mimmunМедицинская иммунологияMedical Immunology (Russia)1563-06252313-741XSPb RAACI10.15789/1563-0625-CLI-3400mimmun-3400Research ArticleОРИГИНАЛЬНЫЕ СТАТЬИORIGINAL ARTICLESОсобенности цитокинового профиля у пациентов с разными генотипами гена MEFVCytokines Levels in Patients with Various MEFV Genotypeshttps://orcid.org/0000-0003-1905-3324ДевяткинаЕ. А.DeviatkinaE. A.

врач-лабораторный генетик, аспирант кафедры клинической лабораторной диагностики с курсом молекулярной медицины ФГБОУ ВО «Первый Санкт-Петербургский государственный медицинский университет им. И.П. Павлова» Минздрава России, Санкт-Петербург, Россия

laboratory geneticist, post-graduate student at the Department of Clinical Laboratory Diagnostics with Molecular Medicine Course, First Pavlov State Medical University of St. Petersburg, Russia

e.deviatkina@list.ruhttps://orcid.org/0000-0002-9354-8790НазаровВ. Д.NazarovV. D.

к.м.н, заведующий лабораторией молекулярной диагностики НМЦ молекулярной медицины МЗ РФ, доцент кафедры медицинской биологии и генетики, ФГБОУ ВО «Первый Санкт-Петербургский государственный медицинский университет им. И.П. Павлова» Минздрава России, Санкт-Петербург, Россия

PhD Med, head of the Laboratory of Molecular Diagnostics Center for Molecular Medicine, Associate Professor at the Department of Medical Biology and Genetics, First Pavlov State Medical University of St. Petersburg, Russia

nazarov19932@mail.ruhttps://orcid.org/0000-0002-4998-3699ЛапинС. В.LapinS. V.

к.м.н., заведующий лабораторией диагностики аутоиммунных заболеваний НМЦ молекулярной медицины МЗ РФ, ФГБОУ ВО «Первый Санкт-Петербургский государственный медицинский университет им. И.П. Павлова» Минздрава России, Санкт-Петербург, Россия

PhD Med, head of the Laboratory of Autoimmune Diseases Diagnostics Center for Molecular Medicine, First Pavlov State Medical University of St. Petersburg, Russia

svlapin@mail.ruhttps://orcid.org/0000-0001-9520-453XХолоповаИ. В.KholopovaI. V.

врач клинической лабораторной диагностики клинико-диагностической лаборатории молекулярной медицины МЗ РФ, ФГБОУ ВО «Первый Санкт-Петербургский государственный медицинский университет им. И.П. Павлова» Минздрава России, Санкт-Петербург, Россия

MD, Laboratory of Clinical Diagnostics, Center for Molecular Medicine, First Pavlov State Medical University of St. St. Petersburg, Russia

irinakholopova@yandex.ruhttps://orcid.org/0000-0003-0986-5150МусоноваА. К.MusonovaA. K.

врач клинической лабораторной диагностики клинико-диагностической лаборатории НМЦ молекулярной медицины МЗ РФ, ФГБОУ ВО «Первый Санкт-Петербургский государственный медицинский университет им. И.П. Павлова» Минздрава России, Санкт-Петербург, Россия

MD, The Laboratory of Clinical Diagnostics, Center for Molecular Medicine, First Pavlov State Medical University of St. St. Petersburg, Russia

amusonova@mail.ruhttps://orcid.org/0000-0001-5318-354XКузнецоваД. А.KuznetsovaD. A.

к.м.н., ведущий научный сотрудник лаборатории молекулярной диагностики НМЦ молекулярной медицины МЗ РФ, ФГБОУ ВО «Первый Санкт-Петербургский государственный медицинский университет им. И.П. Павлова» Минздрава России, Санкт-Петербург, Россия

PhD. Med, Leading Researcher of the Laboratory of Molecular Diagnostics Center for Molecular Medicine, First Pavlov State Medical University of St. St. Petersburg, Russia

lariwar@mail.ruБурбыгинаС. О.BburbyginaS. O.

студент 6 курса лечебного факультета ФГБОУ ВО «Первый Санкт-Петербургский государственный медицинский университет им. И.П. Павлова» Минздрава России, Санкт-Петербург, Россия

6th year student of the Faculty of General Medicine at First Pavlov State Medical University of St. Petersburg, Russia

sonia.burbygina@gmail.comhttps://orcid.org/0000-0002-3055-6507МазингА. В.MazingA. V.

к.м.н., ведущий научный сотрудник лаборатории молекулярной диагностики НМЦ молекулярной медицины МЗ РФ, ФГБОУ ВО «Первый Санкт-Петербургский государственный медицинский университет им. И.П.  Павлова» Минздрава России, Санкт-Петербург, Россия

PhD Med, Leading Researcher of the Laboratory of Molecular Diagnostics Center for Molecular Medicine, First Pavlov State Medical University of St. St. Petersburg, Russia

alex_mazing@mail.ruhttps://orcid.org/0000-0002-2079-0439ЭмануэльВ. Л.EmanuelV. L.

