mimmunМедицинская иммунологияMedical Immunology (Russia)1563-06252313-741XSPb RAACI10.15789/1563-0625-2013-2-177-184mimmun-136Research ArticleИММУНОЛОГИЧЕСКИЕ МЕТОДЫIMMUNOLOGICAL METHODSСРАВНИТЕЛЬНЫЙ АНАЛИЗ ПРИМЕНЕНИЯ МОНОКЛОНАЛЬНЫХ АНТИТЕЛ «КЛИМ-ТЕСТ» ДЛЯ ФЕНОТИПИРОВАНИЯ КЛЕТОК ПЕРИФЕРИЧЕСКОЙ КРОВИ С МОНОКЛОНАЛЬНЫМИ АНТИТЕЛАМИ ЗАРУБЕЖНЫХ ПРОИЗВОДИТЕЛЕЙCOMPARATIVE STUDY OF “KLIM-TEST” MONOCLONAL ANTIBODIES FOR PHENOTYPING OF PERIPHERAL BLOOD CELLS WITH MONOCLONALS FROM FOREIGN PRODUCERSПоповаА. А.PopovaA. A.

к.м.н., научный сотрудник

PhD (Medicine), Research Associate

asya-med@mail.ruСеребровскаяЛ. В.SerebrovskayaL. V.

к.м.н., старший научный сотрудник

PhD (Medicine), Senior Research Associate

asya-med@mail.ruИвановаЛ. А.IvanovaL. A.

научный сотрудник

Research Associate

asya-med@mail.ruХохловаО. Н.KhokhlovaO. N.

младший научный сотрудник

Research Associate

asya-med@mail.ruНовожиловС. Н.NovozhilovS. N.

сотрудник

Associate

asya-med@mail.ruФБУН «Центральный НИИ эпидемиологии» Роспотребнадзора, МоскваРоссияCentral Research Institute of Epidemiology, Federal Supervision Service for Consumer Rights Protection and People’s Welfare, MoscowRussian FederationEvrogen JSC, МоскваРоссияEvrogen JSC, MoscowRussian Federation201316072014152177184Copyright © Попова А.А., Серебровская Л.В., Иванова Л.А., Хохлова О.Н., Новожилов С.Н., 20142014Попова А.А., Серебровская Л.В., Иванова Л.А., Хохлова О.Н., Новожилов С.Н.Popova A.A., Serebrovskaya L.V., Ivanova L.A., Khokhlova O.N., Novozhilov S.N.Данная работа распространяется под лицензией Creative Commons Attribution 4.0.This work is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 License.https://www.mimmun.ru/mimmun/article/view/136

Несмотря на широкое применение проточной цитофлюориметрии в различных областях современной медицины, на российском рынке представлены в основном зарубежные крупные фирмы-производители. Цель: сравнить набор реагентов для  проточной цитометрии Российской фирмы-производителя с зарубежными моноклональными антителами на проточных цитофлюориметрах разных производителей. Материалом для исследования являлась венозная кровь. Исследуемые показатели измерялись методом проточной цитофлюориметрии. Для иммунофенотипирования применялись моноклональные антитела Becton Dickinson (USA), Лаборатория Константа (Россия) и Beckman Coulter (USA). Анализ Блэнда–Альтмана показал практически полное отсутствие систематического расхождения и  относительно небольшой разброс полученных значений. Критерий Фридмана выявил, что значения измеряемых параметров различными моноклональными антителами не отличаются по уровню значимости 0,01. В результате проведенных исследований мы получили данные, что, во-первых, реагенты «Клим-Тест» в сравнении с реагентами зарубежных фирм имеют практически полное отсутствие систематического расхождения и относительно небольшой разброс значений. Реагенты «Клим-Тест» могут быть использованы на проточных цитометрах компаний Becton Dickinson (USA) и Beckman Coulter (USA). Во-вторых, реагент одинаково работает при уровне CD4-лимфоцитов выше и ниже 500 клеток/мкл. В-третьих, применение реагентов «Клим-Тест» с трехцветной меткой по CD45 (CD3-FITC/CD4-PE/CD45-PE-Сy5) соответствует стандартам подсчета CD4-лимфоцитов у ВИЧ-инфицированных пациентов, что позволяет рекомендовать данный реагент для мониторинга ВИЧ-инфекции.

