mimmunМедицинская иммунологияMedical Immunology (Russia)1563-06252313-741XSPb RAACI10.15789/1563-0625-DOR-2587mimmun-2587Research ArticleОРИГИНАЛЬНЫЕ СТАТЬИORIGINAL ARTICLESОпределение референтных интервалов циркулирующих в крови эксцизионных колец TREC и KREC у лиц старше 18 летDetermination of reference values for TREC and KREC in circulating blood of the persons over 18 yearshttps://orcid.org/0000-0002-7603-3269СайтгалинаМ. А.SaitgalinaM. A.

Сайтгалина Мария Александровна – младший научный сотрудник лаборатории молекулярной иммунологии

197101, Санкт-Петербург, ул. Мира, 14

Saitgalina Maria A., Junior Research Associate, Laboratory of Molecular Immunology Saint Petersburg Pasteur Institute

197101, St. Petersburg, Mira str., 14

Sajgalinam@mail.ruЛюбимоваН. Е.LiubimovaN. E.

Любимова Наталья Евгеньевна – кандидат биологических наук, научный сотрудник лаборатории молекулярной иммунологии

Санкт-Петербург

Liubimova Natalia E., PhD (Biology), Research Associate, Laboratory of Molecular Immunology

St. Petersburg

natelu@mail.ruhttps://orcid.org/0000-0003-2270-8897ОстанковаЮ. В.OstankovaYu. V.

Останкова Юлия Владимировна – кандидат биологических наук, заведующая лабораторией иммунологии и вирусологии ВИЧ-инфекции, старший научный сотрудник лаборатории молекулярной иммунологии

Санкт-Петербург

Ostankova Yulia V., PhD (Biology), Head, Laboratory of Immunology and Virology HIV, Senior Research Associate, Laboratory of Molecular Immunology

St. Petersburg

shenna1@yandex.ruhttps://orcid.org/0000-0003-1668-6716КузнецоваР. Н.KuznetzovaR. N.

Кузнецова Раиса Николаевна – кандидат медицинских наук, врач-иммунолог ФБУН «Санкт-Петербургский научно-исследовательский институт эпидемиологии и микробиологии имени Пастера» Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека; доцент кафедры иммунологии ФГБОУ ВО «Первый Санкт-Петербургский государственный медицинский университет имени академика И.П. Павлова» Министерства здравоохранения РФ

Санкт-Петербург

Kuznetsova Raisa N., PhD (Medicine), Clinical Immunologist, Saint Petersburg Pasteur Institute; Associate Professor, Department of Immunology, First St. Petersburg State I.Pavlov Medical University

St. Petersburg

kuznetzova.rais@yandex.ruhttps://orcid.org/0000-0003-4571-8799ТотолянА. А.TotolianA. A.

Тотолян Арег Артемович – доктор медицинских наук, профессор, академик РАН, заведующий лабораторией молекулярной иммунологии, директор ФБУН «Санкт-Петербургский научно-исследовательский институт эпидемиологии и микробиологии имени Пастера» Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека; заведующий кафедрой иммунологии ФГБОУ ВО «Первый Санкт-Петербургский государственный медицинский университет имени академика И.П. Павлова» Министерства здравоохранения РФ

Санкт-Петербург

Totolian Areg A., PhD, MD (Medicine), Professor, Full Member, Russian Academy of Sciences, Head, Laboratory of Molecular Immunology, Director, Saint Petersburg Pasteur Institute; Head, Department of Immunology, First St. Petersburg State I. Pavlov Medical Universit

St. Petersburg

totolian@pasteurorg.ruФБУН «Санкт-Петербургский НИИ эпидемиологии и микробиологии имени Пастера» Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человекаРоссияSt. Petersburg Pasteur InstituteRussian FederationФБУН «Санкт-Петербургский НИИ эпидемиологии и микробиологии имени Пастера» Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека; ФГБОУ ВО «Первый Санкт-Петербургский государственный медицинский университет имени академика И.П. Павлова» Министерства здравоохранения РФРоссияSt. Petersburg Pasteur Institute; First St. Petersburg State I. Pavlov Medical UniversityRussian Federation20220812202224612271236Copyright © Сайтгалина М.А., Любимова Н.Е., Останкова Ю.В., Кузнецова Р.Н., Тотолян А.А., 20222022Сайтгалина М.А., Любимова Н.Е., Останкова Ю.В., Кузнецова Р.Н., Тотолян А.А.Saitgalina M.A., Liubimova N.E., Ostankova Y.V., Kuznetzova R.N., Totolian A.A.Данная работа распространяется под лицензией Creative Commons Attribution 4.0.This work is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 License.https://www.mimmun.ru/mimmun/article/view/2587

