 1β значительно усиливало синтез цитокинов. Донаторы метилирования ДНК снижали содержание IL-6 в культурах ФСК. Адеметионин, в максимальной концентрации, в отличие от гидралазина и генистеина снижал продукцию IL-18. Уровень   IL-17 уменьшался при действии модуляторов в малых дозах, а продукция IL-10 практически не менялась. Заключается, что действие модуляторов метилирования на синтез провоспалительных и противовоспалительных цитокинов ФСК связано не только с их влиянием на метилирование ДНК, но и опосредовано другими эпигенетическими механизмами.   Культуры ФСК могут быть использованы как инструмент для доклинической оценки новых модуляторов метилирования ДНК.

Панкреатит занимает третье место в структуре острых хирургических заболеваний органов брюшной полости. Развитие данной патологии при беременности осложняется преждевременными родами в 58% случаев, что непосредственно отражается на показателях перинатальной заболеваемости и смертности.

Цель исследования: изучить особенности синтеза цитокинов и их влияние на состояние фетоплацентарной системы при остром панкреатите у беременных, а также оценить эффективность разработанного комплекса лечебных мероприятий для коррекции выявленных нарушений и профилактики осложнений гестации.

Материал и методы. В исследование включены 127 беременных с острым панкреатитом. Основную группу составили 43 беременные, которым в комплекс лечебно-профилактических мероприятий дополнительно были включены: дискретный плазмаферез на 1 и 3 сутки и микронизированный прогестерон (патент на изобретение № 2535108 от 08.10.2014 г.). В группе сравнения (n=84) проводилась стандартная терапия острого панкреатита. Контрольная группа (n=30) была представлена здоровыми беременными. Обследование проводили в соответствие со стандартами, дополнительно изучали содержание цитокинов (интерлейкинов IL-1β, IL-4, интерферона IFN-γ, фактора некроза опухоли TNF-α), маркера апоптоза Fas-лиганда, параметры гемодинамики в маточных артериях, концентрации трофобластического бета-1-гликопротеина (ТБГ) и плацентоспецифического альфа-1-микроглобулина (ПАМГ-1) в сыворотке крови беременных.

Результаты исследования. При сочетании беременности с острым панкреатитом выявлено возрастание уровней IFN-γ – в 2,5 раза, IL-1β – в 2,1 раза, TNF-α – в 2,5 раза, IL-4 – в 1,3 раза в сравнении с контрольными данными, на фоне снижения Fas-L – в 1,3 раза и увеличения индексов периферического сопротивления в маточных артериях в 1,3-1,4 раза, что сопровождалось дезадаптацией синтеза гравидарных белков: уменьшением ТБГ (в 1,3 раза) и повышением ПАМГ-1 (в 1,9 раза). Динамический контроль исследуемых параметров показал сохранение высоких концентраций цитокинов и прогрессирование нарушений маточной гемодинамики при стандартном лечении заболевания, которые привели к появлению признаков угрожающего прерывания беременности на 7-10 сутки у 83,3% женщин. Кроме того, развитие панкреатита на различных сроках гестации увеличивает риск самопроизвольного выкидыша до 11,9%, неразвивающейся беременности – до 29,8%, преждевременных родов – до 60,7%, в результате формирования хронической (78,9%) и острой (21,1%) плацентарной недостаточности. Дополнительное использование дискретного плазмафереза и препаратов прогестерона способствовало восстановлению баланса про- и противовоспалительных цитокинов уже к 3-м суткам лечения, предотвращая их длительное негативное воздействие на структуру и функцию маточно-плацентарного комплекса.

Заключение. Сочетание беременности с острым панкреатитом сопровождается диссоциацией иммунного ответа с преобладанием Th1-цитокинов на фоне угнетения апоптоза и развития плацентарной дисфункции. Применение разработанного способа комплексного лечения позволяет сократить частоту угрожающего прерывания беременности при развитии острого панкреатита – в 3 раза, уменьшить число преждевременных родов – в 13 раз, а потери беременности свести до нуля.

