mimmunМедицинская иммунологияMedical Immunology (Russia)1563-06252313-741XSPb RAACI10.15789/1563-0625-EOM-2132mimmun-2132Research ArticleОРИГИНАЛЬНЫЕ СТАТЬИORIGINAL ARTICLESВлияние GcMAF-RF на ex vivo поляризацию макрофагов, активацию дендритных клеток и продукцию цитокинов клетками цельной крови человекаEffect of macrophage-activating factor (GcMAF-RF) upon ex vivo polarization of macrophages, activation of dendritic cells and production of cytokines by human whole blood cellshttps://orcid.org/0000-0002-3426-4501КириковичС. С.KirikovichS. S.

к.б.н., научный сотрудник лаборатории индуцированных клеточных процессов,

г. Новосибирск

PhD (Biology), Research Associate, Laboratory of Induced Cell Processes,

Novosibirskищ

libovktr@mail.ruhttps://orcid.org/0000-0002-3093-407XЛевитесЕ. В.LevitesE. V.

к.б.н., научный сотрудник лаборатории индуцированных клеточных процессов,

г. Новосибирск

PhD (Biology), Research Associate, Laboratory of Induced Cell Processes, 

Novosibirsk

levites@bionet.nsc.ruhttps://orcid.org/0000-0002-5543-248XДолговаЕ. В.DolgovaE. V.

к.б.н., старший научный сотрудник лаборатории индуцированных клеточных процессов,

г. Новосибирск

PhD (Biology), Senior Research Associate, Laboratory of Induced Cell Processes,

Novosibirsk

dolgova.ev@mail.ruhttps://orcid.org/0000-0002-7650-4331ПроскуринаА. С.ProskurinaA. S.

к.б.н., старший научный сотрудник лаборатории индуцированных клеточных процессов,

г. Новосибирск

PhD (Biology), Senior Research Associate, Laboratory of Induced Cell Processes, 

Novosibirsk

asproskurina@gmail.comhttps://orcid.org/0000-0003-1573-3795РиттерГ. С.RitterG. S.

аспирант, исследователь лаборатории индуцированных клеточных процессов,

г. Новосибирск

Postgraduate Student, Researcher, Laboratory of Induced Cell Processes,

Novosibirsk

dilkwe@yandex.ruРузановаВ. С.RuzanovaV. S.

исследователь лаборатории индуцированных клеточных процессов;

магистрант,

г. Новосибирск

Researcher, Laboratory of Induced Cell Processes, 

Novosibirsk

v.ruzanova@g.nsu.ruhttps://orcid.org/0000-0003-3169-8643ЛеплинаО. Ю.LeplinaO. Yu.

д.м.н., ведущий научный сотрудник лаборатории клеточной иммунотерапии,

г. Новосибирск

PhD, MD (Medicine), Leading Research Associate, Laboratory of Cellular Immunotherapy, 

Novosibirsk

oleplina@mail.ruhttps://orcid.org/0000-0001-8997-3586ШевелаЕ. Я.ShevelaE. Ya.

д.м.н., ведущий научный сотрудник лаборатории клеточной иммунотерапии,

г. Новосибирск

PhD, MD (Medicine), Leading Research Associate, Laboratory of Cellular Immunotherapy,

Novosibirsk

shevelak@mail.ruhttps://orcid.org/0000-0001-6895-938XОстанинА. АOstaninA. A.

д.м.н., профессор, главный научный сотрудник лаборатории клеточной иммунотерапии,

г. Новосибирск

PhD, MD (Medicine), Professor, Main Research Associate, Laboratory of Cellular Immunotherapy, 

Novosibirsk

ostanin62@mail.ruРябичеваТ. Г.RyabichevaT. G.

ведущий специалист лаборатории стабилизации,

р. п. Кольцово, Новосибирская обл.

Leading Specialist, Laboratory of Stabilization, 

Koltsovo, Novosibirsk Region

ryabicheva@vector-best.ruРыжиковаС. Л.RyzhikovaS. L.

ведущий биотехнолог лаборатории стабилизации,

р. п. Кольцово, Новосибирская обл.

Leading Biotechnologist, Laboratory of Stabilization, 

Koltsovo, Novosibirsk Region

sv_ryzhikova@mail.ruДружининаЮ. Г.DruzhininaYu. G.

ведущий биотехнолог лаборатории стабилизации,

р. п. Кольцово, Новосибирская обл.

Leading Biotechnologist, Laboratory of Stabilization, 

Koltsovo, Novosibirsk Region

yudoyudo2@gmail.comВараксинН. А.VaraksinN. A.

заведующий лабораторией стабилизации,

р. п. Кольцово, Новосибирская обл.

Head, Laboratory of Stabilization, 

Koltsovo, Novosibirsk Region

varaksin@vector-best.ruhttps://orcid.org/0000-0003-2346-6279ЧерныхЕ. Р.ChernykhE. R.

 д.м.н., профессор, член-корр. РАН, заведующая лабораторией клеточной иммунотерапии,

г. Новосибирск

PhD, MD (Medicine), Professor, Corresponding Member, Russian Academy of Sciences, Head, Laboratory of Cellular Immunotherapy, 

Novosibirsk

ct_lab@mail.ruhttps://orcid.org/0000-0002-2019-9382БогачевС. С.BogachevS. S.

д.б.н., заведующий лабораторией индуцированных клеточных процессов,

630090, г. Новосибирск, пр. Лаврентьева, 10.

PhD, MD (Biology), Head, Laboratory of Induced Cell Processes, 

630090, Novosibirsk, Lavrentiev ave, 10

labmolbiol@mail.ruФГБНУ «Федеральный исследовательский центр “Институт цитологии и генетики” Сибирского отделения Российской академии наук»РоссияInstitute of Cytology and Genetics, Siberian Branch, Russian Academy of SciencesRussian FederationФГБНУ «Федеральный исследовательский центр “Институт цитологии и генетики” Сибирского отделения Российской академии наук» ФГАОУ ВО «Новосибирский национальный исследовательский государственный университет»Russian FederationInstitute of Cytology and Genetics, Siberian Branch, Russian Academy of Sciences; Novosibirsk National Research State UniversityRussian FederationФГБНУ «Научно-исследовательский институт фундаментальной и клинической иммунологии»Russian FederationResearch Institute of Fundamental and Clinical ImmunologyRussian FederationАО «Вектор-Бест»Russian FederationJSC Vector-BestRussian Federation202124042021232257274Copyright © Кирикович С.С., Левитес Е.В., Долгова Е.В., Проскурина А.С., Риттер Г.С., Рузанова В.С., Леплина О.Ю., Шевела Е.Я., Останин А.А., Рябичева Т.Г., Рыжикова С.Л., Дружинина Ю.Г., Вараксин Н.А., Черных Е.Р., Богачев С.С., 20212021Кирикович С.С., Левитес Е.В., Долгова Е.В., Проскурина А.С., Риттер Г.С., Рузанова В.С., Леплина О.Ю., Шевела Е.Я., Останин А.А., Рябичева Т.Г., Рыжикова С.Л., Дружинина Ю.Г., Вараксин Н.А., Черных Е.Р., Богачев С.С.Kirikovich S.S., Levites E.V., Dolgova E.V., Proskurina A.S., Ritter G.S., Ruzanova V.S., Leplina O.Y., Shevela E.Y., Ostanin A.A., Ryabicheva T.G., Ryzhikova S.L., Druzhinina Y.G., Varaksin N.A., Chernykh E.R., Bogachev S.S.Данная работа распространяется под лицензией Creative Commons Attribution 4.0.This work is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 License.https://www.mimmun.ru/mimmun/article/view/2132