Все большее внимание обращают на себя способы выявления первичных и вторичных Т- и/или В-клеточных иммунодефицитов, внедрение которых в лабораторную диагностику способствовало бы скорейшему выявлению иммунодефицитных состояний. В настоящее время неуклонно увеличивается количество выявленных взрослых больных с иммунодефицитами различного генеза. Поскольку пол, возраст и раса пациентов могут являться значимыми факторами состояния иммунитета, определение популяционных референтных интервалов содержания молекул TREC и KREC в периферической крови взрослой популяции для дальнейшего выявления и углубленного обследования сложных случаев как врожденных, так и приобретенных иммунодефицитных состояний является актуальной задачей современной молекулярно-генетической лабораторной диагностики. Цель – определить референтные интервалы количественного содержания фрагментов ДНК TREC и KREC в периферической крови среди взрослого населения Санкт-Петербурга. Использовали образцы цельной крови, полученные от 717 условно здоровых добровольцев в возрасте от 18 до 108 лет в рамках программы оценки популяционного иммунитета жителей СанктПетербурга. Критерием исключения добровольца из исследования являлось наличие диагноза иммунодефицит любого генеза, вирусный гепатит А, В, С, ВИЧ-инфекция. Определение количественного содержания целевых фрагментов ДНК TREC и KREC проводили с использованием набора реагентов для количественного определения эксцизионных колец TREC и KREC методом полимеразной цепной реакции с детекцией в режиме реального времени (TREC/KREC-AMP PS). Определение референтных интервалов прямым методом проводили согласно рекомендациям Международной федерации клинической химии и Государственного стандарта (ГОСТ) Р 53022.3-2008. В рамках исследования добровольцы были разделены на шесть возрастных групп: 18-29 лет, 30-39 лет, 40-49 лет, 50-59 лет, 60-69 лет и лица старше 70 лет. Определено количественное содержание молекул TREC и KREC в каждом образце крови для всех групп. Корреляционный анализ позволил установить отрицательную зависимость концентрации молекул TREC в образцах крови с возрастом участников исследования (коэффициент корреляции Спирмена r = -0,80 (p-value < 0,0001)). Выявлены достоверные различия в уровнях TREC между разными возрастными группами. Корреляционной зависимости содержания молекул KREC в образцах крови от возраста и различий между возрастными группами не установлено. Определены референсные интервалы уровня TREC для каждой выделенной возрастной группы. Для всех групп установлен единый референсный интервал уровней молекул KREC. Определенные РИ TREC и KREC у взрослых людей значительно ниже, чем у новорожденных. Полученные результаты, позволившие определить референсные интервалы уровней TREC и KREC для взрослых людей, будут способствовать эффективной персонифицированной лабораторной диагностике иммунодефицитных состояний различного генеза.

