mimmunМедицинская иммунологияMedical Immunology (Russia)1563-06252313-741XSPb RAACI10.15789/1563-0625-2014-5-437-442mimmun-730Research ArticleОРИГИНАЛЬНЫЕ СТАТЬИORIGINAL ARTICLESЭКСПРЕССИЯ НОВОГО А3 АНТИГЕНА В КЛЕТКАХ БОЛЬНЫХ С РАЗЛИЧНЫМИ ЛИМФОПРОЛИФЕРАТИВНЫМИ ЗАБОЛЕВАНИЯМИEXPRESSION OF A NEW A3 ANTIGEN IN THE CELLS OF PATIENTS WITH VARIOUS LYMPHOPROLIFERATIVE DISEASESДейнекоН. Л.DeinekoN. L.

к.б.н., научный сотрудник, научно-клиническая лаборатория трансфузиологической иммунологии ФГБУ «Гематологический научный центр» Минздрава России, Москва, Россия

PhD (Biology), Research Associate, Clinical Laboratory of Transfusion Immunology and Pathology Department, National Research Center for Hematology Moscow, Russian Federation

БулычеваТ. И.BulychevaT. I.

д.м.н., профессор, научный консультант, научно-клиническая лаборатория трансфузиологической иммунологии ФГБУ «Гематологический научный центр» Минздрава России 125167, Россия, Москва, Новый Зыковский проезд, 4. Тел.: 8 (495) 613-26-56

PhD, MD, Professor, Research Consultant, Clinical Laboratory of Transfusion Immunology and Pathology Department, National Research Center for Hematology 125167, Russian Federation, Moscow, Novozykovsky pass., 4. Phone: 7 (495) 613-26-56

tb@blood.ruКовригинаА. М.KovriginaA. M.

д.б.н., профессор, заведующая патологоанатомическим отделением ФГБУ «Гематологический научный центр» Минздрава России, Москва, Россия

PhD, MD (Biology), Professor, Head, Pathology Department, National Research Center for Hematology Moscow, Russian Federation

ГригорьевА. А.GrigoriyvA. A.

к.б.н., научный сотрудник, научно-клиническая лаборатория трансфузиологической иммунологии ФГБУ «Гематологический научный центр» Минздрава России, Москва, Россия

PhD (Biology), Research Associate, Clinical Laboratory of Transfusion Immunology and Pathology Department, National Research Center for Hematology Moscow, Russian Federation

ФГБУ «Гематологический научный центр» Минздрава России, Москва, РоссияРоссияNational Research Center for Hematology, Moscow, Russian FederationRussian Federation201423112014165437442Copyright © Дейнеко Н.Л., Булычева Т.И., Ковригина А.М., Григорьев А.А., 20142014Дейнеко Н.Л., Булычева Т.И., Ковригина А.М., Григорьев А.А.Deineko N.L., Bulycheva T.I., Kovrigina A.M., Grigoriyv A.A.Данная работа распространяется под лицензией Creative Commons Attribution 4.0.This work is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 License.https://www.mimmun.ru/mimmun/article/view/730

Методом иммуноцитохимического окрашивания в реакции непрямой иммунофлюоресценции было проведено исследование полученных методами гибридомной биотехнологии моноклональных антител А3 на клетках больных различными лимфопролиферативными заболеваниями (ЛПЗ) и больных заболеваниями неопухолевой природы в сравнении с интактными лимфоцитами здоровых лиц. Определено, что при ЛПЗ с низким уровнем пролиферативной активности клеток, определяемой по содержанию Ki-67-позитивных клеток, и заболеваниях системы крови неопухолевой природы антиген А3 локализуется в ядрышках и выявляется в виде одного фокуса свечения. При злокачественных ЛПЗ, характеризующихся резким повышением пролиферативной активности клеток, происходит нарастание количества фокусов свечения до 5 и более, с образованием из фокусов ожерелоподобных структур, находящихся в пределах ядрышка. Полученные нами данные свидетельствуют о диагностической значимости МКА А3 в оценке пролиферативного состояния клеток у больных с различными лимфопролиферативными заболеваниями. Установлено, что, в отличие от Кi-67, стадия пролиферации может быть определена в каждой клетке по количеству фокусов свечения в ядрышках клеток. Эта отличительная способность А3 антигена свидетельствует о его диагностической значимости в оценке злокачественности ЛПЗ.