Данная статья представляет собой второе сообщение из серии статей, посвященных получению отечественного препарата макрофаг-активирующего фактора (GcMAF-RF) и оценке его биологических свойств. Целью данной работы являлось изучение воздействия препарата GcMAF-RF на М0 → М1 поляризацию макрофагов (Мф) и активацию профессиональных свойств антиген-презентирующих дендритных клеток (ДК), генерированных ex vivo, а также на ex vivo продукцию провоспалительных (TNFα, IL-1β, IL-6, IFNγ, IL-17, IL-18) и противовоспалительных (TGF-β, IL-4, IL-10) цитокинов, факторов роста (IL-2, GM-CSF, G-CSF, VEGF) и хемокинов (MCP, IL-8) клетками цельной крови здоровых доноров. Мф и ДК генерировали из моноцитов (3-5 × 106 /мл) прилипающей фракции мононуклеарных клеток (МНК) периферической крови здоровых доноров; при этом для получения Мф использовали гранулоцитарно-макрофагальный колониестимулирующий фактор (rhGM-CSF), а при получении ДК – GM-CSF и интерферон-α. В качестве М1-поляризующих сигналов использовали липополисахарид (LPS Е. coli 0114:B4) (контроль) либо препарат GcMAF-RF (опыт), которые добавляли за 48 ч до окончания культивирования. Стимулирующее влияние полученных Мф и ДК на пролиферацию клеток оценивали в аллогенной смешанной культуре лейкоцитов (алло-СКЛ) радиометрически по включению 3H-тимидина. Индекс влияния (ИВ) Мф или ДК на алло-СКЛ рассчитывали как отношение пролиферативного ответа МНК в присутствии Мф или ДК к уровню спонтанной пролиферации МНК. Для определения продукции цитокинов клетками цельной крови человека ex vivo использовали образцы периферической крови 3 доноров с двумя повторностями препарата GcMAF-RF, итого 6 вариантов. Все варианты исследования проведены на активированных митогеном и неактивированных клетках крови. Содержание цитокинов определяли методом твердофазного иммуноферментного анализа. Для количественной оценки воздействия GcMAF-RF использован индекс влияния (ИВ) как отношение продукции цитокина в присутствии GcMAF-RF к уровню спонтанной продукции. Показано, что препарат GcMAF-RF эффективно, как и «стандартный» активатор Мф и ДК липополисахарид (LPS), индуцирует поляризацию дифференцированных М0-макрофагов в М1-клетки и конечное созревание ДК, что проявляется значимым усилением их аллостимуляторной активности в смешанной культуре лейкоцитов (алло-СКЛ). Кроме того, препарат GcMAF-RF стимулирует продукцию клетками крови (гранулоцитами, лимфоцитами, моноцитами) широкий спектр цитокинов и хемокинов (TNFα, IL-1β, IL-6, IL-18, IL-4, IL-10, GM-CSF, G-CSF, VEGF, IL-8), что свидетельствует о прямом участии активатора макрофагов GcMAF-RF в различных иммунных процессах. Таким образом, отечественный препарат GcMAF-RF индуцирует поляризацию макрофагов M0 → M1, конечное созревание ДК и аллостимулирующую активность Мф и ДК, а также способен эффективно стимулировать циркулирующие клетки крови к синтезу цитокинов/хемокинов с провоспалительной и иммунорегуляторной активностью. 

