ОСОБЕННОСТИ ВЗАИМОСВЯЗИ ФЕНОТИПА И ХЕМИЛЮМИНЕСЦЕНТНОЙ АКТИВНОСТИ НЕЙТРОФИЛЬНЫХ ГРАНУЛОЦИТОВ У БОЛЬНЫХ РАКОМ ПОЧКИ

Целью исследования явилось изучение особенностей взаимосвязи между фенотипом и активностью «респираторного взрыва» нейтрофильных гранулоцитов у больных раком почки. Обследованы больные раком почки (Т3N0М0, светлоклеточный тип) в возрасте 40-55 лет до хирургического лечения (n = 73). Диагноз рака почки у всех больных верифицирован гистологически. В качестве контрольной группы было обследовано 50 практически здоровых людей аналогичного возрастного диапазона. Исследование фенотипа нейтрофильных гранулоцитов крови проводили методом проточной цитометрии. Уровень «респираторного взрыва» в нейтрофильных гранулоцитах определяли с помощью спонтанной и зимозан-индуцированной люцигенин- и люминол-зависимой хемилюминесценции. У больных раком почки обнаружены изменения во взаимосвязях между показателями «респираторного взрыва» и фенотипом нейтрофилов. При раке наблюдается полная потеря взаимосвязей показателей синтеза первичных и вторичных активных форм кислорода с количеством CD11b+, CD62L+ и CD64+ нейтрофилов, но, как и у лиц контрольной группы, корреляционные связи выявляются с уровнем содержания HLA-DR+ клеток. Только у больных выявляется взаимосвязь уровня синтеза супероксид-радикала нейтрофилами, находящимися в состоянии относительного покоя, и экспрессией CD62L. При антигенной индукции «респираторного взрыва» данные взаимосвязи исчезают. Взаимосвязи синтеза первичных и вторичных активных форм кислорода с количеством CD11b+, CD62L+ и CD64+ нейтрофилов, выявляемые у здоровых людей, характеризуют положительную зависимость между показателями «респираторного взрыва» и функциональной активацией клеток, которая выражается в экспрессии адгезионных и функциональных рецепторов. Можно предположить, что нарушение взаимосвязи между показателями «респираторного взрыва» и фенотипом нейтрофилов у больных раком почки определяется различными факторами. Во-первых, при раке меняется фенотип нейтрофилов крови (снижается содержание CD11b+, CD62L+, CD64+, HLA-DR+и HLA-DR+CD64+ нейтрофилов, повышается уровень экспрессии CD16- и HLA-DR-рецепторов), что, возможно, связано с миграцией клеток в опухоль. Во-вторых, у больных наблюдается увеличение интенсивности «респираторного взрыва» в нейтрофилах за счет повышения уровней синтеза первичных и вторичных активных форм кислорода, что может быть связано с действием различных опухолевых факторов (антигенов, регуляторных молекул). Выявленные особенности взаимосвязей между фенотипом и «респираторным взрывом» нейтрофилов характеризуют особенности иммунопатогенеза рака почки и могут быть использованы при разработке иммунотерапевтических методов, направленных на стимуляцию противоопухолевой активности фагоцитирующих клеток.

1. Алексеев Б.Я., Анжиганова Ю.В., Лыков А.В., Леонов О.В., Варламов С.А., Горбачев А.Л., Магер В.О., Демичева Н.Н., Мишугин С.В., Зырянов А.В., Карнаух П.А., Никитин Р.В. Особенности диагностики и лечения рака почки в России: предварительные результаты многоцентрового кооперированного исследования // Онкоурология, 2012. № 3. С. 24-31. [Alekseev B.Ya., Anzhiganova Yu.V., Lykov A.V., Leonov O.V., Varlamov S.A., Gorbachev A.L., Mager V.O., Demicheva N.N., Mishugin S.V., Zyryanov A.V., Karnauh P.A., Nikitin R.V. Features of diagnosis and treatment of kidney cancer in Russia: preliminary results of a multicenter cooperative study. Onkourologiya = Oncourology, 2012, no. 3, pp. 24-31. (In Russ.)]

