ВЗАИМОДЕЙСТВИЕ РАЗЛИЧНЫХ МОЛЕКУЛЯРНЫХ ФОРМ ИММУНОГЛОБУЛИНА КЛАССА А И РЕКОМБИНАНТНЫХ ДЕРИВАТОВ РЕЦЕПТОРНОГО ВАС БЕЛКА СТРЕПТОКОККОВ ГРУППЫ В

Резюме. Работа посвящена исследованию взаимодействия между иммуноглобулином класса А и рекомбинантными полипептидами Р6, Р7, Р8, созданными на основе поверхностного белка Bac стрептококков группы В, обладающего IgA-рецепторной активностью.

В настоящее время существует потребность в иммунохимических реагентах, строго специфичных в отношении IgA как для создания диагностикумов по детекции уровня IgA в биологических жидкостях, так и для аффинного выделения IgA и его фрагментов.

С целью изучения возможности реализации указанных выше направлений применения протеинов в ходе исследования была определена способность рекомбинантных полипептидов Р6, Р7, Р8, связывающих Fc-область IgA, вступать во взаимодействие с различными формами IgA (сывороточный IgA, секреторный IgA, подклассы сывороточного IgA – IgA1, IgA2) и подтверждена избирательность связывания лиганда.

Выяснено, что строение рекомбинантного деривата Р6, среди трех представленных полипептидов, является оптимальным для осуществления IgA-рецепторной способности.

Определены структурные особенности связывания иммуноглобулина А фрагментами Вас белка: положение сайта связывания на молекуле IgA (приближен к эпитопам трех МкАт), изменчивость структуры данного сайта, а также устойчивость сайта связывания полипептидов Р6, Р7, Р8 к частичному восстановлению дисульфидных связей на молекуле IgA.

1. Грязева И.В., Климович В.Б. Моноклональные антитела и тест-системы для выявления секреторного IgA и свободного секреторного компонента // Мед. иммунология. – 1999. – Т. 1, № 3-4. – С. 59.

2. Грязева И.В., Климович В.Б., Пашкова С.Ф. Моноклональные антитела к легким цепям иммуноглобулинов человека и их применение в иммуноанализе // Иммунология. – 1994. – № 3. – С. 31-37.

3. Дэвени Т., Гергей Я. Аминокислоты, пептиды и белки: Пер. с англ. А.Н. Маца / Под ред. Р.С. Незлина. – М.: Мир, 1976. – 356 с.

4. Климович В.Б., Самойлович М.П., Крутецкая И.Ю., Пашкова С.Ф. Моноклональные антитела против подклассов IgG человека. Эпитопная специфичность и применение в иммуноанализе // Иммунология. – 1998. – № 3. – С. 30-32.

5. Мерингова Л.Ф., Леонтьева Г.Ф., Устинович И.А., Грабовская К.Б., Суворов А.Н., Тотолян Артем А. Сравнительное изучение антигенных и иммуногенных свойств рекомбинантных полипептидов – фрагментов белка BAC стрептококка группы B // Мед. иммунология. – 2004. – Т. 6, № 6. – C. 493-498.

6. Устинович И.А. Изучение области связывания IgA на рекомбинантном BAC белке стрептококка группы B: Диcс. ... канд. биол. наук. – СПб., 2000. – 109 с.

7. Леонтьева Г.Ф., Суворов А.Н., Мерингова Л.Ф., Грабовская К.Б., Устинович И.А., Тотолян А.А. Экспериментальная оценка рекомбинантных полипетидов как вакцины против стрептококков группы B // Журн. микробиологии, эпидемиологии и иммунобиологии. – 2005. – № 2. – С. 35-40.

8. Areschoung T., Lindahl G., Stálhammar-Carlemalm M. Surfase proteins of Streptococcus agalactiae and related proteins in other bacterial pathogens // Clin. Microbiol. Rev. – 2005. – Vоl. 18, N 1. – P. 102-127.

9. Brady L.J., Boyle M. Identification of non-immunoglobulin A-Fc-binding forms and low-molecular-weight secreted forms of the group B streptococcal β antigen // Infect. Immun. – 1989. – Vol. 57, N 5. – P. 1573-1581.

10. Lindahl G., Akeström B., Vaerman J.-P., Stenberg L. Characterization of an IgA receptor from group B streptococci: specificity for serum IgA // Eur. J. Immunol. – 1990. – Vol. 20, N 10. – P. 2241-2247.

11. Suvorov A., Ustinovitch I., Meringova L., Grabovskaya K., Leontieva G., Vorobieva E., Totolian A. Construction of recombinant polypeptides based on beta antigen C (Bac) protein & their usage for protection against group B streptococcal infection // Indian J. Med. Res. – 2004. – N 119 (Suppl). – P. 228-232.

12. Forsgren A., Sjöquist J. «Protein A» from S. aureus. I. Pseudo-immune reaction with human gamma-globulin // J. Immunol. – 1966. – Vol. 97, N 6. – P. 822-827.

13. Jerlström P.J., Talay S.R., Valentin-Weigand P., Timmis K.N., Chhatwal G.S. Identification of an Immunoglobulin A binding motif located in the β-antigen of the C protein complex of group B streptococci // Infect. Immun. – 1996. – Vol. 64, N 7. – P. 2787-2793.

14. Mitchell T.J. The pathogenesis of streptococcal infections: from tooth decay to meningitis // Nat. Rev. Microbiol. – 2003. – Vol. 1, N 3. – P. 219-230.

15. Anthony B.F., Concepcion N.F., Puentes S.M., Payne N.R. Nonimmune binding of human immunoglobulin A to type II group B streptococci // Infect. Immun. – 1990. – Vol. 58, N 6. – P. 1789-1795.

16. Yang H.H., Madoff L.C., Guttormsen H.K., Liu Y.D., Paoletti L.C. Recombinant group B streptococcus Beta C protein and a variant with the deletion of its immunoglobulin A-binding site are protective mouse maternal vaccines and effective carriers in conjugate vaccines // Infect. Immun. – 2007. – Vol. 75, N 7. – P. 3455-3461.

17. Russell-Jones G.J., Gotschlich E.C., Blake M.S. A surface receptor specific for human IgA on group B streptococci possessing the Ibc protein antigen // J. Exp. Med. – 1984. – Vol. 160. – P. 1467-1475.

18. Pleass R.J., Areschoug T., Lindahl G., Woof J.M. Streptococcal IgA-binding proteins bind in the Cα2-Cα3 interdomain region and inhibit binding of IgA to human CD89 // J. Biol. Chem. – 2001. – Vol. 276, N 11. – P. 8197-8204.