Динамика иммунных изменений в очаге повреждения при оксазолон-индуцированном язвенном колите на фоне озонотерапии

Ключевыми звеньями патогенеза воспалительных заболеваний кишечника являются нарушение иммунорегуляции и формирование аутоиммунного профиля ответа по отношению к антигенам собственной кишечной микробиоты и воспалительно-измененным антигенам колоноцитов. Мультимодальные биологические эффекты озона являются основанием для применения локальной и системной озонотерапии в комплексном лечении практически любых воспалительных заболеваний желудочно-кишечного тракта. Цель работы – изучить влияние внутрибрюшинной и ректальной озонотерапии на иммунные показатели очага повреждения при оксазолон-индуцированном язвенном колите в динамике эксперимента. Исследование проводили на 64 половозрелых крысах-самцах чистой линии Wistar массой 240±20 г. Моделирование язвенного колита проводилось с помощью оксазолона (4-этоксиметилен-2-фенил2-оксазолин-5-он) (Sigma-Аldrich, США). Озоно-кислородную смесь вводили внутрибрюшинно или ректально в концентрации 1,0-1,2 мг/л ежедневно, 1 раз в сутки, в объеме 10 мл, курс 6 дней. Исходы эксперимента фиксировали на 2-е, 4-е и 6-е сутки. Концентрацию IL-17 и IL-23 определяли в гомогенате тканей кишечника (Bender Medsystems, Австрия) на анализаторе Personal LAB, экспрессию CD4 и FoxP3 на лимфоцитах кишечника иммуногистохимически (ElisaKit, Сhina) Повреждение тканей толстого кишечника в динамике оксазолон-индуцированного язвенного колита нарастало от 2-х к 6-м суткам. Общее количество лимфоцитов значимо увеличивалось в динамике экспериментального колита с параллельным снижением численности CD4+ лимфоцитов и FoxP3- позитивных Т-лимфоцитов. Концентрация IL-17 и IL-23 в тканях нарастала по мере выраженности воспалительных изменений в очаге повреждения. Внутрибрюшинное введение озона значимо снизило уровень лимфоцитов в тканях очага поражения на 6-е сутки, с нормализацией количества CD4+ и FoxP3-позитивных Т-лимфоцитов к 6-м суткам. Уровни IL-17 и IL-23 нарастали от 2-х к 6-м суткам, с более низким значением IL-23 на 6-е сутки в сравнении с группой животных без лечения. Ректальное введение ОКС привело к нормализации FoxP3-клеток на на 6-е сутки относительно интактных. Уровни провоспалительных цитокинов IL-17 и IL-23 значимо снижались на 6-е сутки в сравнении с группой животных без лечения, что, вероятно, связано с проявлением противовоспалительных свойств у озона.

1. Жеребятьев А.С., Камышный А.М. Транскрипционные регуляторы дифференцировки Т-лимфоцитов и паттернраспознающие рецепторы – экспрессия лимфоцитами кишечника при оксазолоновом колите у крыс и после введения ингибитора 3-гидрокси-3-метилглутарил коэнзим А-редуктазы и антагониста рецепторов интерлейкина-1 // Иммунология, 2015. Т. 36, № 3. С. 139-144.

2. Лазебник Л.Б., Парфенов А.И., Князев О.В., Коноплянников А.Г., Сагынбаева В.Э., Яковлева М.В., Астрелина Т.А., Ручкина И.Н., Щербаков П.Л., Трубицына И.Е., Царегородцева Т.М., Гудкова Р.Б., Рогозина В.А., Чикунова Б.З., Хомерики С.Г., Михайлова З.Ф. Биологическая терапия воспалительных заболеваний кишечника // ЭиКГ, 2011. № 3. С. 42-53.

3. Осиков М.В., Симонян Е.В., Листик Е.В., Бакеева А.Е., Бивалькевич В.А. Воспалительные заболевания кишечника: выбор оптимальной экспериментальной модели // Современные проблемы науки и образования, 2017. № 3. [Электронный ресурс]. Режим доступа: https://science-education.ru/ru/article/view?id=26524.

