ИНДУКЦИЯ Т-КЛЕТОЧНОГО ИММУННОГО ОТВЕТА У ПАЦИЕНТОВ С ХРОНИЧЕСКИМ ГЕПАТИТОМ С НА ФОНЕ ИММУНОТЕРАПИИ ДЕНДРИТНЫМИ КЛЕТКАМИ

Ключевая роль Т-клеток в элиминации вируса и отсутствие сильного Т-клеточного ответа у больных хроническим гепатитом С (ХГС)  позволяет рассматривать активацию антиген-специфических  Т-клеток в качестве перспективного подхода  к повышению эффективности лечения. Учитывая центральную роль  дендритных клеток (ДК) в индукции Т-клеточного ответа,  целью  исследования  явилась оценка влияния иммунотерапии ДК на показатели иммунитета у больных ХГС.  Десять пациентов с хронической HCV-инфекцией (генотип 1) были  вакцинированы ДК,  генерируемыми из моноцитов в присутствии интерферона-α (IFN-ДК) и нагруженными рекомбинантными белками Core (1–120) и NS3 (1192–1457). Вакцинотерапия включала инициирующий (4 вакцинации с недельным  интервалом) и поддерживающий (6 вакцинаций с месячным интервалом) курс с последующим периодом 6-месячного наблюдения. Проведение иммунотерапии ДК  не сопровождалось развитием тяжелых нежелательных явлений, выраженных поствакцинальных реакций или  возрастанием биохимических проявлений активности гепатита. Исследования ex vivo показали, что  иммунотерапия ДК приводила к индукции выраженного устойчивого иммунного ответа  на Core и умеренного ответа на  NS3,  что  проявлялось значимым возрастанием пролиферации и продукции IFNγ при  стимуляции  МНК Core  и усилением продукции IFNγ (при  отсутствии достоверного возрастания пролиферативного ответа) при  стимуляции МНК NS3.  Иммунотерапия ДК  также  приводила к возрастанию до  нормативных значений КонА-индуцированной пролиферации МНК,  свидетельствуя о восстановлении митогенной реактивности Т-клеток. В то же время активация Т-клеточного ответа  не сопровождалась индукцией антиген-специфических Th2-клеток и не приводила к генерации регуляторных СD4⁺CD25⁺CD127-Т-клеток. Несмотря на индукцию иммунного ответа,  иммунотерапия ДК не сопровождалась значимым снижением виремии. Тем не менее  преходящее уменьшение вирусной нагрузки у 4 пациентов и стойкое снижение виремии у двух, а также  наличие обратной взаимосвязи между NS3-специфическим пролиферативным ответом и уровнем вирусной нагрузки (Rs = 0,62; p < 0,05) (на момент завершения 6-месячного наблюдения) указывает на способность антиген-специфических Т-клеток ограничивать репликацию вируса.

1. Олейник Е.А., Леплина О.Ю., Тыринова Т.В., Тихонова М.А., Пыринова Г.Б., Останин А.А., Старостина Н.М. , Черных Е.Р. Влияние рекомбинантных белков Core и NS3 вируса гепатита С на созревание и функции дендритных клеток, генерируемых in vitro в присутствии интерферона-альфа // Иммунология, 2016. Т. 37, № 5. С. 239-245. [Oleynik E.A., Leplina O.Yu., Tyrinova T.V., Tikhonova M.A., Pyrinova G.B., Ostanin A.A., Starostina N.M., Chernykh E.R. The influence of recombinant HCV proteins Core and NS3 on maturation and functions of dendritic cells generated in vitro with interferon-alpha. Immunologiya = Immunology, 2016, Vol. 37, no. 5, pp. 239-245. (In Russ.)]

2. Auffermann-Gretzinger S., Keeffe E.B., Levy S. Impaired dendritic cell maturation in patients with chronic, but not resolved, hepatitis C virus infection. Blood, 2001, Vol. 97, no. 10, pp. 3171-3176.

3. Bronowicki J.P., Vetter D., Uhl G., Hudziak H., Uhrlacher A., Vetter J.M., Doffoel M. Lymphocyte reactivity to hepatitis С virus (HCV) antigens shows evidence for exposure to HCV in HCV-seronegative spouses of HCVinfected patients. J. Infect Dis., 1997, Vol. 176, no. 2, pp. 518-522.

4. Caetano J., Martinho A., Paiva A., Pais B., Valente C., Luxo C. Differences in hepatitis C virus (HCV)specific CD8 T-cell phenotype during pegylated alpha interferon and ribavirin treatment are related to response to antiviral therapy in patients chronically infected with HCV. J. Virol., 2008, Vol. 82, no. 15, pp. 7567-7577.