Проведено исследование уровня экспрессии генов транскрипционных факторов (GATA-3, ТBХ2, ИЛ-2RG), а также изменения окислительных процессов при ишемическом  инсульте.

Обнаружено, что при инсульте наблюдается активирование Тh2 клеток (повыщение экспрссии транскрипционного фактора GATA-3) и подавление Тh1-клеток ( понижение экспрессии ИЛ-2 и его рецепторов, а также  гена ТВХ21). Повышение экспрессии транскрипционного фактора GATA-3 у больных инсультом лежит в основе увеличения продукции у этих больных Th2-цитокинов. Сравнительный анализ окисления белков в плазме крови выявил повышение интенсивности окислительной модификации белков у больных инсультом. Исследование содержания  глутатиона, активности ферментов глутатионпероксидазы, глутатионредуктазы в эритроцитах  при инсульте обнaружило уменьшение содержания   глутатиона  и глутатионредуктазы и увеличение активности глутатионпероксидазы.

Полученные данные могут быть полезными для более полного понимания механизмов инсульта.

 

В настоящее время моноциты крови разделяют по крайней мере на две фенотипически различные субпопуляции: «классические» моноциты с фенотипом CD14⁺⁺/CD16^-  и «неклассические» (провоспалительные) - с фенотипом CD14⁺/CD16⁺.  Установлено, что моноциты CD14⁺/CD16⁺  наряду с нейтрофилами крови и микроглиальными клетками мозга, которые  являются аналогом моноцит/макрофагальной системы в мозге,  участвуют в развитии скрытого или, так называемого, системного неинфекционного воспаления в организме человека.  Нарушения  функций моноцитов рассматривают как одно из звеньев нейродегенеративного процесса, лежащего в основе нейровоспалительной гипотезы развития шизофрении. В связи с этим целью настоящего исследования было изучение количества провоспалительных моноцитов у больных юношескими депрессиями по уровню экспрессии рецепторов CD14⁺/CD16⁺, а также активности лейкоцитарной эластазы  и a1-протеиназного ингибитора. Представлялось также интересным определить  механизмы их взаимодействия  в патогенезе иммуновоспаления, в частности,  выявить возможную связь моноцитов CD14⁺СD16⁺  с активностью лейкоцитарной эластазы и a1-протеиназного ингибитора у больных юношескими депрессиями на ранней стадии заболевания. Было обследовано 27 больных мужского пола в возрасте 17–23 лет. Диагностическая оценка заболевания проводилась в соответствии с критериями МКБ-10, согласно которой у всех больных в структуре психопатологических расстройств  выявлялаcь депрессия с синдромом аттенуированных психотических симптомов (Attenuated Psychotic Syndrome). В качестве контроля обследовали 12 психически здоровых мужчин соответствующего возраста. Моноциты получали общепринятым способом адгезии к пластиковой  поверхности из мононуклеарных клеток, выделенных  из периферической венозной крови больных и здоровых центрифугированием в градиенте плотности фиколл-урографина (ρ = 1,077). Изучали  в крови больных и здоровых уровень моноцитов с фенотипом CD14⁺/CD16⁺, энзиматическую активность лейкоцитарной эластазы и функциональную активность a1-протеиназного ингибитора эластазы.  В ходе проведенного клинико-лабораторного исследования выявлено повышение более, чем в два раза,  уровня провоспалительной субпопуляции моноцитов CD14⁺/CD16⁺  у больных по сравнению с его уровнем  у здоровых индивидуумов, которое  сопровождалось увеличением активности лейкоцитарной эластазы и a1-протеиназного ингибитора. Выявлена положительная корреляционная связь  между повышением экспрессии поверхностных рецепторов CD14⁺/CD16⁺  на моноцитах и увеличением активности лейкоцитарной эластазы.

