mimmunМедицинская иммунологияMedical Immunology (Russia)1563-06252313-741XSPb RAACI10.15789/1563-0625-DOB-2609mimmun-2609Research ArticleКРАТКИЕ СООБЩЕНИЯSHORT COMMUNICATIONSФормирование В-клеточного ответа при иммунизации инактивированными гриппозными вакцинами «Гриппол плюс», «Совигрипп» и «Ультрикс»Development of B-cell response during immunization with inactivated influenza vaccines "Grippol plus", "Sovigripp" and "Ultrix"ШурыгинаА.-П. С.ShuryginaA.-P. S.

Шурыгина Анна-Полина Сергеевна  – к.м.н., старший научный сотрудник лаборатории векторных вакцин 

Санкт-Петербург

 

Shurygina Anna-Polina Sergeevna, PhD (Medicine), Senior Research Associate, Laboratory of Vectored Vaccines

St. Petersburg

anna.shurygina@influenza.spb.ruВасильевК. А.VasilyevK. A.

Васильев Кирилл Александрович – к.б.н., научный сотрудник лаборатории векторных вакцин 

Санкт-Петербург

Vasiliev Kirill Alexandrovich, PhD (Biology), Research Associate, Laboratory of Vectored Vaccines

St. Petersburg

kirill.vasilev75512@gmail.comВарюшинаЕ. А.VaryushinaE. A.

Варюшина Елена Анатольевна – д.б.н., ведущий специалист в области лабораторных исследований лаборатории векторных вакцин

Адрес для переписки: Варюшина Елена АнатольевнаФГБУ «Научно-исследовательский институт гриппа имени А.А. Смородинцева» Министерства здравоохранения РФ197376, Россия, Санкт-Петербург, ул. Профессора Попова, 15/17.Тел.: 8 (906) 244-95-19.

Varyushina Elena Anatolevna, PhD, MD (Biology), Leading Specialist in Laboratory Studies, Laboratory of Vectored Vaccines 

Address for correspondence:Elena A. Varyushina –A. Smorodintsev Research Institute of Influenza 15/17 Prof. Popov StSt. Petersburg197376 Russian FederationPhone: +7 (906) 244-95-19.

elena.varyushina@influenza.spb.ruЛадыгинаМ. Д.LadyginaM. D.

Ладыгина Мария Дмитриевна – ведущий специалист в области лабораторных исследований лаборатории векторных вакцин 

Санкт-Петербург

Ladygina Maria Dmitrievna, Leading Specialist in Laboratory Studies, Laboratory of Vectored Vaccines

St. Petersburg

mariia.ladygina@influenza.spb.ruЗубковаТ. Г.ZubkovaT. G.

Зубкова Татьяна Геннадьевна – к.м.н., заведующая клиническим отделением 

Санкт-Петербург

Zubkova Tatiana Gennadevna, PhD (Medicine), Head of the Clinical Department

St. Petersburg

tatiana.zubkova@influenza.spb.ruБузицкаяЖ. В.BuzitskayaZh. V.

Бузицкая Жанна Валерьевна – к.б.н., ведущий научный сотрудник лаборатории векторных вакцин 

Санкт-Петербург

Buzitskaya Zhanna Valerevna, PhD (Biology), Leading Research Associate, Laboratory of Vectored Vaccines

St. Petersburg

janna.buzitskaya@influenza.spb.ruСтуковаМ. А.StukovaM. A.

Стукова Марина Анатольевна – к.м.н., заведующая лабораторией векторных вакцин абораторией 

Stukova Marina Anatolevna, PhD (Medicine), Head, Laboratory of Vectored Vaccines

St. Petersburg

marina.stukova@influenza.spb.ruЛиозновД. А.LioznovD. A.

Лиознов Дмитрий Анатольевич – д.м.н., профессор, директор  института 

Санкт-Петербург

Lioznov Dmitry Anatolevich, PhD, MD (Medicine), Professor, Director

St. Petersburg

office@influenza.spb.ruФГБУ «Научно-исследовательский институт гриппа имени А.А. Смородинцева» Министерства здравоохранения РФРоссияA. Smorodintsev Research Institute of InfluenzaRussian Federation202420092023261191202Copyright © Шурыгина А.С., Васильев К.А., Варюшина Е.А., Ладыгина М.Д., Зубкова Т.Г., Бузицкая Ж.В., Стукова М.А., Лиознов Д.А., 20242024Шурыгина А.С., Васильев К.А., Варюшина Е.А., Ладыгина М.Д., Зубкова Т.Г., Бузицкая Ж.В., Стукова М.А., Лиознов Д.А.Shurygina A.S., Vasilyev K.A., Varyushina E.A., Ladygina M.D., Zubkova T.G., Buzitskaya Z.V., Stukova M.A., Lioznov D.A.Данная работа распространяется под лицензией Creative Commons Attribution 4.0.This work is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 License.https://www.mimmun.ru/mimmun/article/view/2609