Increasing attention is being paid to methods for detecting primary and secondary T and/or B cell immunodeficiencies. Their implementation into laboratory diagnostics would contribute to the early diagnostics of immunodeficiencies. Currently, the number of identified adult patients with immunodeficiencies of various origins is steadily increasing. Age, gender and ethnicity of patients may be significant factors of immunity. Hence, determination of the population reference intervals for TREC and KREC DNA excision rings in peripheral blood of adult persons is an urgent laboratory task for in-depth examination of both congenital and acquired immunodeficiency conditions. Our purpose was to determine the reference intervals for the quantitative assay of TREC and KREC fragments in peripheral blood among the adult population of St. Petersburg. We studied whole blood samples obtained from 717 apparently healthy volunteers aged 18 to 108 years within the program of population immunity assessment among residents of St. Petersburg. The exclusion criterion included immunodeficiency of any origin, viral hepatitis A, B, C, HIV infection. Quantitation of the target TREC and KREC DNA fragments was carried out using a set of reagents for the quantitative determination of excisional rings TREC and KREC by Real-time PCR (TREC/KREC-AMP PS). The reference intervals were determined by the direct method according to the recommendations of the International Federation of Clinical Chemistry and the Russian State Standard (GOST) R 53022.3-2008. The volunteers were divided into six age groups: 18-29, 30-39, 40-49, 50-59, 60-69 years old, and the persons over 70. The amounts of TREC and KREC in each blood sample were determined for all age groups. Upon correlation analysis, we have revealed a negative relationship between the concentration of TREC molecules in blood samples, and the age of study participants (Spearman correlation coefficient r = -0.80 (p-value < 0.0001)). Significant differences in TREC levels between different age groups were revealed. No correlations were detected between KREC contents in blood samples and age as well as any differences between age groups. Reference intervals of the TREC level were determined for each mentioned age group. A unified reference range was established for the KREC levels. The established reference intervals for TREC and KREC molecules in adults are significantly lower than in newborns. The obtained results enable determination of reference intervals for TREC and KREC levels among adults, thus contributing to effective personalized laboratory diagnosis of immunodeficiency states of various origins.