We have conducted a study of a novel monoclonal A3 antibody raised by means of hybridoma biotechnology. The study was performed with malignant cells of the patients with various lymphoproliferative disorders, and persons with nonmalignant diseases, as compared with intact lymphocytes from healthy people,using a method of immunocytochemical staining and indirect immunofluorescence technique. It was found that in cases of lymphoproliferative diseases with low proliferation rates, as based on the numbers of Ki-67 positive cells, as well as in non-malignant blood diseases, the A3 antigen was localized in nucleoli, and it was visualized as focal fluorescence. In malignant lymphoproliferative diseases with high proliferation indexes, the number of brightly fluorescent foci is observed, with formation of necklace-like structures within the nucleolar structures. The obtained data point to a diagnostic significance of A3 Mab in assessment of cellular proliferative rates in patients with various lymphoproliferative diseases. It was established that, in contrast to Ki-67, the proliferation stage could be determined for each cell, according to the number of fuorescent foci in nucleoli. This specific property of the A3 antigen points to its significance for diagnostics and malignancy staging of lymphoproliferative disorders.

антиген А3лимфопролиферативные заболеванияядрышкииммуноцитохимияantigen A3lymphoproliferative diseasesnucleoliimmunocytochemistryReferencesБулычева Т.И., Дейнеко Н.Л., Артеменко Е.Г.,Самойлова Р.С. Диагностическое значение ядрышкового белка В23 – нуклеофозмина при хронических лимфопролиферативных заболеваниях // «Terra Medica», Лабораторная диагностика. 2006. № 2 (10). C. 6-9. [Bulycheva T.I., Deyneko N.L., Artemenko E.G., Samoylova R.S. Diagnosticheskoe znachenie yadryshkovogo belka V23 – nukleofozmina pri khronicheskikh limfoproliferativnykh zabolevaniyakh [Diagnostic significance of the nucleolar protein B23 – nucleophosmin during chronic lymphoproliferative diseases]. Terra Medica. Laboratornaya diagnostika = Terra Medica. Laboratory Diagnostic, 2006, Vol. 2, no. 10, pp. 6-9].Булычева Т.И., Дейнеко Н.Л., Артеменко Е.Г.,Самойлова Р.С. Диагностическое значение ядрышкового белка В23 – нуклеофозмина при хронических лимфопролиферативных заболеваниях // «Terra Medica», Лабораторная диагностика. 2006. № 2 (10). C. 6-9. [Bulycheva T.I., Deyneko N.L., Artemenko E.G., Samoylova R.S. Diagnosticheskoe znachenie yadryshkovogo belka V23 – nukleofozmina pri khronicheskikh limfoproliferativnykh zabolevaniyakh [Diagnostic significance of the nucleolar protein B23 – nucleophosmin during chronic lymphoproliferative diseases]. Terra Medica. Laboratornaya diagnostika = Terra Medica. Laboratory Diagnostic, 2006, Vol. 2, no. 10, pp. 6-9].Булычева Т.И., Дейнеко Н.Л., Вольпина О.М.,Владимирова Н.М. Иммуноцитохимическая визуализация мономерных и олигомерных форм ядрышкового белка В23/ нуклеофозмина в лимфоцитах человека в процессе пролиферации // Иммунология. 2011. № 5. C. 231-236. [Bulycheva T.I., Deyneko N.L., Vol`pina O.M.,Vladimirova N.M. Immunotsitokhimicheskaya vizualizatsiya onomernykh i oligomernykh form yadryshkovogo belka V23/ nukleofozmina v limfotsitakh cheloveka v protsesse proliferatsii [Immunocytochemical visualization of monomeric and oligomeric forms of the nucleolar protein B23/nucleophosmin in human lymphocytes in the process of proliferation]. Immunologiya = Immunology, 2011, no. 5, pp. 231-236].Булычева Т.И., Дейнеко Н.Л., Вольпина О.М.,Владимирова Н.М. Иммуноцитохимическая визуализация мономерных и олигомерных форм ядрышкового белка В23/ нуклеофозмина в лимфоцитах человека в процессе пролиферации // Иммунология. 