mimmunМедицинская иммунологияMedical Immunology (Russia)1563-06252313-741XSPb RAACI10.15789/1563-0625-2014-5-443-448mimmun-731Research ArticleОРИГИНАЛЬНЫЕ СТАТЬИORIGINAL ARTICLESИЗУЧЕНИЕ ЛИГАНД-ОПОСРЕДОВАННОГО ХЕМОТАКСИСА КЛЕТОК МАКРОФАГАЛЬНОЙ ЛИНИИ U937LIGAND INDUCED CHEMOTAXIS OF MACROPHAGE CELL LINE U937ФилинаА. Б.FilinaA. B.

лаборант-исследователь лаборатории молекулярной иммунологии ФГБУ «Научно-исследовательский институт вакцин и сывороток им. И.И. Мечникова» РАМН, Москва, Россия

Laboratory Assistant, Laboratory of Molecular Immunology, I.I. Mechnikov Research Institute of Vaccines and Serology, Russian Academy of Medical Sciences, Moscow, Russian Federation

СвитичО. А.SvitichO. A.

д.м.н., заведующая лабораторией молекулярной иммунологии ФГБУ «Научно-исследовательский институт вакцин и сывороток им. И.И. Мечникова» РАМН 105064, Россия, Москва, Малый Казенный пер., 5а. Тел.: 8 (926)148-83-22

PhD, MD, Chief, Laboratory of Molecular Immunology, I.I. Mechnikov Research Institute of Vaccines and Serology 105064, Russian Federation, Moscow, Maly Kazenny Lane, 5а. Phone: 7 (926) 148-83-22

svitichoa@yandex.ruГанковскаяЛ. В.GankovskayaL. V.

д.м.н., профессор, и.о. заведующего кафедрой иммунологии ГБОУ ВПО «Российский национальный исследовательский медицинский университет им. Н.И. Пирогова» Минздрава России, Москва, Россия

PhD, MD (Medicine), Chief, Department of Immunology, N.I. Pirogov Russian State Medical University, Russian Ministry of Health Care, Moscow, Russian Federation

ЛабжиновП. А.LabzhinovP. A.

заочный аспирант лаборатории молекулярной иммунологии ФГБУ «Научно-исследовательский институт вакцин и сывороток им. И.И. Мечникова» РАМН, Москва, Россия

PhD Candidate, Laboratory of Molecular Immunology, I.I. Mechnikov Research Institute of Vaccines and Serology, Russian Academy of Medical Sciences, Moscow, Russian Federation

ПарфеноваТ. М.ParfenovaT. M.

старший научный сотрудник лаборатории диагностики вирусных инфекций ФГБУ «Научно-исследовательский институт вакцин и сывороток им. И.И. Мечникова» РАМН, Москва, Россия

Senior Research Associate, Laboratory of Viral Diagnostics, I.I. Mechnikov Research Institute of Vaccines and Serology, Russian Academy of Medical Sciences, Moscow, Russian Federation

ЗверевВ. В.ZverevV. V.

д.б.н., профессор, академик РАН, директор ФГБУ «Научно-исследовательский институт вакцин и сывороток им. И.И. Мечникова» РАМН, Москва, Россия

PhD, MD (Biology), Professor, Full Member of RAS, Director, I.I. Mechnikov Research Institute of Vaccines and Serology, Russian Academy of Medical Sciences, Moscow, Russian Federation

ФГБУ «Научно-исследовательский институт вакцин и сывороток им. И.И. Мечникова» РАМН, Москва, РоссияРоссияI.I. Mechnikov Research Institute of Vaccines and Serums, Russian Academy of Medical Sciences, Moscow, Russian FederationRussian FederationГБОУ ВПО «Российский национальный исследовательский медицинский университет им. Н.И. Пирогова» Минздрава России, Москва, РоссияРоссияN.I. Pirogov Russian State Medical University, Moscow, Russian FederationRussian Federation201423112014165443448Copyright © Филина А.Б., Свитич О.А., Ганковская Л.В., Лабжинов П.А., Парфенова Т.М., Зверев В.В., 20142014Филина А.Б., Свитич О.А., Ганковская Л.В., Лабжинов П.А., Парфенова Т.М., Зверев В.В.Filina A.B., Svitich O.A., Gankovskaya L.V., Labzhinov P.A., Parfenova T.M., Zverev V.V.Данная работа распространяется под лицензией Creative Commons Attribution 4.0.This work is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 License.https://www.mimmun.ru/mimmun/article/view/731