5. Diepolder H.M., Gerlach J.T., Zachoval R., Hoffmann R.M., Jung M.C., Wierenga E.A., Scholz S., Santantonio T., Houghton M., Southwood S., Sette A., Pape G.R. Immunodominant CD4 T-cell epitope within nonstructural protein 3 in acute hepatitis С virus infection. J. Virol., 1997, Vol. 71, no. 8, pp. 6011-6019.

6. Dubuisson J. Hepatitis C virus proteins. World J. Gastroenterol., 2007, Vol. 13, no. 17, pp. 2406-2415.

7. Eickhoff S., Brewitz A., Gerner M.Y., Klauschen F., Komander K., Hemmi H., Garbi N., Kaisho T., Germain R.N., Kastenmüller W. Robust anti-viral immunity requires multiple distinct T cell-dendritic cell interactions. Cell, 2015, Vol. 162, no. 6, pp. 1322-1337.

8. Echeverria I., Pereboev A., Silva L., Zabaleta A., Riezu-Boj J.I., Bes M., Cubero M., Borras-Cuesta F., Lasarte J.J., Esteban J.I., Prieto J., Sarobe P. Enhanced T cell responses against hepatitis C virus by ex vivo targeting of adenoviral particles to dendritic cells. Hepatology, 2011, Vol. 54, no. 1, pp. 28-37.

9. Farkas A., Kemény L. Interferon-α in the generation of monocyte-derived dendritic cells: recent advances and implications for dermatology. Br. J. Dermatol., 2011, Vol. 165, no. 2, pp. 247-254.

10. Gowans E.J., Roberts S., Jones К., Dinatale I., Latour P.A., Chua B., Eriksson E.M., Chin R., Li S., Wall D.M., Sparrow R.L., Moloney J., Loudovaris M., Ffrench R., Prince H.M., Hart D., Zeng W., Torresi J., Brown L.E., Jackson D.C. A phase I clinical trial of dendritic cell immunotherapy in HCV-infected individuals. J. Hepatol., 2010, Vol. 53, no. 4, pp. 599-607.

11. Ghany M.G., Strader D.B., Thomas D.L., Seeff L.B. Diagnosis, management, and treatment of hepatitis C: an update. Hepatology, 2009, Vol. 49, no. 4, pp. 1335-1374.

12. Houghton M. Prospects for prophylactic and therapeutic vaccines against the hepatitis C viruses. Immunol. Rev., 2011, Vol. 239, no. 1, pp. 99-108.

13. Jo J., Aichele U., Kersting N., Klein R., Aichele P., Bisse E., Sewell A.K., Blum H.E., Bartenschlager R., Lohmann V., Thimme R. Analysis of CD8+ T-cell-mediated inhibition of hepatitis C virus replication using a novel immunological model. Gastroenterology, 2009, Vol. 136, no. 4, pp. 1391-1401.

14. Klenerman P, Thimme R. T cell responses in hepatitis C: the good, the bad and the unconventional. Gut, 2012, Vol. 61, no. 8, pp. 1226-1234.

15. Kamal S.M., Fehr J., Roesler B., Peters T., Rasenack J.W. Peginterferon alone or with ribavirin enhances HCV-specific CD4 T-helper 1 responses in patients with chronic hepatitis C. Gastroenterology, 2002, Vol. 123, no. 4, pp. 1070-1083.

16. Korthals M., Safaian N., Kronenwett R., Maihofer D., Schott M., Papewalis C., Diaz Blanco E., Winter M., Czibere A., Haas R., Kobbe G., Fenk R. Monocyte derived dendritic cells generated by IFN-alpha acquire mature dendritic and natural killer cell properties as shown by gene expression analysis. J. Transl. Med., 2007, Vol. 5, no. 1, pp. 46-57.

17. Krishnadas D.K., Ahn J.S., Han J., Kumar R., Agrawal B. Immunomodulation by hepatitis C virus-derived proteins: targeting human dendritic cells by multiple mechanisms. Int. Immunol., 2010, Vol. 22, no. 6, pp. 491-502.

18. Li W., Krishnadas D.K., Li J., Tyrrell D.L., Agrawal B. Induction of primary human T cell responses against hepatitis C virus-derived antigens NS3 or core by autologous dendritic cells expressing hepatitis C virus antigens: potential for vaccine and immunotherapy. J. Immunol., 2006, Vol. 176, no. 10, pp. 6065-6075.

19. Lapenta C., Santini S.M., Spada M., Donati S., Urbani F., Accapezzato D., Franceschini D., Andreotti M., Barnaba V., Belardelli F. IFN-alpha-conditioned dendritic cells are highly efficient in inducing cross-priming CD8(+) T cells against exogenous viral antigens. Eur. J. Immunol., 2006, Vol. 36, no. 8, pp. 2046-2060.

