ВОЗМОЖНАЯ РОЛЬ ТРОМБОЦИТАРНО-МОНОЦИТАРНЫХ КОМПЛЕКСОВ В ПАТОГЕНЕЗЕ ПРИВЫЧНОГО НЕВЫНАШИВАНИЯ БЕРЕМЕННОСТИ

Привычное невынашивание беременности представляет собой существенную клиническую проблему, которая затрагивает 1-5% популяции, при этом в более чем половине случаев причина преждевременной потери беременности остается неизвестной. Одной из возможных причин является нарушение баланса в системе гемостаза матери, приводящее к тромбозу маточно-плацентарных сосудов, снижению перфузии плаценты и гипоксии. Изменения морфофункциональных свойств моноцитов и образуемых ими и активированными тромбоцитами агрегатов  могут являться факторами, приводящими к различным осложнениям беременности, в частности, к невынашиванию. Однако, роль тромбоцитарно-моноцитарных комплексов (ТМК), которые представляют интерес в качестве диагностического маркера и в качестве терапевтической мишени, в патогенезе привычного невынашивания беременности практически не изучена. Целью исследования было определение количественных изменений в содержании и фенотипических характеристиках ТМК периферической крови при привычном невынашивании беременности, а также оценка влияния тромбоцитов на экспрессию поверхностных маркерных белков моноцитов при физиологическом и патологическом развитии беременности. Исследуемые группы составили женщины в возрасте 24-42 года с диагнозом привычный выкидыш, имеющие текущую беременность сроком 6-12 недель и женщины с неосложненной (физиологической) беременностью сроком 7-12 недель. В общей популяции и субпопуляциях моноцитов периферической крови пациенток методами проточной цитофлориметрии определяли содержание ТМК и уровни экспрессии поверхностных антигенов тромбоцитов и моноцитов: CD62P, CD11b, CD86, CD162, HLA-DR, TREM-1. Установлено, что при привычном невынашивании уровень ТМК повышен (26,5%) в сравнении с беременностью, протекающей без осложнений (15,3%), и это повышение происходит с участием всех трех субпопуляций моноцитов: классических, промежуточных и неклассических. При этом на уровне общей популяции моноцитов в ТМК отмечалось снижение уровня экспрессии HLA-DR и повышение уровня экспрессии CD11b, тогда как экспрессия CD62P, CD162, CD86 и TREM-1 существеннно не изменялась. Субпопуляции моноцитов вносили различный вклад в изменение уровней экспрессии активационных маркеров моноцитов, связанное с привычным невынашиванием, и эти изменения не всегда проявлялись на уровне всей популяции моноцитов. Сравнение ТМК и свободных моноцитов  показало, что изменения поверхностного фенотипа моноцитов в составе ТМК обусловлены как влиянием тромбоцитов, так и другими факторами. При  привычном невынашивании наблюдалось индуцированное тромбоцитами усиление адгезионных свойств моноцитов, что проявлялось  в повышение уровня экспрессии CD11b. В то же время снижение уровня экспрессии HLA-DR в моноцитах не было связано с их взаимодействием с тромбоцитами. Полученные результаты свидетельствуют о том, что привычное невынашивание беременности сопровождается повышением содержания ТМК в периферической крови и изменениями антигенного фенотипа моноцитов в составе ТМК, демонстрируют иммуномодуляторное влияние тромбоцитов, а также дают обоснования значимости определения паттернов экспрессии поверхностных антигенных маркеров ТМК в диагностических и терапевтических целях.

1. Alecsandru D., Klimczak A. M. Garcia Velasco J. A., Pirtea P., Franasiak J. M. Immunologic causes and thrombophilia in recurrent pregnancy loss. Fertil. Steril., 2021, Vol. 115, no. 3, pp. 561-566.

2. DOI: 10.1016/j.fertnstert.2021.01.017

3. Aleva F.E., Temba G., de Mast Q., Simons S.O., de Groot P.G., Heijdra Y.F., van der Ven A. Increased platelet-monocyte interaction in stable COPD in the absence of platelet hyper-reactivity. Respiration, 2018, Vol. 95, no. 1, pp. 35-43.