2011. № 5. C. 231-236. [Bulycheva T.I., Deyneko N.L., Vol`pina O.M.,Vladimirova N.M. Immunotsitokhimicheskaya vizualizatsiya onomernykh i oligomernykh form yadryshkovogo belka V23/ nukleofozmina v limfotsitakh cheloveka v protsesse proliferatsii [Immunocytochemical visualization of monomeric and oligomeric forms of the nucleolar protein B23/nucleophosmin in human lymphocytes in the process of proliferation]. Immunologiya = Immunology, 2011, no. 5, pp. 231-236].Булычева Т.И., Григорьев А.А., Зацепина О.В. Иммуноцитохимическое изучение природы ядрышкового белка, выявляемого новыми МКА А3 // Иммунология. 2009. № 5. C. 287-289. [Bulycheva T.I.,Grigor`ev A.A., Zatsepina O.V. Immunotsitokhimicheskoe izuchenie prirody yadryshkovogo belka, vyyavlyaemogo novymi MKA A3 [Immunocytochemical study of the nature of the nucleolar protein revealed with new monoclonal antibodies A3]. Immunologiya = Immunology, 2009, Vol. 5, pp. 287-289].Булычева Т.И., Григорьев А.А., Зацепина О.В. Иммуноцитохимическое изучение природы ядрышкового белка, выявляемого новыми МКА А3 // Иммунология. 2009. № 5. C. 287-289. [Bulycheva T.I.,Grigor`ev A.A., Zatsepina O.V. Immunotsitokhimicheskoe izuchenie prirody yadryshkovogo belka, vyyavlyaemogo novymi MKA A3 [Immunocytochemical study of the nature of the nucleolar protein revealed with new monoclonal antibodies A3]. Immunologiya = Immunology, 2009, Vol. 5, pp. 287-289].Булычева Т.И., Дейнеко Н.Л., Артеменко Е.Г., Самойлова Р.С., Зацепина О.В. Способ прогнозирования прогрессирования хронического лимфолейкоза по количественному содержанию ядрышкового белка В23/нуклеофозмина в лизатах лимфоидных клеток // Патент на изобретение РФ № 2310201 от 10.11.2007. [Bulycheva T.I., Deyneko N.L., Artemenko E.G., Samoylova R.S., Zatsepina O.V. Sposob prognozirovaniya progressirovaniya khronicheskogo limfoleykoza po kolichestvennomu soderzhaniyu yadryshkovogo belka V23/nukleofozmina v lizatakh limfoidnykh kletok [A method for prognostication of progression of the chronic lympholeukosys according to the levels of the nucleolar protein B23/ nucleophosmin in the lysates of lymphoid cells]. Patent RF № 2310201. 10.11.2007].Булычева Т.И., Дейнеко Н.Л., Артеменко Е.Г., Самойлова Р.С., Зацепина О.В. Способ прогнозирования прогрессирования хронического лимфолейкоза по количественному содержанию ядрышкового белка В23/нуклеофозмина в лизатах лимфоидных клеток // Патент на изобретение РФ № 2310201 от 10.11.2007. [Bulycheva T.I., Deyneko N.L., Artemenko E.G., Samoylova R.S., Zatsepina O.V. Sposob prognozirovaniya progressirovaniya khronicheskogo limfoleykoza po kolichestvennomu soderzhaniyu yadryshkovogo belka V23/nukleofozmina v lizatakh limfoidnykh kletok [A method for prognostication of progression of the chronic lympholeukosys according to the levels of the nucleolar protein B23/ nucleophosmin in the lysates of lymphoid cells]. Patent RF № 2310201. 10.11.2007].Булычева Т.И, Калинина И.А, Григорьев А.А, Зацепина О.В. Штамм культивируемых клеток мышиной гибридомы А3, используемый для получения моноклональных антител к антигену ядрышек клеток человека // Патент на изобретение № 2296159 от 27.03.2007. [Bulycheva T.I, Kalinina I.A, Grigor`ev A.A, Zatsepina O.V. Shtamm kul`tiviruemykh kletok myshinoy gibridomy A3, ispol`zuemyy dlya polucheniya monoklonal`nykh antitel k antigenu yadryshek kletok cheloveka [A strain of cultured cells of murine hybridome A3 used for production of monoclonal antibodies against an antigen from the nucleoli of human cells]. Patent RF № 2296159, 27.03.2007].Булычева Т.И, Калинина И.А, Григорьев А.А, Зацепина О.В. Штамм культивируемых клеток мышиной гибридомы А3, используемый для получения моноклональных антител к антигену ядрышек клеток человека // Патент на изобретение № 2296159 от 27.03.2007. [Bulycheva T.I, Kalinina I.A, Grigor`ev A.A, Zatsepina O.V. Shtamm kul`tiviruemykh kletok myshinoy gibridomy A3, ispol`zuemyy dlya polucheniya monoklonal`nykh antitel k antigenu yadryshek kletok cheloveka [A strain of cultured cells of murine hybridome A3 used for production of monoclonal antibodies against an antigen from the nucleoli of human cells]. Patent RF № 2296159, 27.03.2007].