Параметры нетоза у пациентов с системной красной волчанкой

Произведена оценка параметров нетоза в комплексе с другими проявлениями функциональной активности нейтрофилов крови у 34 пациентов с системной красной волчанкой (СКВ). Оценивали образование нейтрофильных внеклеточных ловушек (neutrophil extracellular traps, NETs) в культурах клеток, инкубированных в течение 30 и 150 минут в среде (спонтанный уровень; NETСП30 и NETСП150 соответственно) и в присутствии инактивированного нагреванием S. аureus (штамм ATCC 25923, количество микробных тел – 108 КОЕ/мл) (стимулированный уровень; NETСТ30 и NETСТ150 соответственно). При этом за нейтрофильные внеклеточные ловушки принимали тонкие свободнолежащие внеклеточно расположенные фибриллярные структуры, в 2-3 раза превосходящие размер неизмененного гранулоцита. Результат выражали в процентах, как относительное количество внеклеточных ловушек на 100 сосчитанных лейкоцитов. Поглотительную активность нейтрофильных гранулоцитов оценивали в реакции фагоцитоза S. аureus с подсчетом процента нейтрофилов, поглотивших микробные частицы – фагоцитарный индекс (ФИ); среднего числа фагоцитированных объектов на один нейтрофил – фагоцитарное число (ФЧ). АФК-продуцирующую активность определяли в реакции восстановления нитросинего тетразолия в спонтанном и стимулированном S. aureus вариантах (НСТ_СП и НСТ_СТ соответственно), результат выражали как процент содержания формазан-положительных клеток на 100 сосчитанных лейкоцитов. Нитроксид-продуцирующие свойства определяли по методу Crow (1999) в спонтанных и стимулированных пробах по накоплению нитрированной аминокислоты тирозина (3-нитротирозина, 3-NТ_СП и 3-NТ_СТ соответственно). Выявлены более низкие показатели АФК-продуцирующей, поглотительный и NO-образующей активности нейтрофилов на фоне повышенной способности к нетозу у пациентов с СКВ по сравнению со здоровыми лицами (р < 0,05). Активация нетоза отмечена в культурах клеток без стимуляции, что указывает на образование сетей in vivo при СКВ. Уровень NETs максимально выражен при наличии у пациентов люпус-нефрита (р < 0,05) и в период ремиссии заболевания (р < 0,05). Установлена зависимость параметров NET-образования от длительности и степени активности СКВ (r_s = -0,6; р = 0,001 и rs = 0,39; p = 0,02 соответственно); титра аутоантител (anti-dsDNA и ANA; r_s = 0,67 ; р = 0,047 и r_s = 0,59; р = 0,034 соответственно), активности протромбинового комплекса (rs = 0,6; р = 0,036) и уровней мочевины и креатинина (r_s = 0,47; р = 0,037 и rs = 0,39; р = 0,048 соответственно). Полученные данные свидетельствуют о том, что параметры NET-образования можно рассматривать как перспективный биомаркер для верификации диагноза СКВ, оценки клинической активности, тяжести заболевания и прогноза развития осложнений. 

1. Ослякова А.О., Тихомирова И.А. Сосудистые факторы регуляции и их влияние на реологические свойства крови // Ярославский педагогический вестник, 2010. № 4. С. 89-92.

2. Решетняк Т.М., Середавкина Н.В., Дыдыкина И.С., Насонов Е.Л. Глюкокортикоиды в терапии системной красной волчанки // Клиницист, 2013. Т. 3, № 4. С. 14-26.

3. Смирнова Е.В., Краснова Т.Н., Проскурнина Е.В., Мухин Н.А. Роль дисфункции нейтрофилов в патогенезе системной красной волчанки // Терапевтический архив, 2017. № 12. С. 110-113.

4. Hakkim A., Fürnrohr B.G., Amann K., Laube B., Abed U.A., Brinkmann V., Herrmann M. Voll R.E., Zychlinskya A. Impairment of neutrophil extracellular trap degradation is associated with lupus nephritis. Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 2010, Vol. 107, pp. 9813-9818.

5. Kaplan M.J. Neutrophils in the pathogenesis and manifestations of SLE. Nat. Rev. Rheumatol., 2011, Vol. 7, рр. 691-699.

6. Knight J.S., Carmona-Rivera C., Kaplan M.S. Proteins derived from neutrophil extracellular traps may serve as self-antigens and mediate organ damage in autoimmune diseases. Front. Immunol., 2012, Vol. 3, 380. doi: 10.3389/fimmu.2012.00380.

7. Kusworini H., Benny A.P., Radhitio A.N. 1,25(oh)2 d3 inhibits endothelial apoptosis by neutrophil extracellular traps externalization in systemic lupus erythematosus patients. Turk. J. Immunol., 2017, Vol. 5, no. 3, pp. 89-95.

8. Yipp B.G., Kubes P. NETosis: how vital is it? Blood, 2013, Vol. 122, no. 16, pp. 2784-294.