<?xml version="1.0" encoding="UTF-8"?>
<!DOCTYPE article PUBLIC "-//NLM//DTD JATS (Z39.96) Journal Publishing DTD v1.3 20210610//EN" "JATS-journalpublishing1-3.dtd">
<article article-type="research-article" dtd-version="1.3" xmlns:mml="http://www.w3.org/1998/Math/MathML" xmlns:xlink="http://www.w3.org/1999/xlink" xmlns:xsi="http://www.w3.org/2001/XMLSchema-instance" xml:lang="ru"><front><journal-meta><journal-id journal-id-type="publisher-id">mimmun</journal-id><journal-title-group><journal-title xml:lang="ru">Медицинская иммунология</journal-title><trans-title-group xml:lang="en"><trans-title>Medical Immunology (Russia)</trans-title></trans-title-group></journal-title-group><issn pub-type="ppub">1563-0625</issn><issn pub-type="epub">2313-741X</issn><publisher><publisher-name>SPb RAACI</publisher-name></publisher></journal-meta><article-meta><article-id pub-id-type="doi">10.15789/1563-0625-CAO-16916</article-id><article-id custom-type="elpub" pub-id-type="custom">mimmun-3041</article-id><article-categories><subj-group subj-group-type="heading"><subject>Research Article</subject></subj-group><subj-group subj-group-type="section-heading" xml:lang="ru"><subject>КРАТКИЕ СООБЩЕНИЯ</subject></subj-group><subj-group subj-group-type="section-heading" xml:lang="en"><subject>SHORT COMMUNICATIONS</subject></subj-group></article-categories><title-group><article-title>Сравнительный анализ результатов типирования HLA-генов методом NGS с использованием различных платформ</article-title><trans-title-group xml:lang="en"><trans-title>Comparative analyses of the results of HLA genes typing by NGS method using different platforms</trans-title></trans-title-group></title-group><contrib-group><contrib contrib-type="author" corresp="yes"><name-alternatives><name name-style="eastern" xml:lang="ru"><surname>Павлова</surname><given-names>И. Е.</given-names></name><name name-style="western" xml:lang="en"><surname>Pavlova</surname><given-names>I. E.</given-names></name></name-alternatives><bio xml:lang="ru"><p>Павлова Ирина Евгеньевна - д.м.н., главный научный сотрудник НИЛ иммунологии,</p><p>191024, Санкт-Петербург, ул. 2-ая Советская, 16</p></bio><bio xml:lang="en"><p>Irina E.Pavlova - PhD, MD (Medicine), Chief Research Associate, Research Laboratory of Immunology,</p><p>16 2nd Sovietskaya St, St. Petersburg 191024</p></bio><email xlink:type="simple">pavlova@niigt.ru</email><xref ref-type="aff" rid="aff-1"/></contrib><contrib contrib-type="author" corresp="yes"><name-alternatives><name name-style="eastern" xml:lang="ru"><surname>Кузьмич</surname><given-names>Е. В.</given-names></name><name name-style="western" xml:lang="en"><surname>Kuzmich</surname><given-names>E. V.</given-names></name></name-alternatives><bio xml:lang="ru"><p>к.б.н., ведущий научный сотрудник НИЛ иммунологии,</p><p>Санкт-Петербург</p></bio><bio xml:lang="en"><p>PhD (Biology), Leading Research Associate, Research Laboratory of Immunology, </p><p>St. Petersburg</p></bio><xref ref-type="aff" rid="aff-1"/></contrib><contrib contrib-type="author" corresp="yes"><name-alternatives><name name-style="eastern" xml:lang="ru"><surname>Хамаганова</surname><given-names>Е. Г.</given-names></name><name name-style="western" xml:lang="en"><surname>Khamaganova</surname><given-names>E. G.</given-names></name></name-alternatives><bio xml:lang="ru"><p>д.б.н., заведующая лабораторией тканевого типирования,</p><p>Москва</p></bio><bio xml:lang="en"><p>PhD, MD (Biology), Head, Tissue Typing Laboratory, </p><p>Moscow</p></bio><xref ref-type="aff" rid="aff-2"/></contrib><contrib contrib-type="author" corresp="yes"><name-alternatives><name name-style="eastern" xml:lang="ru"><surname>Рудик</surname><given-names>Д. В.</given-names></name><name name-style="western" xml:lang="en"><surname>Rudik</surname><given-names>D. V.</given-names></name></name-alternatives><bio xml:lang="ru"><p>к.б.н., доцент кафедры биохимии,</p><p>Москва</p></bio><bio xml:lang="en"><p>PhD (Biology), Associate Professor, Department of Biochemistry, </p><p>Moscow</p></bio><xref ref-type="aff" rid="aff-3"/></contrib><contrib contrib-type="author" corresp="yes"><name-alternatives><name name-style="eastern" xml:lang="ru"><surname>Кузьминова</surname><given-names>Е. П.