Во всем мире циркулирующие вирусы гриппа ежегодно приводят к серьезным медицинским и социально-экономическим последствиям. Вакцинация является наиболее эффективной и безопасной стратегией предотвращения гриппа и его осложнений. В целях снижения побочных эффектов при использовании живых вирусов широкое применение находят расщепленные и субъединичные гриппозные вакцины. Особенности формирования В-клеточного ответа на фоне иммунизации гриппозными вакцинами до настоящего времени остаются недостаточно изученными. В связи с этим, целью нашего исследования является изучение динамики субпопуляционного состава В-лимфоцитов периферической крови при иммунизации различными типами вакцин «Гриппол плюс», «Совигрипп» и «Ультрикс». Исследование проведено на базе клинического отделения ФГБУ «НИИ гриппа им. А.А. Смородинцева» Минздрава России в эпидемический по гриппу сезон 2018-2019 гг. Образцы венозной крови были получены у 39 добровольцев до вакцинации, на 7-е и 21-е сутки после вакцинации. Субпопуляционный состав В-лимфоцитов оценивали методом проточной цитометрии с применением панели флюоресцентно-меченных антител к CD3, CD19, CD20, CD27, CD38, IgD, IgA (BioLegend, США). Для анализа использовали образцы криоконсервированных мононуклеаров с концентрацией 1 × 106 клеток/образец. Обработку результатов проводили с помощью штатного программного обеспечения (Н., Cytexpert, Beckman Coulter, Inc., США) и дополнительного ПО Kaluza 2.0 software (Beckman Coulter, Inc., США). При статистическом анализе различия с данными до вакцинации оценивали с использованием U-теста Манна–Уитни и считали достоверными при p < 0,05.

В результате проведенных исследований были выявлены следующие популяции В-лимфоцитов (CD3-CD19+): наивные В-клетки (CD20+CD27-IgD+), непереключенные В-клетки памяти (CD20+CD27+IgD+), переключенные В-клетки памяти (CD20+CD27+IgD-), эффекторные В-клетки памяти (CD20+CD27-IgD-), плазмобласты (CD20-CD38hiCD27hi). Активацию В-клеточного иммунного ответа оценивали путем измерения относительного содержания CD38+B-клеток, относящихся к популяциям наивных, эффекторных В-лимфоцитов, переключенных и непереключенных В-клеток памяти. При анализе В-клеточного ответа после иммунизации исследуемыми вакцинами было выявлено увеличение как общего числа В-лимфоцитов, так и отдельных популяций, в том числе плазмобластов и активированных переключенных В-клеток памяти. Для адьювантных вакцин «Гриппол плюс» и «Совигрипп» по сравнению с расщепленной вакциной «Ультрикс» было показано раннее увеличение относительного количества плазмобластов на 7-й день исследования. При этом все три вакцины в одинаковой мере способствовали повышению числа активированных В-клеток памяти с переключенным изотипом антител. Таким образом, оценка В-клеточного ответа выявила значительные изменения в субпопуляционном составе В-лимфоцитов периферической крови в ответ на вакцинацию «Гриппол плюс», «Совигрипп» или «Ультрикс».