This article is the second communication in a series of articles devoted to the effects of a domestic preparation of macrophage-activating factor (GcMAF-RF) and assessment of its biological properties. The aim of this work was to study the effect of the GcMAF-RF upon M0 → M1 polarization of macrophages (Mph), and activation of the professional properties of ex vivo generated antigen-presenting dendritic cells (DC), as well as on ex vivo production of pro-inflammatory (TNFα, IL-1β, IL-6, IFNγ, IL-17, IL-18) and anti-inflammatory (TGF-β, IL-4, IL-10) cytokines, growth factors (IL-2, GM-CSF, G-CSF, VEGF) and chemokines (MCP, IL-8) by the whole blood cells from healthy donors. Mph and DC were generated from the monocytes (3 to 5×106 /ml) derived from adherent fraction of peripheral blood mononuclear cells (MNC) of healthy donors. Granulocyte/macrophage colony-stimulating factor (rhGM-CSF) was used to obtain Mph, whereas DC production was induced by GM-CSF and interferon-α. To provide M1 polarizing signals, bacterial lipopolysaccharide (LPS from E. coli 0114:B4) was used in controls. In experimental series, GcMAF-RF was added 48 h before the end of culture. The stimulating effect of the obtained Mph and DC upon cell proliferation was assessed in allogeneic mixed culture of leukocytes (alloMLC) using radiometric technique, by 3 H-thymidine incorporation. The influence index (IR) of Mph or DC upon allo-SCL was calculated as the ratio of the proliferative response of MNCs in the presence of Mph, or DC to the level of spontaneous MNC proliferation. To determine the cytokine production by human whole blood cells ex vivo, peripheral blood samples from 3 donors with two replicate GcMAF-RF preparations were used, at a total of 6 points. All variants of the study were carried out with mitogen-activated and non-activated blood cells. The cytokine content was determined by the ELISA assays. The effects of GcMAF-RF were quantified as a fold increase (FI), i.e., the ratio of cytokine production in the presence of GcMAF-RF to the level of their spontaneous production. It was shown that the GcMAF-RF preparation was as effective, as lipopolysaccharide (LPS), the standard Mph and DC activator which induces polarization of differentiated M0-macrophages into M1 cells and final maturation of DCs, manifesting by a significant increase in their allo-stimulatory activity in a mixed leukocyte culture (allo-MLC). Moreover, GcMAF-RF stimulates production of numerous cytokines and chemokines (TNFα, IL-1β, IL-6, IL-18, IL-4, IL-10, GM-CSF, G-CSF, VEGF, IL-8), by blood cells (granulocytes, lymphocytes, monocytes), thus indicating direct participation of the macrophage activator GcMAF-RF in various immune processes. The domestic GcMAF-RF drug induces polarization of macrophages M0 → M1, final maturation of DCs and allostimulating activity of Mf and DCs, and is also able to effectively stimulate circulating blood cells to synthesize cytokines/chemokines with pro-inflammatory and immunoregulatory activities. 