д.м.н., профессор, заведующий кафедрой клинической лабораторной диагностики с курсом молекулярной медицины ФГБОУ ВО «Первый Санкт-Петербургский государственный медицинский университет им. И.П. Павлова» Минздрава России

D.Sc Medicine, professor, head of the Department of Clinical Laboratory Diagnostics with Molecular Medicine Course, First Pavlov State Medical University of St. St. Petersburg, Russia

vladimirem1@gmail.comФГБОУ ВО «Первый Санкт-Петербургский государственный медицинский университет им. И.П. Павлова» Минздрава России, Санкт-Петербург, РоссияРоссияFirst Pavlov State Medical University of St. St. Petersburg, RussiaRussian Federation20191408202600Online First3400Copyright © Девяткина Е.А., Назаров В.Д., Лапин С.В., Холопова И.В., Мусонова А.К., Кузнецова Д.А., Бурбыгина С.О., Мазинг А.В., Эмануэль В.Л., 20192019Девяткина Е.А., Назаров В.Д., Лапин С.В., Холопова И.В., Мусонова А.К., Кузнецова Д.А., Бурбыгина С.О., Мазинг А.В., Эмануэль В.Л.Deviatkina E.A., Nazarov V.D., Lapin S.V., Kholopova I.V., Musonova A.K., Kuznetsova D.A., Bburbygina S.O., Mazing A.V., Emanuel V.L.Данная работа распространяется под лицензией Creative Commons Attribution 4.0.This work is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 License.https://www.mimmun.ru/mimmun/article/view/3400Введение

Введение. Семейная средиземноморская лихорадка (ССЛ) является аутовоспалительным заболеванием (АВЗ), ассоциированным с патогенными вариантами гена MEFV. ССЛ считается моногенным АВЗ с аутосомно-рецессивным механизмом наследования: заболевание развивается у пациентов с двумя патогенными вариантами в транс-положении, а лица с одним патогенным вариантом – носители. Однако в литературе встречаются описания клинических случаев ССЛ у гетерозиготных носителей. К тому же клиническая картина варьирует в зависимости от обнаруженных вариантов.

Цель

Цель. Исследовать особенности цитокинового профиля у пациентов с разными генотипами гена MEFV для оценки агрессивности выявленных генетических вариантов и генотипов.

Материалы и методы

Материалы и методы. В исследование были включены 275 пациентов, обратившихся для поиска патогенных вариантов в гене MEFV. Для всех обследованных было проведено секвенирование 2, 3, 5 и 10 экзонов гена MEFV методом секвенирования по Сэнгеру. Исследование уровня цитокинов (СРБ, IL-1, IL-6, IL-8 и IL-18) проводилось в образцах ЭДТА-плазмы, полученной из венозной крови центрифугированием и однократно замороженной при температуре -80°C. В качестве группы сравнения были выбраны образцы 24 условно здоровых доноров из биобанка лаборатории. Для определения уровня цитокинов использовались наборы производителя Вектор-БЕСТ, Россия. Статистическая обработка проведена с использованием программы GraphPadPrism 8 (GraphPadSoftwareInc., США).

Результаты

Результаты. По результатам генотипирования 275 образцов были разделены на подгруппы в зависимости от выявленного генотипа: нормальный генотип – WT (n=60); гомозиготы (n=28), компаунд-гетерозиготы (n=71), гетерозиготы (n=86), носители патогенных вариантов в сочетании с вариантами неясной клинической значимости (VUS) (n=15) – составили группу FMF; носители только VUS (n=15) были исключены из дальнейшего исследования.

При исследовании уровня цитокинов методом иммуноферментного анализа в 260 образцах ЭДТА-плазмы (группы FMF, n=200, и WT, n=60) и 24 образцах сыворотки здоровых доноров (HD, n=24) отмечалось повышение уровня СРБ, IL-1, IL-6, IL-18 в группе FMF в сравнении с группой HD (для всех цитокинов P<0,0001), а также отмечалось увеличение уровня IL-6 (P<0,05) и IL-18 (P<0,0001) в группе FMF в сравнении с группой WT, различий уровня IL-8 обнаружено не было. Выявлены более высокие значения уровня СРБ (P<0,01) и IL-18 (P<0,0001) в группе гомозигот с обнаруженными агрессивными вариантами в сравнении с гомозиготными неагрессивными вариантами, а также уровень IL-18 был выше в подгруппе агрессивных гетерозиготных вариантов в сравнении с неагрессивными (P<0,05).

Выводы

Выводы. Генотип и агрессивность обнаруженных вариантов оказывают влияние на активность воспалительного процесса у пациентов с ССЛ.