В настоящее время очень остро стоит вопрос о лечении онкологических заболеваний. Большое значение в их развитии имеет метастазирование, которое напрямую зависит от хемотаксиса опухолевых клеток. Цель: изучение миграции опухолевых клеток на примере лиганд-опосредованного хемотаксиса клеток макрофагальной линии U937. В качестве хемоаттрактантов использовались синтетические лиганды TLR (DNA_lig, RNA_lig). Изучение экспрессионного профиля TLRs (TLR2, TLR3, TLR7, TLR9) мигрировавших клеток проводилось в динамике с помощью камеры Бойдена и метода ПЦР в режиме реального времени клеток. Была выявлена повышенная миграция клеток по направлению к DNA_lig и TNFα. Экспрессия TLR2, TLR7 и TLR9 значимо увеличились под воздействием TNFα в 1,5, 4 и 19 раз соответственно. Под воздействием DNA_ lig увеличилась экспрессия TLR9 в 105 и TLR3 в 2 раза, но снизилась экспрессия TLR2. При воздействии RNA_lig экспрессия TLR3 увеличилась в 3 раза. Полученные данные могут быть использованы с целью снижения хемотаксиса опухолевых клеток путем воздействия на данные лиганды и на разные звенья хемотаксиса.

Treatment of malignant tumors is among challenging issues of clinical medicine. Dissemination and matestasis of tumor cells plays a major role in oncology, being immediately dependent on chemotaxis of tumor cells. Hence, the aim of our study is to evaluate migration of tumor cells, in terms of ligand-mediated chemotaxis of a human U 937 lymphoma cell line. Synthetic TLR ligands (DNA_lig, RNA_lig) were used as chemoattractants. Assessment of time-dependent TLR expression by the migrating cells (including TLR2, TLR3, TLR7, TLR9) was carried out by means of real-time PCR, using Boyden’s chamber system for the migration assays. We have revealed an increased cell migration towards DNA_ lig and TNFα gradient. Expression of TLR2, TLR7 and TLR9 was found to be increased under the influence of TNFα (respectively 1.5-, 4- and 19-fold). Under the influence of DNA_lig, TLR9 expression was 105-fold increased, whereas TLR3 expression was 2-fold higher, along with decrease of TLR2 expression. Expression of TLR 3 was shown to be 3-times higher under the influence of RNA_lig. The effects observed could be potentially applied for suppression of tumor cell chemotaxis by means of these ligands and by influencing different pathways ofchemotaxis regulation.