2. Владимиров Ю.А., Проскурина Е.В. Свободные радикалы и клеточная хемилюминесценция // Успехи биологической химии, 2009. T. 49. C. 341-388. [Vladimirov Yu.A., Proskurina E.V. Free radicals and cellular chemiluminescence. Uspekhi biologicheskoy khimii = Advances of Biological Chemistry, 2009, Vol. 49, pp. 341-38. (In Russ.)]

3. Коленчукова О.А., Савченко А.А., Смирнова С.В. Особенности люминол- и люцигенин-зависимой хемилюминесценции нейтрофильных гранулоцитов у больных хроническим риносинуситом // Медицинская иммунология, 2010. Т. 12, № 4-5. С. 437-440. [Kolenchukova O.A., Savchenko A.A., Smirnova S.V. The luminol- and lucigenin-dependent chemiluminescence features of neutrophils in patients with chronic rhinosinusitis. Meditsinskaya immunologiya = Medical Immunology (Russia), 2010, Vol. 12, no. 4-5, pp. 437-440. (In Russ.)] http://dx.doi.org/10.15789/1563-0625-2010-4-5-437-440

4. Куртасова Л.М., Савченко А.А., Шкапова Е.А. Клинические аспекты функциональных нарушений нейтрофильных гранулоцитов при онкопатологии. Новосибирск: Наука, 2009. 184 с. [Kurtasova L.M., Savchenko A.A., Shkapova E.A. Clinical aspects of neutrophil granulocytes functional disorders in cancer pathology]. Novosibirsk: Nauka, 2009. 184 p.

5. Мальцева В.Н., Авхачева Н.В., Сафронова В.Г. Общие закономерности в изменениях функциональной активности нейтрофилов при росте in vivo опухолей разной иммуногенности // Бюллетень экспериментальной биологии и медицины, 2010. Т. 150, № 11. С. 520-523. [Mal’tseva V.N., Avkhacheva N.V., Safronova V.G. Common regularities in changes of the neutrophil functional activity during in vivo growth of tumors of different immunogenic activity. Byulleten` eksperimental`noy biologii i meditsiny = Bulletin of Experimental Biology and Medicine, 2010, Vol. 150, no. 11, pp. 520-523. (In Russ.)]

6. Мальцева В.И., Сафронова В.Г. Неоднозначность роли нейтрофила в генезе опухоли // Цитология, 2009. Т. 51, № 6. С. 467-474. [Mal’tseva V.N., Safronova V.G. Ambiguity role of neutrophils in oncogenesis. Tsitologiya = Cytology, 2009, Vol. 51, no. 6, pp. 467-474. (In Russ.)]

7. Носов Д.А., Ворошилова Е.А., Саяпина М.С. Иммунотерапия при метастатическом раке почки: ее роль на современном этапе и перспективы клинического использования // Онкоурология, 2013. № 3. С. 37-42. [Nosov D.A., Voroshilova E.A., Sajapina M.S. Immunotherapy for metastatic kidney cancer: its role at the current stage and prospects of clinical application. Onkourologiya = Oncourology, 2013, no. 3, pp. 37-42. (In Russ.)]

8. Савченко А.А., Здзитовецкий А.Г., Борисов А.Г., Лузан Н.А. Хемилюминесцентная и энзиматическая активность нейтрофильных гранулоцитов у больных распространенным гнойным перитонитом в зависимости от исхода заболевания // Вестник РАМН. 2014. № 5-6. С. 23-28. [Savchenko A.A., Zdzitovetskiy D.E., Borisov A.G., Luzan N.A. Chemiluminescent and enzyme activity of neutrophils in patients with widespread purulent peritonitis depending on the outcome of disease. Vestnik RAMN = Annals of the Russian Academy of Medical Sciences, 2014, no. 5-6, pp. 23-28 (In Russ.)]