Introduction

Introduction. Familial Mediterranean fever (FMF) is a monogenic autosomal recessive autoinflammatory disease caused by MEFV gene pathogenic variants. Heterozygosity remains a clinically challenging issue: while two variants are classically required for disease manifestation, individuals with one pathogenic variant are only carriers. However, there are a lot of cases of FMF clinical picture in heterozygous carriers of MEFV variants.

Aim

Aim. To study the features of the cytokine profile in patients with detected MEFV variants, taking into account molecular-genetic features such as zygosity and aggressiveness of pathogenic variants.

Materials and Methods

Materials and Methods. The study included 275 patients referred for MEFV genetic testing. Genomic DNA and EDTA-plasma were obtained from all subjects. Sanger sequencing of exons 2, 3, 5, and 10 of the MEFV gene was performed. Plasma levels of CRP, IL‑1β, IL‑6, IL‑8, and IL‑18 were measured by ELISA. A control group comprised 24 healthy donors from the laboratory biobank. Statistical analysis was carried out using GraphPad Prism 8.

Result

Result. Based on genotyping results 275 samples were divided into groups: wild-type genotype – WT (n=60); FMF group includes homozygous (n=28), compound heterozygous (n=71), heterozygous (n=86), carriers of combination of pathogenic and variants of unknown significance (VUS) (n=15); for 15 samples of only VUS carriers’ cytokines’ levels were not measured. In the result of ELISA was shown an increase of CRP, IL-1, IL-6 and IL-18 levels in FMF compared to HD (P<0.0001), as well as an increase of IL-6 (P<0.05) and IL-18 (P<0.0001) was found in FMF compared to WT. There was shown no differences in IL-8 level between FMF, WT and HD groups. An increased levels of CRP (P<0.01) and IL-18 (P<0.0001) were shown in the subgroups with aggressive homozygous variants compared to low-aggressive ones, as well as an increased IL-18 level was obtained in aggressive heterozygous compared to low-aggressive ones (P<0.05). An increased level of IL-1β (P<0.05) was shown in the subgroup with two aggressive pathogenic variants compared to subgroup with one aggressive and one low-aggressive pathogenic variant.

Conclusion

Conclusion. The genotype and aggressiveness of detected variants influence the activity of the inflammatory process in patients with FMF.

