mimmunМедицинская иммунологияMedical Immunology (Russia)1563-06252313-741XSPb RAACI10.15789/1563-0625-FOT-2900mimmun-2900Research ArticleКРАТКИЕ СООБЩЕНИЯSHORT COMMUNICATIONSОсобенности лейкоцитарного пула концентрата клеток пуповинной крови, заготовленного для долгосрочного криохраненияFeatures of the leukocyte pool of umbilical cell blood cell concentrate prepared for long-term cryostorageТюминаО. В.TyuminaO. V.

Тюмина О.В. – д.м.н., директор; профессоркафедры госпитальной терапии

443095, Россия, г. Самара, ул. Ташкентская, 159

Тел.: 8 (902) 291-27-88

Tyumina O.V., PhD, MD (Medicine), Director; Professor, Department of Hospital Therapy

159 Tashkentskaya St Samara 443095 Russian Federation

Phone: +7 (902) 291-27-88

centr123@bk.ruОвчинниковП. А.OvchinnikovP. A.

Овчинников П.А. – заведующий отделением заготовки крови и ее компонентов

г. Самара

Ovchinnikov P.А., Head, Department of Blood Banking

Samara

ТрусоваЛ. М.TrusovaL. M.

Трусова Л.М. – заведующая лабораторией иммунологического типирования

г. Самара

Trusova L.M., Head, Department of Immunology

Samara

ТюминИ. В.TyuminI. V.

Тюмин И.В. – аспирант отделения клинической иммунологии, Медицинский радиологический научный центр имени А.Ф. Цыба

г. Самара

Tyumin I.V., Postgraduate Student, Department of Clinical Immunology; Oncologist

Samara

ДавыдкинИ. Л.DavydkinI. L.

Давыдкин И.Л. – д.м.н, профессор, заведующий кафедрой и клиникой госпитальной терапии с курсом поликлинической терапии и трансфузиологии, проректор по научной работе

г. Самара

Davydkin I.L., PhD, MD (Medicine), Professor, Head, Department of Hospital Therapy with Transfusiology, ViceRector for Research

ГБУЗ «Самарский областной медицинский центр “Династия”»; ФГБОУ ВО «Самарский государственный медицинский университет» Министерства здравоохранения РФРоссияSamara Regional Dynasty Medical Center; Samara State Medical UniversityRussian FederationГБУЗ «Самарский областной медицинский центр “Династия”»РоссияSamara Regional Dynasty Medical CenterRussian FederationГБУЗ «Самарский областной медицинский центр “Династия”»; Медицинский радиологический научный центр имени А.Ф. Цыба – филиал ФГБУ «Национальный медицинский исследовательский центр радиологии» Министерства здравоохранения РФРоссияSamara Regional Dynasty Medical Center; A. Tsyb Medical Radiological Research Center, Branch of National Medical Research Center of RadiologyRussian FederationФГБОУ ВО «Самарский государственный медицинский университет» Министерства здравоохранения РФРоссияSamara State Medical UniversityRussian Federation202417102023263617624Copyright © Тюмина О.В., Овчинников П.А., Трусова Л.М., Тюмин И.В., Давыдкин И.Л., 20242024Тюмина О.В., Овчинников П.А., Трусова Л.М., Тюмин И.В., Давыдкин И.Л.Tyumina O.V., Ovchinnikov P.A., Trusova L.M., Tyumin I.V., Davydkin I.L.This work is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 License.https://www.mimmun.ru/mimmun/article/view/2900

