mimmunМедицинская иммунологияMedical Immunology (Russia)1563-06252313-741XSPb RAACI10.15789/1563-0625-2013-6-563-570mimmun-671Research ArticleОРИГИНАЛЬНЫЕ СТАТЬИORIGINAL ARTICLESЗНАЧИМОСТЬ ОДНОНУКЛЕОТИДНЫХ ПОЛИМОРФИЗМОВ -2578C>A и +936C>T ГЕНА VEGF ДЛЯ ОЦЕНКИ ЭФФЕКТИВНОСТИ ПРОТИВООПУХОЛЕВОЙ ИММУНОТЕРАПИИ МЕТАСТАТИЧЕСКОЙ МЕЛАНОМЫ КОЖИSIGNIFICANCE OF SINGLE-NUCLEOTIDE POLYMORPHISMS 2578C>A AND +936C>T IN THE VEGF GENE FOR EFFICIENCY EVALUAT ION OF ANTICANCER IMMUNOTHERAPY IN PAT IENTS WITH METASTAT IC SKIN MELANOMAХоченковаЮ. А.KhochenkovaYu. A.

младший научный сотрудник лаборатории биомаркеров и механизмов опухолевого ангиогенеза

115478, Россия, Москва, Каширское шоссе, 24. Тел.: 8 (499) 612-86-70

Junior Research Associate, Laboratory of Biomarkers and Mechanisms of Tumor Angiogenesis

115478, Kashirskoe rd., 24. Phone: 7 (499) 612-86-70

julia_vet@bk.ruЧкадуаГ. З.ChkaduaG. Z.

к.м.н., старший научный сотрудник, лаборатория экспериментальной диагностики и биотерапии опухолей

PhD (Medicine), Senior Research Associate, Laboratory of Experimental Diagnostics and Biotherapy of Tumors

julia_vet@bk.ruСамойленкоИ. В.SamoylenkoI. V.

к.м.н., научный сотрудник, отделение биотерапии опухолей

PhD (Medicine), Research Associate, Department of Cancer Biotherapy

julia_vet@bk.ruМаливановаТ. Ф.MalivanovaT. F.

к.м.н., старший научный сотрудник, лаборатория онкогеномики

PhD (Medicine), Senior Research Associate, Laboratory of Oncogenomics Federal State Budgetary Institution

julia_vet@bk.ruМихайловаИ. Н.MikhailovaI. N.

д.м.н., ведущий научный сотрудник, отделение биотерапии опухолей

PhD, MD (Medicine), Leading Research Associate, Department of Cancer Biotherapy

julia_vet@bk.ruДемидовЛ. В.DemidovL. V.

д.м.н., профессор, заведующий отделением биотерапии опухолей

PhD, MD (Medicine), Professor, Chief, Department of Cancer Biotherapy

julia_vet@bk.ruСтепановаЕ. В.StepanovaE. V.

д.м.н., заведующая лабораторией биомаркеров и механизмов опухолевого ангиогенеза

PhD, MD (Medicine), Chief, of Laboratory of Biomarkers and Mechanisms of Tumor Angiogenesis

julia_vet@bk.ruФГБУ «Российский онкологический научный центр им. Н.Н. Блохина» РАМН, МоскваРоссияN.N. Blokhin Russian Cancer Research Center, Russian Academy of Medical Sciences, MoscowRussian Federation201326072014156563570Copyright © Хоченкова Ю.А., Чкадуа Г.З., Самойленко И.В., Маливанова Т.Ф., Михайлова И.Н., Демидов Л.В., Степанова Е.В., 20142014Хоченкова Ю.А., Чкадуа Г.З., Самойленко И.В., Маливанова Т.Ф., Михайлова И.Н., Демидов Л.В., Степанова Е.В.Khochenkova Y.A., Chkadua G.Z., Samoylenko I.V., Malivanova T.F., Mikhailova I.N., Demidov L.V., Stepanova E.V.Данная работа распространяется под лицензией Creative Commons Attribution 4.0.This work is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 License.https://www.mimmun.ru/mimmun/article/view/671

