Кондиционированные эмбрионами среды изменяют эффекторные функции естественных киллеров in vitro

NK-клетки представляют собой преобладающую популяцию лимфоцитов в эндометрии. NK-клетки взаимодействуют с эмбрионом во время имплантации, влияя на успех имплантации. Однако в настоящее время в литературе недостаточно данных о влиянии предимплантационных эмбрионов на функциональную активность NK-клеток. Задача NK-клеток в зоне маточно-плацентарного контакта - контролировать инвазию трофобласта, стимулировать или ограничивать ее. Было показано, что цитокины, секретируемые как эмбрионами, так и NK—клетками, такие как IL-1b, IL-6, IL-8, GM-CSF и IP-10, стимулируют миграцию и инвазию клеток трофобласта. Поэтому целью данного исследования была разработка технологии клеточной диагностики для прогнозирования репродуктивных потерь на основе анализа влияния отработанной среды для культивирования эмбрионов (КЭС) на цитотоксическую активность NK-клеток в отношении клеток трофобласта JEG-3 в модели цитотоксичности in vitro. Было обнаружено, что гибели клеток JEG-3 после совместного культивирования с клетками NK-92 был выше спонтанной гибели клеток линии JEG-3. В совокупности отработанные культуральные среды эмбрионов, которые не были разделены на группы в зависимости от качества эмбрионов, снижали гибель клеток линии JEG-3 при совместном культивировании с клетками NK-92. Мы установили, что КЭС эмбрионов класса А (отличного качества) снижают эффекторные функции естественных киллеров в отношении клеток трофобласта JEG-3. Мы предполагаем, что эмбрионы с самым высоким потенциалом к имплантации (класс А) выделяют факторы, которые подавляют цитотоксичность NK-клеток по отношению к клеткам трофобласта, тем самым способствуя выживанию эмбриона и успешной имплантации. Ранее мы выявили цитокины, влияющие на функции NK-клеток, IL-6, IL-8, IL-1b, IL-10, IP-10 и GM-CSF, секретируемые эмбрионами отличного качества в отработанную питательную среду.

Таким образом, эмбрионы отличного качества с наибольшим потенциалом имплантации выделяют факторы, которые модулируют эффекторные функции NK-клеток на границе системы мать–плод. Метод оценки качества эмбрионов с использованием функциональной модели в целом соответствует морфологической системе оценки качества эмбрионов и может быть рекомендован для использования в клинической практике.

1. Agnaeva A.O., Bespalova O.N., Sokolov D.I., Selkov S.A., Kogan I.Yu. The role of natural killer cells (NK cells) in reproductive losses. Journal of Obstetrics and Women's Diseases, 2017, Vol. 66, no. 3, pp. 143-156. (In Russ.)

2. Galkina D.E., Makarenko T.A., Okladnikov D.V. Immunological aspects of normal and pathologically occurring pregnancy. Bulletin of the Russian Academy of Medical Sciences, 2022, Vol. 77, no. 1, pp. 13-24. (In Russ.)

3. Tyschuk E.V., Zementova M.S., Komarova E.M., Lesik E.A., Obedkova K.V., Bespalova O.N., Selkov S.A., Sokolov D.I. Embryo-conditioned media affect the migration of endothelial cells in vitro. Journal of Evolutionary Biochemistry and Physiology, 2025, Vol. 61, no. 1, pp. 3-15. (In Russ.)

4. Ashary N., Tiwari A., Modi D. Embryo Implantation: War in Times of Love. Endocrinology, 2018, Vol. 159, no. 2, pp. 1188-1198.

5. Bazhenov D.O., Furaeva K.N., Stepanova O.I., Viazmina L.P., Sheveleva A.R., Khokhlova E.V., Mikhailova V.A., Selkov S.A., Sokolov D.I. Receptor expression by JEG-3 trophoblast cells in the presence of placenta secreted factors. Gynecol. Endocrinol., 2019, Vol. 35 (Suppl. 1), pp. 35-40.

6. Dosiou C., Giudice L.C. Natural killer cells in pregnancy and recurrent pregnancy loss: endocrine and immunologic perspectives. Endocr. Rev., 2005, Vol. 26, no. 1, pp. 44-62.

7. Gregory C.D., Lee H., Scott I.V., Golding P.R. Phenotypic heterogeneity and recycling capacity of natural killer cells in normal human pregnancy. J. Reprod. Immunol., 1987. Vol. 11, no. 2, pp. 135-145.

8. Hamelin-Morrissette J., Dallagi A., Girouard J., Ravelojaona M., Oufqir Y., Vaillancourt C., van Themsche C., Carrier C., Reyes-Moreno C. Leukemia inhibitory factor regulates the activation of inflammatory signals in macrophages and trophoblast cells. Mol. Immunol., 2020, Vol. 120, pp. 32-42.

9. Konjević G.M., Vuletić A.M., Mirjačić Martinović K.M., Larsen A.K., Jurišić V.B. The role of cytokines in the regulation of NK cells in the tumor environment. Cytokine, 2019. Vol. 117, pp. 30-40.

10. Lee I., Ahn S.H., Kim H.I., Baek H.W., Park Y.J., Kim H., Aljassim A.I., Shin W., Ryu C., Yoon J., Lee J.H., Yun B.H., Seo S.K., Park J.H., Choi Y.S., Cho S.H., Lee B.S. Cytokines in culture media of preimplantation embryos during in vitro fertilization: Impact on embryo quality. Cytokine, 2021. Vol. 148, 155714. doi: 10.1016/j.cyto.2021.155714.

11. Wu J., Gao F.X., Wang C., Qin M., Han F., Xu T., Hu Z., Long Y., He X.-M., Deng X., Ren D.-L., Dai T.-Y. IL-6 and IL-8 secreted by tumour cells impair the function of NK cells via the STAT3 pathway in oesophageal squamous cell carcinoma. J. Exp. Clin. Cancer Res., 2019, Vol. 38, no. 1, 321. doi: 10.1186/s13046-019-1310-0.