Эти результаты  подтверждают  участие моноцитов СD14⁺/СD16⁺ в развитии скрытого или  неинфекционного иммунного   воспаления,  а также определяют механизмы возможного взаимодействия моноцитов и  нейтрофилов в развитии иммуного воспаления  у больных юношескими депрессиями с синдромом аттенуированных психотических симптомов.

 

Диагностика туберкулезной инфекции, в том числе с применением иммунологических методов, претерпела значительные изменения. Внедрение новых диагностических тестов позволило улучшить диагностику латентной туберкулезной инфекции (ЛТИ). Однако положительные результаты иммунологических тестов как у больных туберкулезом, так и у лиц с ЛТИ не позволяют прежде всего иммунологически разделить эти состояния, что требует разработки и внедрения новых диагностических подходов.

Материалы и методы. Было проведено проспективное исследование с обследованием двух групп пациентов: I группа (n=50) - больные с верифицированным туберкулезом легких, МБТ (+); II группа (n =15) – лица с ЛТИ и группа контроля – здоровые лица (n=14). Комплекс обследования включал клинические, лучевые, бактериологические, иммунологические (пробу Манту с 2 ТЕ, тест T-SPOT, QFT и пробу с Диаскинтестом) методы. У всех пациентов и здоровых лиц с помощью метода динамического светорассеяния после добавления in vitro антигенов специфических пептидов ESAT-6 и SFP-10 были определены иммунные комплексы.

Результаты. Полученные данные наглядно демонстрируют низкую информативность клинического метода в диагностике туберкулеза легких. При наличии характерных рентгенологических изменений бактериологическая верификация диагноза туберкулеза была получена только в 46% случаев. Применение различных иммунологических тестов позволяет получить положительные результаты тестов в 84-90% случаев одновременно с получением в 100% случаев положительных тестов у лиц с ЛТИ. Определение специфических иммунных комплексов методом динамического светорассеяния позволяет в 100 % случаев определять активность туберкулезной инфекции и выявлять группу высокого риска по развитию активного туберкулеза у лиц с латентной туберкулезной инфекцией.

Выводы: полученные в исследовании данные могут быть применены не только в диагностике активного туберкулеза при отсутствии верификации диагноза, а также позволяют выделить группу высоко риска по развитию заболевания у лиц с латентной туберкулезной инфекцией.   

Проведено изучение аллогенных по HLA взаимодействий в краткосрочной культуре лимфоцитов супругов, имеющих детей с врожденными пороками сердца или ранние репродуктивные потери. Обследованы: 21 семейная пара (основная группа), имеющих детей со спорадическими врожденными пороками сердца (дефект межжелудочковой перегородки) без хромосомных заболеваний (ВПС); 50 семейных пар (группа сравнения), имеющих две и более репродуктивные потери (выкидыши, замершие беременности, привычное невынашивание беременности - ПНБ) в ранние сроки гестации (до 9 недель); и 41 семья, имеющих трех и более здоровых детей (контрольная группа). Оценка иммунного ответа в СКЛ оценивалась по увеличению экспрессии HLA-DR в смешанной культуре по отношению к спонтанным культурам лимфоцитов. Первичная окраска женских и мужских лимфоцитов моноклональными антителами к CD45 конъюгированными с различными флуоресцентными красителями (PC-5 и PC-7) позволила оценить иммунный ответ женских лимфоцитов на мужские и наоборот. Проведена оценка супрессорного эффекта женской аутосыворотки на смешанную культуру лимфоцитов супругов. Результаты исследования показали различие в аллогенных по HLA взаимодействиях в краткосрочной культуре лимфоцитов супругов, имеющих репродуктивные потери и детей с врожденными пороками сердца. Репродуктивные потери были ассоциированы с низким блокирующим эффектом женской аутосыворотки на аллогенные по HLA взаимодействия в краткосрочной культуре лимфоцитов супругов. Врожденные пороки сердца были ассоциированы с высокой активностью женских В-лимфоцитов (CD3^-/HLA-DR+) в краткосрочной смешанной культуре лимфоцитов супругов.

