Бедина Светлана Александровна – кандидат медицинских наук, старший научный сотрудник клинико-биохимической лаборатории
400138, г. Волгоград, ул. им. Землячки, 76
Bedina Svetlana A., PhD (Medicine), Senior Research Associate, Clinical Biochemical Department
400138, Volgograd, Zemlyachka str., 76
Мозговая Елена Э. – кандидат медицинских наук, ведущий научный сотрудник клинико-биохимической лаборатории
Волгоград
Mozgovaya Elena E., PhD (Medicine), Leading Research Associate, Clinical Biochemical Department
Volgograd
Трофименко Андрей С. – кандидат медицинских наук, заведующий клинико-биохимической лабораторией
Волгоград
Trofimenko Andrey S., PhD (Medicine), Head, Clinical Biochemical Department
Volgograd
Спицина Светлана С. – младший научный сотрудник клинико-биохимической лаборатории
Волгоград
Spitsyna Svetlana S., Junior Research Associate, Clinical Biochemical Department
Volgograd
Мамус Мария А. – младший научный сотрудник клинико-биохимической лаборатории
Волгоград
Mamus Mariya A., Junior Research Associate, Clinical Biochemical Department
Volgograd
Результаты недавних исследований, демонстрирующих наличие провоспалительных медиаторов при остеоартрите (ОА), схожесть гистологических признаков воспаления при ревматоидном артрите (РА) и ОА, дают основание предположить важную роль нетоза (NEToза) в иммунном воспалении у больных ОА. Цель – оценить способность нейтрофилов периферической крови к спонтанному и индуцированному образованию NETs у больных ОА и влияние реактивного синовита на динамику показателей NEToзa. В исследование вошли 31 больной с верифицированным ОА и 30 условно здоровых лиц. Нейтрофилы выделяли одноэтапным центрифугированием в ступенчатом градиенте йогексола. Качественный состав нейтрофильной фракции оценивали с помощью микроскопии стандартных мазков, жизнеспособность клеток – методом исключения трипанового синего, степень активации – с помощью стандартного теста с нитросиним тетразолием. В качестве индуктора образования NETs применяли раствор форбол-12-миристат-13-ацетата (ФМА). Визуализировали спонтанное и индуцированное образование NETs с помощью флуоресцентной микроскопии. На момент включения в исследование все больные ОА находились в стадии ремиссии. В процессе наблюдения у 23 больных отмечалось обострение ОА. Нейтрофильные фракции демонстрировали высокую чистоту и большое содержание жизнеспособных неактивированных клеток. Данные параметры были сопоставимыми в обеих группах. У больных ОА в ремиссии средняя доля нейтрофилов со спонтанным NETs существенно выше по сравнению со здоровыми лицами, применение ФМАиндуктора сопровождалось значительным повышением способности нейтрофилов к образованию NETs. Обострение ОА демонстрировало дальнейший рост числа нейтрофилов, генерирующих NETs, как в процессе спонтанного, так и в процессе ФМА-индуцированного NEToза. У больных ОА в обострении доля спонтанного и индуцированного NETs значительно выше, чем при ОА в ремиссии. Темп прироста спонтанного образования ловушек выше индуцированного в 3,74 раза. Таким образом, в ходе нашего исследования у больных ОА мы выявили статистически значимое повышение способности нейтрофилов периферической крови к спонтанному и индуцированному образованию внеклеточных ловушек, зависящее от стадии заболевания. Получение данные дают ос нование предполагать возможность участия циркулирующих нейтрофилов через NEToз в патогенезе иммунного воспаления при ОА.
The results of recent studies demonstrating the presence of pro-inflammatory mediators in osteoarthritis (OA), as well as known similarity of histological signs of inflammation in rheumatoid arthritis (RA) and OA, suggest an important role of NETosis in immune inflammation in OA patients. Our objective was to assess ability of blood neutrophils from ОA patients to generate NETosis spontaneously and after in vitro induction, and impact of reactive synovitis on the dynamics of NETosis indexes. Thirty-one patients with verified OA and 30 healthy volunteers were included into the study. Circulating neutrophils were isolated with one-step density gradient centrifugation using double layers of Iohexol gradient. Subpopulational profile of isolated neutrophil fractions, their viability, and nonspecific activation were evaluated microscopically using Trypan Blue exclusion test, as well as nitro-blue tetrazolium test. NETs were induced by phorbol-12-myristate13-acetate (PMA). Spontaneous and induced formation of NETs was assessed using fluorescence microscopy. The ОA patients were in clinical remission at the time of inclusion in the study. In 23 OA patients, an exacerbation was diagnosed during the study. The neutrophil fractions showed high purity and a high content of viable nonactivated cells. These parameters were comparable in the study groups. Mean percentage of spontaneous NETs in OA patients in remission was significantly increased comparing to healthy controls. Usage of PMA, as inducing agent was accompanied by a significant increase in ability of neutrophils to form NETs. Transition of OA to exacerbation was characterized by further significant increase in spontaneous and PMA-induced NETs. Spontaneous and induced NETs in OA patients at acute stage of the disease are significantly higher than in OA patients in remission state. The growth rate of spontaneous NET formation is 3.74 times higher than the induced NET formation in OA patients upon exacerbation. Statistically significant increase in the ability of peripheral neutrophils to spontaneous and induced formation of extracellular traps was found, depending on the stage of osteoarthritis. The data obtained suggest an opportunity for participation of circulating neutrophils via NETosis in pathogenesis of immune inflammation in OA.
The authors declare that there are no conflicts of interest present.