The worldwide circulating influenza viruses annually lead to serious medical and socio-economic consequences. It is generally recognized that vaccination is the most effective and safe strategy for preventing influenza and its complications. In order to reduce side effects when using live viruses, split and subunit influenza vaccines are widely used. To date, the characteristics of B cell response after immunization with influenza vaccines remain insufficiently studied. The aim of our study was to compare the effects of immunization with different influenza vaccines, i.e., “Sovigripp”, “Grippol plus” and “Ultrix”, on the B cell response. The study was conducted on the base of Clinical Department at the A.Smorodintsev Influenza Research Institute during the epidemic flu season of 2018-2019. For clinical studies, venous blood samples were obtained from 39 volunteers before vaccination, on the 7th and 21st days after vaccination. The subpopulations of B cells were analyzed by flow cytometry using fluorescently labeled antibodies to CD3, CD19, CD20, CD27, CD38, IgD, IgA surface antigens (BioLegend, USA). Cryopreserved mononuclear cells (1 × 106 cells/sample) were used for analysis. The processing of flow cytometry data was carried out with special software (H., Cytexpert, Beckman Coulter, Inc., USA) and Kaluza 2.0 (Beckman Coulter, Inc., USA). The differences with pre-vaccination data were evaluated using the Mann–Whitney U-test and being considered significant at p < 0.05. As a result of the studies, the following subpopulations of B lymphocytes (CD3-CD19+) were specified: naive B cells (CD20+CD27-IgD+), non-switched memory B cells (CD20+CD27+IgD+), switched memory B cells (CD20+CD27+IgD-), effector memory B cells (CD20+CD27-IgD-), plasmablasts (CD20-CD38hiCD27hi). Activation of the B cell immune response was assessed by measuring the relative content of CD38+B cells belonging to subpopulations of naive, effector B lymphocytes, switched and non-switched memory B cells. The analysis of B cell response showed an increase in both the total number of B lymphocytes and their subpopulations including plasmablasts and activated switched memory B cells after immunization. With adjuvant vaccines “Grippol plus” and “Sovigripp”, as compared with the split “Ultrix” vaccine, an early increase in relative counts of plasmablasts was shown on the 7th day of the study. At the same time, all three vaccines equally contributed to an increase in the number of activated memory B cells with a switched antibody isotype. Thus, the assessment of B cell response revealed significant changes in contents of peripheral blood B cell subpopulations in response to vaccination with “Grippol plus”, “Sovigripp”, or “Ultrix”.