хемотаксисопухолевые клеткиU937TLRsхемокиныкамера Бойденаchemotaxistumor cellsU937 lineTLRschemokinesBoyden chamber assayReferencesГланц С. Медико-биологическая статистика: Пер. с англ. М.: Практика 1999. 459 с. [Glants S. Mediko-biologicheskaya statistika. Per. s angl. [Biomedical statistics.Engl. Transl.]. Moscow: Practice, 1999. 459 p.]Гланц С. Медико-биологическая статистика: Пер. с англ. М.: Практика 1999. 459 с. [Glants S. Mediko-biologicheskaya statistika. Per. s angl. [Biomedical statistics.Engl. Transl.]. Moscow: Practice, 1999. 459 p.]Ковальчук Л.В., Игнатьева Г.А., Ганковская Л.В. Иммунология. Практикум. М.: ГЭОТАР-Медиа, 2010.192 c. [Koval`chuk L.V., Ignat`eva G.A., Gankovskaya L.V. Immunologiya. Praktikum [Immunology. Practical course]. Moscow: GEOTAR-Media, 2010. 192 p.]Ковальчук Л.В., Игнатьева Г.А., Ганковская Л.В. Иммунология. Практикум. М.: ГЭОТАР-Медиа, 2010.192 c. [Koval`chuk L.V., Ignat`eva G.A., Gankovskaya L.V. Immunologiya. Praktikum [Immunology. Practical course]. Moscow: GEOTAR-Media, 2010. 192 p.]Ребриков Д.В. ПЦР в реальном времени. М.: БИНОМ. Лаборатория знаний, 2011. 223 с. [Rebrikov D.V. PTSR v real`nom vremeni [PCR in real time]. Moscow: Binom, 2011. 223 p.]Ребриков Д.В. ПЦР в реальном времени. М.: БИНОМ. Лаборатория знаний, 2011. 223 с. [Rebrikov D.V. PTSR v real`nom vremeni [PCR in real time]. Moscow: Binom, 2011. 223 p.]Ярилин АА. Иммунология. M., 2012. С. 80-123. [Yarilin A.A. Immunologiya [Immunology]. Moscow, 2012, pp. 80-123.]Ярилин АА. Иммунология. M., 2012. С. 80-123. [Yarilin A.A. Immunologiya [Immunology]. Moscow, 2012, pp. 80-123.]Bohnhorst J.,Rasmussen T., Moen SH., Fl ttum M., Knudsen L., B rset M., Espevik T., Sundan A. Toll-like receptors mediate proliferation and survival of multiple myeloma cells. Leukemia. 2006, vol. 20, no. 6, pp. 1138-1144.Bohnhorst J.,Rasmussen T., Moen SH., Fl ttum M., Knudsen L., B rset M., Espevik T., Sundan A. Toll-like receptors mediate proliferation and survival of multiple myeloma cells. Leukemia. 2006, vol. 20, no. 6, pp. 1138-1144.Borsig L., Wolf M.J., Roblek M., Lorentzen A. and Heikenwalder M. Inflammatory chemokines and metastasis – tracing the accessory. Oncogene, 2013, pp. 1-8.Borsig L., Wolf M.J., Roblek M., Lorentzen A. and Heikenwalder M. Inflammatory chemokines and metastasis – tracing the accessory. Oncogene, 2013, pp. 1-8.Christer Sundstr m, Kenneth Nilson. Establishment and characterization of a human histiocitic lymphoma cell line (U-937). Int. J. Cancer, 1976, no. 17, pp. 565-577.Christer Sundstr m, Kenneth Nilson. Establishment and characterization of a human histiocitic lymphoma cell line (U-937). Int. J. Cancer, 1976, no. 17, pp. 565-577.Evanthia T. Roussos, John S. Condeelis and Antonia Patsialou. Chemotaxis in cancer. Nature Reviews Cancer. 2011, Vol. 11, pp. 573-587.Evanthia T. Roussos, John S. Condeelis and Antonia Patsialou. Chemotaxis in cancer. Nature Reviews Cancer. 2011, Vol. 11, pp. 573-587.Istv n F ri, Ferenc Sipos, Tiana M. Germann, Aleksandra Kalm r, Zsolt Tulassay, Moln r B., M zes G. Epithelial toll – like receptor 9 signaling in colorectal inflammation and cancer: Clinico – pathogenic aspects. World Journal of Gastroenterology, 2013, Vol. 19, no. 26, pp. 4119-4126.Istv n F ri, Ferenc Sipos, Tiana M. Germann, Aleksandra Kalm r, Zsolt Tulassay, Moln r B., M zes G. Epithelial toll – like receptor 9 signaling in colorectal inflammation and cancer: Clinico – pathogenic aspects. World Journal of Gastroenterology, 2013, Vol. 19, no. 26, pp. 4119-4126.Jego G., Bataille R., Geffroy-Lozeau A., Descamps G., Pellat-Deceunynck