Булычева Т.И., Григорьев А.А., Дейнеко Н.Л. Способ иммуноцитохимической оценки пролиферации лимфоцитов человека с помощью нового маркера - ядрышкового белка А3 // Патент на изобретение РФ № 2431670 от 20.10.2011. [Bulycheva T.I., Grigor`ev A.A., Deyneko N.L. Sposob immunotsitokhimicheskoy otsenki proliferatsii limfotsitov cheloveka s pomoshch`yu novogo markera - yadryshkovogo belka A3 [A method of immunocytochemical assessment of proliferation of human lymphocytes using a new marker – nucleolar protein A3]. Patent RF № 2431670, 20.10.2011].Булычева Т.И., Григорьев А.А., Дейнеко Н.Л. Способ иммуноцитохимической оценки пролиферации лимфоцитов человека с помощью нового маркера - ядрышкового белка А3 // Патент на изобретение РФ № 2431670 от 20.10.2011. [Bulycheva T.I., Grigor`ev A.A., Deyneko N.L. Sposob immunotsitokhimicheskoy otsenki proliferatsii limfotsitov cheloveka s pomoshch`yu novogo markera - yadryshkovogo belka A3 [A method of immunocytochemical assessment of proliferation of human lymphocytes using a new marker – nucleolar protein A3]. Patent RF № 2431670, 20.10.2011].Самойлова Р.С., Булычева Т.И. Иммунофенотипирование в диагностике хронических лимфоидных заболеваний // Клиническая лабораторная диагностика. 2003. № 11. C. 35-39. [Samoylova R.S., Bulycheva T.I. Immunofenotipirovanie v diagnostike khronicheskikh limfoidnykh zabolevaniy [Immunophenotyping in the diagnostic of chronic lymphoid diseases]. Klinicheskaya laboratornaya diagnostika = Clinical Laboratory Diagnostics, 2003, Vol. 11, pp. 35-39].Самойлова Р.С., Булычева Т.И. Иммунофенотипирование в диагностике хронических лимфоидных заболеваний // Клиническая лабораторная диагностика. 2003. № 11. C. 35-39. [Samoylova R.S., Bulycheva T.I. Immunofenotipirovanie v diagnostike khronicheskikh limfoidnykh zabolevaniy [Immunophenotyping in the diagnostic of chronic lymphoid diseases]. Klinicheskaya laboratornaya diagnostika = Clinical Laboratory Diagnostics, 2003, Vol. 11, pp. 35-39].Шалавин И.А., Бабиченко И.И., Осипов С.А., Самойлов В.М..Экспрессия промежуточных филаментов и регуляторов клеточного цикла в уротериальных опухолях мочевого пузыря // Вестник Российского университета дружбы народов. Серия: Медицина. 2008. № 3. C. 87-89. [Shalavin I.A., Babichenko I.I., Osipov S.A., Samoylov V.M. Ekspressiya promezhutochnykh filamentov i regulyatorov kletochnogo tsikla v uroterial`nykh opukholyakh mochevogo puzyrya [Expression of intermediate filaments and regulators of the cell cycle in tumors of the bladder]. Vestnik Rossiyskogo universiteta druzhby narodov. Seriya: Meditsina = Bulletin of the Russian Universtiy of International Friendship, Medicine Series, 2008, Vol. 3, pp. 87-89].Шалавин И.А., Бабиченко И.И., Осипов С.А., Самойлов В.М..Экспрессия промежуточных филаментов и регуляторов клеточного цикла в уротериальных опухолях мочевого пузыря // Вестник Российского университета дружбы народов. Серия: Медицина. 2008. № 3. C. 87-89. [Shalavin I.A., Babichenko I.I., Osipov S.A., Samoylov V.M. Ekspressiya promezhutochnykh filamentov i regulyatorov kletochnogo tsikla v uroterial`nykh opukholyakh mochevogo puzyrya [Expression of intermediate filaments and regulators of the cell cycle in tumors of the bladder]. Vestnik Rossiyskogo universiteta druzhby narodov. Seriya: Meditsina = Bulletin of the Russian Universtiy of International Friendship, Medicine Series, 2008, Vol. 3, pp. 87-89].Alon U., Barkai N., Notterman D.A., Gish K., Ybarra S., Mack D., Levine A.J. Broad patterns of gene expression revealed by clustering analysis of tumor and normal colon tissues probed by oligonucleotide arrays. Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 1999, Vol. 96, pp. 6745-6750.Alon U., Barkai N., Notterman D.A., Gish K., Ybarra S., Mack D., Levine A.J. Broad patterns of gene expression revealed by clustering analysis of tumor and normal colon tissues probed by oligonucleotide arrays. Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 1999, Vol. 96, pp. 6745-6750.Beresford M.J., Wilson G.D., Makris A. Measuring proliferation in breast cancer: practicalities and applications. Breast Cancer Res., 2006, Vol. 8, no. 6, p. 216.Beresford M.J., Wilson G.D., Makris A. Measuring proliferation in breast cancer: practicalities and applications. Breast Cancer Res., 2006, Vol. 8, no. 6, p. 216.Broyde A., Boycov O., Strenov Y., Okon E., Shpilberg O., Bairey O. Role and prognostic significance of the Ki-67 index in non-Hodgkin’s lymphoma. Am. J. Hematol., 2009, Vol. 84, no. 6, pp. 338-343.Broyde A., Boycov O., Strenov Y., Okon E., Shpilberg O., Bairey O. Role and prognostic significance of the Ki-67 index in non-Hodgkin’s lymphoma. Am. J. Hematol., 2009, Vol. 84, no. 6, pp. 338-343.Derenzini M., Trer D., Pession A., Govoni M., Sirri V., Chieco P. Nucleolar size indicates the rapidity of cell proliferation in cancer tissues. J. Pathol., 2000, Vol. 191, no. 2, pp. 181-186.Derenzini M., Trer D., Pession A., Govoni M., Sirri V., Chieco P. Nucleolar size indicates the rapidity of cell proliferation in cancer tissues. J. Pathol., 2000, Vol. 191, no. 2, pp. 181-186.Hork M., Kotala V., Anton M., Wesierska-Gadek J. Nucleolus and apoptosis. Ann. N Y Acad. Sci, 2002, Vol. 973, pp. 258-264.Hork M., Kotala V., Anton M., Wesierska-Gadek J. Nucleolus and apoptosis. Ann. N Y Acad. Sci, 2002, Vol. 973, pp. 258-264.Leonard B., Maggi Jr., Jason D. Weber. Nucleolar Adaptation in Human Cancer. Cancer Invest. 2005, Vol. 23, no. 7, pp. 599-608.Leonard B., Maggi Jr., Jason D. Weber. Nucleolar Adaptation in Human Cancer. Cancer Invest. 2005, Vol. 23, no. 7, pp. 599-608.Roussel P., Hernandez-Verdun D. Identification of Ag-NOR proteins, markers of proliferation related to ribosomal gene activity. Exp. Cell. Res., 1994, Vol. 214, no. 2, pp. 465-472.Roussel P., Hernandez-Verdun D. Identification of Ag-NOR proteins, markers of proliferation related to ribosomal gene activity. Exp. Cell. Res., 1994, Vol. 214, no. 2, pp. 465-472.Ruggero D., Pandolfi P.P. Does the ribosome translate cancer? Nat. Rev. Cancer, 2003, Vol. 3, no. 3, pp. 179- 192.Ruggero D., Pandolfi P.P. Does the ribosome translate cancer? Nat. Rev. Cancer, 2003, Vol. 3, no. 3, pp. 179- 192.Stuart-Harris R., Caldas C., Pinder S.E., Pharoah P. Proliferation markers and survival in early breast cancer: a systematic review and meta-analysis of 85 studies in 32,825 patients. Breast, 2008, Vol. 17, no. 4, pp. 323-334.Stuart-Harris R., Caldas C., Pinder S.E., Pharoah P. Proliferation markers and survival in early breast cancer: a systematic review and meta-analysis of 85 studies in 32,825 patients. Breast, 2008, Vol. 17, no. 4, pp. 323-334.Uechi T., Tanaka T., Kenmochi N. A complete map of the human ribosomal protein genes: assignment of 80 genes to the cytogenetic map and implications for human disorders. Genomics, 2001, Vol. 72, pp. 223-230.Uechi T., Tanaka T., Kenmochi N. A complete map of the human ribosomal protein genes: assignment of 80 genes to the cytogenetic map and implications for human disorders. Genomics, 2001, Vol. 72, pp. 223-230.Urruticoechea A., Smith I. E., Dowsett M. Proliferation marker Ki-67 in early breast cancer. J. Clin. Oncol., 2005, Vol. 23, no. 28, pp. 7212-7220.Urruticoechea A., Smith I. E., Dowsett M. Proliferation marker Ki-67 in early breast cancer. J. Clin. Oncol., 2005, Vol. 23, no. 28, pp. 7212-7220.

The authors declare that there are no conflicts of interest present.