Аллогенная трансплантация гемопоэтических клеток входит в стандарт лечения пациентов с острым лейкозом высокого риска. Пуповинная кровь (ПК) является альтернативным источником аллогенных стволовых гемопоэтических клеток для пациентов, которые нуждаются в трансплантации, но не имеют родственного донора. Цель исследования: изучение особенностей лейкоцитарного пула (клеточного состава, иммунофенотипа) концентрата клеток пуповинной крови (ПК), которые заготавливаются для публичного долгосрочного криохранения для нужд трансплантологии. Проведено исследование 1096 образцов пуповинной крови доношенных новорожденных до и после процессинга (выделения концентрата гемопоэтических стволовых клеток (ГСК). Показано, что при использовании критерия обработки образцов ПК с количеством лейкоцитов не менее 15 × 108 лейкоцитов в пересчете на объем заготовленного образца ПК до обработки с антикоагулянтом среднее количество клеток в концентрате ГСК ПК объемом 25 мл, находящегося на долгосрочном криохранении составляет: лейкоцитов – 17,41±0,36 × 108, ГСК с иммунофенотипом (CD34+) – 5,25±3,6 × 106, натуральных киллерных клеток (CD3-CD16+CD56+) – 1,65±0,7 × 108. Изучена субпопуляционная структура NKлимфоцитов в концентрате ГСК ПК: иммунофенотип CD56dimCD16dim клеток встречался в большинстве случаев – 45,15±18,1%, а минорные субпопуляции CD56dimCD16bright, CD56-CD16+, CD56brightCD16 составили 0,27±0,2, 1,33±0,7 и 0,99±0,4% соответственно. При анализе популяции NKT-клеток было выявлено 6,22±2,1% клеток с иммунофенотипом СD3+CD16/СD56+, количество CD3+CD56+ клеток составило 3,69±2,4%, количество CD3+CD16+ – 2,53±1,2%. В пуле NKT-клеток выявлены 5,15±2,1% CD56+CD16- клеток, также определены две минорные субпопуляции, которые отличаются по экспрессии антигенов CD56 и CD16: уровень CD56-CD16+ составил 2,91±1,2%, а CD56+CD16+ оказалось равным 0,69±0,3%. Полученные данные о количестве и характеристике иммунофенотипа клеток, также гетерогенности популяции NK- и NKT-лимфоцитов в концентрате ГСК ПК, заложенных на долгосрочное криохранение, необходимо учитывать для подбора концентрата ГСК ПК с целью трансплантации при онкогематологических заболевания.

Allogeneic hematopoietic cell transplantation is the standard of care for patients with highrisk acute leukemia. Cord blood (UCB) is an alternative source of allogeneic hematopoietic stem cells for patients who need transplantation but do not have a related donor. The purpose of our study was to evaluate the characteristics of leukocyte pool (cellular composition, immunophenotype) of umbilical cord blood (UCB) cell concentrates, which were harvested for public long-term cryostorage for the needs of transplantology. A study of 1096 samples of umbilical cord blood of full-term newborns before and after processing [isolation of hematopoietic stem cells (HSC) concentrate] was carried out. The number of cells in the pooled concentrate of HSC at a volume of 25 mL, after long-term cryostorage was as follows: leukocytes, 17.41±0.36 × 108; HSCs with CD34+ immunophenotype, 5.25±3.6 × 106; natural killer cells (CD3-CD16+CD56+), 1.65+0.7 × 108. Analysis of the NKT cell population revealed 6.22±2.1% of cells with CD3+CD16/CD56+ immunophenotype. The contents of CD3+CD56+ cells was 2.69±2.4%, the relative amount of CD3+CD16+ was 2.53±1.2%. In the pooled NKT cell preparations, 5.15±2.1% of CD56+CD16 cells were detected, and two minor subpopulations were also identified, which differ in CD56 and CD16 antigen expression: the level of CD56-CD16+ was 2.91±1.2%, and the ratio of CD56+CD16+ cells was 0.69±0.3%. The obtained data on relative amounts and characteristics of cellular immunophenotype as well as the heterogeneity of the NK and NKT cell population in the HSC UCB concentrate, subjected to long-term cryostorage must be taken into account when selecting the HSC UCB concentrates for the purpose of transplantation in oncohematological diseases.