иммунный статусиммунодефицитTRECKRECметод диагностикиреференсный интервал.immune statusimmunodeficiencyTRECKRECdiagnostic methodreference intervalReferencesГОСТ Р 53022.3-2008. Технологии лабораторные клинические. Требования к качеству клинических лабораторных исследований. Часть 3. Правила оценки клинической информативности лабораторных тестов. Введ. 2010-01-01. М.: Стандарт информ, 2009. 19 с.GOST R 53022.3-2008. Clinical laboratory technologies. Requirements for the quality of clinical laboratory research. Part 3. Rules for assessing the clinical informativeness of laboratory tests. Introduction 2010-01-01]. Moscow: Standart inform, 2009. 19 p.Евгина С.А., Савельев Л.И. Современные теория и практика референтных интервалов // Лабораторная служба, 2019. T. 8, № 2. С. 36-44.Evgina S.A., Saveliev L.I. Сurrent theory and practice of reference interval. Laboratornaya sluzhba = Laboratory Service, 2019, Vol. 8, no. 2, pp. 36-44. (In Russ.)Клинические рекомендации. Первичные иммунодефициты преимущественно с недостаточностью антител (D80- D 80.9; D83 – D83.2; D83.8; D83.9). 2018. [Электронный ресурс]. Режим доступа: https://nrcii.ru/specialistam/klinrecommend/pid.pdf.Сlinical guidelines. Primary immunodeficiencies predominantly with antibody deficiency (D80- D 80.9; D83 – D83.2; D83.8; D83.9). 2018. [Electronic resourse]. Access mode: https://nrcii.ru/specialistam/klinrecommend/pid.pdf.Сайтгалина М.А., Останкова Ю.В., Любимова Н.Е., Семенов А.В., Кузнецова Р.Н., Тотолян А.А. Модифицированный метод количественного определения уровней TREC и KREC в периферической крови у больных с иммунодефицитными состояниями // Инфекция и иммунитет, 2022, T. 12, № 5. С. 981-996. doi: 10.15789/2220-7619-MMF-2039.Saitgalina M.A., Ostankova Yu.V., Liubimova N.E., Semenov A.V., Kuznetsova R.N., Totolian Areg A. Modified method for quantitative determination of TREC and KREC levels in peripheral blood in patients with immunodeficiency states. Infektsiya i immunitet = Russian Journal of Infection and Immunity, 2022, Vol. 12, no. 5, pp. 981-996. (In Russ.) doi: 10.15789/2220-7619-MMF-2039.Тузанкина И.А., Каракина М.Л., Власова Е.В. Анализ клинических проявлений дебюта первичных иммунодефицитов у взрослых // Медицинская иммунология, 2014. Т. 4, № 16. C. 367-374. doi: 10.15789/1563-0625-2014-4-367-374.Tuzankina I.A., Karakina M.L., Vlasova E.V. Analysis of the clinical manifestations of the onset of primary immunodeficiencies in adults. Meditsinskaya immunologiya = Medical Immunology (Russia), 2014, Vol. 4, no. 16, pp. 367-374. (In Russ.) doi: 10.15789/1563-0625-2014-4-367-374.Ярилин А.А. Иммунология. М.: ГЭОТАР-Медиа, 2010. C. 251-260.Yarilin A.A. Immunology. Moscow: GEOTAR-Media, 2010, pp. 251-260.Argudo-Ramírez A., Martín-Nalda A., Marín-Soria J.L., López-Galera R.M., Pajares-García S., González de Aledo-Castillo J.M., Martínez-Gallo M., García-Prat M., Colobran R., Riviere J.G., Quintero Y., Collado T., García-Villoria J., Ribes A., Soler-Palacín P. First Universal Newborn Screening Program for Severe Combined Immunodeficiency in Europe. Two-Years’ Experience in Catalonia (Spain). Front. Immunol., 2019, Vol. 10, 2406. doi:10.3389/fimmu.2019.02406.Argudo-Ramírez A., Martín-Nalda A., Marín-Soria J.L., López-Galera R.M., Pajares-García S., González de Aledo-Castillo J.M., Martínez-Gallo M., García-Prat M., Colobran R., Riviere J.G., Quintero Y., Collado T., García-Villoria J., Ribes A., Soler-Palacín P. First Universal Newborn Screening Program for Severe Combined Immunodeficiency in Europe. Two-Years’ Experience in Catalonia (Spain). Front. Immunol., 2019, Vol. 10, 2406. doi:10.3389/fimmu.2019.02406.Brown J.J., Datta V., Browning M.J., Swift P.G.F. Graves’ disease in DiGeorge syndrome: patient report with a review of endocrine autoimmunity associated with 22q11.2 deletion. J. Pediatr. Endocrinol. Metab., 2004, Vol. 17, pp. 1575-1579.Brown J.J., Datta V., Browning M.J., Swift P.G.F. Graves’ disease in DiGeorge syndrome: patient report with a review of endocrine autoimmunity associated with 22q11.2 deletion. J. Pediatr. Endocrinol. Metab., 2004, Vol. 17, pp. 1575-1579.CLSI Document