4. DOI: 10.1159/000480457

5. Allen N., Barrett T.J., Guo Y., Nardi M., Ramkhelawon B., Rockman C.B., Hochman J.S., Berger J.S. Circulating monocyte-platelet aggregates are a robust marker of platelet activity in cardiovascular disease. Atherosclerosis, 2019, Vol. 282, pp. 11-18. DOI: 10.1016/j.atherosclerosis.2018.12.029

6. Arts R.J., Joosten L.A., van der Meer J.W., Netea M.G. TREM-1: intracellular signaling pathways and interaction with pattern recognition receptors. J. Leukoc. Biol., 2013, Vol. 93, no. 1, pp. 209-215. DOI: 10.1189/jlb.0312145

7. Ashman N., Macey M.G., Fan S.L., Azam U., Yaqoob M.M. Increased platelet-monocyte aggregates and cardiovascular disease in end-stage renal failure patients. Nephrol. Dial. Transplant., 2003, Vol. 18, no. 10, pp. 2088-2096. DOI: 10.1093/ndt/gfg348

8. Blumenfeld, Z., Brenner, B. Thrombophilia-associated pregnancy wastage. Fertil. Steril., 1999, Vol. 72, no. 5, pp. 765-774.

9. DOI: 10.1016/s0015-0282(99)00360-x

10. Brambilla M., Canzano P., Becchetti A., Tremoli E., Camera M. Alterations in platelets during SARS-CoV-2 infection. Platelets, 2022, Vol. 33, no. 2, pp. 192-199. DOI: 10.1080/09537104.2021.1962519

11. Клинические рекомендации. Привычный выкидыш. https://cr.minzdrav.gov.ru/recomend/721_1 (Электронный ресурс)

12. Clinical guidelines. Recurrent miscarriage.(In Russ.) Available at: https://cr.minzdrav.gov.ru/recomend/721_1 (Electronic source) URL: https://cr.minzdrav.gov.ru/recomend/721_1

13. Dimitriadis E., Menkhorst E., Saito S., Kutteh W. H., Brosens, J. J. Recurrent pregnancy loss. Nat. Rev. Dis. Primers, 2020, Vol. 6, no. 1, p. 98. DOI: 10.1038/s41572-020-00228-z

14. Elalamy I., Chakroun T., Gerotziafas G.T., Petropoulou A., Robert F., Karroum A., Elgrably F., Samama M.M., Hatmi M. Circulating platelet-leukocyte aggregates: a marker of microvascular injury in diabetic patients. Thromb. Res., 2008, Vol. 121, no. 6, pp. 843-848. DOI: 10.1016/j.thromres.2007.07.016

15. Gawaz M. P., Loftus J. C., Bajt M. L., Frojmovic M. M., Plow E. F., Ginsberg M. H. Ligand bridging mediates integrin alpha IIb beta 3 (platelet GPIIB-IIIA) dependent homotypic and heterotypic cell-cell interactions. J. Clin. Invest., 1991, Vol. 88., no. 4, pp.1128-1134.

16. DOI: 10.1172/JCI115412

17. Graff J., Harder S., Wahl O., Scheuermann E.H., Gossmann J. Anti-inflammatory effects of clopidogrel intake in renal transplant patients: effects on platelet-leukocyte interactions, platelet CD40 ligand expression, and proinflammatory biomarkers. Clin. Pharmacol. Ther., 2005, Vol. 78, no. 5, pp. 468-476. DOI: 10.1016/j.clpt.2005.08.002

18. Grandone E., Piazza G. Thrombophilia, inflammation, and recurrent pregnancy loss: a case-based review. Semin. Reprod. Med., 2021, Vol. 39, no. 01/02, pp. 62-68. DOI: 10.1055/s-0041-1731827

19. Harding S.A., Sommerfield A.J., Sarma J., Twomey P.J., Newby D.E., Frier B.M., Fox K.A. Increased CD40 ligand and platelet-monocyte aggregates in patients with type 1 diabetes mellitus. Atherosclerosis, 2004, Vol. 176, no. 2, pp. 321-325. DOI: 10.1016/j.atherosclerosis.2004.05.008.