</given-names></name><name name-style="western" xml:lang="en"><surname>Kuzminova</surname><given-names>E. P.</given-names></name></name-alternatives><bio xml:lang="ru"><p>к.б.н., старший научный сотрудник лаборатории тканевого типирования,</p><p>Москва</p></bio><bio xml:lang="en"><p>PhD (Biology), Senior Research Associate, Tissue Typing Laboratory, </p><p>Moscow</p></bio><xref ref-type="aff" rid="aff-2"/></contrib><contrib contrib-type="author" corresp="yes"><name-alternatives><name name-style="eastern" xml:lang="ru"><surname>Абдрахимова</surname><given-names>А. Р.</given-names></name><name name-style="western" xml:lang="en"><surname>Abdrakhimova</surname><given-names>A. R.</given-names></name></name-alternatives><bio xml:lang="ru"><p>научный сотрудник лаборатории тканевого типирования,</p><p>Москва</p></bio><bio xml:lang="en"><p>Research Associate, Tissue Typing Laboratory, </p><p>Moscow</p></bio><xref ref-type="aff" rid="aff-2"/></contrib></contrib-group><aff-alternatives id="aff-1"><aff xml:lang="ru"><institution>ФГБУ «Российский научно-исследовательский институт гематологии и трансфузиологии Федерального медико-биологического агентства»</institution><country>Россия</country></aff><aff xml:lang="en"><institution>Russian Research Institute of Haematology and Transfusiology, Federal Medical and Bilogical Agency</institution><country>Russian Federation</country></aff></aff-alternatives><aff-alternatives id="aff-2"><aff xml:lang="ru"><institution>ФГБУ «Национальный медицинский исследовательский центр гематологии» Министерства здравоохранения РФ</institution><country>Россия</country></aff><aff xml:lang="en"><institution>National Medical Research Center for Hematology</institution><country>Russian Federation</country></aff></aff-alternatives><aff-alternatives id="aff-3"><aff xml:lang="ru"><institution>ФГАОУ ВО «Первый Московский государственный медицинский университет имени И.М. Сеченова» Министерства здравоохранения РФ</institution><country>Россия</country></aff><aff xml:lang="en"><institution>I. Sechenov First Moscow State Medical University</institution><country>Russian Federation</country></aff></aff-alternatives><pub-date pub-type="collection"><year>2024</year></pub-date><pub-date pub-type="epub"><day>26</day><month>07</month><year>2024</year></pub-date><volume>26</volume><issue>4</issue><fpage>717</fpage><lpage>726</lpage><permissions><copyright-statement>Copyright &amp;#x00A9; Павлова И.Е., Кузьмич Е.В., Хамаганова Е.Г., Рудик Д.В., Кузьминова Е.П., Абдрахимова А.Р., 2024</copyright-statement><copyright-year>2024</copyright-year><copyright-holder xml:lang="ru">Павлова И.Е., Кузьмич Е.В., Хамаганова Е.Г., Рудик Д.В., Кузьминова Е.П., Абдрахимова А.Р.</copyright-holder><copyright-holder xml:lang="en">Pavlova I.E., Kuzmich E.V., Khamaganova E.G., Rudik D.V., Kuzminova E.P., Abdrakhimova A.R.</copyright-holder><license xml:lang="ru" license-type="creative-commons-attribution" xlink:href="https://creativecommons.org/licenses/by/4.0/" xlink:type="simple"><license-p>Данная работа распространяется под лицензией Creative Commons Attribution 4.0.</license-p></license><license xml:lang="en" license-type="creative-commons-attribution" xlink:href="https://creativecommons.org/licenses/by/4.0/" xlink:type="simple"><license-p>This work is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 License.</license-p></license></permissions><self-uri xlink:href="https://www.mimmun.ru/mimmun/article/view/3041">https://www.mimmun.ru/mimmun/article/view/3041</self-uri><abstract><p>Секвенирование нового поколения (next generation sequencing, NGS), позволяющее проводить массовое HLA-типирование на уровне от высокого до аллельного разрешения, быстро завоевало позицию наиболее распространенного и максимально информативного метода определения генов главного комплекса гистосовместимости (HLA-генов). Метод характеризуется сочетанием экономической и технологической эффективности. HLA-типирование методом NGS выполняется с помощью специальных платформ (генетических секвенаторов). Наиболее распространенной платформой является MiSeq (Illumina, США). В настоящее время техническое обслуживание этого прибора затруднено, что вызвало необходимость поиска аналогов, не уступающих по производительности и качеству HLA-типирования. Целью нашего исследования являлся сравнительный анализ результатов HLA-типирования методом NGS с использованием платформ MiSeq (Illumina, США) и FastaSeq 300 (GeneMind, Китай). В исследование включены образцы ДНК, выделенные из ядросодержащих клеток периферической крови доноров, вступивших в Федеральный регистр доноров гемопоэтических стволовых клеток (ГСК): 12 образцов получены и проанализированы в ФГБУ РосНИИГТ ФМБА России и 24 образца – в ФГБУ «НМИЦ гематологии» Минздрава России. HLA-типирование всех образцов выполнено дважды: с использованием секвенатора MiSeq и секвенатора FastaSeq 300. Результаты HLA-типирования 12 образцов из ФГБУ РосНИИГТ ФМБА России, полученные на двух платформах, совпали. Аллель гена DRB1 одного из образцов представлен в виде группы P при применении MiSeq, но группы G в случае FastaSeq 300. Результаты HLA-типирования 24 образцов из ФГБУ «НМИЦ гематологии» Минздрава России, полученные на двух платформах, также совпали. Однако для 10 образцов наблюдались различия в уровне разрешения HLA-типирования. Более высокий уровень разрешения при применении MiSeq получен для генов: B – 2 случая; С, DRB3, DRB4 – по 3 случая. При использовании FastaSeq 300 более высокий уровень разрешения имел место несколько чаще и установлен для генов: DRB1 – 4, DQB1 – 7, DPA1 – 10 случаев. Различия в уровне разрешения HLA-типирования некоторых образцов не являются критическими, так как в настоящее время для подбора пары донор-реципиент ГСК используются результаты высокоразрешающего типирования. Полученные данные свидетельствуют о возможности эффективного использования секвенатора FastaSeq 300 для HLA-типирования. Целесообразно провести аналогичный анализ на основе обследования пациентов с различными нозологическими формами заболеваний, лечение которых требует проведения аллогенной трансплантации ГСК.</p></abstract><trans-abstract xml:lang="en"><p>Next generation sequencing (NGS) allows high-resolution and allelic HLA-typing. The most common platform is MiSeq (Illumina, USA). Currently, the maintenance of this device is difficult, which has necessitated the search for analogues that are not inferior in capacity and quality of HLA-typing. The purpose of our study was a comparative analysis of the results of HLA-typing by NGS using the MiSeq (Illumina, USA) and FastaSeq 300 (Gene-Mind, China) platforms. The study included DNA samples of hematopoietic stem cell (HSC) donors: 12 samples were obtained and analyzed at the FSBI RosNIIGT FMBA of Russia and 24 samples at the National Medical Research Center for Hematology of the Ministry of Health of the Russian Federation. HLA typing of all samples was performed twice: using a MiSeq sequencer and a FastaSeq 300 sequencer. The results of HLA-typing of 12 samples from the FSBI RosNIIGT FMBA of Russia, obtained on two platforms, coincided. DRB1 allele of one sample was achieved as group P with MiSeq, but as group G with FastaSeq 300. The results of HLA-typing of 24 samples from the National Medical Research Center for Hematology of the Ministry of Health of the Russian Federation, obtained on two platforms, coincided. However, differences in the level of resolution of HLA-typing were observed for 10 samples. A higher level of resolution with using MiSeq was observed for genes: B – 2 cases; C, DRB3, DRB4 – 3 cases each. When using FastaSeq 300, a higher level of resolution was achieved a little more often and was established for the genes: DRB1 – 4, DQB1 – 7, DPA1 – 10 cases. Differences in the level of resolution of HLA-typing for some samples are not critical, since high-resolution typing results are currently used to select HSC donor-recipient pairs. Our study indicated the possibility of effectively using the FastaSeq 300 for HLA-typing.