Продукция цитокинов биоптатами инвазивной карциномы молочной железы неспецифического типа как критерий использования ацетил-амидной формы синтетического пептида HLDF-6 для дифференцирующей терапии рака молочной железы

Одним из перспективных направлений в терапии онкологических заболеваний является дифференцирующая терапия, направленная на использование агентов, повышающих степень дифференцировки опухолевых клеток и снижающих тем самым злокачественный потенциал неоплазмы. Одним из таких веществ является ацетил-амидная форма синтетического пептида HLDF-6. Ранее было установлено, что пептид способствует снижению относительного содержания низкодифференцированных клеток в биоптатах рака молочной железы. Однако механизмы влияния пептида на клетки опухоли и ее микроокружения остаются неизвестными. Не исключено, что вектором приложения действия пептида является его воздействие на функциональную активность опухоли. Целью исследования явилось изучение влияния ацетил-амидной формы синтетического пептида HLDF-6 на продукцию цитокинов биоптатами инвазивной карциномы молочной железы неспецифического типа. Проведен морфометрический анализ биоптатов, полученных у 40 женщин, больных инвазивной карциномой молочной железы неспецифического типа, до и после воздействия ацетил-амидной формы синтетического пептида HLDF-6. Для оценки эффекта от изучаемого пептида предложена оценка индекса влияния HLDF-6, выраженная в условных единицах (у. е.). Показатель ИВ-HLDF-6 0,9 у. е. и менее принят за значимый эффект. В зависимости от величины индекса, пациентки были разделены на две группы. Первую группу составили 27 человек со значимым эффектом от воздействия изучаемого пептида, вторую – 13 пациенток без значимого эффекта. Параллельно в супернатантах биоптатов до и после инкубации с изучаемым пептидом определяли концентрации TNFa, IFNg, VEGF, G-CSF, GM-CSF, MCP-1, IL-6, IL-8, IL-10, IL-17, IL-18 и IL-1b с помощью иммуноферментного метода. Индекс влияния ИВ-HLDF-6-cytokine, выраженный в условных единицах (у. е.), отражал влияние ацетил-амидной формы синтетического пептида HLDF-6 на продукцию цитокинов биоптатами опухоли. Исследование показало, что спонтанная продукция GM-CSF в первой группе достоверно ниже, чем во второй. Однако при воздействии исследуемого пептида концентрация этого цитокина значительно нарастает именно группе I по сравнению с группой II, о чем говорит статистически значимое различие в ИВ-HLDF-6-GM-CSF. По результатам ROC-анализа получено хорошее качество модели при изучении ИВ-HLDF-6-GM-CSF и относительного содержания низкодифференцированных клеток, что может послужить основой для использования этого показателя в качестве точки отсечки, используемой для отбора пациенток, которые могут являться кандидатами для дифференцирующей терапии ацетил-амидной формой синтетического пептида HLDF-6.

1. Аутеншлюс А.И., Жураковский И.П., Маринкин И.О., Богачук А.П., Липкин В.М. Средство, снижающее относительное содержание низкодифференцированных и повышающее относительное содержание высокодифференцированных клеток в инвазивной карциноме молочной железы неспецифического типа. Патент № 2786528 C1, 21.12.2022.

2. Пауков В.С. Клиническая патология. М.: Литтерра, 2018. 768 с. [Paukov V.S. Clinical pathology. Moscow: Littera, 2018. 768 p.

3. Поспехова Н.И., Головина Д.А., Филиппова М.Г., Семьянихина А.В., Дранко С.Л., Данишевич А.М., Строганова А.М. Молекулярно-биологические подтипы рака молочной железы у носителей мутаций в гене BRCA1 // Успехи молекулярной онкологии, 2020. Т. 7, № 4. С. 29-36.

4. Becher B., Tugues S., Greter M. GM-CSF: From growth factor to central mediator of tissue inflammation. Immunity, 2016, Vol. 4, no. 5, pp. 963-973.

5. Cruceriu D., Baldasici O., Balacescu O., Berindan-Neagoe I. The dual role of tumor necrosis factor-alpha (TNF-α) in breast cancer: molecular insights and therapeutic approaches. Cell. Oncol. (Dordr.), 2020, Vol. 43, no. 1, pp. 1-18.

6. Erez N., Glanz S., Raz Y., Avivi C., Barshack I. Cancer Associated Fibroblasts express pro-inflammatory factors in human breast and ovarian tumors. Biochem. Biophys. Res. Commun., 2013, Vol. 437, no. 3, pp. 397-402.

7. Erić I., Petek Erić A., Kristek J., Koprivčić I., Babić M. Breast cancer in young women: pathologic and immunohistochemical features. Acta Clin. Croat., 2018, Vol. 57, no. 3, pp, 497-502.

8. Fotinós J., Barberis L., Condat C.A. Effects of a differentiating therapy on cancer-stem-cell-driven tumors. J. Theor. Biol., 2023, Vol. 572, 111563. doi: 10.1016/j.jtbi.2023.111563.

9. Habanjar O., Bingula R., Decombat C., Diab-Assaf M., Caldefie-Chezet F., Delort L. Crosstalk of inflammatory cytokines within the breast tumor microenvironment. Int. J. Mol. Sci., 2023, Vol. 24, no. 4, 4002. doi: 10.3390/ijms24044002.

10. Howard F.M., Olopade O.I. Epidemiology of triple-negative breast cancer: a review. Cancer J., 2021, Vol. 27, no. 1, pp. 8-16.

11. Kumar A., Taghi Khani A., Sanchez Ortiz A., Swaminathan S. GM-CSF: A double-edged sword in cancer immunotherapy. Front. Immunol., 2022, Vol. 13, 901277. doi: 10.3389/fimmu.2022.901277.

12. Li J., Chen Z., Su K., Zeng J. Clinicopathological classification and traditional prognostic indicators of breast cancer. Int. J. Clin. Exp. Pathol., 2015, Vol. 8, no. 7, pp. 8500-8505.

13. Mihalik N.E., Steinberger K.J., Stevens A.M., Bobko A.A., Hoblitzell E.H., Tseytlin O., Akhter H., Dziadowicz S.A., Wang L., O’Connell R.C., Monaghan K.L., Hu G., Mo X., Khramtsov V.V., Tseytlin M., Driesschaert B., Wan E.C.K., Eubank T.D. Dose-specific intratumoral GM-CSF modulates breast tumor oxygenation and antitumor immunity. J. Immunol., 2023, Vol. 211, no. 10, pp. 1589-1604.

14. Rakha E.A., Reis-Filho J.S., Baehner F., Dabbs D.J., Decker T., Eusebi V., Fox S.B., Ichihara S., Jacquemier J., Lakhani S.R., Palacios J., Richardson A.L., Schnitt S.J., Schmitt F.C., Tan P.H., Tse G.M., Badve S., Ellis I.O. Breast cancer prognostic classification in the molecular era: the role of histological grade. Breast Cancer Res., 2010, Vol. 12, no. 4, 207. doi: 10.1186/bcr2607.

15. Turner K.M., Yeo S.K., Holm T.M., Shaughnessy E., Guan J.L. Heterogeneity within molecular subtypes of breast cancer. Am. J. Physiol. Cell Physiol., 2021, Vol. 321, no. 2, pp. 343-354.

16. Yang Z., Zeng H., Li J., Zeng N., Zhang Q., Hou K., Li J., Yu J., Wu Y. Dissecting the emerging role of cancerassociated adipocyte-derived cytokines in remodeling breast cancer progression. Heliyon, 2024, Vol. 10, no.15, e35200. doi: 10.1016/j.heliyon.2024.e35200.