Иммунизация апопротеинами ЛПВП индуцирует опосредованное Т-лимфоцитами воспаление аорты и вен

В последнее время все большее распространение получает гипотеза о том, что атеросклеротические процессы в большей степени обусловлены иммунными (аутоиммунными) механизмами. В то же время аутоиммунная гипотеза атерогенеза не стала общепринятой и требует дополнительных доказательств. Ранее нам удалось вызвать изменения в стенке аорты крысы, подобные изменениям на ранних стадиях атеросклероза человека, а также вызвать висцеральное ожирение у нормохолестеринемических крыс Wistar путем однократной иммунизации нативными липопротеинами высокой или низкой плотности человека. Также нами было обнаружено, что иммунный ответ на нативные ЛПВП человека вызывает атеросклерозоподобные поражения в аорте кролика, такие как адипоцитарная и хондроцитарная метаплазия, отложения протеогликанов, лейкоцитарная инфильтрация. Изменения в стенке аорты кроликов и крыс, иммунизированных нативными липопротеинами, были получены на фоне нормального уровня холестерина крови. Таким образом, иммунный ответ против ЛПВП или ЛПНП может быть независимой причиной атерогенеза. Цель данного исследования состояла в том, чтобы проверить, будет ли иммунизация человеческими апопротеинами ЛПВП (белками апоА1 и апоЕ) вызывать атеросклерозоподобные поражения в аорте нормохолестеринемических крыс Wistar. Апопротеины ЛПВП выделяли из плазмы человека или крысы. Для иммунизации апопротеинами ЛПВП человека использовали крыс Wistar (n = 5) в возрасте 2 месяцев. Апопротеины ЛПВП вводили однократно в виде внутрикожной инъекции по 100 мкг на крысу в неполном адъюванте Фрейнда. Контрольным крысам вводили подкожно неполный адъювант Фрейнда (n = 5). Крыс вскрывали через 25 недель после иммунизации. Срезы аорты окрашивали гематоксилином и эозином для световой микроскопии. Для определения инфильтрации Т-лимфоцитами проводили иммуногистохимическое окрашивание FITC-мечеными антителами, специфичными к крысиному CD3. CD3⁺Т-лимфоциты выявляли с помощью флуоресцентного микроскопа Olympus BX53. Уровень антител к апопротеинам человека и крысы определяли методом непрямого твердофазного иммуноферментного анализа. Иммунизация апопротеинами ЛПВП вызвала опосредованный Т-лимфоцитами иммунный ответ, без выработки аутоантител к апопротеинам ЛПВП. Интима и адвентиция аорты были инфильтрированы Т-лимфоцитами у крыс, иммунизированных апопротеинами ЛПВП. Неожиданным было обнаружение сильной Т-лимфоцитарной инфильтрации всех слоев стенки вен у крыс, иммунизированных апопротеинами ЛПВП человека. Таким образом, посредством иммунизации апопротеинами нам не удалось вызвать у крыс изменения в стенке аорты характерные для продвинутых стадий атеросклероза. Однако иммунизация апопротеинами ЛПВП вызвала опосредованное Т-лимфоцитами сильное воспаление аорты и вен.

1. Burstein M., Scholnick H.R., Morfin R. Rapid method for the isolation of lipoproteins from human serum by precipitation with polyanions. J. Lipid Res., 1970, Vol. 11, no. 6, pp. 583-595.

2. Cham B.E., Knowles B.R. A solvent system for delipidation of plasma or serum without protein precipitation. J. Lipid Res., 1976, Vol. 17, no. 2, pp. 176-181.

3. d’Elios M.M., Bergman M.P., Azzurri A., Amedei A., Benagiano M., de Pont J.J., Cianchi F., Vandenbroucke-Grauls C.M., Romagnani S., Appelmelk B.J., del Prete G. H(+),K(+)-atpase (proton pump) is the target autoantigen of Th1-type cytotoxic T cells in autoimmune gastritis. Gastroenterology, 2001, Vol. 120, no. 2, pp. 377-386.