аутовоспаительные заболеваниясемейная средиземноморская лихорадкагиперактивация инфламмасомыинфламмасомапатияпровоспалительные цитокиныIL-18.autoinflammatory diseasesfamilial Mediterranean feverinflammasome hyperactivationinflammasomapathyproinflammatory cytpkinesIL-18.ReferencesНасонов Е.Л., Елисеев М.С. Роль интерлейкина 1 в развитии заболеваний человека // Научно-практическая ревматология. - 2016. - №1. - С. 60-77.Nasonov E.L., Eliseev M.S. ROLE OF INTERLEUKIN 1 IN THE DEVELOPMENT OF HUMAN DISEASES. RheumatologyScienceandPractice. 2016;54(1):60-77. (InRuss.)Пирожков С.В., Литвицкий П.Ф. Инфламмасомные болезни // Иммунология. - 2018. - №39. - С. 158-165.Pirozhkov S.V., Litvitskiy P.F. Inflammasomal diseases. Immunologiya. 2018; 39(2-3): 158-165.Федоров Е.С., Салугина С.O. Семейная средиземноморская лихорадка (периодическая болезнь): история или реальная проблема // Современная ревматология. - 2018. - №12(3). - С. 61-69.Fedorov ES, Salugina SO. Familial Mediterranean fever (periodic disease): history or a real problem. SovremennayaRevmatologiya=ModernRheumatologyJournal. 2018;12(3):61-69. (InRuss.)Федоров Е.С., Салугина С.О. Семейная средиземноморская лихорадка (периодическая болезнь): течение заболевания у двух поколений одной крымско-татарской семьи // Педиатрия. - 2018. - №97(3). - С. 83-91.Fedorov ES, Salugina SO. Familial Mediterranean fever (periodic disease): history or a real problem. SovremennayaRevmatologiya=ModernRheumatologyJournal. 2018;12(3):61-69. (InRuss.)Федоров Е.С., Салугина С.О., Кузьмина Н.Н. Семейная средиземноморская лихорадка (периодическая болезнь): современный взгляд на проблему // Современная ревматология. - 2013. - №7(1). - С. 24-30.Fedorov ES, Salugina SO, Kuzmina NN. Familial Mediterranean fever (a periodic disease): The present-day view of the problem. SovremennayaRevmatologiya=ModernRheumatologyJournal. 2013;7(1):24-30. (InRuss.)Barbitoff Y.A., Khmelkova D.N., Pomerantseva E.A., Slepchenkov A.V., Zubashenko N.A., Mironova I.V., Kaimonov V.S., Polev D.E., Tsay V.V., Glotov A.S., Aseev M.V., Shcherbak S.G., Glotov O.S., Isaev A.A., Predeus A.V. Expanding the Russian allele frequency reference via cross-laboratory data integration: insights from 6,096 exome samples. NatlSciRev., 2024, 11(10), pp. nwae326.Barbitoff Y.A., Khmelkova D.N., Pomerantseva E.A., Slepchenkov A.V., Zubashenko N.A., Mironova I.V., Kaimonov V.S., Polev D.E., Tsay V.V., Glotov A.S., Aseev M.V., Shcherbak S.G., Glotov O.S., Isaev A.A., Predeus A.V. Expanding the Russian allele frequency reference via cross-laboratory data integration: insights from 6,096 exome samples. NatlSciRev., 2024, 11(10), pp. nwae326.Ben-Chetrit E., Touitou I. Familial Mediterranean fever in the World. ArthritisRheum., 2009, 61(10), pp. 1447-1453.Ben-Chetrit E., Touitou I. Familial Mediterranean fever in the World. ArthritisRheum., 2009, 61(10), pp. 1447-1453.Berdeli A., Mukctarova G., Oz A., Musayev S. MEFV gene mutation distrubution in Azerbaijan population. PediatricRheumatology, 2015, 13(Suppl 1), pp. 127.Berdeli A., Mukctarova G., Oz A., Musayev S. MEFV gene mutation distrubution in Azerbaijan population. PediatricRheumatology, 2015, 13(Suppl 1), pp. 127.Booth D.R., Gillmore J.D., Lachmann H.J., Booth S.E., Bybee A., Soytürk M., Akar S., Pepys M.B., Tunca M., Hawkins P.N. The genetic basis of autosomal dominant familial Mediterranean fever. QJM., 2000, 93(4), pp. 217-221.Booth D.R., Gillmore J.D., Lachmann H.J., Booth S.E., Bybee A., Soytürk M., Akar S., Pepys M.B., Tunca M., Hawkins P.N. The genetic basis of autosomal dominant familial Mediterranean fever. QJM., 2000, 93(4), pp. 217-221.Broderick L., Hoffman H.M. Pediatric recurrent fever and autoinflammation from the perspective of an allergist/immunologist. J AllergyClinImmunol., 2020, 146(5), pp. 960-966.Broderick L., Hoffman H.M. Pediatric recurrent fever and autoinflammation from the perspective of an allergist/immunologist. J AllergyClinImmunol., 2020, 146(5), pp. 960-966.Celep G., Durmaz Z.H., Erdogan Y., Akpinar S., Kaya S.A., Guckan R. The Spectrum of MEFV Gene Mutations and Genotypes in the Middle Northern Region of Turkey. Eurasian J Med., 2019, 51(3), pp. 252-256.Celep