In view of wide-spread usage of flow cytometry (FC) in various areas of modern medicine, Russian market is still dominated by foreign manufacturers of monoclonal antibodies (MAbs). This problem is accomplished by lack of information about Russian producers of MAbs. Objective: to compare a set of FC reagents produced by a Russian manufacturer with MAbs for FC from different foreign manufacturers. Venous blood served as biomaterial for this study. The parameters under study were measured by FC techniques. Comparative immunophenotyping was performed with MAbs from Becton Dickinson (USA), Lab Constant (Russia), and Beckman Coulter (USA). Virtually complete absence of systematic differences and a relatively small spread of values was revealed by means of Bland–Altman analysis. The values of parameters, as measured with different MAbs, did not differ from one another by significance level of 0.01, according to Friedman criterion. The following evidence has been yielded in present study: (1) data obtained with “Klim-Test” reagents do not exhidit any systematic differences, as compared with Mabs from foreign manufacturers, and they show a relatively small scatter of results. “Klim-Test” reagents may be applied for Becton Dickinson and Beckman Coulter flow cytometers. (2) These reagents are equally effective at the levels of CD4-lymphocytes above 500 cells/mcL, and below these values. (3) Usage of “Klim-Test” reagents with a three-color label for CD45 cells (CD3-FITC/CD4-PE/CD45-PE-Sy5) corresponds to the standards for CD4-lymphocyte count in HIV-infected patients, thus allowing it to recommend this reagent for HIV-infection monitoring.

