mimmunМедицинская иммунологияMedical Immunology (Russia)1563-06252313-741XSPb RAACI10.15789/1563-0625-2014-5-449-456mimmun-732Research ArticleОРИГИНАЛЬНЫЕ СТАТЬИORIGINAL ARTICLESФЕНОТИП ЛИМФОЦИТОВ У БОЛЬНЫХ РАКОМ ЖЕЛУДКА И ПРЯМОЙ КИШКИ ПОСЛЕ ИММУНОТЕРАПИИ АКТИВИРОВАННЫМИ ЛИМФОЦИТАМИLYMPHOCYTE SUBPOPULATIONS IN GASTRIC AND COLORECTAL CANCER PATIENTS AFTER IMMUNOTHERAPY WITH ACTIVATED LYMPHOCYTESАбакушинаЕ. В.AbakushinaE. V.

к.м.н., старший научный сотрудник лаборатории клинической иммунологии ФГБУ «Медицинский радиологический научный центр» Минздрава России 249036, Россия, Калужская область, г. Обнинск, ул. Королева, 4. Тел.: 8 (484) 392-96-04. Факс: 8 (495) 956-14-40

PhD, Senior Research Associate, Laboratory of Clinical Immunology, Medical Radiological Research Center, RussianMinistry of Health Care 249036, Russian Federation, Obninsk, Kaluga Region, Koroleva str., 4. Phone: 7 (484) 392-96-04.Fax: 7 (495) 956-14-40

abakushina@mail.ruМаризинаЮ. В.MarizinaYu. V.

лаборант-исследователь научно-организационного отдела ФГБУ «Медицинский радиологический научный центр» Минздрава России, г. Обнинск, Россия

Laboratory Research Assistant, Science Organization Department, Medical Radiological Research Center, Russian Ministry of Health Care, Obninsk, Russian Federation

НепринаГ. С.NeprinaG. S.

к.м.н., ведущий научный сотрудник лаборатории клинической иммунологии ФГБУ «Медицинский радиологический научный центр» Минздрава России, г. Обнинск, Россия

PhD (Medicine), Leading Researcher, Laboratory of Clinical Immunology, Medical Radiological Research Center, Russian Ministry of Health Care, Obninsk, Russian Federation

ПасоваИ. А.PasovaI. A.

врач аллерголог-иммунолог, лаборатория клинической иммунологии ФГБУ «Медицинский радиологический научный центр» Минздрава России, г. Обнинск, Россия

Immunologist, Laboratory of Clinical Immunology, Medical Radiological Research Center, Russian Ministry of Health Care, Obninsk, Russian Federation

БердовБ. А.BerdovB. A.

д.м.н., профессор, заведующий отделом лучевых и хирургических методов лечения ФГБУ «Медицинский радиологический научный центр» Минздрава России, г. Обнинск, Россия

PhD, MD (Medicine),Professor, Head, Department of Radiology and Surgery Methods of Therapy, Medical Radiological Research Center, Russian Ministry of Health Care, Obninsk, Russian Federation

ФГБУ «Медицинский радиологический научный центр» Минздрава России, г. Обнинск, РоссияРоссияMedical Radiological Research Center, Russian Ministry of Health Care, Obninsk, Russian FederationRussian Federation201423112014165449456Copyright © Абакушина Е.В., Маризина Ю.В., Неприна Г.С., Пасова И.А., Бердов Б.А., 20142014Абакушина Е.В., Маризина Ю.В., Неприна Г.С., Пасова И.А., Бердов Б.А.Abakushina E.V., Marizina Y.V., Neprina G.S., Pasova I.A., Berdov B.A.Данная работа распространяется под лицензией Creative Commons Attribution 4.0.This work is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 License.https://www.mimmun.ru/mimmun/article/view/732

В работе оценен фенотип лимфоцитов периферической крови и маркеры активации (HLA- DR, CD38, CD69, CD314, CD25) у 13 пациентов с диссеминированными формами рака желудка и толстой кишки до и после проведения адоптивной иммунотерапии с использованием активированных лимфоцитов. Показано, что лимфоциты хорошо активируются и пролиферируют in vitro. Было выявлено, что у пациентов повышено содержание Тreg-лимфоцитов и NK-клеток. После иммунотерапии у всех больных сохранился исходно низкий уровень В-лимфоцитов (ср. 5%) и не изменилось содержание Тreg-лимфоцитов. Выявлено увеличение экспрессии маркеров активации на всех лимфоцитах (CD25, CD314, CD38, HLA-DR) и на Т-лимфоцитах (CD3+HLA-DR, CD3+CD38+). Отмечено достоверное снижение в кровяном русле Т-хелперов и активированных NК-клеток (CD16+CD314+), снижение соотношения CD4+/CD8+. Незначительно повысилось содержание зрелых (CD45RO+) и снизилось содержание юных лимфоцитов (CD45RA+). Адоптивная иммунотерапия хорошо переносится, характеризуется отсутствием побочных эффектов и может рекомендоваться как сопроводительная к лучевой и химиотерапии.