 

Одной из актуальных проблем современной медицины является поиск генетических маркеров хронической обструктивной болезни легких (ХОБЛ).  В этой связи целью настоящего исследования явилось изучение связи HLA гаплотипов  с ХОБЛ у лиц, заболевание которых развилось в процессе профессиональной деятельности в цехе кремнийорганического производства  ПАО «Химпром» (г. Новочебоксарск, Россия). В исследование включены больные ХОБЛ в стадии ремиссии, принадлежащие чувашской этнической группе России  – 36 женщин и 26 мужчин (средний возраст – 45,4±2,3 года).  Стаж работы составил в среднем 15,2±2,4 года, продолжительность ХОБЛ – 12,3±2,4 года. Курящие составляли 22,0±5,8% от общего числа больных. Группой сравнения служила когорта  здоровых работников кремнийорганического производства.  Типирование HLA-антигенов класса I проводили в стандартном микролимфоцитотоксическом тесте с использованием гистотипирующих анти-HLA-сывороток к 8 антигенам HLA-A  локуса (А1, А2, А3, А9, А10, А11, А19, А28) и 18 антигенам HLA-В локуса (В5, В7, В8, В12, В13, В14, В15, В16, В17, В18, В21, В22, В27, В35, В40, В41, В42, В53) (ЗАО «Межрегиональный центр иммуногенетики и гистотипирующих реагентов «Гисанс», С.-Петербург). HLA-генотипирование аллелей класса II проводили методом мультипраймерной полимеразной цепной реакции (ПЦР) в ДНК, полученной из ядерных клеток периферической крови, с использованием наборов реагентов НПФ «ДНК-Технология» (Москва),  по методике производителя реагентов.  Типировали по 14 аллелям локуса DRB1, 8 аллелям DQA1 и 11 аллелям DQB1. Частоты двухлокусных гаплотипов рассчитывали с использованием компьютерной программы «Arlequin v. 3.01». Силу ассоциации HLA с ХОБЛ определяли с помощью величины относительного риска (ОР) по  формуле J. Haldane.  Статистическую достоверность отличия ОР от 1 определяли по точному двустороннему критерию Фишера.  В результате проведенного исследования установлена положительная  ассоциация  ХОБЛ с гаплотипами: HLA-А9-DQA1*0501, А10-DQA1*0103, А28-DQA1*0102, B7-DQA1*0103. Данные гаплотипы можно отнести к генетическим маркерам предрасположенности к развитию ХОБЛ. Отрицательная ассоциация с заболеванием установлена для гаплотипических сочетаний аллелей HLA-А2-В8,  А19-DQB1*0502-04, B12-DQB1*0502-04, B27-DQA1*0103,  DRB1*01-DQA1*0101, DRB1*07-DQA1*0201, DRB1*13-DQA1*0102.  Данный ряд гаплотипов можно отнести к разряду протективных генетических маркеров  ХОБЛ в условиях  кремнийорганического производства. Результаты проведенного исследования свидетельствуют об ассоциации  ХОБЛ с рядом определенных HLA-гаплотипов.

 

