К.м.н., старший научный сотрудник клинико-биохимической лаборатории, Научно-исследовательский институт клинической и экспериментальной ревматологии имени А.Б. Зборовского; доцент кафедры клинической лабораторной диагностики, Волгоградский государственный медицинский университет
Адрес для переписки:Бедина Светлана Александровна –ФГБНУ «Научно-исследовательский институт клинической и экспериментальной ревматологии имени А.Б. Зборовского»400138, Россия, г. Волгоград, ул. им. Землячки, 76. Тел.: 8 (8442) 78-90-95.
PhD (Medicine), Senior Research Associate, Department of Clinical Biochemistry, A.B. Zborovsky Research Institute of Clinical and Experimental Rheumatology; Associate Professor, Department of Clinical and Laboratory Diagnostics Volgograd State Medical University
Address for correspondence:Bedina Svetlana A. –A. Zborovsky Research Instituteof Clinical and Experimental Rheumatology 76 Zemlyachki StVolgograd 400138 Russian Federation Phone: +7 (8442) 78-90-95.
К.м.н., ведущий научный сотрудник клинико-биохимической лаборатории
г. Волгоград
PhD (Medicine), Leading Research Associate, Department of Clinical Biochemistry
Volgograd
К.м.н., заведующий клинико-биохимической лабораторией
г. Волгоград
PhD (Medicine), Head of Department, Department of Clinical Biochemistry
Volgograd
Младший научный сотрудник клинико-биохимической лаборатории
г. Волгоград
Junior Research Associate, Department of Clinical Biochemistry
Volgograd
Младший научный сотрудник клинико-биохимической лаборатории
г. Волгоград
Junior Research Associate, Department of Clinical Biochemistry
Volgograd
Сходство клинических проявлений и некоторых патогенетических механизмов при ревматоидном артрите (РА) и остеоартрите (ОА) вызывает определенный интерес в изучении особенностей образования внеклеточных ловушек нейтрофилов (NETs) при данных заболеваниях костномышечной системы.Цель – оценить образование внеклеточных ловушек циркулирующими периферическими нейтрофилами в зависимости от аутоиммунного воспаления при РА и реактивного воспаления при ОА.Основную группу составили 39 больных РА, контрольную – 35 больных ОА, референтную – 33 условно здоровых лица. Нейтрофилы выделяли одноэтапным центрифугированием в ступенчатом градиенте йогексола. Стимулировали генерацию NETs форбол-12-миристат-13-ацетата (ФМА). Визуализация NETs осуществлялась методом флуоресцентной микроскопии.У больных РА при включении в исследование активность по шкале DAS28 была ≤ 2,6 балла; больные ОА были вне обострения. В ходе динамического наблюдения у 17 больных РА выявлено повышение DAS28 > 3,2 балла, у 25 больных ОА – обострение. Средняя доля NETs спонтанных и индуцированных в референтной группе составила 3,8 (2,6-5,0) % и 12,2 (9,0-15,4) % соответственно; у больных с неактивным РА – 5,9 (5,6-6,2) % и 26 (23,9-28,1) %, активным РА – 16,6 (16,1-17,1) % и 38,0 (36,6-39,4)% соответственно; при ОА вне обострения: 5,4 (5,2-5,6) % и 20,3 (18,3-22,3) %, при обострении ОА с развитием синовита: 13,1 (12,6-18,1) % и 28,3 (6,4-30,2) % соответственно. Прирост спонтанных NETs при активации РА – 181,4%, индуцированных – 46,2%; а при обострении ОА – 142,6% и – 39,4% соответственно. Темп прироста спонтанного образования NETs оказался выше индуцированного в 3,9 у больных РА и в 3,6 раза при ОА. Прирост спонтанных NETs относительно индуцированных выражен в большей степени при активном РА по сравнению с ОА с синовитом. Основное различие в составе NETs у больных активным РА (в 88% случаев) и ОА с синовитом (в 50% случаев) обусловлено содержанием цитруллиновых эпитопов (р = 0,03).Переход РА из состояния ремиссии к активному воспалению и обострение ОА сопровождаются значительным приростом образования NETs, особенно спонтанного. При этом степень роста была выше при РА, что, по-видимому, свидетельствует о большей заинтересованности нейтрофилов в генерации NETs при аутоиммунном воспалении по сравнению с реактивным. Преобладание цитруллинированных эпитопов в составе NETs демонстрирует их влиянии на индукцию и поддержание аутоиммунной реакции к специфическим для РА аутоантигенам.
The similarity of clinical manifestations and some pathogenetic mechanisms in rheumatoid arthritis (RA) and osteoarthritis (OA) is of particular interest in studying the features of extracellular neutrophil traps (NETs) formation in these musculoskeletal diseases. Our objective was to evaluate circulating neutrophil extracellular trap formation related to autoimmune inflammation in RA and reactive inflammation in OA.39 RA patients comprised the main group; 35 OA patients, control group; 33 healthy individuals were included into the reference group. Circulating neutrophils were isolated by the one-step centrifugation in double layer of iohexol density gradient. NETs were induced by phorbol-12-myristate-13–acetate (PMA) being visualized by fluorescence microscopy.The RA disease activity at the inclusion period should not exceed 2.6 DAS28 points. ОA patients were in clinical remission at the inclusion timepoint. In 17 RA patients, an increase in DAS28 exceeded 3.2 points; in 25 OA patients, an exacerbation was diagnosed during the study. The mean percentage of spontaneous and induced NETs in reference group was 3.8% (2.6-5.0) and 12.2% (9.0-15.4), respectively. Appropriate values for the patients with inactive RA were 5.9% (5.6-6.2) and 26% (23.9-28.1); 16.6% (16.1-17.1) and 38.0% (36.6-39.4) in active RA cases, respectively; 5.4% (5.2-5.6) and 20.3% (18.3-22.3) in OA without synovitis; 13.1% (12.6-18.1) and 28.3% (6. 4-30.2) in OA with synovitis, respectively. Spontaneous increase of NETs during RA activation was 181.4%; induced increase in NETs was 46.2%; and in cases of OA exacerbation these values were 142.6% and 39.4%, respectively. In RA patients, the rates of spontaneous NETs formation were 3.9 times higher than for induced values. Appropriate index was 3.6 times higher among the OA patients. The increase in spontaneous -to-induced NETs formation was more pronounced in active RA than in OA with synovitis. The main difference in NETs composition for active RA patients (in 88% of cases) and OA synovitis (in 50% of cases) is related to the contents of citrulline epitopes (p = 0.03).Transition of RA from the remission state to active inflammation, as well as OA exacerbation are accompanied by a significant increase in NETs, especially, spontaneous formation. The degree of increase in RA was higher than in OA, thus, probably, indicating higher involvement of neutrophils in generation of NETs during autoimmune inflammation rather than in reactive inflammation. A sufficient role of citrullinated epitopes in NETs demonstrates their influence upon induction and maintenance of autoimmune response to RA-specific autoantigens.
The authors declare that there are no conflicts of interest present.