Phenotyping of peripheral blood lymphocytes and immune activation markers of activation (HLADR, CD38, CD69, CD314, CD25) was performed in thirteen patients with disseminated forms of stomach and rectal cancer before cell treatment, and following adoptive immunotherapy with activated lymphocytes. It wasshown that the lymphocytes are well activated and are able to proliferate in vitro. It was revealed that the relative content of Tregs and NK cells is increased in these patients. After the courses of immunotherapy, initially low levels of B-cells (average 5%) remained in all the patients, whereas concentration of Тregs didn’t change. Increased expression of activation markers was revealed for all lymphocyte subsets (CD25, CD314, CD38, HLA-DR) and, especially, for T-lymphocytes (CD3+HLA-DR, CD3+CD38+). Significant decrease of T helpers, activated NK-cells (CD16+CD314+) and CD4+/CD8+ was noted in peripheral blood. A non-significant elevation in mature lymphocytes (CD45RO+) and reduced content of young lymphocytes (CD45RA+) were revealed. Adoptive immunotherapy is safe and well tolerated, being characterized by lack of side effects, and it may be recommended as a complement to conventional radio- and chemotherapy.

адоптивная иммунотерапияактивированные лимфоцитырак желудка и прямой кишкифенотип лимфоцитов периферической кровиadoptive immunotherapyactivated lymphocytesgastric and colorectal cancerlymphocyte phenotypeperipheral bloodReferencesАбакушина Е.В., Кузьмина Е.Г., Коваленко Е.И. Основные свойства и функции NK-клеток человека // Иммунология. 2012. Т. 33, № 4. С. 220-224. [Abakushina E.V., Kuz`mina E.G., Kovalenko E.I. Osnovnye svoystva i funktsii NK-kletok cheloveka [The main characteristics of human natural killer cells]. Immunologiya = Immunologiya, 2012, Vol. 33, no. 4, pp. 220-224].Абакушина Е.В., Кузьмина Е.Г., Коваленко Е.И. Основные свойства и функции NK-клеток человека // Иммунология. 2012. Т. 33, № 4. С. 220-224. [Abakushina E.V., Kuz`mina E.G., Kovalenko E.I. Osnovnye svoystva i funktsii NK-kletok cheloveka [The main characteristics of human natural killer cells]. Immunologiya = Immunologiya, 2012, Vol. 33, no. 4, pp. 220-224].Злокачественные новообразования в России в 2010 году (заболеваемость и смертность) / Под редакцией В.И. Чиссова, В.В. Старинского, Г.В. Петровой. М.: ФГБУ «МНИОИ им. П.А. Герцена» Минздравсоцразвития России, 2012. 260 с. [Zlokachestvennye novoobrazovaniya v Rossii v 2010 godu (zabolevaemost` i smertnost`). Pod redaktsiey V.I. Chissova, V.V. Starinskogo, G.V. Petrovoy [Malignancies in Russia in 2010 (morbidity and mortality). Eds.: Chissov V.I., Starinsky V.V., Petrova G.V.] Moscow: FGBU «MNIOI after P. A. Hertzen» inzdravsocrazvitija Rossii, 2012. 260 p.]Злокачественные новообразования в России в 2010 году (заболеваемость и смертность) / Под редакцией В.И. Чиссова, В.В. Старинского, Г.В. Петровой. М.: ФГБУ «МНИОИ им. П.А. Герцена» Минздравсоцразвития России, 2012. 260 с. [Zlokachestvennye novoobrazovaniya v Rossii v 2010 godu (zabolevaemost` i smertnost`). Pod redaktsiey V.I. Chissova, V.V. Starinskogo, G.V. Petrovoy [Malignancies in Russia in 2010 (morbidity and mortality). Eds.: Chissov V.I., Starinsky V.V., Petrova G.V.] Moscow: FGBU «MNIOI after P. A. Hertzen» inzdravsocrazvitija Rossii, 2012. 260 p.]Исмаил-заде Р.С., Белевцев М.В., Потапнев М.П., Савицкий В.П., Жаврид Э.А. и Буглова С.Е. Иммуномодулирующее действие препаратов ИЛ-2 и ИФН-α в комбинации с сеансами общей гипертермии на этапах интенсивной химиотерапии у детей с далеко зашедшими злокачественными новообразованиями // Медицинская иммунология. 