Большой и разнообразный репертуар антител кодирует историю прошлого иммунологического опыта, создавая глобальную сеть системы регуляции организма. В этой статье мы предлагаем использовать пептидный микрочип (метод «иммуносигнатуры») для оценки глобальных индивидуальных паттернов антител и биоинформационный анализ данных для дифференциальной диагностики расстройств аутистического спектра. Пептидный микрочип состоит из 124000 случайным образом синтезированных антигенных миметиков, ковалентно связанных с поверхностью стеклянного слайда. Капля плазмы тестируется на наличие антител определенной реактивности, путем измерения связывания их с каждым антигенным миметиком микрочипа с помощью флуоресцентного окрашивания вторичными IgG-антителами, и такая реакция учитывается при лазерной активации. Файлы оцифрованных данных интенсивности флуоресценции, которая презентовала реактивность антител плазмы, связавшихся с антигенными миметиками, использовали для биоинформационного анализа. Обработка данных была проведена пакетами проекта Bioconductor для программно-статистической среды R. На этапе предобработки полученных данных, для выравнивания распределений показателей реактивности антител, применяли квантильную нормализацию. Данные по образцам и другую необходимую информацию объединяли в один файл-контейнер класса ExpessionSet. Для сравнения контрольной и опытной групп использовали однофакторный дисперсионный анализ в модификации Уэлча (для неравных дисперсий). Полученные оценки разности средних значений и статистической значимости P использовали далее для построения вулканной диаграммы, для ранжирования и отбора наиболее перспективных показателей реактивности антител. Для дифференциальной диагностики аутизма и оценки диагностической значимости метода иммуносигнатуры была построена тепловая карта. При построении тепловой карты использовали стандартизованные значения логарифмов реактивности антител и результаты иерархического кластерного анализа, проведённого методом Уорда, с использованием в качестве меры сходства корреляции Пирсона. В результате биоинформационного анализа данных было выбрано 73 антитела, реактивность которых имела статистически значимые различия в группах детей с аутизмом и типично развивающихся детей. Эти антитела были использованы для дифференциальной диагностики, ценность которой определяли при построении тепловой карты. Обнаружено, что группа детей с расстройствами аутистического спектра по показателям реактивности антител обладает выраженной гетерогенностью, и состоит как минимум из двух подгрупп. Кроме того, 60 антител у детей с аутизмом демонстрировали преимущественно среднюю и низкую реактивность, т.е. эти антитела имели слабую силу связывания с антигенными миметиками, и только 13 антител показывали высокую реактивность. В целом, специфичность диагностики расстройств аутистического спектра с помощью метода иммуносигнатуры составила 96,0% (95% ДИ от 82,8 до 99,6%), чувствительность – 78,3% (95% ДИ от 64,9 до 88,2%) и диагностическая эффективность – 82,7%. Наше пилотное исследование позволяет предложить метод иммуносигнатуры для дифференциальной диагностики аутизма и, возможно, расширить наше понимание нарушений при расстройствах аутистического спектра.

Имеются данные о различных эффектах пищевых красителей иммунопатогенного характера. Их употребление в составе пищевых продуктов и лекарственных средств индуцирует гиперчувствительность, что расценивается как побочное действие лекарств или непереносимость пищевых веществ. Оценка влияния красителей пищи и лекарств на систему иммунитета проводилась у 68 пациентов с хроническими аллергическими заболеваниями вне обострения и 23 здоровых лиц. Провокационная пероральная проба поставлена с 2 мг титана диоксида (TiO₂)  в порошке или 2 мг тартразина в составе пшеничной муки, обработанной при температуре приготовления пищи, или в желатиновой капсуле, содержащей в составе 0,2 мг титана диоксида. Забирались ротовая жидкость и/или венозная кровь натощак и через 40 минут после пробы. Исследовалась пероксидазная активность ротовой жидкости и экспрессия маркеров CD203c и IgE на базофилах крови. Цельную кровь 20 пациентов с аллергопатологией инкубировали 3 и 24 часа с 0,001% и 0,01% смесью растворов тартразина, кармуазина, понсо, сансета, TiO₂ с определением уровня интерлейкина 17 (IL17) в надосадочной жидкости. Пероксидазная активность ротовой жидкости увеличивалась на 30% и более в 30% случаев проб с тартразином и пшеничной мукой у пациентов с аллергией (в 12,5% случаев у здоровых лиц), в 44% - с TiO₂ у пациентов с аллергией (в 22% случаев у здоровых лиц), в 63% - с тартразином и TiO₂ в составе белой желатиновой капсулы у пациентов с аллергией (у здоровых не отмечалось, р=0,047). В 44% увеличивалось и в 50% случаях снижалось число IgE⁺CD203c⁺ базофилов после пробы с TiO₂ в группе пациентов с аллергией, по сравнению с 22% повышения и 22% снижения - у здоровых (р=0,007). Более низкая концентрация смеси красителей (0,001%) индуцировала секрецию IL17 в надосадочной жидкости у всех 20 пациентов с аллергическими заболеваниями, предельно допустимая концентрация (0,01%) раствора - реже у 40% обследованных (р=0,0002). Секреция IL17 под действием обеих концентраций была выше, чем в контрольных пробах (р<0,05). Таким образом, красители пищи и лекарств проявляют иммуномодулирующую активность как у пациентов с аллергическими заболеваниями (чаще), так и у здоровых лиц. Обнаружена взаимосвязь положительной пероральной пробы с пищевыми красителями тартразином и титана диоксидом, повышением пероксидазной активности ротовой жидкости и повышением количества IgE⁺CD203c⁺ базофилов, IgE^bright базофилов и секрецией IL17 под влиянием этих красителей.