9. Хайдуков С.В., Байдун Л.А., Зурочка А.В., Тотолян Арег А. Стандартизованная технология «Исследование субпопуляционного состава лимфоцитов периферической крови с применением проточных цитофлюориметров-анализаторов» (Проект) // Медицинская иммунология, 2012. Т. 14, № 3. С. 255-268. [Khaydukov S.V., Baydun L.A., Zurochka A.V., Totolian Areg A. Standardized technology «Research of lymphocytes subpopulation composition in peripheral blood using flow cytometry analyzers» (Draft). Meditsinskaya immunologiya = Medical Immunology (Russia), 2012, Vol. 14, no. 3, pp. 255-268. (In Russ.)] http://dx.doi.org/10.15789/1563-0625-2012-3-255-268

10. Шкапова Е.А., Куртасова Л.М., Савченко А.А. Показатели люцигенин- и люминолзависимой хемилюминесценции нейтрофилов крови у больных раком почки // Бюллетень экспериментальной биологии и медицины, 2010. Т. 149, № 2. С. 201-203. [Shkapova E.A., Kurtasova L.M., Savchenko A.A. Lucigenin- and luminoldependent chemiluminescence of blood neutrophils in patients with renal cancer. Byulleten` eksperimental`noy biologii i meditsiny = Bulletin of Experimental Biology and Medicine, 2010, Vol. 149, no. 2. pp. 201-203 (In Russ.)]

11. Bayat B., Tjahjono Y., Berghцfer H., Werth S., Deckmyn H., De Meyer S.F., Sachs U.J., Santoso S. Choline Transporter-Like Protein-2: New von Willebrand Factor-Binding Partner Involved in Antibody-Mediated Neutrophil Activation and Transfusion-Related Acute Lung Injury. Arterioscler. Thromb. Vasc. Biol., 2015, Vol. 35, no. 7, pp. 1616-1622.

12. Braster R., O’Toole T., van Egmond M. Myeloid cells as effector cells for monoclonal antibody therapy of cancer. Methods, 2014, Vol. 65, no. 1, pp. 28-37.

13. Cortez-Retamozo V., Etzrodt M., Newton A., Rauch P.J., Chudnovskiy A., Berger C., Ryan R.J., Iwamoto Y., Marinelli B., Gorbatov R., Forghani R., Novobrantseva T.I., Koteliansky V., Figueiredo J.L., Chen J.W., Anderson D.G., Nahrendorf M., Swirski F.K., Weissleder R., Pittet M.J. Origins of tumor-associated macrophages and neutrophils. Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 2012, Vol. 109, no. 7, pp. 2491-2496.

14. Finisguerra V., Di Conza G., Di Matteo M., Serneels J., Costa S., Thompson A.A., Wauters E., Walmsley S., Prenen H., Granot Z., Casazza A., Mazzone M. MET is required for the recruitment of anti-tumoural neutrophils. Nature, 2015, Vol. 522, no. 7556, pp. 349-353.

15. Fossati G., Moots R.J., Bucknall R.C., Edwards S.W. Differential role of neutrophil Fcgamma receptor IIIB (CD16) in phagocytosis, bacterial killing, and responses to immune complexes. Arthritis Rheum., 2002, Vol. 46, no. 5, pp. 1351-1361.

16. Legitimo A., Consolini R., Failli A., Orsini G., Spisni R. Dendritic cell defects in the colorectal cancer. Hum. Vaccin Immunother., 2014, Vol. 10, no. 11, pp. 3224-3235.

17. Li P., Znaor A., Holcatova I., Fabianova E., Mates D., Wozniak M.B., Ferlay J., Scelo G. Regional geographic variations in kidney cancer incidence rates in European countries. Eur. Urol., 2015, Vol. 67, no. 6, pp. 1134-1141.