противогриппозные вакциныВ-лимфоцитыпроточная цитометрияплазмобластыВ-клетки памятивирус гриппаinfluenza vaccinesB-lymphocytesflow cytometryplasmablastsmemory B cellsinfluenza virusРабота выполнена в рамках государственного задания Министерства здравоохранения Российской Федерации по теме «Оценка напряженности коллективного иммунитета и эпидемиологической эффективности гриппозных вакцин в Российской Федерации» 2019-2021 гг.ReferencesЛиознов Д. А., Харит С. М., Ерофеева М. К., Зубкова Т.Г., Горчакова О.В., Николаенко С.Л.. Оценка реактогенности и иммуногенности вакцины гриппозной четырехвалентной инактивированной субъединичной // Эпидемиология и Вакцинопрофилактика, 2018, Т. 17, №3, С. 57–62.Lioznov D.A., Kharit S.M., Erofeeva M.K., Zubkova T.G., Gorchakova O.V., Nikolaenko S.L. Assessment of reactogenicity and immunogenicity of the quadrivalent live attenuated influenza vaccine. Epidemiologiya i Vaktsinoprofilaktika = Epidemiology and Vaccinal Prevention, 2018, Vol. 17, no. 3, pp. 57-62. (In Russ.)Никифорова А.Н., Исакова-Сивак И.Н., Ерофеева М.К., Фельдблюм И.В., Руденко Л.Г. Результаты изучения безопасности и иммуногенности отечественной субъединичной адъювантной вакцины Совигрипп у добровольцев 18 – 60 лет // Эпидемиология и вакцинопрофилактика, 2014, №2 (75), С. 72-78.Nikiforova A.N., Isakova-Sivak I.N., Erofeeva M.K., Feldblyum I.V., Rudenko L.G. The results of the study of the safety and immunogenicity of the domestic subunit adjuvant vaccine “Sovigripp” in volunteers aged 18-60 years. Epidemiologiya i Vaktsinoprofilaktika = Epidemiology and Vaccinal Prevention, 2014, no. 2 (75), pp. 72-78. (In Russ.)Селькова Е.П., Гренкова Т.А., Алешкин В.А., Гудова Н.В., Лыткина И.Н., Михайлова Е.В., Яшина А.Я., Федякина И.Т. Изучение иммуногенности, эффективности и переносимости отечественной вакцины «Ультрикс®» среди лиц повышенного риска инфицирования и заболеваемости гриппом и острыми респираторными вирусными инфекциями // Эпидемиология и инфекционные болезни. Актуальные вопросы, 2016. №4, С.59-66.Selkova E.P., Grenkova T.A., Aleshkin V.A., Gudova N.V., Lytkina I.N., Mikhailova E.V., Yashina A.Ya., Fedyakina I.T. The study of the immunogenicity, efficacy and tolerability of the domestic vaccine “Ultrix®”among people at increased risk of infection and morbidity with influenza and acute respiratory viral infections. Epidemiologia i infektsionnye bolezni. Aktualnye voprosy = Epidemiology and Infectious Diseases. Current Issues, 2016, no. 4, pp. 59-66. (In Russ.)Cossarizza A., Chang H.-D., Radbruch A., Acs A., Adam D., Adam-Klages S., Agace W.W., AghaeepourN., Akdis M., Allez M., Almeida L.N., Alvisi G., Anderson G., Andrä I., Annunziato F., Anselmo A., Bacher P., Baldari C.T., Bari S., Barnaba V., Barros-Martins J., Battistini L., Bauer W., Baumgart S., Baumgarth N., Baumjohann D., Baying B., Bebawy M., Becher B., Beisker W., Benes V., Beyaert R., Blanco A., Boardman D.A., Bogdan C., Borger J.G., Borsellino G., Boulais P.E., Bradford J.A., Brenner D., Brinkman R.R., Brooks A.E.S., Busch D.H., Büscher M., Bushnell T.P., Calzetti F., Cameron G., Cammarata I., Cao X., Cardell S.L., Casola S., Cassatella M.A., Cavani A., Celada A., Chatenoud L., Chattopadhyay P.K., Chow S., Christakou E., Čičin-Šain L., Clerici M., Colombo F.S., Cook L., Cooke A., Cooper A.M., Corbett A.J., Cosma A., Cosmi L., Coulie P.G., Cumano A., Cvetkovic L., Dang V.D., Dang-Heine C., Davey M.S., Davies D., de Biasi S., del Zotto G., dela Cruz G.V., Delacher M., Bella S.D., Dellabona P., Deniz G., Dessing M., di Santo J.P., Diefenbach A., Dieli F., Dolf A., Dörner T., Dress R.J., Dudziak D., Dustin M., Dutertre C. A., Ebner F., Eckle S.B.G., Edinger M., Eede P., Ehrhardt G.R.A., Eich M., Engel P., Engelhardt B., Erdei A., Esser C., Everts B., Evrard M., Falk C.S., Fehniger T.A., Felipo-Benavent M., Ferry H., Feuerer M., Filby A., Filkor K., Fillatreau S., Follo M., Förster I., Foster J., Foulds G.A., Frehse