Резюме. Повышение уровня VEGF у онкологических больных может сопровождаться снижением числа дендритных клеток (ДК) и их функциональной активности. Проведено пилотное исследование взаимосвязи между частотой встречаемости аллельных вариантов гена VEGF в позициях -2578C>A (rs699947) и +936C>T (rs3025039) и эффективностью иммунотерапии аутологичными ДК больных метастатической меланомой. Установлено, что под действием индукторов дифференцировки по мере созревания ДК экспрессия VEGFR-1 снижалась (от 18,9±0,7% на моноцитах периферической крови до 6,3±0,6% на зрелых ДК), а VEGFR-2 значимо не менялась (13,1±0,4% и 15,9±0,4% соответственно). Частота встречаемости генотипа АА участка -2578C>A (rs699947) гена VEGF составила 46,1%, АС – 38,5% и СС – 15,4%. Наличие генотипов АА и АС гена VEGF -2578C>A прямо коррелирует с продолжительностью времени до прогрессирования и эффективностью проводимого лечения. Медиана времени до прогрессирования составила 8,4 мес. у больных с АА и АС генотипом и 2,7 мес. у носителей СС генотипа (р = 0,002). Выявленные особенности могут быть использованы для оценки риска прогрессирования заболевания у больных метастатической меланомой, а также для оптимизации и персонализации проводимого лечения, в том числе и с использованием антиангиогенной терапии.

Abstract. Increased VEGF levels in cancer patients may be associated with decreased number of dendritic cells (DCs) and lower DC function. We investigated whether VEGF gene polymorphisms -2578C>A (rs699947) and +936C>T (rs3025039) are associated with efficacy of autologous DC-based immunotherapy in patients with malignant melanoma. Evaluation of VEGFR-1 and VEGFR-2 expression on mature monocyte-derived DC revealed a decreased VEGFR-1 level (18.9±0.7% on peripheral blood monocytes, as compared to 6.3±0.6% on mature DCs) and non-changed VEGFR-2 expression (13.1±0.4% and 15.9±0.4%, respectively). The АА genotype frequency of -2578C>A (rs699947) polymorphism of VEGF gene was 46.1%. АС heterozygous state was found in 38.5%, and СС, in 15.4% of cases. The VEGF -2578 AC and AA genotypes were directly associated with progression-free survival and efficacy of treatment. The median progression-free survival of patients with -2578 AA and AC genotypes was a significantly longer (8.4 months), as compared with that of patients with CC genotypes (2.7 months), p = 0.002. The established relationship between genotype and efficacy of immunotherapy can be used to develop modern methods for predicting melanoma progression and to personalize immunotherapy including a combination with antiangiogenic therapy.