C28-A3c. Defining, establishing, and verifying reference intervals in the clinical laboratory. Approved guideline. Third edition. Wayne. Pa. USA: CLSI. 2010. Available at: https://clsi.org/media/1421/ep28a3c_sample.pdf.CLSI Document C28-A3c. Defining, establishing, and verifying reference intervals in the clinical laboratory. Approved guideline. Third edition. Wayne. Pa. USA: CLSI. 2010. Available at: https://clsi.org/media/1421/ep28a3c_sample.pdf.Dar N., Gothelf D., Korn D., Frisch A., Weizman A., Michaelovsky E., Carmel M., Yeshayahu Y., DubnovRaz G., Pessach I.M., Simon A.J., Lev A., Somech R. Thymic and bone marrow output in individuals with 22q11.2 deletion syndrome. Pediatr. Res., 2015, Vol. 4, no. 7, pp. 579-585.Dar N., Gothelf D., Korn D., Frisch A., Weizman A., Michaelovsky E., Carmel M., Yeshayahu Y., DubnovRaz G., Pessach I.M., Simon A.J., Lev A., Somech R. Thymic and bone marrow output in individuals with 22q11.2 deletion syndrome. Pediatr. Res., 2015, Vol. 4, no. 7, pp. 579-585.di Renzo M., Pasqui A.L., Auteri A. Common variable immunodeficiency: a review. Clin. Exp. Med., 2004, Vol. 3, no. 4, pp. 211-217.di Renzo M., Pasqui A.L., Auteri A. Common variable immunodeficiency: a review. Clin. Exp. Med., 2004, Vol. 3, no. 4, pp. 211-217.Garcia-Prat M., Álvarez-Sierra D., Aguiló-Cucurull A., Salgado-Perandrés S., Briongos-Sebastian S., Franco-Jarava C., Martin-Nalda A., Colobran R., Montserrat I., Hernández-González M., Pujol-Borrell R., SolerPalacin P., Martínez-Gallo M. Extended immunophenotyping reference values in a healthy pediatric population. Cytometry B Clin. Cytom., 2019, Vol. 96, no. 3, pp. 223-233.Garcia-Prat M., Álvarez-Sierra D., Aguiló-Cucurull A., Salgado-Perandrés S., Briongos-Sebastian S., Franco-Jarava C., Martin-Nalda A., Colobran R., Montserrat I., Hernández-González M., Pujol-Borrell R., SolerPalacin P., Martínez-Gallo M. Extended immunophenotyping reference values in a healthy pediatric population. Cytometry B Clin. Cytom., 2019, Vol. 96, no. 3, pp. 223-233.Gathmann B. The European internet-based patient and research database for primary immunodeficiencies: update 2011. Clin. Exp. Immunol., 2012, Vol. 167, no. 3, pp. 479-491.Gathmann B. The European internet-based patient and research database for primary immunodeficiencies: update 2011. Clin. Exp. Immunol., 2012, Vol. 167, no. 3, pp. 479-491.Hazenberg M.D., Verschuren M.C., Hamann D., Miedema F., van Dongen J.J. T cell receptor excision circles as markers for recent thymic emigrants: basic aspects, technical approach, and guidelines for interpretation. J. Mol. Med., 2001, Vol. 79, no. 11, pp. 631-640.Hazenberg M.D., Verschuren M.C., Hamann D., Miedema F., van Dongen J.J. T cell receptor excision circles as markers for recent thymic emigrants: basic aspects, technical approach, and guidelines for interpretation. J. Mol. Med., 2001, Vol. 79, no. 11, pp. 631-640.Jung D., Alt F.W. Unraveling V(D)J recombination; insights into gene regulation. Cell, 2004, Vol. 116, no. 2, pp. 299-311.Jung D., Alt F.W. Unraveling V(D)J recombination; insights into gene regulation. Cell, 2004, Vol. 116, no. 2, pp. 299-311.Just H.L., Deleuran M., Vestergaard C., Deleuran B., Thestrup-Pedersen K. T-cell receptor excision circles (TREC) in CD4+ and CD8+ T-cell subpopulations in atopic dermatitis and psoriasis show major differences in the emission of recent thymic emigrants. Acta Derm. Venereol., 2008, Vol. 88, no. 6, pp. 566-572.Just H.L., Deleuran M., Vestergaard C., Deleuran B., Thestrup-Pedersen K. T-cell receptor excision circles (TREC) in CD4+ and CD8+ T-cell subpopulations in atopic dermatitis and psoriasis show major differences in the emission of recent thymic emigrants. Acta Derm. Venereol., 2008, Vol. 88, no. 6, pp. 566-572.Kamae C., Nakagawa N., Sato H., Honma K., Mitsuiki N., Ohara O., Kanegane H., Pasic S., PanHammarström Q., van Zelm M.C., Morio T., Imai K., Nonoyama S. Common variable immunodeficiency classification by quantifying T-cell receptor and immunoglobulin κ-deleting recombination excision circles. J. Allergy Clin. Immunol., 2013, Vol. 131, no. 5, pp. 1437-1440.Kamae C., Nakagawa N., Sato H., Honma K., Mitsuiki