СРАВНИТЕЛЬНЫЙ АНАЛИЗ ПРИМЕНЕНИЯ МОНОКЛОНАЛЬНЫХ АНТИТЕЛ «КЛИМ-ТЕСТ» ДЛЯ ФЕНОТИПИРОВАНИЯ КЛЕТОК ПЕРИФЕРИЧЕСКОЙ КРОВИ С МОНОКЛОНАЛЬНЫМИ АНТИТЕЛАМИ ЗАРУБЕЖНЫХ ПРОИЗВОДИТЕЛЕЙ

Несмотря на широкое применение проточной цитофлюориметрии в различных областях
современной медицины, на российском рынке представлены в основном зарубежные крупные фирмы-производители. Цель: сравнить набор реагентов для  проточной цитометрии Российской фирмы-производителя с зарубежными моноклональными антителами на проточных цитофлюориметрах разных производителей. Материалом для исследования являлась венозная кровь. Исследуемые показатели измерялись методом проточной цитофлюориметрии. Для иммунофенотипирования применялись моноклональные антитела Becton Dickinson (USA), Лаборатория Константа (Россия) и Beckman Coulter (USA). Анализ Блэнда–Альтмана показал практически полное отсутствие систематического расхождения и  относительно небольшой разброс полученных значений. Критерий Фридмана выявил, что значения измеряемых параметров различными моноклональными антителами не отличаются по уровню значимости 0,01. В результате проведенных исследований мы получили данные, что, во-первых, реагенты «Клим-Тест» в сравнении с реагентами зарубежных фирм имеют практически полное отсутствие систематического расхождения и относительно небольшой разброс значений. Реагенты «Клим-Тест» могут быть использованы на проточных цитометрах компаний Becton Dickinson
(USA) и Beckman Coulter (USA). Во-вторых, реагент одинаково работает при уровне CD4-лимфоцитов выше и ниже 500 клеток/мкл. В-третьих, применение реагентов «Клим-Тест» с трехцветной меткой по CD45 (CD3-FITC/CD4-PE/CD45-PE-Сy5) соответствует стандартам подсчета CD4-лимфоцитов у ВИЧ-инфицированных пациентов, что позволяет рекомендовать данный реагент для мониторинга ВИЧ-инфекции.

моноклональные антитела, гейтирование по CD45, двухплатформенная методика

1. Бурместр Г.Р., Пецутто А. Наглядная иммунология: Пер. с англ. – М.: БИНОМ. Лаборатория знаний, 2007. – 320 с. Burmestr G.R. Naglyadnaya immunologiya [Visual immunology/ Trans. from angl: G.-R. Byrrmestr, A. Pettstso]. Moscow: BINOM. Laboratoriya znaniy – BINOM. Laboratory of Knowledge, 2007. 320 p.

2. ВИЧ-инфекция и СПИД. Клинические рекомендации / под редакцией В.В. Покровского. – 2-е изд., перераб. и доп. – М.: Геотар-Медиа, 2010. – 192 с. VICH-infektsiya i SPID. Klinicheskie rekomendatsii [Clinical recommendations under the editorship of V. Pokrovsky. - 2-e Izd.]. Moscow: Geotar-Media – Geotar-Media, 2010. 192 p.

3. ВИЧ-инфекция. Информационный бюллетень № 28 / под редакцией Н.Н.Ладной. – М., 2006. – 24 с. VICH-infektsiya. Informatsionnyy byulleten` №28/ pod redaktsiey N.N.Ladnoy [HIV-infection. Newsletter №28/ under the editorship of N.N.Ladnaya], Moscow, 2006. 24 p.

4. Гланц Стентон. Медико-биологическая статистика / Стентон Гланц. Пер. с англ. – М.: Практика, 1999. – 459 с. Glants Stenton. Mediko-biologicheskaya statistika [Trans. from angl.: Stanton Glantz. Medico-biological statistics]. Moscow: Praktika – Practice, 1999, 459 p.

5. Хоффман К., Рокшто Ю.К. Лечение ВИЧ-инфекции 2009. – М.: Р. Валент, 2012. – 736 с. Hoffman K. Lechenie VICH-infektsii 2009 [Treatment of HIV-2009/ Christian Hoffmann, Jrgen К.Rockstroh]. Moscow: R.Valent – R.Valent, 2012, 736 p.

6. Borkov G., Qibin L., Bentwich Z. Immune activation correlates better than HIV plasma viral load with CD4 T-cell decline during HIV infection // 8th European conference on clinical aspects and treatment of HIV-infection. Athens, 2001, abstr 535.

7. CDC Guideline for performing singl-platform CD4+T-cell determinations with CD45 gating forpersons infected with HIV. MMWR, Jan 31, 2003 / 52 (RRO2), pp. 1-13.

8. Eidukevicius R., Characiejus D., Janavicius R., Kazlauskaite N., Pasukoniene V., Mauricas M., Den Otter W. A method to estimate cell cycle time and growth fraction using bromodeoxyuridine-flow cytometry data from a single sample. BMC Cancer, 2005, vol. 5, p. 122.

9. Hazenberg M.D., Stuart J.W., Otto S.A. T-cell division in human immunodeficiency virus (HIV)-1 infection is mainly due to immune activation: a longitudinal analysis in patients before and during highly active antiretroviral therapy (HAART). Blood, 2000, vol. 95, pp. 249-255.

10. Rodrigues D.S, Salom o R., Kallas E.G. Profound peripheral T-lymphocyte depletion and activation in disseminated tuberculosis. Braz. J. Infect Dis., 2006, vol. 10, no. 1, pp. 59-61.

11. Schacker T.W., Bosch R.J., Bennett K., Pollard R., Robbins G.K, Collier A.C., Gulick R.M., Spritzler J., Mildvan D. Measurement of Na ve CD4 cells realiably predicts Potential for immune reconstitution in HIV. JAIDS, 2010, vol. 54, issue 1, pp. 59-62.

12. Schnizein-Bick C.T, Mandy F.F., O’Gorman M.R.G., Paxton H., Nicholson J.K., Hultin L.E., Gelman R.S., Wilkening C.L., Livnat D. Use of CD45 Gating in Three and Four-color Flow Cytometric Immunophenotyping: Guideline From The National Institute of Allergy and Infectious Diseases, Division of AIDS. Cytometry, 2002, vol. 50, no. 2, pp. 46-52.