G., Durmaz Z.H., Erdogan Y., Akpinar S., Kaya S.A., Guckan R. The Spectrum of MEFV Gene Mutations and Genotypes in the Middle Northern Region of Turkey. Eurasian J Med., 2019, 51(3), pp. 252-256.Chae J.J., Aksentijevich I., Kastner D.L. Advances in the understanding of familial Mediterranean fever and possibilities for targeted therapy. Br J Haematol., 2009, 146(5), pp. 467-478.Chae J.J., Aksentijevich I., Kastner D.L. Advances in the understanding of familial Mediterranean fever and possibilities for targeted therapy. Br J Haematol., 2009, 146(5), pp. 467-478.Chae J.J., Wood G., Masters S.L., Richard K., Park G., Smith B.J., Kastner D.L. The B30.2 domain of pyrin, the familial Mediterranean fever protein, interacts directly with caspase-1 to modulate IL-1beta production. Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 2006, 103, pp. 9982–9987.Chae J.J., Wood G., Masters S.L., Richard K., Park G., Smith B.J., Kastner D.L. The B30.2 domain of pyrin, the familial Mediterranean fever protein, interacts directly with caspase-1 to modulate IL-1beta production. Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 2006, 103, pp. 9982–9987.Dinarello C.A. Blocking IL-1 in systemic inflammation. J ExpMed., 2005, 201(9), pp. 1355-1359.Dinarello C.A. Blocking IL-1 in systemic inflammation. J ExpMed., 2005, 201(9), pp. 1355-1359.Duşunsel R., Dursun I., Gündüz Z., Poyrazoğlu M.H., Gürgöze M.K., Dundar M. Genotype-phenotype correlation in children with familial Mediterranean fever in a Turkish population. PediatrInt., 2008, 50(2), pp. 208-212.Duşunsel R., Dursun I., Gündüz Z., Poyrazoğlu M.H., Gürgöze M.K., Dundar M. Genotype-phenotype correlation in children with familial Mediterranean fever in a Turkish population. PediatrInt., 2008, 50(2), pp. 208-212.El Roz A., Ghssein G., Khalaf B., Fardoun T., Ibrahim J.N. Spectrum of MEFV Variants and Genotypes among Clinically Diagnosed FMF Patients from Southern Lebanon. MedSci (Basel), 2020, 8(3), pp. 35.El Roz A., Ghssein G., Khalaf B., Fardoun T., Ibrahim J.N. Spectrum of MEFV Variants and Genotypes among Clinically Diagnosed FMF Patients from Southern Lebanon. MedSci (Basel), 2020, 8(3), pp. 35.Gershoni-Baruch R., Shinawi M., Leah K., Badarnah K., Brik R. Familial Mediterranean fever: prevalence, penetrance and genetic drift. Eur J HumGenet., 2001, 9(8), pp. 634.Gershoni-Baruch R., Shinawi M., Leah K., Badarnah K., Brik R. Familial Mediterranean fever: prevalence, penetrance and genetic drift. Eur J HumGenet., 2001, 9(8), pp. 634.Haznedaroglu S., Ozturk M.A., Sancak B., Goker B., Onat A.M., Bukan N., Ertenli I., Kiraz S., Calguneri M. Serum interleukin 17 and interleukin 18 levels in familial Mediterranean fever. ClinExpRheumatol., 2005, 23(4 Suppl 38), pp. 77–80.Haznedaroglu S., Ozturk M.A., Sancak B., Goker B., Onat A.M., Bukan N., Ertenli I., Kiraz S., Calguneri M. Serum interleukin 17 and interleukin 18 levels in familial Mediterranean fever. ClinExpRheumatol., 2005, 23(4 Suppl 38), pp. 77–80.Heilig R., Broz P. Function and mechanism of the pyrin inflammasome. EuropeanJournalofImmunology, 2017, 48(2), pp. 230–238.Heilig R., Broz P. Function and mechanism of the pyrin inflammasome. EuropeanJournalofImmunology, 2017, 48(2), pp. 230–238.Hesker P.R., Nguyen M., Kovarova M., Ting J.P., Koller B.H. Genetic loss of murine pyrin, the Familial Mediterranean Fever protein, increases interleukin-1β levels. PLoSOne, 2012, 7(11), pp. e51105.Hesker P.R., Nguyen M., Kovarova M., Ting J.P., Koller B.H. Genetic loss of murine pyrin, the Familial Mediterranean Fever protein, increases interleukin-1β levels. PLoSOne, 2012, 7(11), pp. e51105.Kirnaz B, Gezgin Y, Berdeli A. MEFV gene allele frequency and genotype distribution in 3230 patients' analyses by next generation sequencing methods. Gene, 2022, 827, pp. 146447.Kirnaz B, Gezgin Y, Berdeli A. MEFV gene allele frequency and genotype distribution in 3230 patients' analyses by next generation sequencing methods. Gene, 2022, 827, pp. 146447.Koga T, Migita K, Kawakami A. Biologic therapy in familial Mediterranean fever. ModRheumatol., 2016, 26, pp. 637–641.Koga T, Migita K, Kawakami A. Biologic therapy in familial Mediterranean fever. ModRheumatol., 