N., Ohara O., Kanegane H., Pasic S., PanHammarström Q., van Zelm M.C., Morio T., Imai K., Nonoyama S. Common variable immunodeficiency classification by quantifying T-cell receptor and immunoglobulin κ-deleting recombination excision circles. J. Allergy Clin. Immunol., 2013, Vol. 131, no. 5, pp. 1437-1440.Kwok J.S.Y., Cheung S.K.F., Ho J.C.Y., Tang I.W.H., Chu P.W.K., Leung E.Y.S. Establishing simultaneous T Cell Receptor Excision Circles (TREC) and K-Deleting Recombination Excision Circles (KREC) quantification assays and laboratory reference intervals in healthy individuals of different age groups in Hong Kong. Front. Immunol., 2020, Vol. 11, 1411. doi: 10.3389/fimmu.2020.01411.Kwok J.S.Y., Cheung S.K.F., Ho J.C.Y., Tang I.W.H., Chu P.W.K., Leung E.Y.S. Establishing simultaneous T Cell Receptor Excision Circles (TREC) and K-Deleting Recombination Excision Circles (KREC) quantification assays and laboratory reference intervals in healthy individuals of different age groups in Hong Kong. Front. Immunol., 2020, Vol. 11, 1411. doi: 10.3389/fimmu.2020.01411.Lucas M., Lee M., Lortan J., Lopez-Granados E., Misbah S., Chapel H. J. Infection outcomes in patients with common variable immunodeficiency disorders: relationship to immunoglobulin therapy over 22 years. J. Allergy Clin. Immunol., 2010, Vol. 125, no. 6, pp. 1354-1360.Lucas M., Lee M., Lortan J., Lopez-Granados E., Misbah S., Chapel H. J. Infection outcomes in patients with common variable immunodeficiency disorders: relationship to immunoglobulin therapy over 22 years. J. Allergy Clin. Immunol., 2010, Vol. 125, no. 6, pp. 1354-1360.Naylor K., Li G., Vallejo A.N., Lee W.W., Koetz K., Bryl E. The influence of age on T cell generation and TCR diversity. J. Immunol., 2005, Vol. 174, no. 11, pp. 7446-7452.Naylor K., Li G., Vallejo A.N., Lee W.W., Koetz K., Bryl E. The influence of age on T cell generation and TCR diversity. J. Immunol., 2005, Vol. 174, no. 11, pp. 7446-7452.Peyvandi S., Lupo P.J., Garbarini J. 22q11.2 deletion in patients with conotruncal defects: data from 1610 consecutive cases. Pediatr. Cardiol., 2013, Vol. 34, no. 7, pp. 1687-1694.Peyvandi S., Lupo P.J., Garbarini J. 22q11.2 deletion in patients with conotruncal defects: data from 1610 consecutive cases. Pediatr. Cardiol., 2013, Vol. 34, no. 7, pp. 1687-1694.Pido-Lopez J., Imami N., Aspinall R. Both age and gender affect thymic output: more recent thymic migrants in females than males as they age. Clin. Exp. Immunol., 2001, Vol. 125, no. 3, pp. 409-413.Pido-Lopez J., Imami N., Aspinall R. Both age and gender affect thymic output: more recent thymic migrants in females than males as they age. Clin. Exp. Immunol., 2001, Vol. 125, no. 3, pp. 409-413.Quinti I., Soresina A., Spadaro G., Martino S., Donnanno S., Agostini C. Long-term follow-up and outcome of a large cohort of patients with common variable immunodeficiency. J. Clin. Immunol., 2007, Vol. 27, no. 3, pp. 308-316.Quinti I., Soresina A., Spadaro G., Martino S., Donnanno S., Agostini C. Long-term follow-up and outcome of a large cohort of patients with common variable immunodeficiency. J. Clin. Immunol., 2007, Vol. 27, no. 3, pp. 308-316.Siest G., Henny J., Grasbeck R., Wilding P., Petitclerc C., Queralto J., Petersen P. The theory of reference values: an unfinished symphony. CCLM, 2013, Vol. 51, no. 1, pp. 47-64.Siest G., Henny J., Grasbeck R., Wilding P., Petitclerc C., Queralto J., Petersen P. The theory of reference values: an unfinished symphony. CCLM, 2013, Vol. 51, no. 1, pp. 47-64.Sottini A., Serana F., Bertoli D., Chiarini M., Valotti M., Vaglio Tessitore M., Lmberti L. Simultaneous quantification of T-cell receptor excision circles (TRECs) and K-deleting recombination excision circles (KRECs) by real-time PCR. J. Vis. Exp., 2014, Vol. 94, 52184. doi: 10.3791/52184.Sottini A., Serana F., Bertoli D., Chiarini M., Valotti M., Vaglio Tessitore M., Lmberti L. Simultaneous quantification of T-cell receptor excision circles (TRECs) and K-deleting recombination excision circles (KRECs) by real-time PCR. J. Vis. Exp., 2014, Vol. 94, 52184. doi: 10.3791/52184.Tangye S.G., Al-Herz W., Bousfiha