2006. Т. 8, № 4. C. 561-566. [Ismail-zade R.S., Belevtsev M.V., Potapnev M.P., Savitskiy V.P., Zhavrid E.A. i Buglova S.E. Immunomoduliruyushchee deystvie preparatov IL-2 i IFN-α v kombinatsii s seansami obshchey gipertermii na etapakh intensivnoy khimioterapii u detey s daleko zashedshimi zlokachestvennymi novoobrazovaniyami [IL-2 and IFN-alpha induced changes of peripheral blood lymphocyte subpopulations in children with advanced malignancies, treated with chemotherapy and whole body hyperthermia]. Meditsinskaya immunologiya = Medical Immunology, 2006, Vol. 8, no. 4, pp. 561-566].Исмаил-заде Р.С., Белевцев М.В., Потапнев М.П., Савицкий В.П., Жаврид Э.А. и Буглова С.Е. Иммуномодулирующее действие препаратов ИЛ-2 и ИФН-α в комбинации с сеансами общей гипертермии на этапах интенсивной химиотерапии у детей с далеко зашедшими злокачественными новообразованиями // Медицинская иммунология. 2006. Т. 8, № 4. C. 561-566. [Ismail-zade R.S., Belevtsev M.V., Potapnev M.P., Savitskiy V.P., Zhavrid E.A. i Buglova S.E. Immunomoduliruyushchee deystvie preparatov IL-2 i IFN-α v kombinatsii s seansami obshchey gipertermii na etapakh intensivnoy khimioterapii u detey s daleko zashedshimi zlokachestvennymi novoobrazovaniyami [IL-2 and IFN-alpha induced changes of peripheral blood lymphocyte subpopulations in children with advanced malignancies, treated with chemotherapy and whole body hyperthermia]. Meditsinskaya immunologiya = Medical Immunology, 2006, Vol. 8, no. 4, pp. 561-566].Киселевский М.В. Адоптивная иммунотерапия при злокачественных новообразованиях // Вестник Российской академии наук. 2003. № 1. C. 40-44. [Kiselevskiy M.V. Adoptivnaya immunoterapiya prizlokachestvennykh novoobrazovaniyakh [Adoptive immunotherapy for malignant tumors]. Vestnik Rossiyskoy akademii nauk = Bulletin of the Russian Academy of Sciences, 2003, no. 1, pp. 40-44].Киселевский М.В. Адоптивная иммунотерапия при злокачественных новообразованиях // Вестник Российской академии наук. 2003. № 1. C. 40-44. [Kiselevskiy M.V. Adoptivnaya immunoterapiya prizlokachestvennykh novoobrazovaniyakh [Adoptive immunotherapy for malignant tumors]. Vestnik Rossiyskoy akademii nauk = Bulletin of the Russian Academy of Sciences, 2003, no. 1, pp. 40-44].Козлов В.А., Черных Е.Р. Современные проблемы иммунотерапии в онкологии // Бюллетень СО РАМН. 2004. Т. 112, № 2. C. 13-19. [Kozlov V.A., Chernykh E.R. Sovremennye problemy immunoterapii v onkologii [Modern problems of cancer immunotherapy]. Byulleten` SO RAMN = Bulletin of Siberian Branch of the Russian Academy of Medical Sciences, 2004, Vol. 112, no. 2, pp. 13-19].Козлов В.А., Черных Е.Р. Современные проблемы иммунотерапии в онкологии // Бюллетень СО РАМН. 2004. Т. 112, № 2. C. 13-19. [Kozlov V.A., Chernykh E.R. Sovremennye problemy immunoterapii v onkologii [Modern problems of cancer immunotherapy]. Byulleten` SO RAMN = Bulletin of Siberian Branch of the Russian Academy of Medical Sciences, 2004, Vol. 112, no. 2, pp. 13-19].Курилин В.В., Хантакова Ю.Н., Облеухова И.А., Шевченко Ю.А., Куликова Е.В., Якушенко В.К., Соколов, А.В., Сенников С.В. Стимуляция дендритными клетками in vitro противоопухолевой цитотоксической активности мононуклеарных клеток больных колоректальным раком // едицинская иммунология. 