2016, 26, pp. 637–641.Korkmaz C., Ozdogan H., Kasapçopur O., Yazici H. Acute phase response in familial Mediterranean fever. AnnRheumDis., 2002, 61(1), pp. 79-81.Korkmaz C., Ozdogan H., Kasapçopur O., Yazici H. Acute phase response in familial Mediterranean fever. AnnRheumDis., 2002, 61(1), pp. 79-81.Majeed H.A., El-Khateeb M., El-Shanti H., Rabaiha Z.A., Tayeh M., Najib D. The spectrum of familial Mediterranean fever gene mutations in Arabs: report of a large series. SeminArthritisRheum., 2005, 34(6), pp. 813-818.Majeed H.A., El-Khateeb M., El-Shanti H., Rabaiha Z.A., Tayeh M., Najib D. The spectrum of familial Mediterranean fever gene mutations in Arabs: report of a large series. SeminArthritisRheum., 2005, 34(6), pp. 813-818.Manukyan G., Aminov R. Update on Pyrin Functions and Mechanisms of Familial Mediterranean Fever. FrontMicrobiol., 2016, 7, pp. 456.Manukyan G., Aminov R. Update on Pyrin Functions and Mechanisms of Familial Mediterranean Fever. FrontMicrobiol., 2016, 7, pp. 456.Marek-Yagel D., Berkun Y., Padeh S., Abu A., Reznik-Wolf H., Livneh A., Pras M., Pras E. Clinical disease among patients heterozygous for familial mediterranean fever. Arthritis&Rheumatism, 2009, 60(6), pp. 1862–1866.Marek-Yagel D., Berkun Y., Padeh S., Abu A., Reznik-Wolf H., Livneh A., Pras M., Pras E. Clinical disease among patients heterozygous for familial mediterranean fever. Arthritis&Rheumatism, 2009, 60(6), pp. 1862–1866.Migita K., Uehara R., Nakamura Y., Yasunami M., Tsuchiya-Suzuki A., Yazaki M., Nakamura A., Masumoto J., Yachie A., Furukawa H., Ishibashi H., Ida H., Yamazaki K., Kawakami A., Agematsu K. FamilialMediterraneanfeverinJapan. Medicine, 2012, 91(6), pp. 337-343.Migita K., Uehara R., Nakamura Y., Yasunami M., Tsuchiya-Suzuki A., Yazaki M., Nakamura A., Masumoto J., Yachie A., Furukawa H., Ishibashi H., Ida H., Yamazaki K., Kawakami A., Agematsu K. FamilialMediterraneanfeverinJapan. Medicine, 2012, 91(6), pp. 337-343.Moradian M.M., Sarkisian T., Ajrapetyan H., Avanesian N. Genotype-phenotype studies in a large cohort of Armenian patients with familial Mediterranean fever suggest clinical disease with heterozygous MEFV mutations. J HumGenet., 2010, 55(6), pp. 389-393.Moradian M.M., Sarkisian T., Ajrapetyan H., Avanesian N. Genotype-phenotype studies in a large cohort of Armenian patients with familial Mediterranean fever suggest clinical disease with heterozygous MEFV mutations. J HumGenet., 2010, 55(6), pp. 389-393.Oktem S., Yavuzsen T.U., Sengül B., Akhunlar H., Akar S., Tunca M. Levels of interleukin-6 (IL-6) and its soluble receptor (sIL-6R) in familial Mediterranean fever (FMF) patients and their first degree relatives. ClinExpRheumatol., 2004, 22(4 Suppl 34), pp. 34-36.Oktem S., Yavuzsen T.U., Sengül B., Akhunlar H., Akar S., Tunca M. Levels of interleukin-6 (IL-6) and its soluble receptor (sIL-6R) in familial Mediterranean fever (FMF) patients and their first degree relatives. ClinExpRheumatol., 2004, 22(4 Suppl 34), pp. 34-36.Ozen S., Bakkaloglu A., Yilmaz E., Duzova A., Balci B., Topaloglu R., Besbas N. Mutations in the gene for familial Mediterranean fever: do they predispose to inflammation? J Rheumatol., 2003, 30(9), pp. 2014-2018.Ozen S., Bakkaloglu A., Yilmaz E., Duzova A., Balci B., Topaloglu R., Besbas N. Mutations in the gene for familial Mediterranean fever: do they predispose to inflammation? J Rheumatol., 2003, 30(9), pp. 2014-2018.Ozen S., Demirkaya E., Erer B., Livneh A., Ben-Chetrit E., Giancane G., Ozdogan H., Abu I., Gattorno M., Hawkins P.N., Yuce S., Kallinich T., Bilginer Y., Kastner D., Carmona L. EULAR recommendations for the management of familial Mediterranean fever. AnnRheumDis., 2016, 75(4), pp. 644-651.Ozen S., Demirkaya E., Erer B., Livneh A., Ben-Chetrit E., Giancane G., Ozdogan H., Abu I., Gattorno M., Hawkins P.N., Yuce S., Kallinich T., Bilginer Y., Kastner D., Carmona L. EULAR recommendations for the management of familial Mediterranean fever. AnnRheumDis., 2016, 75(4), pp. 644-651.Ozen S., Frenkel J., Ruperto N., Gattorno M. The Eurofever project: towards better care for autoinflammatory disease. Eur J Pediatr., 2011, 170(4), pp. 445-452.Ozen S., Frenkel J., Ruperto