C. Pathogen-associated molecular patterns are growth and survival factors for human myeloma cells through Toll-like receptors. Leukemia, 2006, Vol. 20, no. 6, pp. 1130-1137.Jego G., Bataille R., Geffroy-Lozeau A., Descamps G., Pellat-Deceunynck C. Pathogen-associated molecular patterns are growth and survival factors for human myeloma cells through Toll-like receptors. Leukemia, 2006, Vol. 20, no. 6, pp. 1130-1137.Koval’chuk L.V., Gankovskaya L.V., Gankovskaya O.A. Herpes simplex virus, innate immunity and treatment Immune Mediated Diseases: From Theory to Therapy. Advances in Experimental Medicine and Biology, 2007, Vol. 601, p. 480.Koval’chuk L.V., Gankovskaya L.V., Gankovskaya O.A. Herpes simplex virus, innate immunity and treatment Immune Mediated Diseases: From Theory to Therapy. Advances in Experimental Medicine and Biology, 2007, Vol. 601, p. 480.Ngo V.N., Young R.M., Schmitz R., Jhavar S., Xiao W., Lim K.H., Kohlhammer H., Xu W., Yang Y., Zhao H., Shaffer A.L., Romesser P., Wright G., Powell J., Rosenwald A., Muller-Hermelink H.K., Ott G., Gascoyne R.D., Connors J.M., Rimsza L.M., Campo E., Jaffe E.S., Delabie J., Smeland E.B., Fisher R.I., Braziel R.M., Tubbs R.R., Cook J.R., Weisenburger D.D., Chan W.C., Staudt L.M. Oncogenically active MYD88 mutations in human lymphoma. Nature, 2011, Vol. 470, no. 7332, pp. 115-119.Ngo V.N., Young R.M., Schmitz R., Jhavar S., Xiao W., Lim K.H., Kohlhammer H., Xu W., Yang Y., Zhao H., Shaffer A.L., Romesser P., Wright G., Powell J., Rosenwald A., Muller-Hermelink H.K., Ott G., Gascoyne R.D., Connors J.M., Rimsza L.M., Campo E., Jaffe E.S., Delabie J., Smeland E.B., Fisher R.I., Braziel R.M., Tubbs R.R., Cook J.R., Weisenburger D.D., Chan W.C., Staudt L.M. Oncogenically active MYD88 mutations in human lymphoma. Nature, 2011, Vol. 470, no. 7332, pp. 115-119.Rakoff-Nahoum S, Medzhitov R. Toll-like receptors and cancer. Nat. Rev. Cancer, 2009, vol. 9, no. 1, pp. 57- 63.Rakoff-Nahoum S, Medzhitov R. Toll-like receptors and cancer. Nat. Rev. Cancer, 2009, vol. 9, no. 1, pp. 57- 63.Salcedo R., Cataisson C., Hasan U., Yuspa S.H., Trinchieri G. MyD88 and its divergent toll in carcinogenesis. Trends in Immunology 2013, Vol. 34, no. 8, pp. 379-389.Salcedo R., Cataisson C., Hasan U., Yuspa S.H., Trinchieri G. MyD88 and its divergent toll in carcinogenesis. Trends in Immunology 2013, Vol. 34, no. 8, pp. 379-389.Dimicoli S., Wei Y., Bueso-Ramos C., Yang H., DiNar C., Jia Y., Zheng H., Fang Z., Nguyen M., Pierce S., Chen R., Wang H., Wu C., Garcia-Manero G. Overexpression of the Toll-Like Receptor (TLR) Signaling Adaptor MYD88, but Lack of Genetic Mutation, in Myelodysplastic Syndromes. PLoS One, 2013, no. 8, pp. 1-9.Dimicoli S., Wei Y., Bueso-Ramos C., Yang H., DiNar C., Jia Y., Zheng H., Fang Z., Nguyen M., Pierce S., Chen R., Wang H., Wu C., Garcia-Manero G. Overexpression of the Toll-Like Receptor (TLR) Signaling Adaptor MYD88, but Lack of Genetic Mutation, in Myelodysplastic Syndromes. PLoS One, 2013, no. 8, pp. 1-9.Svitich O., Gankovskaya L., Lavrov V., Grigoreva O., Karaulov A., Zverev V. Herpes simplex virus type 2 infection during pregnancy is correlated with elevated TLR9 and TNF expression in cervical cells. International Trends in Immunology, 2014, Vol. 1, no. 1, pp. 62-66.Svitich O., Gankovskaya L., Lavrov V., Grigoreva O., Karaulov A., Zverev V. Herpes simplex virus type 2 infection during pregnancy is correlated with elevated TLR9 and TNF expression in cervical cells. International Trends in Immunology, 2014, Vol. 1, no. 1, pp. 62-66.

The authors declare that there are no conflicts of interest present.