A., Chatila T., Cunningham-Rundles C., Etzioni A. Human inborn errors of immunity: 2019 update on the classification from the international union of immunological societies expert committee. J. Clin. Immunol., 2020, Vol. 40, no. 1, pp. 24-64.Tangye S.G., Al-Herz W., Bousfiha A., Chatila T., Cunningham-Rundles C., Etzioni A. Human inborn errors of immunity: 2019 update on the classification from the international union of immunological societies expert committee. J. Clin. Immunol., 2020, Vol. 40, no. 1, pp. 24-64.Törlén J., Gaballa A., Remberger M., Mörk L.M., Sundberg B., Mattsson J., Uhlin M. Effect of graftversus-host disease prophylaxis regimens on T and B cell reconstitution after allogeneic hematopoietic stem cell transplantation. Biol. Blood Marrow Transplant., 2019, Vol. 25, no. 6, pp. 1260-1268.Törlén J., Gaballa A., Remberger M., Mörk L.M., Sundberg B., Mattsson J., Uhlin M. Effect of graftversus-host disease prophylaxis regimens on T and B cell reconstitution after allogeneic hematopoietic stem cell transplantation. Biol. Blood Marrow Transplant., 2019, Vol. 25, no. 6, pp. 1260-1268.Tuano K.S., Seth N., Chinen J. Secondary immunodeficiencies: An overview. Ann. Allergy Asthma Immunol., 2021, Vol. 127, no. 6, pp. 617-626.Tuano K.S., Seth N., Chinen J. Secondary immunodeficiencies: An overview. Ann. Allergy Asthma Immunol., 2021, Vol. 127, no. 6, pp. 617-626.Urm S.H. Asthma and risk of selective IgA deficiency or common variable immunodeficiency: a population based case control study. Mayo Clin. Proc., 2013, Vol. 88, no. 8, pp. 813-821.Urm S.H. Asthma and risk of selective IgA deficiency or common variable immunodeficiency: a population based case control study. Mayo Clin. Proc., 2013, Vol. 88, no. 8, pp. 813-821.Vadamalai K. Screening for humoral immunodeficiency in patients with community-acquired pneumonia. J. Hosp. Med., 2019, Vol. 14, no. 1, pp. 33-37.Vadamalai K. Screening for humoral immunodeficiency in patients with community-acquired pneumonia. J. Hosp. Med., 2019, Vol. 14, no. 1, pp. 33-37.van Zelm M.C., van der Burg M., Langerak A.W., van Dongen J.J. PID comes full circle: applications of V(D) J recombination excision circles in research, diagnostics and newborn screening of primary immunodeficiency disorders. Front Immunol., 2011, Vol. 2, 12. doi: 10.3389/fimmu.2011.00012.van Zelm M.C., van der Burg M., Langerak A.W., van Dongen J.J. PID comes full circle: applications of V(D) J recombination excision circles in research, diagnostics and newborn screening of primary immunodeficiency disorders. Front Immunol., 2011, Vol. 2, 12. doi: 10.3389/fimmu.2011.00012.Verbsky J.W. Newborn screening for severe combined immunodeficiency; The wisconsin experience (2008- 2011). J. Clin. Immunol., 2012, Vol. 32, no. 1, pp. 82-88.Verbsky J.W. Newborn screening for severe combined immunodeficiency; The wisconsin experience (2008- 2011). J. Clin. Immunol., 2012, Vol. 32, no. 1, pp. 82-88.Verma N. Therapeutic management of primary immunodeficiency in older patients. Drugs Aging, 2013, Vol. 30, no. 7, pp. 503-512.Verma N. Therapeutic management of primary immunodeficiency in older patients. Drugs Aging, 2013, Vol. 30, no. 7, pp. 503-512.Verstegen R.H.J. Impact of Down syndrome on the performance of neonatal screening assays for severe primary immunodeficiency diseases. J. Allergy Clin. Immunol., 2014, Vol. 133, no. 4, pp. 1208-1211.Verstegen R.H.J. Impact of Down syndrome on the performance of neonatal screening assays for severe primary immunodeficiency diseases. J. Allergy Clin. Immunol., 2014, Vol. 133, no. 4, pp. 1208-1211.Zhao Q., Dai R., Li Y., Wang Y., Chen X., Shu Z., Zhou L., Ding Y., Tang X., Zhao X. Trends in TREC values according to age and gender in Chinese children and their clinical applications. Eur. J. Pediatr., 2022, Vol. 181, no. 2, pp. 529-538.Zhao Q., Dai R., Li Y., Wang Y., Chen X., Shu Z., Zhou L., Ding Y., Tang X., Zhao X. Trends in TREC values according to age and gender in Chinese children and their clinical applications. Eur. J. Pediatr., 2022, Vol. 181, no. 2, pp. 529-538.

The authors declare that there are no conflicts of interest present.