N., Gattorno M. The Eurofever project: towards better care for autoinflammatory disease. Eur J Pediatr., 2011, 170(4), pp. 445-452.Papadopoulos V.P., Giaglis S., Mitroulis I., Ritis K. The population genetics of familial mediterranean fever: a meta-analysis study. AnnHumGenet., 2008, 72(Pt 6), pp. 752-761Papadopoulos V.P., Giaglis S., Mitroulis I., Ritis K. The population genetics of familial mediterranean fever: a meta-analysis study. AnnHumGenet., 2008, 72(Pt 6), pp. 752-761Papin S., Cuenin S., Agostini L., Martinon F., Werner S., Beer H.D., Grütter C., Grütter M., Tschopp J. The SPRY domain of Pyrin, mutated in familial Mediterranean fever patients, interacts with inflammasome components and inhibits proIL-1β processing. CellDeathDiffer., 2007, 14, pp. 1457–1466.Papin S., Cuenin S., Agostini L., Martinon F., Werner S., Beer H.D., Grütter C., Grütter M., Tschopp J. The SPRY domain of Pyrin, mutated in familial Mediterranean fever patients, interacts with inflammasome components and inhibits proIL-1β processing. CellDeathDiffer., 2007, 14, pp. 1457–1466.Park Y.H., Wood G., Kastner D.L., Chae J.J. Pyrin inflammasome activation and RhoA signaling in the autoinflammatory diseases FMF and HIDS. NatureImmunology, 2016, 17(8), pp. 914–921.Park Y.H., Wood G., Kastner D.L., Chae J.J. Pyrin inflammasome activation and RhoA signaling in the autoinflammatory diseases FMF and HIDS. NatureImmunology, 2016, 17(8), pp. 914–921.Reddy P. Interleukin-18: recent advances. CurrOpinHematol., 2004, 11(6), pp. 405-410.Reddy P. Interleukin-18: recent advances. CurrOpinHematol., 2004, 11(6), pp. 405-410.Rosenberg-Hasson Y, Hansmann L, Liedtke M, Herschmann I, Maecker HT. Effects of serum and plasma matrices on multiplex immunoassays. Immunol Res. 2014 May;58(2-3):224-33. doi: 10.1007/s12026-014-8491-6. PMID: 24522699; PMCID: PMC4332596.Rosenberg-Hasson Y, Hansmann L, Liedtke M, Herschmann I, Maecker HT. Effects of serum and plasma matrices on multiplex immunoassays. Immunol Res. 2014 May;58(2-3):224-33. doi: 10.1007/s12026-014-8491-6. PMID: 24522699; PMCID: PMC4332596.Sag E., Demirel D., Demir S., Atalay E., Akca U., Bilginer Y., Ozen S. Performance Of The New “Eurofever/PRINTO Classification Criteria” In FMF Patients. SeminarsinArthritisRheum., 2020, 50(1), pp. 172-175.Sag E., Demirel D., Demir S., Atalay E., Akca U., Bilginer Y., Ozen S. Performance Of The New “Eurofever/PRINTO Classification Criteria” In FMF Patients. SeminarsinArthritisRheum., 2020, 50(1), pp. 172-175.Sarkisian T., Ayrapetyan H., Shahsuvaryan G. Molecular study of FMF patients in Armenia. Curr. DrugTargetsInflamm. Allergy., 2005, 4, pp. 113–116.Sarkisian T., Ayrapetyan H., Shahsuvaryan G. Molecular study of FMF patients in Armenia. Curr. DrugTargetsInflamm. Allergy., 2005, 4, pp. 113–116.Simsek I., Pay S., Pekel A., Dinc A., Musabak U., Erdem H., Sengul A. Serum proinflammatory cytokines directing T helper 1 polarization in patients with familial Mediterranean fever. RheumatolInt. 2007. 27(9). pp. 807-811.Simsek I., Pay S., Pekel A., Dinc A., Musabak U., Erdem H., Sengul A. Serum proinflammatory cytokines directing T helper 1 polarization in patients with familial Mediterranean fever. RheumatolInt. 2007. 27(9). pp. 807-811.Stojanov S., Kastner D.L. Familial autoinflammatory diseases: genetics, pathogenesis and treatment. CurrOpinRheumatol., 2005, 17(5), pp. 586-599.Stojanov S., Kastner D.L. Familial autoinflammatory diseases: genetics, pathogenesis and treatment. CurrOpinRheumatol., 2005, 17(5), pp. 586-599.Teletar M., Grody W.W. Molecular genetic testing for familial Mediterranean fever. Mol. Genet. Metab., 2000, 71, pp. 256–260.Teletar M., Grody W.W. Molecular genetic testing for familial Mediterranean fever. Mol. Genet. Metab., 2000, 71, pp. 256–260.The French FMF Consortium. A candidate gene for familial Mediterranean fever. NatureGenetics, 1997, 17(1), pp. 25–31.The French FMF Consortium. A candidate gene for familial Mediterranean fever. NatureGenetics, 1997, 17(1), pp. 25–31.The International FMF Consortium. Ancient Missense Mutations in a New Member of the RoRet Gene Family Are Likely to Cause Familial Mediterranean Fever. Cell, 1997, 90(4), pp. 