ВЛИЯНИЕ Breg И IL-10 НА ГУМОРАЛЬНЫЙ ИММУННЫЙ ОТВЕТ

Breg угнетают патологические процессы при воспалительных и аутоиммунных заболеваниях. Регуляторные функции Breg обусловлены в основном секрецией IL-10. Роль Breg в гуморальном иммунном ответе не изучалась. В данной работе было исследовано влияние IL-10 и Breg при иммунном ответе В1- и В2-клеток мыши на Т-зависимые и Т-независимые антигены в модельной системе in vitro. В качестве Т-зависимого антигена использовали водорастворимый антиген бараньих эритроцитов, Т-независимого антигена 1 типа – LPS, Т-независимых антигенов 2 типа поливинилпирролидон и α(1→3) декстран. В1- и В2-лимфоциты были выделены из клеток перитонеальной полости и селезенки мышей линии СВА соответственно. Клетки культивировались в среде RPMI 1640 с 10% ЭТС и всеми необходимыми добавками с антигенами, IL-10 и без них. Число антитело- и иммуноглобулин-образующих клеток определяли методом ELISPOT.

Под действием водорастворимого антигена бараньих эритроцитов число антитело- и иммуноглобулин-образующих клеток в культурах В1- и В2-лимфоцитов возрастало. Добавление IL-10 приводило к снижению числа антителопродуцентов в среднем на 27%. IL-10 снижал также число индуцированных LPS антитело- и иммуноглобулин-образующих клеток в культуре В2-лимфоцитов на 75%. Под действием IL-10 в культуре В1-клеток, активированных Т-независимыми антигенами 2 типа, число антителопродуцентов уменьшалось в среднем на 50%.

Для изучения функциональной активности Breg выделяли из клеток перитонеальной полости и селезенки мышей линии СВА. Количество Breg после активации В-клеток LPS, иономицином и форболовым эфиром возрастало в 20 раз (с 4 до 96%). Основным изотипом иммуноглобулинов, секретируемых Breg, являлся IgM. При чистоте Вreg 96% иммуноглобулины секретировали ~12% этих клеток. Это означает, что некоторая часть Breg одновременно синтезирует иммуноглобулины и IL-10.

Получение высокоочищенных Breg и использование трансвеллов позволило исследовать бесконтактное влияние Breg на иммунный ответ в культуре спленоцитов xid-мышей линии CBA/N. Было установлено, что как специфический, так и поликлональный ответ в культуре этих клеток на водорастворимый антиген бараньих эритроцитов Breg угнетали. Таким образом, Breg участвуют в гуморальном иммунном ответе, подавляя функциональную активность спленоцитов мышей линии CBA/N на Т-зависимый антиген. Очевидно, что сущеcтвенную роль в этом играет секретируемый Breg IL-10.

1. Гаврилова М.В., Чернышова И.Н., Хоченков Д.А., Сидорова Е.В. Клеточные взаимодействия при ответе на Т-независимые антигены 2-го типа in vitro // Медицинская иммунология, 2013. Т. 15, № 4. С. 325-334. [Gavrilova M.V., Chernyshova I.N., Khochenkov D.A., Sidorova E.V. In vitro cellular interactions during immune response to T cellindependent type 2 antigens. Meditsinskaya immunologiya = Medical Immunology (Russia), Vol. 5, no. 4, pp. 325-334. (In Russ.)] http://dx.doi.org/10.15789/1563-0625-2013-4-325-334

2. Bouaziz J.D., Yanaba K., Tedder T.F. Regulatory B cells as inhibitors of immune responses and inflammation. Immunol. Rev., 2008, Vol. 224, pp. 201-214.

3. Chernyshova I.N., Gavrilova M.V., Sidorova E.V. Model System for Studies of Cell Interactions and Mechanisms of Immune Response to T-Independent Antigens of Type 2 in vitro. Biochemistry (Moscow) Supplement Series A: Membrane and Cell Biology, 2010, Vol. 4, no. 4, pp. 321-326.

4. DiLillo D.J., Horikawa M., Tedder T.F. B-lymphocyte effector functions in health and disease. Immunol. Res., 2011, Vol. 49, no. 1-3, pp. 281-292.

5. Fillatreau S., Sweenie C.H., McGeachy M.J., Gray D., Anderton S.M. B cells regulate autoimmunity by provision of IL-10. Nat. Immunol., 2002, Vol. 3, no. 10, pp. 944-950.

6. Maseda D., Smith S.H., DiLillo D.J., Bryant J.M., Candando K.M., Weaver C.T., Tedder T.F. Regulatory B10 cells differentiate into antibody-secreting cells after transient IL-10 production in vivo. J. Immunol., 2012, Vol. 188, no. 8, pp. 1036-1048.

7. Matsushita T., Tedder T.F. Identifying regulatory B cells (B10 cells) that produce IL-10 in mice. Methods Mol. Biol., 2011, Vol. 677, pp. 99-111.

8. Mauri C., Bosma A. Immune regulatory function of B cells. Annu Rev Immunol. 2012, Vol. 30, pp. 221-241.

9. Noh G., Lee J.H. Regulatory B cells and allergic diseases. Allergy Asthma Immunol. Res., 2011, Vol. 3, no. 3, pp. 168-177.

10. Pecanha L.M.T., Snapper C.M., Lees A., Yamaguchi H., Mond J.J. IL-10 inhibits T cell-independent but not T cell-dependent responses in vitro. J. Immunol., 1993, Vol. 150, no. 8, pp. 3215-3223.

11. Seman M., Mazie J.C., Bussard A.E. Antigen properties of water soluble fraction of sheep erythrocytes. Eur. J. Immunol., 1972, Vol. 2, no. 4, pp. 387-388.

12. Wolf S.D., Dittel B.N., Hardardottir F., Janeway C.A. Experimental autoimmune ncephalomyelitis induction in genetically B cell-deficient mice. J. Exp. Med., 1996, Vol. 184, no. 6, pp. 2271-2278.