20. Haselmayer P., Grosse-Hovest L., von Landenberg P., Schild H., Radsak M.P. TREM-1 ligand expression on platelets enhances neutrophil activation. Blood, 2007, Vol. 110, no. 3, pp. 1029-1035. DOI: 10.1182/blood-2007-01-069195.

21. Hottz E.D., Azevedo-Quintanilha I.G., Palhinha L., Teixeira L., Barreto E.A., Pao C.R.R., Righy C., Franco S., Souza T.M.L., Kurtz P., Bozza F.A., Bozza P.T. Platelet activation and platelet-monocyte aggregate formation trigger tissue factor expression in patients with severe COVID-19. Blood, 2020, Vol. 136, no. 11, pp. 1330-1341. DOI: 10.1182/blood.2020007252

22. Hottz E.D., Medeiros-de-Moraes I.M., Vieira-de-Abreu A., de Assis E.F., Vals-de-Souza R., Castro-Faria-Neto H.C., Weyrich A.S., Zimmerman G.A., Bozza F.A., Bozza P.T. Platelet activation and apoptosis modulate monocyte inflammatory responses in dengue. J. Immunol., 2014, Vol. 193, no. 4, pp. 1864-1872. DOI: 10.4049/jimmunol.1400091

23. Hottz E.D., Quirino-Teixeira A.C., Merij L.B., Pinheiro M.B.M., Rozini S.V., Bozza F.A., Bozza P.T. Platelet-leukocyte interactions in the pathogenesis of viral infections. Platelets, 2022, Vol. 33, no. 2, pp. 200-207. DOI: 10.1080/09537104.2021.1952179.

24. Ishikawa T., Shimizu M., Kohara S., Takizawa S., Kitagawa Y., Takagi S. Appearance of WBC-platelet complex in acute ischemic stroke, predominantly in atherothrombotic infarction. J. Atheroscler. Thromb., 2012, Vol. 19, no. 5, pp. 494-501. DOI: 10.5551/jat.10637

25. Kaplar M., Kappelmayer J., Veszpremi A., Szabo K., Udvardy M. The possible association of in vivo leukocyte-platelet heterophilic aggregate formation and the development of diabetic angiopathy. Platelets, 2001, Vol. 12, no. 7, pp. 419-422. DOI: 10.1080/09537100120078368

26. Kullaya V., van der Ven A., Mpagama S., Mmbaga B.T., de Groot P., Kibiki G., de Mast Q. Platelet-monocyte interaction in Mycobacterium tuberculosis infection. Tuberculosis, 2018, Vol. 111, pp. 86-93. DOI: 10.1016/j.tube.2018.05.002

27. Liang H., Duan Z., Li D., Li D., Wang Z., Ren L., Shen T., Shao Y. Higher levels of circulating monocyte-platelet aggregates are correlated with viremia and increased sCD163 levels in HIV-1 infection. Cell. Mol. Immunol., 2015, Vol. 12, no. 4, pp. 435-443. DOI: 10.1038/cmi.2014.66

28. Liu X., Chen Y., Ye C., Xing D., Wu R., Li F., Chen L., Wang T. Hereditary thrombophilia and recurrent pregnancy loss: a systematic review and meta-analysis. Hum. Reprod., 2021, Vol.36, no. 5, pp.1213-1229.