4. Fomina K., Beduleva L., Menshikov I., Anikaeva M., Suntsova D., Sidorov A., Stolyarova E. Immune response to native lipoproteins induces visceral obesity and aortic wall injury in rats: the role of testosterone. Endocr. Metab. Immune Disord. Drug Targets, 2017, Vol. 17, no. 2, pp. 125-133.

5. Fomina K., Beduleva L., Menshikov I., Zerjawi A., Terentiev A., Sidorov A., Khramova T., Abisheva N., Gorbushina A. Аtherosclerosislike changes in the rabbit aortic wall induced by immunization with native highdensity lipoproteins. Immun. Inflamm. Dis., 2020, Vol. 8, no. 4, pp. 559-567.

6. Kobiyama K., Ley K. Atherosclerosis. Circ. Res., 2018, Vol. 123, no. 10, pp. 1118-1120.

7. McLeod O., Silveira A., Fredrikson G.N., Gertow K., Baldassarre D., Veglia F., Sennblad B., Strawbridge R.J., Larsson M., Leander K., Gigante B., Kauhanen J., Rauramaa R., Smit A.J., Mannarino E., Giral P., Humphries S.E., Tremoli E., de Faire U., Ohrvik J., Nilsson J., Hamsten A. Plasma autoantibodies against apolipoprotein B-100 peptide 210 in subclinical atherosclerosis. Atherosclerosis, 2014, Vol. 232, no. 1, pp. 242-248.

8. Meier L.A., Binstadt B.A. The contribution of autoantibodies to inflammatory cardiovascular pathology. Front. Immunol., 2018, Vol. 9, 911. doi: 10.3389/fimmu.2018.00911.

9. Montecucco F., Vuilleumier N., Pagano S., Lenglet S., Bertolotto M., Braunersreuther V., Pelli G., Kovari E., Pane B., Spinella G., Pende A., Palombo D., Dallegri F., Mach F., Roux-Lombard P. Anti-Apolipoprotein A-1 autoantibodies are active mediators of atherosclerotic plaque vulnerability. Eur. Heart J., 2011, Vol. 32, pp. 412-421.

10. Ramos-Leví A.M., Marazuela M. Pathogenesis of thyroid autoimmune disease: the role of cellular mechanisms. Endocrinol. Nutr., 2016, Vol. 63, no. 8, pp. 421-429.

11. Stamler J., Daviglus M.L., Garside D.B., Dyer A.R., Greenland P., Neaton J.D. Relationship of baseline serum cholesterol levels in 3 large cohorts of younger men to long-term coronary, cardiovascular, and all-cause mortality and to longevity. JAMA, 2000, Vol. 284, no. 3, pp. 311-318.

12. Verstappen G.M., Kroese F.G.M., Bootsma H. T cells in primary Sjögren’s syndrome: targets for early intervention. Rheumatology (Oxford), 2021, Vol. 60, no. 7, pp. 3088-3098.

13. Vuilleumier N., Montecucco F., Hartley O. Autoantibodies to apolipoprotein A-1 as a biomarker of cardiovascular autoimmunity. World J. Cardiol., 2014, Vol. 6, no. 5, pp. 314-326.

14. Vuilleumier N., Reber G., James R., Burger D., de Moerloose P., Dayer J.M., Roux-Lombard P. Presence of autoantibodies to apolipoprotein A-1 in patients with acute coronary syndrome further links autoimmunity to cardiovascular disease. J. Autoimmun., 2004, Vol. 23, no. 4, pp. 353-360.

15. Yang Y., Charlton B., Shimada A., dal Canto R., Fathman C.G. Monoclonal T cells identified in early NOD islet infiltrates. Immunity, 1996, Vol. 4, no. 2, pp. 189-194.