B., Frenette P.S., Frischbutter S., Fritzsche W., Galbraith D.W., Gangaev A., Garbi N., Gaudilliere B., Gazzinelli R.T., Geginat J., Gerner W., Gherardin N.A., Ghoreschi K., Gibellini L., Ginhoux F., Goda K., Godfrey D.I., Goettlinger C., González-Navajas J.M., Goodyear C.S., Gori A., Grogan J.L., Grummitt D., Grützkau A., Haftmann C., Hahn J., Hammad H., Hämmerling G., Hansmann L., Hansson G., Harpur C.M., Hartmann S., Hauser A., Hauser A.E., Haviland D.L., Hedley D., Hernández D.C., Herrera G., Herrmann M., Hess C., Höfer T., Hoffmann P., Hogquist K., Holland T., Höllt T., Holmdahl R., Hombrink P., Houston J.P., Hoyer B.F., Huang B., Huang F.-P., Huber J.E., Huehn J., Hundemer M., Hunter C.A., Hwang W.Y.K., Iannone A., Ingelfinger F., Ivison S.M., Jäck H.-M., Jani P.K., Jávega B., Jonjic S., Kaiser T., Kalina T., Kamradt T., Kaufmann S.H.E., Keller B., Ketelaars S.L.C., Khalilnezhad A., Khan S., Kisielow J., Klenerman P., Knopf J., Koay H.-F., Kobow K., Kolls J.K., Kong W.T., Kopf M., Korn T., Kriegsmann K., Kristyanto H., Kroneis T., Krueger A., Kühne J., Kukat C., Kunkel D., Kunze-Schumacher H., Kurosaki T., Kurts C., Kvistborg P., Kwok I., Landry J., Lantz O., Lanuti P., LaRosa F., Lehuen A., LeibundGutLandmann S., Leipold M.D., Leung L.Y.T., Levings M.K., Lino A.C., Liotta F., Litwin V., Liu Y., Ljunggren H. G., Lohoff M., Lombardi G., Lopez L., López-Botet M., Lovett-Racke A.E., Lubberts E., Luche H., Ludewig B., Lugli E., Lunemann S., Maecker H.T., Maggi L., Maguire O., Mair F., Mair K.H., Mantovani A., Manz R.A., Marshall A.J., Martínez-Romero A., Martrus G., Marventano I., Maslinski W., Matarese G., Mattioli A.V., Maueröder C., Mazzoni A., McCluskey J., McGrath M., McGuire H.M., McInnes I.B., Mei H.E., Melchers F., Melzer S., Mielenz D., Miller S.D., Mills K.H.G., Minderman H., MjösbergJ., Moore J., Moran B., Moretta L., Mosmann T.R., Müller S., Multhoff G., Muñoz L.E., Münz C., Nakayama T., Nasi M., Neumann K., Ng L.G., Niedobitek A., Nourshargh S., Núñez G., O'Connor J. E., Ochel A., Oja A., Ordonez D., Orfao A., Orlowski-Oliver E., Ouyang W., Oxenius A., Palankar R., Panse I., Pattanapanyasat K., Paulsen M., Pavlinic D., Penter L., Peterson P., Peth C., Petriz J., Piancone F., Pickl W.F., Piconese S., Pinti M., Pockley A.G., Podolska M.J., Poon Z., Pracht K., Prinz I., Pucillo C.E.M., Quataert S.A., Quatrini L., Quinn K.M., Radbruch H., Radstake T.R.D.J., Rahmig S., Rahn H. P., Rajwa B., Ravichandran G., Raz Y., Rebhahn J.A., Recktenwald D., Reimer D., Sousa C.R., Remmerswaal E.B.M., Richter L., Rico L.G., Riddell A., Rieger A.M., Robinson J.P., Romagnani C., Rubartelli A., Ruland J., Saalmüller A., Saeys Y., Saito T., Sakaguchi S., Sala-de-Oyanguren F., Samstag Y., Sanderson S., Sandrock I., Santoni A., Sanz R.B., Saresella M., Sautes-Fridman C., Sawitzki B., Schadt L., Scheffold A., Scherer H.U., Schiemann M., Schildberg F.A., Schimisky E., Schlitzer A., Schlosser J., Schmid S., Schmitt S., Schober K., Schraivogel D., Schuh W., Schüler T., Schulte R., Schulz A.R., Schulz S.R., Scottá C., Scott-Algara D., Sester D.P., Shankey T.V., Silva-Santos B., Simon A.K., Sitnik K.M., Sozzani S., Speiser D.E., Spidlen J., Stahlberg A., Stall A.M., Stanley N., Stark R., Stehle C., Steinmetz T., Stockinger H., Takahama Y., Takeda K., Tan L., Tárnok A., Tiegs G., Toldi G., Tornack J., Traggiai E., Trebak M., Tree T.I.M., Trotter J., Trowsdale J., Tsoumakidou M., Ulrich H., Urbanczyk S., van de Veen W., van den Broek M., van der Pol E., van Gassen S., van Isterdael G., van Lier R.A.W., Veldhoen M., Vento-Asturias S., Vieira P., Voehringer D., Volk H.