</p></trans-abstract><kwd-group xml:lang="ru"><kwd>аллели</kwd><kwd>генетический анализатор</kwd><kwd>гены</kwd><kwd>секвенирование нового поколения</kwd><kwd>HLA</kwd><kwd>HLA-типирование</kwd></kwd-group><kwd-group xml:lang="en"><kwd>alleles</kwd><kwd>genetic analyzer</kwd><kwd>genes</kwd><kwd>next generation sequencing</kwd><kwd>HLA</kwd><kwd>HLA-typing</kwd></kwd-group></article-meta></front><back><ref-list><title>References</title><ref id="cit1"><label>1</label><citation-alternatives><mixed-citation xml:lang="ru">Кузьмич Е.В., Алянский А.Л., Иванова Н.Е., Витрищак А.А., Владовская М.Д., Морозова Е.В., Бондаренко С.Н., Семенова Е.В., Зубаровская Л.С., Афанасьев Б.В. Анализ результатов аллогенной трансплантации гемопоэтических стволовых клеток в зависимости от степени HLA-подбора пациента и неродственного донора // Онкогематология, 2014. № 3. С. 25-31.</mixed-citation><mixed-citation xml:lang="en">Kuzmich Ye.V., Alyanskiy A.L., Ivanova N.Ye., Vitrischak A.A., Vladovskaya M.D., Morozova Ye.V., Bondarenko S.N., Semenova Ye.V., Zubarovskaya L.S., Afanasyev B.V. Analysis of the results of allogeneic hematopoietic stem cell transplantation depending on HLA matching of the unrelated donor/recipient pair. Onkogematologiya = Oncohematology, 2014, no. 3, pp. 25-31. (In Russ.)</mixed-citation></citation-alternatives></ref><ref id="cit2"><label>2</label><citation-alternatives><mixed-citation xml:lang="ru">Хамаганова Е.Г., Хижинский С.П., Абдрахимова А.Р., Кузьминова Е.П., Леонов Е.А., Покровская О.С., Кузьмина Л.А., Паровичникова Е.Н. Мультилокусные HLA-гаплотипы (A-B-C-DRB1-DRB3/ DRB4/DRB5-DQA1-DQB1-DPA1-DPB1) в семьях больных с назначением к трансплантации аллогенных гемопоэтических стволовых клеток // Медицинская иммунология, 2024. Т. 26, № 2. С. 291-302. doi: 10.15789/1563-0625-MHH-2651.</mixed-citation><mixed-citation xml:lang="en">Khamaganova  E.G., Khizhinsky  S.P., Abdrakhimova A.R., Kuzminova E.P., Leonov E.A., Pokrovskaya O.S., Kuzmina L.A., Parovichnikova E.N. Multilocus HLA haplotypes (A-B-C-DRB1-DRB3/DRB4/DRB5-DQA1-DQB1-DPA1-DPB1) in families of patients scheduled for allogeneic hematopoietic stem cell transplantation. Meditsinskaya Immunologiya = Medical Immunology (Russia), 2024, Vol. 26, no. 2, pp. 291-302. (In Russ.) doi: 10.15789/1563-0625-MHH-2651.</mixed-citation></citation-alternatives></ref><ref id="cit3"><label>3</label><citation-alternatives><mixed-citation xml:lang="ru">Янкевич Т.Э., Трофимов Ю.Д., Болдырева М.Н., Шубина Е.С., Гольцов А.Ю., Алтухова О.С., Суслова Т.А. Разработка системы «HLA-эксперт» для типирования генов HLA с высоким разрешением методом NFS. Опыт использования // Вестник гематологии, 2018. Т. 14, № 2. С. 56.</mixed-citation><mixed-citation xml:lang="en">Yankevich T.E., Trofimov Yu.D., Boldyreva M.N., Shubina E.S., Gol’cov A.Yu., Altuhova O.S., Suslova T.A. Development of the “HLA-expert” system for typing HLA genes with high resolution using the NFS method. Experience of use. Vestnik gematologii = Bulletin of Hematology, 2018, Vol. 14, no. 2, p. 56. (In Russ.)</mixed-citation></citation-alternatives></ref><ref id="cit4"><label>4</label><citation-alternatives><mixed-citation xml:lang="ru">Loginova M., Smirnova D., Paramonov I. A Novel HLA-B*57 allele, HLA-B*57:163, was identified by next generation sequencing typing. HLA, 2023, Vol. 101, no. 2, pp. 171-172.</mixed-citation><mixed-citation xml:lang="en">Loginova M., Smirnova D., Paramonov I. A Novel HLA-B*57 allele, HLA-B*57:163, was identified by next generation sequencing typing. HLA, 2023, Vol. 101, no. 2, pp. 171-172.</mixed-citation></citation-alternatives></ref><ref id="cit5"><label>5</label><citation-alternatives><mixed-citation xml:lang="ru">Standards for histocompatibility &amp; immunogenetics testing [date of access March 2024]. Available at: http://www.efiweb.org.</mixed-citation><mixed-citation xml:lang="en">Standards for histocompatibility &amp; immunogenetics testing [date of access March 2024]. Available at: http://www.efiweb.org.</mixed-citation></citation-alternatives></ref></ref-list><fn-group><fn fn-type="conflict"><p>The authors declare that there are no conflicts of interest present.</p></fn></fn-group></back></article>