В работе представлены результаты исследования эффективности и безопасности использования системной энзимотерапии препаратом Вобэнзим в комплексном лечении  больных гормонозависимой бронхиальной астмой тяжелого течения с вторичной иммунной недостаточностью.  Установлено, что включение в комплексную базисную терапию тяжелой гормонозависимой бронхиальной астмы с вторичной иммунной недостаточностью, препарата системной энзимотерапии Вобэнзима сопровождается улучшением параметров функционального состояния бронхов, интенсификацией функциональной активности клеточного и стабилизацией гуморального звеньев, уменьшением циркулирующих имунных комплексов на фоне позитивных изменений основных маркеров атопии (IL-4, общий IgE), устойчивому нарастанию уровня кортизола.  Полученные данные убеждают в безопасности включения препарата системной энзимотерапии в комплексное лечение больных тяжелой гормонозависимой бронхиальной астмой, повышении эффективности базисной терапии, улучшении контроля над течением заболевания,  позволяют выработать показания к назначению  Вобэнзима больным тяжелой бронхиальной астмой.

Введение: Ревматоидный артрит (РА) – это системное аутоиммунное заболевание, характеризующееся хроническим воспалением суставов и наличием аутоантител, наиболее специфичными из которых являются ревматоидный фактор (РФ) и антитела к циклическому цитруллинированному пептиду (AЦЦП).  Основным генетическим фактором, определяющим предрасположенность к РА, является носительство ряда аллелей HLA-DRB1. Аллели локуса HLA-DRB1 кодируют аминокислотную последовательность, получившую название Shared Epitope (SE).

Целью нашего исследования является оценить клиническое значение и встречаемость генов SE и HLA-DRB1, а также проанализировать прогностическую значимость этих факторов у больных РА

Материалы и методы: Нами была собрана коллекция образцов сывороток и ДНК 72  пациентов с РА. Для типирования генов по локусу HLA-DRB1 применялись коммерческие наборы фирмы «ДНК-Технология» (Москва, Россия). HLA-DRB1 SE были генотипированы методом ПЦР в реальном времени со специфичными праймерами.  Серологические меркеры АЦЦП и РФ детектировались в сыворотке методом ИФА (Euroimmun AG, Lübeck, Германия) и турбодиметрическим методом соответсвенно. Активность болезни оценивалась с помощью индекса активности РА DAS-28.

Результаты: Анализ популяционной частоты генов HLA-DRB1 в Северо-Западном регионе показал, что встречаемость генов HLA-DRB1*04 составляет 22,8%, генов HLA-DRB1*01 – 28,3%, HLA-DRB1*10 и HLA-DRB1*14 – 1,7% и 4% соответственно. Аллельные гены DRB1*04 и DRB1*01 встречались у 73,6% пациентов с РА, в то время как в группе контроля - у 43,9%. Среди больных РА частота гена SE составила 66,6%. У пациентов с SE детектировались высокие титры АЦЦП и обнаруживалось более высокое значение индекса DAS28.