-D., von Borstel A., von Volkmann K., Waisman A., Walker R.V., Wallace P.K., Wang S.A., Wang X.M., Ward M.D., Ward-Hartstonge K.A., Warnatz K., Warnes G., Warth S., Waskow C., Watson J.V., Watzl C., Wegener L., Weisenburger T., Wiedemann A., Wienands J., Wilharm A., Wilkinson R.J., Willimsky G., Wing J.B., Winkelmann R., Winkler T.H., Wirz O.F., Wong A., Wurst P., Yang J.H.M., Yang J., Yazdanbakhsh M., Yu L., Yue A., Zhang H., Zhao Y., Ziegler S.M., Zielinski C., Zimmermann J., Zychlinsky A. Guidelines for the use of flow cytometry and cell sorting in immunological studies (second edition). Eur. J. Immunol., 2019, Vol. 49, no. 10, pp. 1457-1973.Cossarizza A., Chang H.-D., Radbruch A., Acs A., Adam D., Adam-Klages S., Agace W.W., AghaeepourN., Akdis M., Allez M., Almeida L.N., Alvisi G., Anderson G., Andrä I., Annunziato F., Anselmo A., Bacher P., Baldari C.T., Bari S., Barnaba V., Barros-Martins J., Battistini L., Bauer W., Baumgart S., Baumgarth N., Baumjohann D., Baying B., Bebawy M., Becher B., Beisker W., Benes V., Beyaert R., Blanco A., Boardman D.A., Bogdan C., Borger J.G., Borsellino G., Boulais P.E., Bradford J.A., Brenner D., Brinkman R.R., Brooks A.E.S., Busch D.H., Büscher M., Bushnell T.P., Calzetti F., Cameron G., Cammarata I., Cao X., Cardell S.L., Casola S., Cassatella M.A., Cavani A., Celada A., Chatenoud L., Chattopadhyay P.K., Chow S., Christakou E., Čičin-Šain L., Clerici M., Colombo F.S., Cook L., Cooke A., Cooper A.M., Corbett A.J., Cosma A., Cosmi L., Coulie P.G., Cumano A., Cvetkovic L., Dang V.D., Dang-Heine C., Davey M.S., Davies D., de Biasi S., del Zotto G., dela Cruz G.V., Delacher M., Bella S.D., Dellabona P., Deniz G., Dessing M., di Santo J.P., Diefenbach A., Dieli F., Dolf A., Dörner T., Dress R.J., Dudziak D., Dustin M., Dutertre C. A., Ebner F., Eckle S.B.G., Edinger M., Eede P., Ehrhardt G.R.A., Eich M., Engel P., Engelhardt B., Erdei A., Esser C., Everts B., Evrard M., Falk C.S., Fehniger T.A., Felipo-Benavent M., Ferry H., Feuerer M., Filby A., Filkor K., Fillatreau S., Follo M., Förster I., Foster J., Foulds G.A., Frehse B., Frenette P.S., Frischbutter S., Fritzsche W., Galbraith D.W., Gangaev A., Garbi N., Gaudilliere B., Gazzinelli R.T., Geginat J., Gerner W., Gherardin N.A., Ghoreschi K., Gibellini L., Ginhoux F., Goda K., Godfrey D.I., Goettlinger C., González-Navajas J.M., Goodyear C.S., Gori A., Grogan J.L., Grummitt D., Grützkau A., Haftmann C., Hahn J., Hammad H., Hämmerling G., Hansmann L., Hansson G., Harpur C.M., Hartmann S., Hauser A., Hauser A.E., Haviland D.L., Hedley D., Hernández D.C., Herrera G., Herrmann M., Hess C., Höfer T., Hoffmann P., Hogquist K., Holland T., Höllt T., Holmdahl R., Hombrink P., Houston J.P., Hoyer B.F., Huang B., Huang F.-P., Huber J.E., Huehn J., Hundemer M., Hunter C.A., Hwang W.Y.K., Iannone A., Ingelfinger F., Ivison S.M., Jäck H.-M., Jani P.K., Jávega B., Jonjic S., Kaiser T., Kalina T., Kamradt T., Kaufmann S.H.E., Keller B., Ketelaars S.L.C., Khalilnezhad A., Khan S., Kisielow J., Klenerman P., Knopf J., Koay H.-F., Kobow K., Kolls J.K., Kong W.T., Kopf M., Korn T., Kriegsmann K., Kristyanto H., Kroneis T., Krueger A., Kühne J., Kukat C., Kunkel D., Kunze-Schumacher H., Kurosaki T., Kurts C., Kvistborg P., Kwok I., Landry J., Lantz O., Lanuti P., LaRosa F., Lehuen A., LeibundGutLandmann S., Leipold M.D., Leung L.Y.T., Levings M.K., Lino A.C., Liotta F., Litwin V., Liu Y., Ljunggren H. G., Lohoff M., Lombardi G., Lopez L., López-Botet M., Lovett-Racke A.E., Lubberts E., Luche H., Ludewig B., Lugli E., Lunemann S., Maecker H.T., Maggi L., Maguire O., Mair F., Mair K.H., Mantovani A., Manz R.A., Marshall A.J., Martínez-Romero A., Martrus G., Marventano I., Maslinski W., Matarese G., Mattioli A.V., Maueröder C., Mazzoni A., McCluskey J., McGrath M., McGuire H.M., McInnes I.B., Mei H.E., Melchers F., Melzer S., Mielenz D., Miller S.D., Mills K.H.G., Minderman H., MjösbergJ., Moore J., Moran B., Moretta L., Mosmann T.R., Müller S., Multhoff G., Muñoz L.E., Münz C., Nakayama T., Nasi M., Neumann K., Ng L.G., Niedobitek A., Nourshargh S., Núñez G., O'Connor J. E., Ochel A., Oja A., Ordonez D., Orfao A., Orlowski-Oliver E., Ouyang W., Oxenius A., Palankar R., Panse I., Pattanapanyasat K., Paulsen