VEGFSNPsдендритные клеткипротивоопухолевая иммунотерапияметастатическая меланомаVEGFSNPsdendritic cellsanticancer immunotherapymetastatic melanomaReferencesБалдуева И.А., Новик А.В., Моисеенко В.М., Нехаева Т.Л., Данилова А.Б., Данилов А.О., Проценко С.А., Петрова Т.Ю., Улейская Г.И., Щекина Л.А., Семенова А.И., Михайличенко Т.Д., Телетаева Г.М., Жабина А.С., Волков Н.В., Комаров Ю.И. Клиническое исследование (II фаза) вакцины на основе аутологичных дендритных клеток с иммунологическим адъювантом у больных с меланомой кожи // Вопросы онкологии. – 2012. – Т. 58. – С. 212-221. Baldueva I.A., Novik A.V., Moiseenko V.M., Nekhaeva T.L., Danilova A.B., Danilov A.O., Protsenko S.A., Petrova T.Yu., Uleyskaya G.I., Shchekina L.A., Semenova A.I., Mikhaylichenko T.D., Teletaeva G.M., Zhabina A.S., Volkov N.V., Komarov Yu.I. Klinicheskoe issledovanie (II faza) vaktsiny na osnove autologichnykh dendritnykh kletok s immunologicheskim ad»yuvantom u bol`nykh s melanomoy kozhi [The results of second-phase clinical trial of autologous dendritic cells vaccine with immunologic adjuvant in cutaneous melanoma patients]. Voprosy onkologii – Questions of Oncology, 2012, vol. 58, pp. 212-221.Балдуева И.А., Новик А.В., Моисеенко В.М., Нехаева Т.Л., Данилова А.Б., Данилов А.О., Проценко С.А., Петрова Т.Ю., Улейская Г.И., Щекина Л.А., Семенова А.И., Михайличенко Т.Д., Телетаева Г.М., Жабина А.С., Волков Н.В., Комаров Ю.И. Клиническое исследование (II фаза) вакцины на основе аутологичных дендритных клеток с иммунологическим адъювантом у больных с меланомой кожи // Вопросы онкологии. – 2012. – Т. 58. – С. 212-221. Baldueva I.A., Novik A.V., Moiseenko V.M., Nekhaeva T.L., Danilova A.B., Danilov A.O., Protsenko S.A., Petrova T.Yu., Uleyskaya G.I., Shchekina L.A., Semenova A.I., Mikhaylichenko T.D., Teletaeva G.M., Zhabina A.S., Volkov N.V., Komarov Yu.I. Klinicheskoe issledovanie (II faza) vaktsiny na osnove autologichnykh dendritnykh kletok s immunologicheskim ad»yuvantom u bol`nykh s melanomoy kozhi [The results of second-phase clinical trial of autologous dendritic cells vaccine with immunologic adjuvant in cutaneous melanoma patients]. Voprosy onkologii – Questions of Oncology, 2012, vol. 58, pp. 212-221.Демидов Л.B., Харкевич Г.Ю. Меланома кожи: стадирование, диагностика и лечение // Русский медицинский журнал. – 2003. – №. 1. – С. 112–117. Demidov L.B., Harkevich G.Yu. Melanoma kozhi: stadirovanie, diagnostika i lechenie [Skin Melanoma: staging, diagnostics and treatment]. Russkiy meditsinskiy zhurnal – Russian Medical Journal, 2003, no. 11, pp. 112-117.Демидов Л.B., Харкевич Г.Ю. Меланома кожи: стадирование, диагностика и лечение // Русский медицинский журнал. – 2003. – №. 1. – С. 112–117. Demidov L.B., Harkevich G.Yu. Melanoma kozhi: stadirovanie, diagnostika i lechenie [Skin Melanoma: staging, diagnostics and treatment]. Russkiy meditsinskiy zhurnal – Russian Medical Journal, 2003, no. 11, pp. 112-117.Михайлова И.Н., Петенко Н.Н., Чкадуа Г.З., Вишнякова Л.Ю. Вакцинотерапия метастатической меланомы с использованием дендритных клеток: клиническое исследование I/II фазы // Российский биотерапевтический журнал. – 2007. – № 6. – С. 39-44. Mikhailova I.N., Petenko N.N., Chkadua G.Z., Vishnyakova L.Yu. Vaktsinoterapiya metastaticheskoy melanomy s ispol`zovaniem dendritnykh kletok: klinicheskoe issledovanie I/II fazy [Dendritic cell vaccine therapy of advanced melanoma: I/II phase clinical trial]. Rossiyskiy bioterapevticheskiy zhurnal – Russian Journal of Biotherapy, 2007, no. 6, pp. 39-44.Михайлова И.Н., Петенко Н.Н., Чкадуа Г.З., Вишнякова Л.Ю. Вакцинотерапия метастатической меланомы с использованием дендритных клеток: клиническое исследование I/II фазы // Российский биотерапевтический журнал. – 2007. – № 6. – С. 39-44. Mikhailova I.N., Petenko N.N., Chkadua G.Z., Vishnyakova L.Yu. Vaktsinoterapiya metastaticheskoy melanomy s ispol`zovaniem dendritnykh kletok: klinicheskoe issledovanie I/II fazy [Dendritic cell vaccine therapy of advanced melanoma: I/II phase clinical trial]. Rossiyskiy bioterapevticheskiy zhurnal – Russian Journal of Biotherapy, 2007, no. 6, pp. 39-44.Чкадуа Г.З., Заботина Т.Н., Буркова А.А., Тамаева З.Э., Огородникова Е.В., Жорданиа К.И., Кадагидзе З.Г., Барышников А.