20. MohdHanafiah K., Groeger J., Flaxman A.D., Wiersma S.T. Global epidemiology of hepatitis C virus infection: New estimates of age specific antibody to HCV seroprevalence. Hepatology, 2013, Vol. 57, no. 4, pp. 1333-1334.

21. Manns M.P., Wedemeyer H., Cornberg M. Treating viral hepatitis C: efficacy, side effects, and complications. Gut, 2006, Vol. 55, no. 9, pp. 1350-1359.

22. Miroux C., Vausselin T., Delhem N. Regulatory T cells in HBV and HCV liver diseases: implication of regulatory T lymphocytes in the control of immune response. Expert Opin. Biol. Ther., 2010, Vol. 10, no. 11, pp. 1563-1572.

23. Petruzziello A., Marigliano S., Loquercio G., Cozzolino A., Cacciapuoti C. Global epidemiology of hepatitis C virus infection: An up-date of the distribution and circulation of hepatitis C virus genotypes. World J. Gastroenterol., 2016, Vol. 22, no. 34, pp. 7824-7840.

24. Roohvand F., Kossari N. Advances in hepatitis C virus vaccines, part two: advances in hepatitis C virus vaccine formulations and modalities. Expert Opin. Ther. Pat., 2012, Vol. 22, no. 4, pp. 391-415.

25. Randolph G.J., Beaulieu S., Lebecque S., Steinman R.M., Muller W.A. Differentiation of monocytes into dendritic cells in a model of transendothelial trafficking. Science, 1998, Vol. 282, no. 5388, pp. 480-483

26. Rosen H.R. Emerging concepts in immunity to hepatitis C virus infection. J. Clin. Invest., 2013, Vol. 123, no. 10, pp. 4121-4130.

27. Santini S.M., Lapenta C., Logozzi M., Parlato S., Spada M., Di Pucchio T., Belardelli F. Type I interferon as a powerful adjuvant for monocyte-derived dendritic cell development and activity in vitro and in hu-pbl-scid mice. J. Exp. Med., 2000, Vol. 191, no. 10, pp. 1777-1788.

28. Sachdeva M., Chawla Y.R., Arora S.R. Dendritic cells: The warriors upfront-turned defunct in chronic hepatitis C infection. World J. Hepatol., 2015, Vol. 7, no. 19, pp. 2202-2208.

29. Thompson A.J., Holmes J.A. Treating hepatitis C – what’s new? Aust. Prescr., 2015, Vol. 38, no. 6, pp. 191-197.

30. Thimme R., Bukh J., Spangenberg H.C., Wieland S., Pemberton J., Steiger C., Govindarajan S., Purcell R.H., Chisari F.V. Viral and immunological determinants of hepatitis C virus clearance, persistence, and disease. Proc. Natl. Acad. Sci USA, 2002, Vol. 99, no. 24, pp. 15661-15668.

31. Thurner B., Roder C., Dieckmann D., Heuer M., Kruse M., Glaser A., Keikavoussi P., Kampgen E., Bender A., Schuler G. Generation of large numbers of fully mature and stable dendritic cells from leukapheresis products for clinical applications. J. Immunol. Meth., 1999, Vol. 224, no. 1-2, p. 211.

32. Vertuani S., Bazzaro M., Gualandi G., Micheletti F., Marastoni M., Fortini C., Canella A., Marino M., Tomatis R., Traniello S., Gavioli R. Effect of interferon-alpha therapy on epitope-specific cytotoxic Т lymphocyte responses in hepatitis C virus-infected individuals. Eur. J. Immunol., 2002, Vol. 32, no. 1, pp. 144-154.

33. Zabaleta A., D’Avola D., Echeverria I., Llopiz D., Silva L., Villanueva L., Riezu-Boj J.I., Larrea E., Pereboev A., Lasarte J.J., Rodriguez-Lago I., Iсarrairaegui M., Sangro B., Prieto J., Sarobe P. Clinical testing of a dendritic cell targeted therapeutic vaccine in patients with chronic hepatitis C virus infection. Mol. Ther. Methods Clin. Dev., 2015, Vol. 11, no. 2, p. 15006.

34. Zhu W., Chang Y., Wu C., Han Q., Pei R., Lu M., Chen X. The wild-type hepatitis C virus core inhibits initiation of antigen-specific Tand B-cell immune responses in BALB/c mice. Clin. Vaccine Immunol., 2010, Vol. 17, no. 7, pp. 1139-1147.

35. Zhou Y., Zhang Y., Yao Z., Moorman J.P., Jia Z. Dendritic cell-based immunity and vaccination against hepatitis C virus infection. Immunology., 2012, Vol. 136, no. 4, pp. 385-396.