Годовалов Анатолий Петрович – кандидат медицинских наук, ведущий научный сотрудник ЦНИЛ
614990, г. Пермь, ул. Петропавловская, 26
Anatoliy P. Godovalov, PhD (Medicine), Leading Research Associate, Central Research Laboratory
26 Petropavlovskaya St Perm 614990
Морозов Илья Андреевич – соискатель
Пермь
PhD Student
Perm
Как известно, полиамины бактериального происхождения, к которым относятся кадаверин и путресцин, способны разносторонне влиять на активность иммунокомпетентных клеток. В частности, такая ситуация наблюдается при длительно текущих воспалительных заболеваниях, особенно при интенсивном размножении микроорганизмов, способных к продукции полиаминов. Представляет интерес изучение продукции одного из основных противовоспалительных цитокинов – IL-10 – под влиянием бактериальных полиаминов. Для проведения исследований из периферической крови практически здоровых доноров путем градиентного центрифугирования выделяли популяцию мононуклеарных лейкоцитов. Клеточную суспензию помещали в круглодонный планшет с предварительно внесенными полиаминами в концентрациях 5, 25, 50, 75, 100 ммоль/л. В качестве контроля использовали лунки не содержащие полиаминов, по окончании инкубации в течение 72 ч при 37 °С и 5% СО2 супернатанты стягивали и использовали для определения концентрации IL-10. В работе использовали набор для определения концентрации IL-10 с помощью иммуноферментного метода (Россия). Статистический анализ проводили с помощью программного пакета Statistica 6.0. В случае распределения приближенного к нормальному использовали критерий Стьюдента, в остальных – применяли критерий Манна–Уитни для оценки значимости различий. В ходе проведения исследований показано, что лейкоциты в присутствии конканавалина А продуцируют IL-10 в концентрации 17,13±6,08 пг/мл. Установлено, что под влиянием полиаминов бактериального происхождения продукция IL-10 усиливается только если путресцин и кадаверин в концентрациях 50 ммоль/л и выше. При низких концентрациях полиаминов значимого увеличения продукции IL-10 не выявлено. Поскольку IL-10 является противовоспалительным цитокином, для которого известен в том числе и противоболевой эффект, следует ожидать, что при увеличении его концентрации в очаге инвазии условно патогенных бактерий воспалительный процесс будет развиваться латентно, когда симптомы слабо выражены. В целом можно ожидать, что бактерии-продуценты полиаминов будут способствовать поддержанию малосимптомного воспаления.
As is known, bacterial polyamines, which include cadaverine and putrescine, are capable of influencing the activity of immunocompetent cells in many ways. In particular, this situation is observed in long-term inflammatory diseases, especially with intensive reproduction of microorganisms capable of producing polyamines. It is of interest to study the production of one of the main anti-inflammatory cytokines, IL-10, under the influence of bacterial polyamines. For research, a population of mononuclear leukocytes was isolated from the peripheral blood of healthy donors by gradient centrifugation. The cell suspension was placed in a round-bottomed plates with preliminarily added polyamines at concentrations of 5, 25, 50, 75, and 100 mmol/L. Wells not containing polyamines were used as a control. After incubation for 72 h at 37 °C and 5% CO2, the supernatants were harvested and used to determine the concentration of IL-10. We used a kit for determining the concentration of IL-10 using the enzyme immunoassay method (Russia). Statistical analysis was performed using the Statistica 6.0 software package. In the case of a distribution close to normal, Student’s t-test was used; in the rest, the Mann–Whitney test was used to assess the significance of differences. Studies have shown that leukocytes in the presence of concanavalin A produce IL-10 at a concentration of 17.13±6.08 pg/mL. It has been established that under the influence of polyamines of bacterial origin, the production of IL-10 is enhanced only if putrescine and cadaverine are at concentrations of 50 mmol/L and higher. At low concentrations of polyamines, no significant increase in IL-10 production was detected. Since IL-10 is an anti- inflammatory cytokine, for which the analgesic effect is also known, it should be expected that with an increase in its concentration in the focus of invasion of opportunistic bacteria, the inflammatory process will develop latently, when the symptoms are mild. In general, it can be expected that polyamine-producing bacteria will contribute to the maintenance of few symptomatic inflammation.
The authors declare that there are no conflicts of interest present.