Ю. Адаптирование методики культивирования дендритных клеток человека из моноцитов периферической крови для клинического применения // Российский биотерапевтический журнал. – 2002. – № 3. – С. 56-62. Chkadua G.Z., Zabotina T.N., Burkova A.A., Tamaeva Z.E., Ogorodnikova E.V., Zhordania K.I., Kadagidze Z.G., Baryshnikov A.Yu. Adaptirovanie metodiki kul`tivirovaniya dendritnykh kletok cheloveka iz monotsitov perifericheskoy krovi dlya klinicheskogo primeneniya [The adaptation of method of generating monocyte derived human dendritic cells for clinical practice]. Rossiyskiy bioterapevticheskiy zhurnal – Russian Journal of Biotherapy, 2002, no. 3, pp. 56-62.Чкадуа Г.З., Заботина Т.Н., Буркова А.А., Тамаева З.Э., Огородникова Е.В., Жорданиа К.И., Кадагидзе З.Г., Барышников А.Ю. Адаптирование методики культивирования дендритных клеток человека из моноцитов периферической крови для клинического применения // Российский биотерапевтический журнал. – 2002. – № 3. – С. 56-62. Chkadua G.Z., Zabotina T.N., Burkova A.A., Tamaeva Z.E., Ogorodnikova E.V., Zhordania K.I., Kadagidze Z.G., Baryshnikov A.Yu. Adaptirovanie metodiki kul`tivirovaniya dendritnykh kletok cheloveka iz monotsitov perifericheskoy krovi dlya klinicheskogo primeneniya [The adaptation of method of generating monocyte derived human dendritic cells for clinical practice]. Rossiyskiy bioterapevticheskiy zhurnal – Russian Journal of Biotherapy, 2002, no. 3, pp. 56-62.Alfaro C., Suarez N., Gonzalez A., Solano S., Erro L., Dubrot J., Palazon A., Hervas-Stubbs S., Gurpide A., Lopez-Picazo J.M., Grande-Pulido E., Melero I., Perez-Gracia J.L. Influence of bevacizumab, sunitinib and sorafenib as single agents or in combination on the inhibitory effects of VEGF on human dendritic cell differentiation from monocytes. Br. J. Cancer, 2009, vol. 100, pp. 1111-1119.Alfaro C., Suarez N., Gonzalez A., Solano S., Erro L., Dubrot J., Palazon A., Hervas-Stubbs S., Gurpide A., Lopez-Picazo J.M., Grande-Pulido E., Melero I., Perez-Gracia J.L. Influence of bevacizumab, sunitinib and sorafenib as single agents or in combination on the inhibitory effects of VEGF on human dendritic cell differentiation from monocytes. Br. J. Cancer, 2009, vol. 100, pp. 1111-1119.Awata T., Kurihara S., Takata N., Neda T., Iizuka H., Ohkubo T., Osaki M., Watanabe M., Nakashima Y., Inukai K., Inoue I., Kawasaki I., Mori K., Yoneya S., Katayama S. Functional VEGF C-634G polymorphism is associated with development of diabetic macular edema and correlated with macular retinal thickness in type 2 diabetes. Biochem. Biophys. Res. Commun., 2005, vol. 333, pp. 679-685.Awata T., Kurihara S., Takata N., Neda T., Iizuka H., Ohkubo T., Osaki M., Watanabe M., Nakashima Y., Inukai K., Inoue I., Kawasaki I., Mori K., Yoneya S., Katayama S. Functional VEGF C-634G polymorphism is associated with development of diabetic macular edema and correlated with macular retinal thickness in type 2 diabetes. Biochem. Biophys. Res. Commun., 2005, vol. 333, pp. 679-685.Dikov M.M., Ohm J.E., Ray N., Tchekneva E.E., Burlison J., Moghanaki D., Nadaf S., Carbone D.P. Differential roles of vascular endothelial growth factor receptors 1 and 2 in dendritic cell differentiation. J. Immunol., 2005, vol. 174, pp. 215-222.Dikov M.M., Ohm J.E., Ray N., Tchekneva E.E., Burlison J., Moghanaki D., Nadaf S., Carbone D.P. Differential roles of vascular endothelial growth factor receptors 1 and 2 in dendritic cell differentiation. J. Immunol., 2005, vol. 174, pp. 215-222.Eubank T.D., Roberts R., Galloway M., Wang Y., Cohn D.E., Marsh C.B. GM-CSF induces expression of soluble VEGF receptor-1 from human monocytes and inhibits angiogenesis in mice. Immunity, 2004, vol. 21, pp. 831-842.Eubank T.D., Roberts R., Galloway M., Wang Y., Cohn D.E., Marsh C.B. GM-CSF induces expression of soluble VEGF receptor-1 from human monocytes and inhibits angiogenesis in mice. Immunity, 2004, vol. 21, pp. 831-842.Ferrara N. VEGF and the quest for tumour angiogenesis factors. Nat. Rev. Cancer, 2002, vol. 2, pp. 795-803.Ferrara N. VEGF and the quest for tumour angiogenesis factors. Nat. Rev. Cancer, 2002, vol. 2, pp. 795-803.Hamai A., Benlalam H., Meslin F., Hasmim M., Carré T., Akalay I, Janji B., Berchem G., Noman M.Z., Chouaib S. Immune surveillance of human cancer: if the cytotoxic T-lymphocytes play the music, does the tumoral system