РЕКОМБИНАНТНЫЕ ПОЛИПЕПТИДЫ НА ОСНОВЕ С5a ПЕПТИДАЗЫ КАК ПОТЕНЦИАЛЬНЫЕ КОМПОНЕНТЫ ВАКЦИН ПРОТИВ СТРЕПТОКОККА ГРУППЫ

Резюме. Фрагменты гена, кодирующие Nтерминальный и центральный участки С5а пептидазы стрептококка группы  В (СГВ), были проклонированы с использованием экспрессионных векторов в E. coli M15. Соответствующие рекомбинантные полипептиды SCPB1a и SCPB3a с молекулярной массой 12,0±0,5 кДа и 11,0±0,5 кДа были экспрессированы и аффинно очищены. Оба полипептида индуцировали продукцию специфических антител при подкожной иммунизации мышей. Болеевыраженный  иммунный  ответ  наблюдали  на  введение  SCPB3a.  В  опытах  in  vitro  (опсонофагоцитарный тест) и in vivo (модель генерализованной инфекции на мышах) были исследованы антимикробные свойства антиSCPB1a и антиSCPB3a антител. В работе было продемонстрировано, что Nтерминальная и центральная части молекулы С5а пептидазы содержат эпитопы, ответственные за формирование гуморального иммунитета с образованием антител класса G, эффективно опсонизирующих СГВ, а полученные рекомбинантные полипептиды SCPB1a и SCPB3a могут быть рекомендованы для дальнейшего использования при создании поликомпонентной вакцины против СГВ.

1. Грабовская К.Б., Леонтьева Г.Ф., Мерингова Л.Ф., Воробьева Е.И., Суворов А.Н., Тотолян А.А. Протективные свойства некоторых поверхностных рекомбинантных полипептидов стрептококков группы В // ЖМЭИ. – 2007. – № 5. – С. 44-51.

2. Дуплик Н.В., Королева И.В., Суворов А.Н. Клонирование, экспрессия и изучение иммунологических свойств рекомбинантного полипептида на основе С5а пептидазы стрептококков группы В // Медицинская иммунология. – 2009. – Т. 11. – С. 7-14.

3. Мерингова Л.Ф., Войцеховский Б.Л., Духин А.И., Крамская Т.А., Поляк Р.Я. Применение методов химической кинетики для оценки аффинитета циркулирующих свободных и связанных с антигеном антител (модель экспериментальный грипп) // Иммунология. – 1986. – № 6. – С. 48-51.

4. Суворов А.Н., Грабовская К.Б., Леонтьева Г.Ф., Мерингова Л.Ф., Королева И.В., Дуплик Н.В., Тотолян А.А. Рекомбинантные фрагменты консервативных белков стрептококков группы В как основа специфической вакцины // ЖМЕИ. – 2010. – № 2. – С. 44-50.

5. Baker C.J., Edwards M.S. Group B streptococcal conjugate vaccines // Arch. DisChild. – 2003. – Vol. 88. – P. 375-378.

6. Beckmann C., Waggoner J.D., Harris T.O., Tamura G.S. and Rubens C.E. Identification of Novel Adhesins from Group B Streptococci by Use of Phage Display Reveals that C5a Peptidase Mediates Fibronectin Binding // Infect. Immun. – 2002. – Vol. 70. – P. 2869-2876.

7. Bohnsack J.F., Chang J.K. and Hill H.R. Restricted ability of Group B Streptococcal C5a-asa to anactivate C5a prepared from different animal species // Immun. – 1993. – Vol. 61. – P.1421 –1426.

8. Cheng Q., Stafslien D., Purushothaman S.S., Cleary P. The group B streptococcal C5a peptidase is both a specific protease and an invasion // Infect. Immun. – 2002. – Vol. 70. – P. 2408-2413.

9. Chmourigina I.I., Suvorov A.N., Ferrieri P., Cleary P.P. Conservation of the C5a peptidase genes in group A and B streptococci // Infect. Immun. – 1996. – Vol. 67. – P. 2387-2390.

10. Doran K.S., Nizet V. Molecular pathogenesis of neonatal group B streptococcal infection: no longer in its infancy // Mol. Microbiol. – 2004. – Vol. 54. – P. 23-31.

11. Edwards M. S. and Baker C.J. Group B streptococcal infections // Infectious diseases of the fetus and the newborn infant / Ed. Remington J.S. and J.O. Klein. – The W.B. Saunders Co., Philadelphia, Pa. – 2001. – P. 1091-1156.

12. Edwards M.S., Baker C.J. Group B streptococcal infections in elderly adults // Clin. Infect. Dis. – 2005. – Vol. 41. – P. 839-847.

13. Heath P.T., Balfour G.F., Tighe H., Verlander N.Q., Lamagni T.L., Efstratiou A.; HPA GBS Working Group. Group B streptococcal disease in infants: a case control study. // Arch. Dis. – Child. – 2009. – Vol. 94. – P. 674-680.

14. Jackson L.A., Hilsdon R., Farley M.M., Harrison L.H., Reingold A.L., Plikaytis. B.D., Wenger. J.D., Schuchat. A. Risk factors for. group. B streptococcal disease in adults // Ann. Intern. Med. – 1995. – Vol. 123. – P. 415-420.

15. Larsson C., Stalhammar-Carlemalm M. and Lindahl G. Protection against experimental infection with group B streptococcus by immunization with a bivalent protein vaccine // Vaccine. – 1999. – Vol. 17. – P. 454-458.

16. Levent F., Baker C.J., Rench M.A., Edwards M.S. Early outcomes of group B streptococcal meningitis in the 21st century // Pediatr. Infect. Dis. J. – 2010.

17. Lowry O.H., Rosenbraugh N.J., Ferr A.L., Randall R.J. Protein measurement-with the folin phenol reagent // J. Mol. Biol. – 1957. – Vol. 193. – Р. 265-273.

18. Paoletti L.C., Wessels M.R., Rodewald A.K., Shroff A.A., Jennings H.J. and Kasper D.L. Neonatal mouse protection against infection with multiple group B streptococcal (GBS) serotypes by maternal immunization with a tetravalent GBS polysaccharidetetanus toxoid conjugate vaccine // Infect. Immun. – 1994. – Vol. 62. – P. 3236-3243.

19. Takahahsi S., Nagano Y., Nagano N., Hayashi O., Taguchi F., Okuwaki Y. Role of C5a-asanin group B streptococcal resistance to opsonophagocytic killing // Infect. Immun. – 1995. – Vol. 63. – P. 4764-4769.

20. Yang H.H., Samantha J. Mascuch, Lawrence C. Madoff and Lawrence C. Paoletti. Recombinant Group B Streptococcus AlphaLike Protein 3 Is an Effective Immunogen and Carrier Protein // Clin. Vaccine Immunol. – 2008. – Vol. 15. – P. 1035-1041.