моноклональные антителагейтирование по CD45двухплатформенная методикаmonoclonal antibodiesCD45 gatingdouble-platform approachReferencesБурместр Г.Р., Пецутто А. Наглядная иммунология: Пер. с англ. – М.: БИНОМ. Лаборатория знаний, 2007. – 320 с. Burmestr G.R. Naglyadnaya immunologiya [Visual immunology/ Trans. from angl: G.-R. Byrrmestr, A. Pettstso]. Moscow: BINOM. Laboratoriya znaniy – BINOM. Laboratory of Knowledge, 2007. 320 p.Бурместр Г.Р., Пецутто А. Наглядная иммунология: Пер. с англ. – М.: БИНОМ. Лаборатория знаний, 2007. – 320 с. Burmestr G.R. Naglyadnaya immunologiya [Visual immunology/ Trans. from angl: G.-R. Byrrmestr, A. Pettstso]. Moscow: BINOM. Laboratoriya znaniy – BINOM. Laboratory of Knowledge, 2007. 320 p.ВИЧ-инфекция и СПИД. Клинические рекомендации / под редакцией В.В. Покровского. – 2-е изд., перераб. и доп. – М.: Геотар-Медиа, 2010. – 192 с. VICH-infektsiya i SPID. Klinicheskie rekomendatsii [Clinical recommendations under the editorship of V. Pokrovsky. - 2-e Izd.]. Moscow: Geotar-Media – Geotar-Media, 2010. 192 p.ВИЧ-инфекция и СПИД. Клинические рекомендации / под редакцией В.В. Покровского. – 2-е изд., перераб. и доп. – М.: Геотар-Медиа, 2010. – 192 с. VICH-infektsiya i SPID. Klinicheskie rekomendatsii [Clinical recommendations under the editorship of V. Pokrovsky. - 2-e Izd.]. Moscow: Geotar-Media – Geotar-Media, 2010. 192 p.ВИЧ-инфекция. Информационный бюллетень № 28 / под редакцией Н.Н.Ладной. – М., 2006. – 24 с. VICH-infektsiya. Informatsionnyy byulleten` №28/ pod redaktsiey N.N.Ladnoy [HIV-infection. Newsletter №28/ under the editorship of N.N.Ladnaya], Moscow, 2006. 24 p.ВИЧ-инфекция. Информационный бюллетень № 28 / под редакцией Н.Н.Ладной. – М., 2006. – 24 с. VICH-infektsiya. Informatsionnyy byulleten` №28/ pod redaktsiey N.N.Ladnoy [HIV-infection. Newsletter №28/ under the editorship of N.N.Ladnaya], Moscow, 2006. 24 p.Гланц Стентон. Медико-биологическая статистика / Стентон Гланц. Пер. с англ. – М.: Практика, 1999. – 459 с. Glants Stenton. Mediko-biologicheskaya statistika [Trans. from angl.: Stanton Glantz. Medico-biological statistics]. Moscow: Praktika – Practice, 1999, 459 p.Гланц Стентон. Медико-биологическая статистика / Стентон Гланц. Пер. с англ. – М.: Практика, 1999. – 459 с. Glants Stenton. Mediko-biologicheskaya statistika [Trans. from angl.: Stanton Glantz. Medico-biological statistics]. Moscow: Praktika – Practice, 1999, 459 p.Хоффман К., Рокшто Ю.К. Лечение ВИЧ-инфекции 2009. – М.: Р. Валент, 2012. – 736 с. Hoffman K. Lechenie VICH-infektsii 2009 [Treatment of HIV-2009/ Christian Hoffmann, Jrgen К.Rockstroh]. Moscow: R.Valent – R.Valent, 2012, 736 p.Хоффман К., Рокшто Ю.К. Лечение ВИЧ-инфекции 2009. – М.: Р. Валент, 2012. – 736 с. Hoffman K. Lechenie VICH-infektsii 2009 [Treatment of HIV-2009/ Christian Hoffmann, Jrgen К.Rockstroh]. Moscow: R.Valent – R.Valent, 2012, 736 p.Borkov G., Qibin L., Bentwich Z. Immune activation correlates better than HIV plasma viral load with CD4 T-cell decline during HIV infection // 8th European conference on clinical aspects and treatment of HIV-infection. Athens, 2001, abstr 535.Borkov G., Qibin L., Bentwich Z. Immune activation correlates better than HIV plasma viral load with CD4 T-cell decline during HIV infection // 8th European conference on clinical aspects and treatment of HIV-infection. Athens, 2001, abstr 535.CDC Guideline for performing singl-platform CD4+T-cell determinations with CD45 gating forpersons infected with HIV. MMWR, Jan 31, 2003 / 52 (RRO2), pp. 1-13.CDC Guideline for performing singl-platform CD4+T-cell determinations with CD45 gating forpersons infected with HIV. MMWR, Jan 31, 2003 / 52 (RRO2), pp. 1-13.Eidukevicius R., Characiejus D., Janavicius R., Kazlauskaite N., Pasukoniene V., Mauricas M., Den Otter W. A method to estimate cell cycle time and growth fraction using bromodeoxyuridine-flow cytometry data from a single sample. BMC Cancer, 2005, vol. 5, p. 122.Eidukevicius R., Characiejus D., Janavicius R., Kazlauskaite N., Pasukoniene V., Mauricas M., Den Otter W. A method to estimate cell cycle time and growth fraction using bromodeoxyuridine-flow cytometry data from a single sample. BMC Cancer, 2005, vol. 5, p. 122.Hazenberg M.D., Stuart J.W., Otto S.A. T-cell division in human immunodeficiency virus (HIV)-1 infection is mainly due to immune activation: a longitudinal analysis in patients before and during highly active antiretroviral therapy (HAART). Blood, 2000, vol. 95, pp. 249-255.Hazenberg M.D., Stuart J.W., Otto S.A. T-cell division in human immunodeficiency virus (HIV)-1 infection is mainly due to immune activation: a longitudinal analysis in patients before and during highly active antiretroviral therapy (HAART). Blood, 2000, vol. 95, pp. 249-255.Rodrigues D.S, Salom o R., Kallas E.G. Profound peripheral T-lymphocyte depletion and activation in disseminated tuberculosis. Braz. J. Infect Dis., 2006, vol. 10, no. 1, pp. 59-61.Rodrigues D.S, Salom o R., Kallas E.G. Profound peripheral T-lymphocyte depletion and activation in disseminated tuberculosis. Braz. J. Infect Dis., 2006, vol. 10, no. 1, pp. 59-61.Schacker T.W., Bosch R.J., Bennett K., Pollard R., Robbins G.K, Collier A.C., Gulick R.M., Spritzler J., Mildvan D. Measurement of Na ve CD4 cells realiably predicts Potential for immune reconstitution in HIV. JAIDS, 2010, vol. 54, issue 1, pp. 59-62.Schacker T.W., Bosch R.J., Bennett K., Pollard R., Robbins G.K, Collier A.C., Gulick R.M., Spritzler J., Mildvan D. Measurement of Na ve CD4 cells realiably predicts Potential for immune reconstitution in HIV. JAIDS, 2010, vol. 54, issue 1, pp. 59-62.Schnizein-Bick C.T, Mandy F.F., O’Gorman M.R.G., Paxton H., Nicholson J.K., Hultin L.E., Gelman R.S., Wilkening C.L., Livnat D. Use of CD45 Gating in Three and Four-color Flow Cytometric Immunophenotyping: Guideline From The National Institute of Allergy and Infectious Diseases, Division of AIDS. Cytometry, 2002, vol. 50, no. 2, pp. 46-52.Schnizein-Bick C.T, Mandy F.F., O’Gorman M.R.G., Paxton H., Nicholson J.K., Hultin L.E., Gelman R.S., Wilkening C.L., Livnat D. Use of CD45 Gating in Three and Four-color Flow Cytometric Immunophenotyping: Guideline From The National Institute of Allergy and Infectious Diseases, Division of AIDS. Cytometry, 2002, vol. 50, no. 2, pp. 46-52.

The authors declare that there are no conflicts of interest present.