18. Lucca I., Klatte T., Fajkovic H., de Martino M., Shariat S.F. Gender differences in incidence and outcomes of urothelial and kidney cancer. Nat. Rev. Urol., 2015, Vol. 12, no. 10, pp. 585-592.

19. Luider J., Cyfra M., Johnson P., Auer I. Impact of the new Beckman Coulter Cytomics FC 500 5-color flow cytometer on a regional flow cytometry clinical laboratory service. Lab. Hematol., 2004, Vol. 10, pp. 102-108.

20. Maecker H., McCoy P., Nussenblatt R. Standardizing immunophenotyping for the human immunology project. Nat. Rev. Immunol., 2012, Vol. 12, pp. 191-200.

21. Mancardi D.A., Albanesi M., Jönsson F., Iannascoli B., Van Rooijen N., Kang X., England P., Daлron M., Bruhns P. The high-affinity human IgG receptor FcγRI (CD64) promotes IgG-mediated inflammation, anaphylaxis, and antitumor immunotherapy. Blood, 2013, Vol. 121, no. 9, pp. 1563-1573.

22. Mantia-Smaldone G.M., Chu C.S. A review of dendritic cell therapy for cancer: progress and challenges. BioDrugs, 2013, Vol. 27, no. 5, pp. 453-468.

23. Mastej K., Adamiec R. Neutrophil surface expression of CD11b and CD62L in diabetic microangiopathy. Acta Diabetol., 2008, Vol. 45, no. 3, pp. 183-190.

24. O’Hare F.M., Watson W., O’Neill A., Grant T., Onwuneme C., Donoghue V., Mooney E., Downey P., Murphy J., Twomey A., Molloy E.J. Neutrophil and monocyte toll-like receptor 4, CD11b and reactive oxygen intermediates, and neuroimaging outcomes in preterm infants. Pediatr. Res., 2015, Vol. 78, no. 1, pp. 82-90.

25. Pauken K.E., Wherry E.J. Overcoming T cell exhaustion in infection and cancer. Trends Immunol., 2015, Vol. 36, no. 4, pp. 265-276.

26. Perri S.R., Martineau D., Francois M., Lejeune L., Bisson L., Durocher Y., Galipeau J. Plasminogen Kringle 5 blocks tumor progression by antiangiogenic and proinflammatory pathways. Mol. Cancer Ther., 2007, Vol. 6, no. 2, pp. 441-449.

27. Rymaszewski A.L., Tate E., Yimbesalu J.P., Gelman A.E., Jarzembowski J.A., Zhang H., Pritchard K.A.Jr., Vikis H.G. The role of neutrophil myeloperoxidase in models of lung tumor development. Cancers (Basel), 2014, Vol. 6, no. 2, pp. 1111-1127.

28. Sarode S.C., Sarode G.S. Neutrophil-tumor cell cannibalism in oral squamous cell carcinoma. J. Oral Pathol. Med., 2014, Vol. 43, no. 6, pp. 454-458.

29. Swierczak A., Mouchemore K.A., Hamilton J.A., Anderson R.L. Neutrophils: important contributors to tumor progression and metastasis. Cancer Metastasis Rev., 2015, Vol. 34, pp. 735-751.

30. Verschoor C.P., Loukov D., Naidoo A., Puchta A., Johnstone J., Millar J., Lelic A., Novakowski K.E., Dorrington M.G., Loeb M., Bramson J.L., Bowdish D.M. Circulating TNF and mitochondrial DNA are major determinants of neutrophil phenotype in the advanced-age, frail elderly. Mol. Immunol., 2015, Vol. 65, no. 1, pp. 148-156.

31. Whiteside T.L. Regulatory T cell subsets in human cancer: are they regulating for or against tumor progression? Cancer Immunol. Immunother., 2014, Vol. 63, no. 1, p. 67-72.