пуповинная кровьстволовые гемопоэтические клеткиконцентрат ГСК ПКNK-лимфоцитыNKT-лимфоцитысубпопуляции лимфоцитовcord bloodhematopoietic stem cellsstem cell concentrateNKNK lymphocytesNKT lymphocyteslymphocyte subpopulationsReferencesАбакушина Е.В. Метод проточной цитометрии для оценки NK-клеток и их активности // Клиническая лабораторная диагностика, 2015. № 11. С. 37-44.Abakushina E.V. Flow cytometry method for assessing NK cells and their activity. Klinicheskaya laboratornaya diagnostika = Russian Clinical Laboratory Diagnostics, 2015, Vol. 11, no. 37-44. (In Russ.)Приказ Министерства здравоохранения Российской Федерации от 25 июля 2003 г. № 325 «О развитии клеточных технологий».Order of the Ministry of Health of the Russian Federation dated July 25, 2003 No. 325 “On the development of cell technologies”Ремизова И.И., Чистякова Г.Н., Ляпунов В.А., Черешнев В.А., Устьянцева Л.С., Газиева И.А. Особенности фенотипического состава и функциональной активности иммунокомпетентных клеток пуповинной крови в зависимости от гестационного возраста // Медицинская иммунология, 2016. Т. 18, № 3. С. 291-298. [Remizova I.I., Chistyakova G.N., Lyapunov V.A., Chereshnev V.A., Ustyantseva L.S., Gazieva I.A. Features of the phenotypic composition and functional activity of umbilical cord blood immunocompetent cells depending on gestational age. Meditsinskaya immunologiya = Medical Immunology (Russia), 2016, Vol. 18, no. 3, pp. 291-298. (In Russ.) doi: 10.15789/1563-0625-2016-3-291-298.Румянцев С.А., Боякова Е.В., Шутьева А.Б., Майорова О.А., Панков Д.Д., Сахаровская Е.Л. Состав лейкоцитарного пула и гемопоэтических стволовых клеток пуповинной крови доношенных новорожденных // АГ-инфо, 2011. № 2. С. 6-11.Rumyantsev S.A., Boyakova E.V., Shutieva A.B., Mayorova O.A., Pankov D.D., Sakharovskaya E.L. Composition of the leukocyte pool and hematopoietic stem cells cord blood of full-term newborns. AG-info = AG-info, 2011, no. 2, pp. 6-11. (In Russ.)РУСКОРД. Ассоциация Рускорд открывает новую веху стандартизации для банков пуповинной крови в России. [Электронный ресурс]. Режим доступа: https://ruscord.com/bez-kategorii/assocziacziyaruskord-otkryvaet-novuyu-vehu-standartizaczii-dlya-bankov-pupovinnoj-krovi-v-rossii/RUSCORD. Ruscord Association opens a new standardization milestone for cord blood banks in Russia. [Electronic resource]. Access mode: https://ruscord.com/bez-kategorii/assocziacziya-ruskord-otkryvaet-novuyu-vehu-standartizaczii-dlyabankov-pupovinnoj-krovi-v-rossii/.Табаков Д.В., Заботина Т.Н., Борунова А.А., Панчук И.О., Короткова О.В., Кадагидзе З.Г. Гетерогенность популяций NK- и NKT-лимфоцитов у здоровых доноров // Медицинская иммунология, 2017. Т. 19, № 4. С. 401-408.Tabakov D.V., Zabotina T.N., Borunova A.A., Panchuk I.O., Korotkova O.V., Kadagidze Z.G. Heterogeneity of NK and NKT lymphocyte populations in healthy donors. Meditsinskaya immunologiya = Medical Immunology (Russia), 2017, Vol. 19, no. 4, pp. 401-408. (In Russ.) doi: 10.15789/1563-0625-2017-4-401-408.Тюмина О.В., Волчков С.Е., Овчинников П.А. Применение гематопоэтических стволовых клеток пуповинной крови // Гены и Клетки, 2019. Т. 14, № 3. С. 236-237.Tyumina O.V., Volchkov S.E., Ovchinnikov P.A. Application of cord blood hematopoietic stem cells. Geny i Kletki = Genes and Cells, 2019, Vol. 14, no. 3, pp. 236-237. (In Russ.)Abu-Ghosh A., Goldman S., Slone V., van de Ven C., Suen Y., Murphy L., Sender L., Cairo M. Immunological reconstitution and correlation of circulating serum inflammatory mediators/ cytokines with the incidence of acute graft-versus-host disease during the first 100 days following unrelated umbilical cord blood transplantation. Bone Marrow Transplant., 1999, Vol. 24. pp. 535-544.Abu-Ghosh A., Goldman S., Slone V., van de Ven C., Suen Y., Murphy L., Sender L., Cairo M. Immunological