Фенотипическая характеристика интраэпителиальных лимфоцитов толстой кишки у пациентов с болезнью Крона

Интраэпителиальные лимфоциты (IEL) играют важную роль в поддержании иммунного гомеостаза и обеспечивают первую линию защиты слизистых оболочек желудочно-кишечного тракта от антигенов, а также быстро реагируют на повреждение эпителия. В последнее время IEL рассматриваются в качестве ключевых медиаторов аберрантного иммунного ответа, характеризующегося стойкой иммунной активацией, воспалением и нарушением барьерной функции слизистых оболочек, что наблюдается при болезни Крона. В данном исследовании впервые приводится сравнительная характеристика субпопуляционного состава IEL толстой кишки у пациентов с болезнью Крона и здоровых доноров для последующего определения их потенциальной роли в патогенезе заболевания.

Материалом исследования явилась ткань толстой кишки и периферическая кровь 10 пациентов с болезнью Крона и 6 здоровых доноров. IEL выделяли из ткани методом клеточной диссоциации; циркулирующие лимфоциты получали из периферической венозной крови путем центрифугирования на градиенте плотности. Фенотип лимфоидных клеток оценивали с использованием моноклональных антител и метода проточной цитометрии.

Большинство IEL толстой кишки идентифицировалось как СD3⁺Т-лимфоциты, однако статистически значимые различия в их количестве отсутствовали в исследуемых группах. При этом установлены изменения субпопуляционного состава Т-клеток: у пациентов с болезнью Крона соотношение CD3⁺CD4⁺IEL и CD3⁺CD8⁺IEL составило 1:1 и коррелировало с процентом Т-лимфоцитов в периферической крови (R = 0,7; p < 0,05), в то время как в донорской ткани выявлялось ожидаемое преобладание СD3⁺СD8⁺Т-киллеров (соотношение достигало 1:2, p < 0,05). Наряду с этим повышение неклассических γδIEL (преимущественно за счет Vδ1⁺T-клеток) и СD161⁺T-клеток в сочетании со снижением TNK-клеток наблюдалось как в толстой кишке (p < 0,01), так и в периферической крови (p < 0,05) пациентов с болезнью Крона относительно контрольной группы. При этом количество γδIEL коррелировало с локализацией (R = -0,6; p < 0,05) и течением заболевания (R = 0,7; p < 0,01) согласно Монреальской классификации.

У пациентов с болезнью Крона выявлены изменения состава IEL толстой кишки, которые характеризуют вовлечение субпопуляций Т-хелперов, γδТ-лимфоцитов и мукозально-ассоциированных СD161⁺Т-клеток в патогенез аутоиммунного воспаления, что требует дальнейшего исследования для установления их патогенетической роли.

1. Casalegno G.R., Dabritz J. New insights on CD8+ T cells in inflammatory bowel disease and therapeutic approaches. Front. Immunol., 2021, Vol. 12, 738762. doi: 10.3389/fimmu.2021.738762.

2. Catalan-Serra I., Sandvik A., Bruland T. Gamma delta T-Cells in Crohn's disease: a new player in the disease pathogenesis? J. Crohns Colitis, 2017, Vol. 11, no. 9, pp. 1135-1145.

3. Cheroutre H., Lambolez F., Mucida D. The light and dark sides of intestinal intraepithelial lymphocytes. Nat. Rev. Immunol., 2012, Vol. 11, no. 7, pp. 445-456.

4. Fergusson J.R., Fleming V.M., Klenerman P. CD161-expressing human T cells. Front. Immunol., 2011, Vol. 2, 36. doi: 10.3389/fimmu.2011.00036.

5. Hu M.D., Edelblum K.L. Sentinels at the frontline: the role of intraepithelial lymphocytes in inflammatory bowel disease. Curr. Pharmacol. Rep., 2017, Vol. 3, no. 6, pp. 321-334.

6. Imam T., Park S., Kaplan M.H., Olson M.R. Effector T helper cell subsets in inflammatory bowel diseases. Front. Immunol., 2018, Vol. 1, no. 9, 1212. doi: 10.3389/fimmu.2018.01212.

7. Kleinschek M.A., Boniface K., Sadekova S., Grein J., Murphy E.E., Turner S.P., Raskin L., Desai B., Faubion W.A., de Waal Malefyt R., Pierce R.H., McClanahan T., Kastelein R.A. Circulating and gut-resident human Th17 cells express CD161 and promote intestinal inflammation. J. Exp. Med., 2009, Vol. 206, no. 3, pp. 525-534.

8. Mayassi T., Jabri B. Human intraepithelial lymphocytes. Mucosal Immunol., 2018, Vol. 11, no. 5, pp. 1281-1289.

9. Mc Carthy N.E., Eberl M. Human '/O T-Cell control of mucosal immunity and inflammation. Front. Immunol., 2018, Vol. 9, 985. doi: 10.3389/fimmu.2018.00985.

10. Nizheharodava D.B., Tsekhanovich D.A., Starostin A.M., Dybov O.G., Zafranskaya M.M. Subpopulations of circulating Y§-lymphocytes in patients with inflammatory bowel diseases. Journal of the Belarusian State University, Ecology. 2022, Vol. 4, pp. 79-88. (In Russ.)

11. Nussler N.C., Stange B., Hoffman R.A., Schraut W.H., Bauer A.J., Neuhaus P Enhanced cytolytic activity of intestinal intraepithelial lymphocytes in patients with Crohn's disease. Langenbeck's Arch. Surg., 2000, Vol. 385, pp. 218-224.

12. Regner E.H., Ohri N., Stahly A., Gerich M.E., Fennimore B.P., Ir D., Jubair W.K., Gorg C., Siebert J., Robertson C.E., Caplan L., Frank D.N., Kuhn K.A. Functional intraepithelial lymphocyte changes in inflammatory bowel disease and spondyloarthritis have disease specific correlations with intestinal microbiota. Arthritis Res. Ther., 2018, Vol. 20, 149. doi: 10.1186/s13075-018-1639-3.

13. van Dieren J.M., van der Woude C.J., Kuipers E.J., Escher J.C., Samsom J.N., Blumberg R.S., Nieuwenhuis E.S. Roles of CD1d-Restricted NKT cells in the intestine. Inflamm. Bowel Dis., 2007, Vol. 13, pp. 1146-1152.

14. van Kaer L., Olivares-Villagomez D. Intestinal intraepithelial lymphocytes development, homeostasis, and functions. J. Immunol. 2018, Vol. 200, pp. 2235-2244.