2013. Т. 15, № 3. C. 235-246. [Kurilin V.V., Hantakova Yu.N., Obleukhova I.A., Shevchenko Yu.A., Kulikova E.V., Yakushenko V.K., Sokolov, A.V., Sennikov S.V. Stimulyatsiya dendritnymi kletkami in vitro protivoopukholevoy tsitotoksicheskoy aktivnosti mononuklearnykh kletok bol`nykh kolorektal`nym rakom [In vitro stimulation of antitumor cytotoxic activity of mononuclear cells from colorectal cancer patients]. Meditsinskaya immunologiya = Medical Immunology, 2013, Vol. 15, no. 3, pp. 235-246].Курилин В.В., Хантакова Ю.Н., Облеухова И.А., Шевченко Ю.А., Куликова Е.В., Якушенко В.К., Соколов, А.В., Сенников С.В. Стимуляция дендритными клетками in vitro противоопухолевой цитотоксической активности мононуклеарных клеток больных колоректальным раком // едицинская иммунология. 2013. Т. 15, № 3. C. 235-246. [Kurilin V.V., Hantakova Yu.N., Obleukhova I.A., Shevchenko Yu.A., Kulikova E.V., Yakushenko V.K., Sokolov, A.V., Sennikov S.V. Stimulyatsiya dendritnymi kletkami in vitro protivoopukholevoy tsitotoksicheskoy aktivnosti mononuklearnykh kletok bol`nykh kolorektal`nym rakom [In vitro stimulation of antitumor cytotoxic activity of mononuclear cells from colorectal cancer patients]. Meditsinskaya immunologiya = Medical Immunology, 2013, Vol. 15, no. 3, pp. 235-246].Нехаева Т.Л. Оптимизация аутологичных дендритно-клеточных вакцин для лечения больных злокачественными новообразованиями // Сибирский онкологический журнал. 2013. T. 57, № 3.Нехаева Т.Л. Оптимизация аутологичных дендритно-клеточных вакцин для лечения больных злокачественными новообразованиями // Сибирский онкологический журнал. 2013. T. 57, № 3.C. 52-56. [Nekhaeva T.L. Optimizatsiya autologichnykh dendritno-kletochnykh vaktsin dlya lecheniya bol`nykh zlokachestvennymi novoobrazovaniyami [Autologous dendritic cell vaccine optimization for therapy of patients with disseminated malignant neoplasms]. Sibirskiy onkologicheskiy zhurnal = Siberian Journal of Oncology, 2013, Vol. 57, no. 3, pp. 52-56].C. 52-56. [Nekhaeva T.L. Optimizatsiya autologichnykh dendritno-kletochnykh vaktsin dlya lecheniya bol`nykh zlokachestvennymi novoobrazovaniyami [Autologous dendritic cell vaccine optimization for therapy of patients with disseminated malignant neoplasms]. Sibirskiy onkologicheskiy zhurnal = Siberian Journal of Oncology, 2013, Vol. 57, no. 3, pp. 52-56].Титов К.С., Киселевский М.В., Демидов Л.В., Сельчук В.Ю., Грицай А.Н., Кучмезов Э.Х. Внутрибрюшинная биотерапия с использованием ИЛ-2 и донорских ЛАК-клеток при метестатических асцитах у больных раком яичников // Российский биотерапевтический журнал. 2011. Т. 10, № 2. C. 51-54. [Titov K.S., Kiselevskiy M.V., Demidov L.V., Sel`chuk V.Yu., Gritsay A.N., Kuchmezov E.H. Vnutribryushinnaya bioterapiya s ispol`zovaniem IL-2 i donorskikh LAK-kletok pri metestaticheskikh astsitakh u bol`nykh rakom yaichnikov [Intraperitoneal IL-2 and allogen lymphokine activated killers biotherapy of malignant peritoneal effusions in ovarian cancer patients]. Rossiyskiy bioterapevticheskiy zhurnal = Russian Journal of Biotherapy, 2011, vol. 10, no. 2, pp. 51-54].Титов К.С., Киселевский М.В., Демидов Л.В., Сельчук В.Ю., Грицай А.Н., Кучмезов Э.Х. Внутрибрюшинная биотерапия с использованием ИЛ-2 и донорских ЛАК-клеток при метестатических асцитах у больных раком яичников // Российский биотерапевтический журнал. 