4. Ситкин С.И., Вахитов Т.Я., Демьянова Е.В. Микробиом, дисбиоз толстой кишки и воспалительные заболевания кишечника: когда функция важнее таксономии // Альманах клинической медицины, 2018. T. 46, № 5. С. 396-425.

5. Ткачев А.В., Мкртчян Л.С., Беловолова Р.А., Девликамова Т.А. Диагностическая значимость иммунологических маркеров при различных формах язвенного колита // Медицинский вестник Северного Кавказа, 2019. Т. 14, № 2. С. 334-338.

6. Третьякова Ю.И. Особенности иммуновоспалительного синдрома у пациентов с язвенным колитом в зависимости от тяжести атаки заболевания // Пермский медицинский журнал, 2018. Т. 35, № 4. С. 39-45.

7. Bai Z., Li X., Liu Y. , Deng J., Wang Ch., Li Y., Qi X. Successful treatment of acute-on-chronic liver failure and hemolytic anemia with hepato-protective drugs in combination with intravenous ozone without steroids: A case report. Intractable Rare Dis. Res., 2018, Vol. 7, no. 3, pp. 204-208.

8. Bocci V., Valacchi G. Nrf2 activation as target to implement therapeutic treatments. Front. Chem., 2015, Vol. 3, 4. doi: 10.3389/fchem.2015.00004.

9. Clavo B.N., Santana-Rodríguez P., Llontop P., Gutiérrez D., Suárez G., López L., Rovira G., MartínezSánchez G., González E., Jorge I.J., Perera C., Blanco J., Rodríguez-Esparragón F. Ozone therapy as adjuvant for cancer treatment: is further research warranted? Evid. Based Complement. Alternat. Med., 2018, Vol. 2018, 7931849. doi: 10.1155/2018/7931849.

10. Kim Y.M., Pae H.O., Park J.E., Lee Y.C., Woo J.M., Kim N.-H., Choi Y.K., Lee B.-S., Kim S.R., Chung H.-T. Heme oxygenase in the regulation of vascular biology: from molecular mechanisms to therapeutic opportunities. Antioxid. Redox Signal, 2011, Vol. 14, no. 1, pp. 137-167.

11. Lamas B., Richard M.L., Leducq V., Pham H.P., Michel M.L., Da Costa G., Bridonneau C., Jegou S., Hoffmann T.W., Natividad J.M., Brot L., Taleb S., Couturier-Maillard A., Nion-Larmurier I., Merabtene F., Seksik P., Bourrier A., Cosnes J., Ryffel B., Beaugerie L., Launay J.M., Langella P., Xavier R.J., Sokol H. CARD9 impacts colitis by altering gut microbiota metabolism of tryptophan into aryl hydrocarbon receptor ligands. Nat. Med., 2016, Vol. 22, no. 6, pp. 598-605.

12. Lee Y.K., Mazmanian S.K. Has the microbiota played a critical role in the evolution of the adaptive immune system? Science, 2010, Vol. 330, no. 6012, pp. 1768-7173.

13. Manoto S.L., Maepa M.J., Motaung S.K. Medical ozone therapy as a potential treatment modality for regeneration of damaged articular cartilage in osteoarthritis. Saudi J. Biol. Sci., 2018, Vol. 25, no. 4, pp. 672-679.

14. Orakdogen M., Uslu S., Emon S.T., Somay H., Meric Z.C., Hakan T. The effect of ozone therapy on experimental vasospasm in the rat femoral artery. Turk. Neurosurg., 2016, Vol. 26, no. 6, pp. 860-865.

15. Wirtz S., Neufert C., Weigmann B., Neurath M.F. Chemically induced mouse models of intestinal inflammation. Nat. Protoc., 2007, Vol. 2, no. 3, pp. 541-600.