call the tune? Tissue Antigens, 2010, vol. 75, pp. 1-8.Hamai A., Benlalam H., Meslin F., Hasmim M., Carré T., Akalay I, Janji B., Berchem G., Noman M.Z., Chouaib S. Immune surveillance of human cancer: if the cytotoxic T-lymphocytes play the music, does the tumoral system call the tune? Tissue Antigens, 2010, vol. 75, pp. 1-8.Han S.W., Kim G.W., Seo J.S., Kim S.J., Sa K.H., Park J.Y., Lee J., Kim S.Y., Goronzy J.J., Weyand C.M., Kang Y.M. VEGF gene polymorphisms and susceptibility to rheumatoid arthritis. Rheumatology, 2004, vol. 43, pp. 1173-1177.Han S.W., Kim G.W., Seo J.S., Kim S.J., Sa K.H., Park J.Y., Lee J., Kim S.Y., Goronzy J.J., Weyand C.M., Kang Y.M. VEGF gene polymorphisms and susceptibility to rheumatoid arthritis. Rheumatology, 2004, vol. 43, pp. 1173-1177.Hayashi T., Hideshima T., Akiyama M., Raje N., Richardson P., Chauhan D., Anderson K.C. Ex vivo induction of multiple myeloma-specific cytotoxic T lymphocytes. Blood, 2003, vol. 102, pp. 1435-1442.Hayashi T., Hideshima T., Akiyama M., Raje N., Richardson P., Chauhan D., Anderson K.C. Ex vivo induction of multiple myeloma-specific cytotoxic T lymphocytes. Blood, 2003, vol. 102, pp. 1435-1442.Mimura K., Kono K., Takahashi A., Kawaguchi Y., Fujii H. Vascular endothelial growth factor inhibits the function of human mature dendritic cells mediated by VEGF receptor-2. Cancer Immunol Immunother., 2007, vol. 56, pp. 761-770.Mimura K., Kono K., Takahashi A., Kawaguchi Y., Fujii H. Vascular endothelial growth factor inhibits the function of human mature dendritic cells mediated by VEGF receptor-2. Cancer Immunol Immunother., 2007, vol. 56, pp. 761-770.Nasr H.B., Chahed K., Bouaouina N., Chouchane L. Functional vascular endothelial growth factor −2578 C/A polymorphism in relation to nasopharyngeal carcinoma risk and tumor progression. Clinica Chimica Acta, 2008, vol. 395, pp. 124-129.Nasr H.B., Chahed K., Bouaouina N., Chouchane L. Functional vascular endothelial growth factor −2578 C/A polymorphism in relation to nasopharyngeal carcinoma risk and tumor progression. Clinica Chimica Acta, 2008, vol. 395, pp. 124-129.Renner W., Kotschan S., Hoffmann C., Obermayer-Pietsch B., Pilger E. A common 936 C/T mutation in the gene for vascular endothelial growth factor is associated with vascular endothelial growth factor plasma levels. J. Vasc. Res., 2000, vol. 37, no. 6, pp. 443-448.Renner W., Kotschan S., Hoffmann C., Obermayer-Pietsch B., Pilger E. A common 936 C/T mutation in the gene for vascular endothelial growth factor is associated with vascular endothelial growth factor plasma levels. J. Vasc. Res., 2000, vol. 37, no. 6, pp. 443-448.Salven P., Heikkilä P., Joensuu H. Enhanced expression of vascular endothelial growth factor in metastatic melanoma. Br. J. Cancer, 1997, vol. 76, pp. 930-934.Salven P., Heikkilä P., Joensuu H. Enhanced expression of vascular endothelial growth factor in metastatic melanoma. Br. J. Cancer, 1997, vol. 76, pp. 930-934.Steffensen K.D., Waldstrom M., Brandslund I., Jakobsen A. The relationship of VEGF polymorphisms with serum VEGF levels and progression-free survival in patients with epithelial ovarian cancer. Gynecologic Oncology, 2010, vol. 117, pp. 109-116.Steffensen K.D., Waldstrom M., Brandslund I., Jakobsen A. The relationship of VEGF polymorphisms with serum VEGF levels and progression-free survival in patients with epithelial ovarian cancer. Gynecologic Oncology, 2010, vol. 117, pp. 109-116.Steinman RM. Dendritic cells in vivo: a key target for a new vaccine science. Immunity, 2008. vol. 29, pp. 319-324.Steinman RM. Dendritic cells in vivo: a key target for a new vaccine science. Immunity, 2008. vol. 29, pp. 319-324.Yang Z.F., Poon R.T., Luo Y., Cheung C.K., Ho D.W., Lo C.M., Fan S.T. Up-regulation of vascular endothelial growth factor (VEGF) in small-for-size liver grafts enhances macrophage activities through VEGF receptor 2-dependent pathway. J. Immunol, 2004, vol. 173, pp. 2507-2515.Yang Z.F., Poon R.T., Luo Y., Cheung C.K., Ho D.W., Lo C.M., Fan S.T. Up-regulation of vascular endothelial growth factor (VEGF) in small-for-size liver grafts enhances macrophage activities through VEGF receptor 2-dependent pathway. J. Immunol, 2004, vol. 173, pp. 2507-2515.

The authors declare that there are no conflicts of interest present.