797–807.The International FMF Consortium. Ancient Missense Mutations in a New Member of the RoRet Gene Family Are Likely to Cause Familial Mediterranean Fever. Cell, 1997, 90(4), pp. 797–807.Touitou I. ThespectrumofFamilialMediterraneanFever (FMF) mutations. Eur. J. Hum. Genet., 2001, 9(7), pp. 473-483.Touitou I. ThespectrumofFamilialMediterraneanFever (FMF) mutations. Eur. J. Hum. Genet., 2001, 9(7), pp. 473-483.Turkish FMF StudyGroup. FamilialMediterraneanfever (FMF) inTurkey: resultsof a nationwidemulticenterstudy. Medicine, 2005, 84(1), pp. 1-11.Turkish FMF StudyGroup. FamilialMediterraneanfever (FMF) inTurkey: resultsof a nationwidemulticenterstudy. Medicine, 2005, 84(1), pp. 1-11.Varan O., Kucuk H., Babaoglu H., Tecer D., Atas N., BiliciSalman R., Satıs H., Ozturk M.A., Haznedaroglu S., Goker B., Tufan A. ChronicinflammationinadultfamilialMediterraneanfeverpatients: underlyingcausesandassociationwithamyloidosis. Scand J Rheumatol., 2019, 48(4), pp. 315-319.Varan O., Kucuk H., Babaoglu H., Tecer D., Atas N., BiliciSalman R., Satıs H., Ozturk M.A., Haznedaroglu S., Goker B., Tufan A. ChronicinflammationinadultfamilialMediterraneanfeverpatients: underlyingcausesandassociationwithamyloidosis. Scand J Rheumatol., 2019, 48(4), pp. 315-319.Wada T., Toma T., Miyazawa H., Koizumi E., Shirahashi T., Matsuda Y., Yachie A. Longitudinalanalysisofserum interleukin-18 inpatientswithfamilialMediterraneanfevercarrying MEFV mutationsinexon 10. Cytokine, 2018, 104, pp. 143-146.Wada T., Toma T., Miyazawa H., Koizumi E., Shirahashi T., Matsuda Y., Yachie A. Longitudinalanalysisofserum interleukin-18 inpatientswithfamilialMediterraneanfevercarrying MEFV mutationsinexon 10. Cytokine, 2018, 104, pp. 143-146.Yildirim K., Uzkeser H., Keles M., Karatay S., Kiziltunc A., Kaya M.D., Yildirim A. Relationshipbetweenserum interleukin-1beta levelsandacutephaseresponseproteinsinpatientswithfamilialMediterraneanfever. BiochemMed (Zagreb), 2012, 22(1), pp. 109-113.Yildirim K., Uzkeser H., Keles M., Karatay S., Kiziltunc A., Kaya M.D., Yildirim A. Relationshipbetweenserum interleukin-1beta levelsandacutephaseresponseproteinsinpatientswithfamilialMediterraneanfever. BiochemMed (Zagreb), 2012, 22(1), pp. 109-113.Yildirim M.E., Kurtulgan H.K., Ozdemir O., Kilicgun H., Aydemir D.S., Baser B., Sezgin I. Prevalenceof MEFV genemutationsin a largecohortofpatientswithsuspectedfamilialMediterraneanfeverinCentralAnatolia. AnnSaudiMed., 2019, 39(6), pp. 382-387.Yildirim M.E., Kurtulgan H.K., Ozdemir O., Kilicgun H., Aydemir D.S., Baser B., Sezgin I. Prevalenceof MEFV genemutationsin a largecohortofpatientswithsuspectedfamilialMediterraneanfeverinCentralAnatolia. AnnSaudiMed., 2019, 39(6), pp. 382-387.Yilmaz E., Ozen S., Balci B., Duzova A., Topaloglu R., Besbas N., Saatci U., Bakkaloglu A., Ozguc M. MutationfrequencyofFamilialMediterraneanFeverandevidencefor a highcarrierrateintheTurkishpopulation. Eur J HumGenet.. 2001. 9(7). pp. 553-555.Yilmaz E., Ozen S., Balci B., Duzova A., Topaloglu R., Besbas N., Saatci U., Bakkaloglu A., Ozguc M. MutationfrequencyofFamilialMediterraneanFeverandevidencefor a highcarrierrateintheTurkishpopulation. Eur J HumGenet.. 2001. 9(7). pp. 553-555.Yu J.W., Fernandes-Alnemri T., Datta P., Wu J., Juliana C., Solorzano L., McCormick M., Zhang Z., Alnemri E.S. Pyrinactivatesthe ASC pyroptosomeinresponsetoengagementbyautoinflammatory PSTPIP1 mutants. Mol. Cell., 2007, 28, pp. 214–227.Yu J.W., Fernandes-Alnemri T., Datta P., Wu J., Juliana C., Solorzano L., McCormick M., Zhang Z., Alnemri E.S. Pyrinactivatesthe ASC pyroptosomeinresponsetoengagementbyautoinflammatory PSTPIP1 mutants. Mol. Cell., 2007, 28, pp. 214–227.Yu J.W., Wu J., Zhang Z., Datta P., Ibrahimi I., Taniguchi S., Sagara J., Fernandes-Alnemri T., Alnemri E.S. Cryopyrinandpyrinactivate caspase-1, butnot NF-kappaB, via ASC oligomerization. CellDeathDiffer., 2006, 13, pp. 236–249.Yu J.W., Wu J., Zhang Z., Datta P., Ibrahimi I., Taniguchi S., Sagara J., Fernandes-Alnemri T., Alnemri E.S. Cryopyrinandpyrinactivate caspase-1, butnot NF-kappaB, via ASC oligomerization. CellDeathDiffer., 2006, 13, pp. 236–249.

The authors declare that there are no conflicts of interest present.