M., Pavlinic D., Penter L., Peterson P., Peth C., Petriz J., Piancone F., Pickl W.F., Piconese S., Pinti M., Pockley A.G., Podolska M.J., Poon Z., Pracht K., Prinz I., Pucillo C.E.M., Quataert S.A., Quatrini L., Quinn K.M., Radbruch H., Radstake T.R.D.J., Rahmig S., Rahn H. P., Rajwa B., Ravichandran G., Raz Y., Rebhahn J.A., Recktenwald D., Reimer D., Sousa C.R., Remmerswaal E.B.M., Richter L., Rico L.G., Riddell A., Rieger A.M., Robinson J.P., Romagnani C., Rubartelli A., Ruland J., Saalmüller A., Saeys Y., Saito T., Sakaguchi S., Sala-de-Oyanguren F., Samstag Y., Sanderson S., Sandrock I., Santoni A., Sanz R.B., Saresella M., Sautes-Fridman C., Sawitzki B., Schadt L., Scheffold A., Scherer H.U., Schiemann M., Schildberg F.A., Schimisky E., Schlitzer A., Schlosser J., Schmid S., Schmitt S., Schober K., Schraivogel D., Schuh W., Schüler T., Schulte R., Schulz A.R., Schulz S.R., Scottá C., Scott-Algara D., Sester D.P., Shankey T.V., Silva-Santos B., Simon A.K., Sitnik K.M., Sozzani S., Speiser D.E., Spidlen J., Stahlberg A., Stall A.M., Stanley N., Stark R., Stehle C., Steinmetz T., Stockinger H., Takahama Y., Takeda K., Tan L., Tárnok A., Tiegs G., Toldi G., Tornack J., Traggiai E., Trebak M., Tree T.I.M., Trotter J., Trowsdale J., Tsoumakidou M., Ulrich H., Urbanczyk S., van de Veen W., van den Broek M., van der Pol E., van Gassen S., van Isterdael G., van Lier R.A.W., Veldhoen M., Vento-Asturias S., Vieira P., Voehringer D., Volk H.-D., von Borstel A., von Volkmann K., Waisman A., Walker R.V., Wallace P.K., Wang S.A., Wang X.M., Ward M.D., Ward-Hartstonge K.A., Warnatz K., Warnes G., Warth S., Waskow C., Watson J.V., Watzl C., Wegener L., Weisenburger T., Wiedemann A., Wienands J., Wilharm A., Wilkinson R.J., Willimsky G., Wing J.B., Winkelmann R., Winkler T.H., Wirz O.F., Wong A., Wurst P., Yang J.H.M., Yang J., Yazdanbakhsh M., Yu L., Yue A., Zhang H., Zhao Y., Ziegler S.M., Zielinski C., Zimmermann J., Zychlinsky A. Guidelines for the use of flow cytometry and cell sorting in immunological studies (second edition). Eur. J. Immunol., 2019, Vol. 49, no. 10, pp. 1457-1973.Halliley J.L., Kyu S., Kobie J.J., Walsh E.E., Falsey A.R., Randall T.R., Treanor J., Feng C., Sanz I., Lee F.E.-H. Peak frequencies of circulating human influenza specific antibody secreting cells correlate with serum antibody response after immunization. Vaccine, 2010, Vol. 28, no. 20, pp. 3582-3587.Halliley J.L., Kyu S., Kobie J.J., Walsh E.E., Falsey A.R., Randall T.R., Treanor J., Feng C., Sanz I., Lee F.E.-H. Peak frequencies of circulating human influenza specific antibody secreting cells correlate with serum antibody response after immunization. Vaccine, 2010, Vol. 28, no. 20, pp. 3582-3587.Peteranderl C., Herold S., Schmoldt C. Human influenza virus infections. Semin. Respir. Crit. Care Med., 2016, Vol. 37, no. 4, pp. 487-500.Peteranderl C., Herold S., Schmoldt C. Human influenza virus infections. Semin. Respir. Crit. Care Med., 2016, Vol. 37, no. 4, pp. 487-500.Piedra-Quintero Z.L., Wilson Z., Nava P., Guerau-de-Arellano M. CD38: An immunomodulatory molecule in inflammation and autoimmunity. Front. Immunol., 2020, Vol. 11, 597959. doi: 10.3389/fimmu.2020.597959.Piedra-Quintero Z.L., Wilson Z., Nava P., Guerau-de-Arellano M. CD38: An immunomodulatory molecule in inflammation and autoimmunity. Front. Immunol., 2020, Vol. 11, 597959. doi: 10.3389/fimmu.2020.597959.Ruschil C., Gabernet G., Lepennetier G. Heumos S., Kaminski M., Hracsko Z., Irmler M., JBeckers J., Ziemann U., Nahnsen S., Owens G.P., Bennett J.L., Hemmer B., Kowarik M.C. Specific induction of double negative B cells during protective and pathogenic immune responses. Front. Immunol., 2020, Vol. 11, 606338. doi: 10.3389/fimmu.2020.606338.Ruschil C., Gabernet G., Lepennetier G. Heumos S., Kaminski M., Hracsko Z., Irmler M., JBeckers J., Ziemann U., Nahnsen S., Owens G.P., Bennett J.L., Hemmer B., Kowarik M.C. Specific induction of double negative B cells during protective and pathogenic immune responses. Front. Immunol., 2020, Vol. 11, 606338. doi: 10.3389/fimmu.2020.606338.Sanyal M., Holmes T.H., Maecker H.T., Randy A., Albrecht R.A., Dekker C.L., He X.