29. DOI: 10.1093/humrep/deab010

30. Loguinova M., Pinegina N., Kogan V., Vagida M., Arakelyan A., Shpektor A., Margolis L., Vasilieva E. Monocytes of different subsets in complexes with platelets in patients with myocardial infarction. Thromb. Haemost., 2018, Vol. 118, no. 11, pp. 1969-1981. DOI: 10.1055/s-0038-1673342

31. Lukanov T. H, Veleva G. L., Konova E. I., Ivanov P. D., Kovacheva, K. S., Stoykov D. J. Levels of platelet-leukocyte aggregates in women with both thrombophilia and recurrent pregnancy loss. Clin Appl Thromb. Hemost., 2011, Vol.17, no. 2, pp.181-187. DOI: 10.1177/1076029609350891

32. Maclay J.D., McAllister D.A., Johnston S., Raftis J., McGuinnes C., Deans A., Newby D.E., Mills N.L., MacNee W. Increased platelet activation in patients with stable and acute exacerbation of COPD. Thorax, 2011, Vol. 66, no. 9, pp. 769-774. DOI: 10.1136/thx.2010.157529

33. Marquardt L., Anders C., Buggle F., Palm F., Hellstern P., Grau A.J. Leukocyte-platelet aggregates in acute and subacute ischemic stroke. Cerebrovasc. Dis., 2009, Vol. 28, no. 3, pp. 276-282. DOI: 10.1159/000228710

34. Ozanska A., Szymczak D., Rybka J. Pattern of human monocyte subpopulations in health and disease. Scand. J. Immunol., 2020, Vol. 92, no.1, pp. e12883. DOI: 10.1111/sji.12883

35. Practice Committee of the American Society for Reproductive Medicine. Evaluation and treatment of recurrent pregnancy loss: a committee opinion. Fertil. Steril., 2012, Vol. 98, no. 5, pp. 1103-1111. DOI: 10.1016/j.fertnstert.2012.06.048

36. Rondina M.T., Brewster B., Grissom C.K., Zimmerman G.A., Kastendieck D.H., Harris E.S., Weyrich A.S. In vivo platelet activation in critically ill patients with primary 2009 influenza A(H1N1). Chest, 2012, Vol. 141, no. 6, pp. 1490-1495. DOI: 10.1378/chest.11-2860

37. Samfireag M., Potre C., Potre O., Tudor R., Hoinoiu T., Anghel A. Approach to thrombophilia in pregnancy-a narrative review. Medicina (Kaunas), 2022, Vol. 58, no. 5, pp. 692. DOI: 10.3390/medicina58050692

38. Sayed D., Amin N.F., Galal G.M. Monocyte-platelet aggregates and platelet micro-particles in patients with post-hepatitic liver cirrhosis. Thromb. Res., 2010, Vol. 125, no. 5, pp. e228-e233. DOI: 10.1016/j.thromres.2009.12.002

39. Schrottmaier W.C., Kral J.B., Badrnya S., Assinger A. Aspirin and P2Y12 Inhibitors in platelet-mediated activation of neutrophils and monocytes. Thromb. Haemost., 2015, Vol. 114, no. 3, pp. 478-489. DOI: 10.1160/TH14-11-0943

40. Серебряная Н.Б., Шанин С.Н., Фомичева Е.Е., Якуцени П.П. Тромбоциты как активаторы и регуляторы воспалительных и иммунных реакций. Часть 2. Тромбоциты как участники иммунных реакций // Медицинская иммунология. – 2019. – Т. 21, № 1. – С. 9-20. Serebryanaya N.B., Shanin S.N., Fomicheva E.E., Yakutseni P.P.

41. Blood platelets as activators and regulators of inflammatory and immune reactions. Part 2. Thrombocytes as participants of

42. immune reactions. Meditsinskaya

43. Immunologiya = Medical Immunology, 2019, Vol. 21, no. 1, pp. 9-20. (In Russ.) DOI: 10.15789/1563-0625-2019-1-9-20

44. Simcox L. E., Ormesher L., Tower C., Greer I. A. Thrombophilia and pregnancy complications. Int. J. Mol. Sci, 2015, Vol. 16, no. 12, pp. 28418-28428. DOI: 10.3390/ijms161226104

