Влияние эндоморфинов на гуморальный иммунный ответ, продукцию Th1/Th2/Th17-цитокинов и апоптоз CD4⁺, CD8⁺ лимфоцитов in vivo

Эндогенные опиоидные пептиды представляют собой большую группу физиологически активных соединений с выраженным сродством к рецепторам опиоидного типа, способную проявлять выраженную анальгетическую активность, а также оказывать дополнительные эффекты на периферии, ввиду своего широкого распространения на клетках многих органов и тканей. Мало изученными представителями этой группы являются эндоморфины, которые, благодаря своей структуре и свойствам, способны производить сильное антиноцицептивное воздействие после центрального введения, а значит, в перспективе, они могут рассматриваться как потенциальные заменители низкомолекулярных опиатов. Цель данного исследования заключается в том, чтобы оценить влияние эндоморфинов на гуморальный иммунный ответ, продукцию Th1/Th2/Th17-цитокинов и апоптоз CD4⁺, CD8⁺ лимфоцитов in vivo. В качестве объекта исследования использовали спленоциты белых мышей самцов породы Swiss. Оценку количества антителообразующих клеток в селезенке проводили с использованием метода локального гемолиза в геле агарозы по Jerne. Количественное определение цитокинов проводили методом твердофазного иммуноферментного анализа с помощью наборов (R&D, США) согласно методике, предложенной производителем. Апоптоз оценивали при помощи реагентов Annexin V-FITC/7-AAD kit (Beckman Coulter, США) в соответствии с инструкцией производителя методом проточной цитометрии на проточном цитофлюориметре CytoFLEX S (BeckmanCoulter, США). В ходе исследования установлено, что эндоморфины усиливают антителогенез селезенки, а предварительная блокада опиатных рецепторов налоксоном приводила к отмене стимулирующего влияния пептидов. Эндоморфины не влияли на продукцию спленоцитами IL-2, IL-4, IFNg, однако введение эндоморфина-2 налоксоннезависимо усиливало индуцированную продукцию IL-17. Оценка влияния эндоморфинов на апоптоз спленоцитов 24 ч культур показала, что эндоморфин-2 в нестимулированных культурах налоксонзависимо увеличивал процент позднего апоптоза CD8⁺ лимфоцитов, однако в индуцированных культурах оба эндоморфина повышали апоптотическую активность CD8⁺ лимфоцитов уже независимо от предварительной блокады опиоидных рецепторов. Подводя итог, можно сказать, что в системе in vivo эндоморфины оказывают широкий спектр разнонаправленных иммуномодулирующих эффектов, которые в дальнейшем могут представлять большой интерес для практического использования.

1. Anton B., Leff P., Calva J.C., Acevedo R., Salazar A., Matus M., Pavón L., Martinez M., Meissler J.J., Adler M.W., Gaughan J.P., Eisenstein T.K. Endomorphin 1 and endomorphin 2 suppress in vitro antibody formation at ultra-low concentrations: Anti-peptide antibodies but not opioid antagonists block the activity. Brain Behav. Immun., 2008, Vol. 22, no. 6, pp. 824-832.

2. Azuma Y., Ohura K., Wang P.L., Shinohara M. Endomorphins delay constitutive apoptosis and alter the innate host defense functions of neutrophils. Immunol. Lett., 2002, Vol. 81, no. 1, pp. 31-40.

3. Bodnar R.J. Endogenous opiates and behavior. Peptides, 2010, Vol. 31, no. 12, pp. 2325-2359.

4. Gein S.V., Baeva T.A. Endogenous opioid peptides in the regulation of innate immunity cell functions. Biochemistry, 2011, Vol. 76, no. 3, pp. 379-390. (In Russ.)

5. Gein S.V., Baeva T.A., Nebogatikov V.O., Tendryakova S.P. Influence of beta-endorphin on antibody genesis, proliferation and secretion of Th1/Th2 cytokines in vivo. Bulletin of Experimental Biology and Medicine, 2011, Vol. 152, no. 11, pp. 526-529. (In Russ.)

6. Horvath G. Endomorphin-1 and endomorphin-2: pharmacology of the selective endogenous µ-opioid receptor agonists. Pharmacol. Ther., 2000, Vol. 88, no. 3, pp. 437-463.

7. Janecka A., Staniszewska R., Fichna J. Endomorphin analogs. Curr. Med. Chem., 2007, Vol. 14, no. 30, pp. 3201-3208.

8. Jerne N.K., Nordin A.A. Plaque formation in agar by single antibody-producing cells. Science, 1963, Vol. 140, no. 3365, pp. 405-405.

9. Keresztes A., Borics A., Tóth G. Recent advances in endomorphin engineering. ChemMedChem, 2010, Vol. 5, no. 8, pp. 1176-1196.

10. Kimmey B.A., McCall N.M., Wooldridge L.M., Satterthwaite T.D., Corder G. Engaging endogenous opioid circuits in pain affective processes. J. Neurosci. Res., 2022, Vol. 100, no. 1, pp. 66-98.

11. Plein L.M., Rittner H.L. Opioids and the immune system – friend or foe. Br. J. Pharmacol., 2017, Vol. 175, no. 14, pp. 2717-2725.

12. Pomorska D.K., Gach K., Janecka A. Immunomodulatory effects of endogenous and synthetic peptides activating opioid receptors. Mini Rev. Med. Chem., 2014, Vol. 14, no. 14, pp. 1148-1155.

13. Pshennikova M.G. The role of opioid peptides in the body’s response to stress. Pathological Physiology and Experimental Therapy, 1987, no. 3, pp. 85-90. (In Russ.)

14. Sharp B.M. Multiple opioid receptors on immune cells modulate intracellular signaling. Brain Behav. Immun., 2006, Vol. 20, no. 1, pp. 9-14.

15. Zadina J.E., Nilges M.R., Morgenweck J., Zhang X., Hackler L., Fasold M.B. Endomorphin analog analgesics with reduced abuse liability, respiratory depression, motor impairment, tolerance, and glial activation relative to morphine. Neuropharmacology, 2016, Vol. 105, pp. 215-227.