reconstitution and correlation of circulating serum inflammatory mediators/ cytokines with the incidence of acute graft-versus-host disease during the first 100 days following unrelated umbilical cord blood transplantation. Bone Marrow Transplant., 1999, Vol. 24. pp. 535-544.Barker J.N., Wagner J.E. Umbilical-cord blood transplantation for the treatment of cancer. Nat. Rev. Cancer, 2003, Vol. 3, pp. 526-532.Barker J.N., Wagner J.E. Umbilical-cord blood transplantation for the treatment of cancer. Nat. Rev. Cancer, 2003, Vol. 3, pp. 526-532.Biron C.A., Nguyen K.B., Pien G.C., Cousens L.P., Salazar-Mather T.P. Natural killer cells in antiviral defense: function and regulation by innate cytokines. Annu. Rev. Immunol., 1999, Vol. 17, pp. 189-220.Biron C.A., Nguyen K.B., Pien G.C., Cousens L.P., Salazar-Mather T.P. Natural killer cells in antiviral defense: function and regulation by innate cytokines. Annu. Rev. Immunol., 1999, Vol. 17, pp. 189-220.Dalle J.H., Menezes J., Wagner E., Blagdon M., Champagne J., Champagne M.A., Duval M. Characterization of cord blood natural killer cells: implications for transplantation and neonatal infections. Pediatr. Res., 2005, Vol. 57, pp. 649-655.Dalle J.H., Menezes J., Wagner E., Blagdon M., Champagne J., Champagne M.A., Duval M. Characterization of cord blood natural killer cells: implications for transplantation and neonatal infections. Pediatr. Res., 2005, Vol. 57, pp. 649-655.Damele L., Spaggiari G.M., Parodi M., Mingari M.C., Vitale M., Vitale C. Cord blood-derived natural killer cell exploitation in immunotherapy protocols: more than a promise? Cancers, 2022, Vol. 14, 4439. doi: 10.3390/cancers14184439.Damele L., Spaggiari G.M., Parodi M., Mingari M.C., Vitale M., Vitale C. Cord blood-derived natural killer cell exploitation in immunotherapy protocols: more than a promise? Cancers, 2022, Vol. 14, 4439. doi: 10.3390/cancers14184439.Eapen M., Rubinstein P., Zhang M.-J., Stevens C., Kurtzberg J., Scaradavou A., Loberiza F.R., Champlin R.E., Klein J.P., Horowitz M.M., Wagner J.E. Outcomes of transplantation of unrelated donor umbilical cord blood and bone marrow in children with acute leukaemia: a comparison study. Lancet, 2007, Vol. 369, pp. 1947-1954.Eapen M., Rubinstein P., Zhang M.-J., Stevens C., Kurtzberg J., Scaradavou A., Loberiza F.R., Champlin R.E., Klein J.P., Horowitz M.M., Wagner J.E. Outcomes of transplantation of unrelated donor umbilical cord blood and bone marrow in children with acute leukaemia: a comparison study. Lancet, 2007, Vol. 369, pp. 1947-1954.Escobedo-Cousin M., Jackson N., Laza-Briviesca R., Ariza-McNaughton L., Luevano M., Derniame S., Querol S., Blundell M., Thrasher A., Soria B., Cooper N., Bonnet D., Madrigal A., Saudemont A. Natural killer cells improve hematopoietic stem cell engraftment by increasing stem cell clonogenicity in vitro and in a humanized mouse model. PLoS One, 2015, Vol. 10, e0138623. doi: 10.1371/journal.pone.0138623.Escobedo-Cousin M., Jackson N., Laza-Briviesca R., Ariza-McNaughton L., Luevano M., Derniame S., Querol S., Blundell M., Thrasher A., Soria B., Cooper N., Bonnet D., Madrigal A., Saudemont A. Natural killer cells improve hematopoietic stem cell engraftment by increasing stem cell clonogenicity in vitro and in a humanized mouse model. PLoS One, 2015, Vol. 10, e0138623. doi: 10.1371/journal.pone.0138623.Verneris M.R., Mille J.S. The phenotypic and functional characteristics of umbilical cord blood and peripheral blood natural killer cell. Br. J. Haematol., 2009, Vol. 147, no. 2, pp. 185-191.Verneris M.R., Mille J.S. The phenotypic and functional characteristics of umbilical cord blood and peripheral blood natural killer cell. Br. J. Haematol., 2009, Vol. 147, no. 2, pp. 185-191.

The authors declare that there are no conflicts of interest present.