45. Simon D. I., Chen Z., Xu H., Li C. Q., Dong J., McIntire L. V., Ballantyne C. M., Zhang L., Furman M. I., Berndt M. C., Lopez J. A. Platelet glycoprotein Ibα is a counterreceptor for the leukocyte integrin Mac-1 (CD11b/CD18). J. Exp. Med., 2000, Vol. 192, no. 2, pp. 193-204. DOI: 10.1084/jem.192.2.193

46. Tao L., Changfu W., Linyun L., Bing M., Xiaohui H. Correlations of platelet-leukocyte aggregates with P-selectin S290N and P-selectin glycoprotein ligand-1 M62I genetic polymorphisms in patients with acute ischemic stroke. J. Neurol. Sci., 2016, Vol. 367, pp. 95-100. DOI: 10.1016/j.jns.2016.05.046

47. Taus F., Salvagno G., Cane S., Fava C., Mazzaferri F., Carrara E., Petrova V., Barouni R.M., Dima F., Dalbeni A., Romano S., Poli G., Benati M., De Nitto S., Mansueto G., Iezzi M., Tacconelli E., Lippi G., Bronte V., Minuz P. Platelets promote thromboinflammation in SARS-CoV-2 pneumonia. Arterioscler. Thromb. Vasc. Biol., 2020, Vol. 40, no. 12, pp. 2975-2989. DOI: 10.1161/ATVBAHA.120.315175

48. Thomas M.R., Storey R.F. The role of platelets in inflammation. Thromb. Haemost., 2015, Vol. 114, no. 3, pp. 449-458. DOI: 10.1160/TH14-12-1067

49. Wu Q., Ren J., Hu D., Wu X., Li G., Wang G., Gu G., Chen J., Li R., Li Y., Hong Z., Ren H., Zhao Y., Li J. Monocyte subsets and monocyte-platelet aggregates: implications in predicting septic mortality among surgical critical illness patients. Biomarkers, 2016, Vol. 21, no. 6, pp. 509-516. DOI: 10.3109/1354750X.2016.1160290

50. Yang S., Huang X., Liao J., Li Q., Chen S., Liu C., Ling L., Zhou J. Platelet-leukocyte aggregates - a predictor for acute kidney injury after cardiac surgery. Ren. Fail., 2021, Vol. 43, no. 1, pp. 1155-1162. DOI: 10.1080/0886022X.2021.1948864

51. Zahran A.M., El-Badawy O., Mohamad I.L., Tamer D.M., Abdel-Aziz S.M., Elsayh K.I. Platelet activation and platelet-leukocyte aggregates in type I diabetes mellitus. Clin. Appl. Thromb. Hemost., 2018, Vol. 24, no. 9_suppl, pp. 230S-239S. DOI: 10.1177/1076029618805861

52. Zarbock A., Muller H., Kuwano Y., Ley K. PSGL-1-dependent myeloid leukocyte activation. J. Lekoc. Biol. 2009, Vol. 86, no. 5, pp. 1119-1124. DOI: 10.1189/jlb.0209117

53. Zhou X., Liu X.L., Ji W.J., Liu J.X., Guo Z.Z., Ren D., Ma Y.Q., Zeng S., Xu Z.W., Li H.X., Wang P.P., Zhang Z., Li Y.M., Benefield B.C., Zawada A.M., Thorp E.B., Lee D.C., Heine G.H. The kinetics of circulating monocyte subsets and monocyte-platelet aggregates in the acute phase of ST-elevation myocardial infarction: associations with 2-year cardiovascular events. Medicine (Baltimore), 2016, Vol. 95, no. 18, pp. e3466. DOI: 10.1097/MD.0000000000003466

54. Ziegler-Heitbrock L., Ancuta P., Crowe S., Dalod M., Grau V., Hart D. N., Leenen P. J., Liu Y. J., MacPherson G., Randolph G. J., Scherberich J., Schmitz J., Shortman K., Sozzani S., Strobl H., Zembala M., Austyn J. M., Lutz M. B. Nomenclature of monocytes and dendritic cells in blood. Blood, 2010, Vol. 116, no. 16, pp. e74-e80. DOI: 10.1182/blood-2010-02-258558