Выводы: Аллельные вариации HLA-DRB, кодирующие SE, ассоциированы с АЦЦП- положительным РА у жителей Северо-Западного региона Российской Федерации. Выявление аллельных генов локуса HLA-DRB1 и SE может быть дополнением к серологической диагностике РА.

Проведено клиническое наблюдение и обследование 22 больных хроническим пиелонефритом (ХПН) и 30 практически здоровых лиц. Больные ХПН обследованы дважды. В первую группу (ГI) вошли пациенты с обострением данного заболевания. В группу сравнения (ГII)- те же больные спустя 1,5-3 месяца после завершения лечения, без клинических проявлений обострения ХПН. У всех обследованных пациентов не выявлены лабораторные признаки острого почечного повреждения. В образцах мочи всех обследованных лиц проводили определение концентрации VEGF, МСР-1, IL-8 и IL-18 в моче методом ИФА. У 6 пациентов ГI и 6 – ГII с исследовали белковый спектр мочи с помощью масс-спектрометрического анализа, используя хроматограф Agilent 1100 и гибридный масс-спектрометр LTQ-FT Ultra. Результаты параллельного определения белков мочи двумя методами показали, что обострение ХПН   развивается на фоне локальной вторичной иммунной недостаточности на уровне уротелия почечных канальцев. Определение протеома мочи с помощью масс-спектрометрии при обострении заболевания позволяет идентифицировать белки, связанные с повреждением эпителиальной выстилки почечных канальцев и формированием локального иммунного ответа.  

Цель исследования: усовершенствование иммунологической диагностики системной склеродермии путем определения антител  к церулоплазмину, а также его количества и ферментативной активности, а также контроля за эффективностью терапии с помощью иммобилизированной формы магнитоуправляемого иммуносорбента на основе церулоплазмина. Материалы и методы. Было обследовано 30 практически здоровых лиц, 68 больных системной склеродермией.  В исследование включались больные с направительным диагнозом системной склеродермией, давшие информированное согласие на участие.

Результаты. Было выявлено, что у больных системной склеродермией наблюдается снижение оксидазной активности церулоплазмина, увеличение его количества, а также повышение уровня антител к нему по сравнению с контрольной группой. Выявлена зависимость количества антител к изучаемому ферменту от активности, характера течения и стадии заболевания. Обнаружена достоверная обратная корреляция между содержанием антител к церулоплазмину и количеством эритроцитов, уровнем гемоглобина.  Впервые для оценки активности патологического процесса при системной склеродермии применена комплексная оценка трех показателей: ферментативной активности, количества церулоплазмина и содержания антител к нему. Выявлено, что аутоантитела к церулоплазмину чаще обнаруживаются у больных системной склеродермией с высокой активностью болезни, подострым течением, при наличии поражения печени, легких и анемии. Обнаружено, что антитела к церулоплазмину выявляются на ранних стадиях развития системной склеродермии и могут быть использованы для своевременной диагностики заболевания.  Показано, что динамика изученных показателей может быть использована для суждения об эффективности проводимой терапии.

Заключение. Снижение ферментативной активности церулоплазмина, повышение количества его и уровня антител к нему,  может быть использовано как дополнительный критерий диагностики активности системной склеродермии, способствует более точному определению активности, характера течения патологического процесса и указывает на наличие разнообразных клинических форм заболевания.  Применение этих показателей для мониторинга проводимой в условиях стационара терапии позволяет более точно оценить ее эффективность и коррекцию.  Изучение антителообразования к церулоплазмину, а также его количества и биохимической активности расширяет имеющиеся представления о патогенезе ревматических заболеваний и намечает пути для дальнейших научных изысканий и отражают заинтересованность антиоксидантной системы при иммунологических заболеваниях.