mimmunМедицинская иммунологияMedical Immunology (Russia)1563-06252313-741XSPb RAACI10.15789/1563-0625-2007-6-569-574mimmun-242Research ArticleОБЗОРЫREVIEWSПОДХОДЫ К СТАНДАРТИЗАЦИИ МЕТОДА ПРОТОЧНОЙ ЦИТОМЕТРИИ ДЛЯ ИММУНОФЕНОТИПИРОВАНИЯ. НАСТРОЙКА ЦИТОМЕТРОВ И ПОДГОТОВКА ПРОТОКОЛОВ ДЛЯ АНАЛИЗАAPPROACHES TO STANDARDIZATION OF THE FLOW CYTOMETRY METHOD FOR CELLS IMMUNOPHENOTIPING. CYTOMETRS ADJUSTMENT AND PREPARATION OF PROTOCOLS FOR ANALYSISХайдуковС. В.KhaidukovS. V.

лаборатория иммунохимии

khsv@mail.ibch.ruИнститут биоорганической химии им. акад. М.М. Шемякина и Ю.А. Овчинникова РАН, МоскваRussian Federation20071707201496569574Copyright © Хайдуков С.В., 20142014Хайдуков С.В.Khaidukov S.V.Данная работа распространяется под лицензией Creative Commons Attribution 4.0.This work is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 License.https://www.mimmun.ru/mimmun/article/view/242

Резюме. Иммунофенотипирование методом проточной цитометрии позволяет охарактеризовать клетки при помощи моноклональных антител или каких-либо других зондов и дает возможность судить об их типе и функциональном состоянии по наличию того или иного набора клеточных маркеров и происходящих в них процессах.

Однако в результате проведения цитометрического анализа может быть допущен ряд ошибок на разных этапах подготовки цитометра к работе, что приводит к некорректному результату. Чтобы избежать этого, предложен алгоритм подготовки протоколов для анализа клеток периферической крови. Этот алгоритм настройки рабочего протокола выглядит следующим образом: проверка работы цитометра; настройка дискриминатора; настройка чувствительности каналов светорассеяния; настройка чувствительности каналов флуоресценции; введение коэффициентов компенсации.

Стандартные настройки проточных цитометров и протоколов позволят более корректно проводить анализ как в клинико-диагностических, так и научно-исследовательских целях.

проточная цитометриядискриминаторкомпенсациясветорассеяниемногопараметрический анализflow cytometrydiscriminatorindemnificationmultivariable analysisReferencesЛуговская С.А., Почтарь М.Е., Тупицын Н.Н. Иммунофенотипирование в диагностике гемобластозов // М.-Тверь: ООО «Издательство Триада», 2005. – 168 с.Луговская С.А., Почтарь М.Е., Тупицын Н.Н. Иммунофенотипирование в диагностике гемобластозов // М.-Тверь: ООО «Издательство Триада», 2005. – 168 с.Полетаев А.И. Проточная цитометрия и сор- тировка в цитологии, молекулярной биологии, биотехнологии и медицине / ИНТ серия «Общие проблемы физико-химической биологии». – М., 1989. – Т. 12. – 88 с.Полетаев А.И. Проточная цитометрия и сор- тировка в цитологии, молекулярной биологии, биотехнологии и медицине / ИНТ серия «Общие проблемы физико-химической биологии». – М., 1989. – Т. 12. – 88 с.Claude L., Lobagiu C., Genin C. Enumeration of peripheral lymphocyte subsets using 6 vs. 4 color staining: a clinical evaluation of new flowcytometer // Cytometry B Clin. Cytom. – 2005. – 70B. – P. 29-38.Claude L., Lobagiu C., Genin C. Enumeration of peripheral lymphocyte subsets using 6 vs. 4 color staining: a clinical evaluation of new flowcytometer // Cytometry B Clin. Cytom. – 2005. – 70B. – P. 29-38.Gallego A., Vargas J.A., Castejon R., Citores M.J., Romero Y., Millan I., Durantez A. Production of intracellular IL-2, TNF-alpha, and IFN-gamma by T cells in B-CLL // Cytometry B Clin. Cytom. – 2003. – Vol. 56, N 1. – P. 23-29.Gallego A., Vargas J.A., Castejon R., Citores M.J., Romero Y., Millan I., Durantez A. Production of intracellular IL-2, TNF-alpha, and IFN-gamma by T cells in B-CLL // Cytometry B Clin. Cytom. – 2003. – Vol. 56, N 1. – P. 23-29.Leucocyte typing VI / Ed. Kishimoto K. et al. – Garland Publishing, Inc. New York & London. 1997. – P. 1342.Leucocyte typing VI / Ed. Kishimoto K. et al. – Garland Publishing, Inc. New York & London. 1997. – P. 1342.Luider J., Cyfra M., Johnson P., Auer I. Impact of the new Beckman Coulter Cytomics FC 500 5-color flow cytometer on a regional flow Cytometry clinical laboratory servise // Lab. Hematol. – 2004. – Vol. 10. – P. 102-108.Luider J., Cyfra M., Johnson P., Auer I. Impact of the new Beckman Coulter Cytomics FC 500 5-color flow cytometer on a regional flow Cytometry clinical laboratory servise // Lab. Hematol. – 2004. – Vol. 10. – P. 102-108.Mandy F.F., Bergeron M., Minkus T. Evolution of leukocyte immunophenotyping as influenced by the HIV/AIDS pandemic: a short history of the development of gating strategies for CD4+T-cell enumeration. // Cytometry. – 1997. – Vol. 30, N 4. – P. 157-165.Mandy F.F., Bergeron M., Minkus T. Evolution of leukocyte immunophenotyping as influenced by the HIV/AIDS pandemic: a short history of the development of gating strategies for CD4+T-cell enumeration. // Cytometry. – 1997. – Vol. 30, N 4. – P. 157-165.Mandy F.F., Nicholson J.K., McDougal J.S. Guidelines for performing single-platform absolute CD4+T-cell determinations with CD45 gating for persons infected with human immunodeficiency virus // Centers for Disease Control and Prevention. MMWR Recomm Rep. – 2003. – 52 (RR-2). – P. 1-13.Mandy F.F., Nicholson J.K., McDougal J.S. Guidelines for performing single-platform absolute CD4+T-cell determinations with CD45 gating for persons infected with human immunodeficiency virus // Centers for Disease Control and Prevention. MMWR Recomm Rep. – 2003. – 52 (RR-2). – P. 1-13.Nagata H., Konno A., Kimura N., Zhang Y., Kimura M., Demachi A., Sekine T., Yamamoto K., Shimizu N. Characterization of novel natural killer (NK)-cell and gammadelta T-cell lines established from primary lesions of nasal T/NK-cell lymphomas associated with the Epstein-Barr virus. // Blood. – 2001. – Vol. 97, N 3. – P. 708-713.Nagata H., Konno A., Kimura N., Zhang Y., Kimura M., Demachi A., Sekine T., Yamamoto K., Shimizu N. Characterization of novel natural killer (NK)-cell and gammadelta T-cell lines established from primary lesions of nasal T/NK-cell lymphomas associated with the Epstein-Barr virus. // Blood. – 2001. – Vol. 97, N 3. – P. 708-713.Shapiro H.M. Practical flow cytometry. – WILEY-LISS, Inc., New York, Chichester, Brisbane, Toronto & Singapore, 1995. – P. 542.Shapiro H.M. Practical flow cytometry. – WILEY-LISS, Inc., New York, Chichester, Brisbane, Toronto & Singapore, 1995. – P. 542.

The authors declare that there are no conflicts of interest present.