2011. Т. 10, № 2. C. 51-54. [Titov K.S., Kiselevskiy M.V., Demidov L.V., Sel`chuk V.Yu., Gritsay A.N., Kuchmezov E.H. Vnutribryushinnaya bioterapiya s ispol`zovaniem IL-2 i donorskikh LAK-kletok pri metestaticheskikh astsitakh u bol`nykh rakom yaichnikov [Intraperitoneal IL-2 and allogen lymphokine activated killers biotherapy of malignant peritoneal effusions in ovarian cancer patients]. Rossiyskiy bioterapevticheskiy zhurnal = Russian Journal of Biotherapy, 2011, vol. 10, no. 2, pp. 51-54].Cheng M., Chen Y., Xiao W., Sun R., Tian Z. NK cell-based immunotherapy for malignant diseases. Cell. Mol. Immunol., 2013, Vol. 3, no. 10, рp. 1-23.Cheng M., Chen Y., Xiao W., Sun R., Tian Z. NK cell-based immunotherapy for malignant diseases. Cell. Mol. Immunol., 2013, Vol. 3, no. 10, рp. 1-23.Sangiolo D., Martinuzzi E., Todorovic M., Vitaggio K., Vallario A., Jordaney N., Carnevale-Schianca F., Capaldi A., Geuna M., Casorzo L., Nash R., Aglietta M., Cignetti A. Alloreactivity and anti-tumor activity egregate within two distinct subsets of cytokine-induced killer (CIK) cells: implications for their infusion across major HLA barriers. Int. Immunol., 2008, Vol. 20, no. 7, pp. 841-848.Sangiolo D., Martinuzzi E., Todorovic M., Vitaggio K., Vallario A., Jordaney N., Carnevale-Schianca F., Capaldi A., Geuna M., Casorzo L., Nash R., Aglietta M., Cignetti A. Alloreactivity and anti-tumor activity egregate within two distinct subsets of cytokine-induced killer (CIK) cells: implications for their infusion across major HLA barriers. Int. Immunol., 2008, Vol. 20, no. 7, pp. 841-848.Shen Y., Lu C., Tian W., Wang L., Cui B., Jiao Y., Ma C., Ju Y., Zhu L., Shao C., Liu X., Wang J., Zhang B., Lu Z. Possible association of decreased NKG2D expression levels and suppression of the activity of natural killer cells in patients with colorectal cancer. Int. J. Oncol., 2012, Vol. 40, no. 4, pp. 1285-1290.Shen Y., Lu C., Tian W., Wang L., Cui B., Jiao Y., Ma C., Ju Y., Zhu L., Shao C., Liu X., Wang J., Zhang B., Lu Z. Possible association of decreased NKG2D expression levels and suppression of the activity of natural killer cells in patients with colorectal cancer. Int. J. Oncol., 2012, Vol. 40, no. 4, pp. 1285-1290.Terunuma H., Deng Х., Nishino N., Watanabe K. NK cells-based autologous immune enhancement therapy for cancer. JSRM, 2013, Vol. 9, no. 1, pp. 9-13.Terunuma H., Deng Х., Nishino N., Watanabe K. NK cells-based autologous immune enhancement therapy for cancer. JSRM, 2013, Vol. 9, no. 1, pp. 9-13.Todaro M., Orlando V., Cicero G., Caccamo N., Meraviglia S., Stassi G., Dieli F. Chemotherapy sensitizes colon cancer initiating cells to Vγ9Vδ2 T cell-mediated cytotoxicity. PloS one, 2013, Vol. 6, no. 8, pp. 1-8. e65145. doi: 10.1371.Todaro M., Orlando V., Cicero G., Caccamo N., Meraviglia S., Stassi G., Dieli F. Chemotherapy sensitizes colon cancer initiating cells to Vγ9Vδ2 T cell-mediated cytotoxicity. PloS one, 2013, Vol. 6, no. 8, pp. 1-8. e65145. doi: 10.1371.van der Vliet H.J., Balk S.P., Exley M.A. Natural killer T cell-based cancer immunotherapy. J. Clin. Cancer Res., 2006, Vol. 12, no. 20, pp. 5921-5923.van der Vliet H.J., Balk S.P., Exley M.A. Natural killer T cell-based cancer immunotherapy. J. Clin. Cancer Res., 2006, Vol. 12, no. 20, pp. 5921-5923.Zhang Z., Su T., He L., Wang H., Ji G., Liu X., Zhang Y., Dong G. Identification and functional analysis of ligands for natural killer cell activating receptors in colon carcinoma. J. Exp. Med., 2012, Vol. 226, no. 1, pp. 59-68.Zhang Z., Su T., He L., Wang H., Ji G., Liu X., Zhang Y., Dong G. Identification and functional analysis of ligands for natural killer cell activating receptors in colon carcinoma. J. Exp. Med., 2012, Vol. 226, no. 1, pp. 59-68.

The authors declare that there are no conflicts of interest present.