-S., Greenberg H.B. Diminished B-cell response after repeat influenza vaccination. J. Infect. Dis., 2019, Vol. 219, no. 10, pp. 1586-1595.Sanyal M., Holmes T.H., Maecker H.T., Randy A., Albrecht R.A., Dekker C.L., He X.-S., Greenberg H.B. Diminished B-cell response after repeat influenza vaccination. J. Infect. Dis., 2019, Vol. 219, no. 10, pp. 1586-1595.Sanza I., Weia C., Leeb F.E.-H., Anolik J. Phenotypic and functional heterogeneity of human memory B cells. Semin. Immunol., 2008, Vol. 20, no. 1, pp. 67-82.Sanza I., Weia C., Leeb F.E.-H., Anolik J. Phenotypic and functional heterogeneity of human memory B cells. Semin. Immunol., 2008, Vol. 20, no. 1, pp. 67-82.Sasaki S., Jaimes M.C., Holmes T.H., Dekker C.L., Mahmood K., Kemble G.W., Arvin A.M., Greenberg H.B. Comparison of the influenza virus-specific effector and memory B-cell responses to immunization of children and adults with live attenuated or inactivated influenza virus vaccines. J. Virol., 2007, Vol. 81, no. 1 pp. 215-228.Sasaki S., Jaimes M.C., Holmes T.H., Dekker C.L., Mahmood K., Kemble G.W., Arvin A.M., Greenberg H.B. Comparison of the influenza virus-specific effector and memory B-cell responses to immunization of children and adults with live attenuated or inactivated influenza virus vaccines. J. Virol., 2007, Vol. 81, no. 1 pp. 215-228.Sasaki S., Sullivan M., Narvaez C.F., Holmes T.H., Furman D., Zheng N.-Y., Nishtala M., Wrammert J., Smith K., James J.A., Dekker C.L., Davis M.M., Wilson P.C., Greenberg H.B., He X.-S. Limited efficacy of inactivated influenza vaccine in elderly individuals is associated with decreased production of vaccine-specific antibodies. J. Clin. Invest., 2011, Vol. 121, no. 8, pp. 3109-3119.Sasaki S., Sullivan M., Narvaez C.F., Holmes T.H., Furman D., Zheng N.-Y., Nishtala M., Wrammert J., Smith K., James J.A., Dekker C.L., Davis M.M., Wilson P.C., Greenberg H.B., He X.-S. Limited efficacy of inactivated influenza vaccine in elderly individuals is associated with decreased production of vaccine-specific antibodies. J. Clin. Invest., 2011, Vol. 121, no. 8, pp. 3109-3119.Taylor J.J., Jenkins M.K., Pape K. A. Heterogeneity in the differentiation and function of memory B cells. Trends Immunol., 2012, Vol. 33, no. 12, pp. 590-597.Taylor J.J., Jenkins M.K., Pape K. A. Heterogeneity in the differentiation and function of memory B cells. Trends Immunol., 2012, Vol. 33, no. 12, pp. 590-597.Turner J.S., Zhou J.Q., Han J., Schmitz A.J., Rizk A.A., Alsoussi W.B., Lei T., Amor M., McIntire K.M., Meade P., Strohmeier S., Brent R.I., Richey S.T., Haile A., Yang Y.R., Klebert M.K., Suessen T., Teefey S., Presti R.M., Krammer F., Kleinstein S.H., Ward A.B., Ellebedy A.H. Human germinal centers engage memory and naïve B cells after influenza vaccination. Nature, 2020, Vol. 586, no. 7827, pp. 127-132.Turner J.S., Zhou J.Q., Han J., Schmitz A.J., Rizk A.A., Alsoussi W.B., Lei T., Amor M., McIntire K.M., Meade P., Strohmeier S., Brent R.I., Richey S.T., Haile A., Yang Y.R., Klebert M.K., Suessen T., Teefey S., Presti R.M., Krammer F., Kleinstein S.H., Ward A.B., Ellebedy A.H. Human germinal centers engage memory and naïve B cells after influenza vaccination. Nature, 2020, Vol. 586, no. 7827, pp. 127-132.Wu Y.C.B., Kipling D., Dunn-Walters D.K. The relationship between CD27 negative and positive B cell populations in human peripheral blood. Front. Immunol., 2011, Vol. 2, 81. doi: 10.3389/fimmu.2011.00081.Wu Y.C.B., Kipling D., Dunn-Walters D.K. The relationship between CD27 negative and positive B cell populations in human peripheral blood. Front. Immunol., 2011, Vol. 2, 81. doi: 10.3389/fimmu.2011.00081.

The authors declare that there are no conflicts of interest present.