макрофаг-активирующий фактор (GcMAF-RF)макрофагидендритные клеткицитокиныmacrophage-activating factor (GcMAF-RF)macrophagesdendritic cellscytokinesДанная работа была выполнена при поддержке бюджетного финансирования по теме государственного задания № 0259-2021-0013. Работа была выполнена при поддержке ООО «АКТИВАТОР МАФ» и ООО «БА-фарма».ReferencesКетлинский С.А., Симбирцев А.С. Цитокины. СПб: Фолиант, 2008. 552 c.Ketlinsky S.A., Simbirtsev A.S. Cytokines. St. Petersburg: Foliant, 2008. 552 p.Козлова А.И., Воропаев Е.В., Конопля А.И. Роль дендритных клеток в формировании противоопухолевого иммунитета (обзор литературы) // Проблемы здоровья и экологии, 2015. C. 19-24.Kozlova A.I., Voropaev E.V., Konoplya A.I. The role of dendritic cells in the formation of antitumor immunity (literature review). Problemy zdorovya i ekologii = Health and Ecology Problems, 2015, pp. 19-24. (In Russ.)Левитес Е.В., Кирикович С.С., Долгова Е.В., Проскурина А.С., Риттер Г.С., Останин А.А., Черных Е.Р., Богачев С.С. Оценка in vitro биологической активности отечественного препарата макрофаг-активирующего фактора (GcMAF-RF) // Вавиловский журнал генетики и селекции, 2020. Т. 24, № 3. С. 284-291.Levites E.V., Kirikovich S.S., Dolgova E.V., Proskurina A.S., Ritter G.S., Ostanin A.A., Chernykh E.R., Bogachev S.S. In vitro assay of biological activity of a national preparation of macrophage activating factor (GcMAF-RF). Vavilovskiy zhurnal genetiki i selektsii = Vavilov Journal of Genetics and Breeding, 2020, Vol. 24, no. 3, pp. 284-291. (In Russ.)Леплина О.Ю., Тихонова М.А., Козлов Ю.П., Ступак В.В., Никонов С.Д., Останин А.А., Черных Е.Р. Частично зрелые дендритные клетки как потенциальная основа для индукции противоопухолевого ответа у больных злокачественными глиомами // Медицинская иммунология, 2005. Т. 7, № 4. С. 365-374. doi: 10.15789/1563-0625-2005-4-365-374.Leplina O.Yu., Tikhonova M.A., Kozlov Yu.P., Stupak V.V., Nikonov S.D., Ostanin A.A., Chernykh E.R. Semimature dendritic cells as a potential basis for the induction of anti-tumor response in patients with malignant gliomas. Meditsinskaya immunologiya = Medical Immunology (Russia), 2005, Vol. 7, no. 4, pp. 365-374. (In Russ.) doi: 10.15789/1563-0625-2005-4-365-374.Леплина О.Ю., Тихонова М.А., Тыринова Т.В., Алямкина Е.А., Богачев С.С., Останин А.А., Черных Е.Р. Функциональная активность IFNα- и IL-4-индуцированных дендритных клеток человека: сравнительное исследование // Медицинская иммунология, 2014. Т. 16, № 1. С. 43-52. doi: 10.15789/1563-0625-2014-1-43-52.Leplina O.Yu., Tikhonova M.A., Tyrinova T.V., Alyamkina E.A., Bogachev S.S., Ostanin A.A., Chernykh E.R. Functional activity of IFNα- and IL-4- induced human dendritic cells: a comparative study. Meditsinskaya immunologiya = Medical Immunology (Russia), 2014, Vol. 16, no. 1, pp. 43-52. (In Russ.) doi: 10.15789/1563-0625-2014-1-43-52.Монастырская Е.А., Лямина С.В., Малышев И.Ю. М1 и М2 фенотипы активированных макрофагов и их роль в иммунном ответе и патологии // Патогенез, 2008. Т. 6, № 4. С. 31-39.Monastyrskaya E.A., Lyamina S.V., Malyshev I.Yu. M1 and M2 phenotypes of activated macrophages and their role in the immune response and pathology. Patogenez = Pathogenesis, 2008, Vol. 6, no. 4, pp. 31-39. (In Russ.)Останин А.А., Кирикович С.С., Долгова Е.В., Проскурина А.С., Черных Е.Р., Богачев С.С. Тернистый путь макрофаг-активирующего фактора (GcMAF): от открытия к клинической практике // Вавиловский журнал генетики и селекции, 2019. Т. 23, № 5. С. 624-631.Ostanin A.A., Kirikovich S.S., Dolgova E.V., Proskurina A.S., Chernykh E.R., Bogachev S.S. A thorny pathway of macrophage activating factor (GcMAF): from bench to bedside. Vavilovskiy zhurnal genetiki i selektsii = Vavilov Journal of Genetics and Breeding, 2019, Vol. 23, no. 5, pp. 624-631. (In Russ.)Рыжикова С.Л., Дружинина Ю.Г., Рябичева Т.Г., Вараксин Н.А. Стандартизация методики определения продукции цитокинов клетками крови ex vivo // Клиническая лабораторная диагностика, 2011. Т. 11. С. 49-53.Ryzhikova S.L., Druzhinina Yu.G., Ryabicheva T.G., Varaksin N.A. Standardization of the method for determining the production of cytokines by blood cells ex vivo. Klinicheskaya laboratornaya diagnostika = Russian Clinical Laboratory Diagnostics, 2011, Vol. 11, pp. 49-53. (In Russ.)Сахно Л.В., Шевела Е.Я., Тихонова М.А., Останин А.А., Черных Е.Р. Молекулярные механизмы иммуносупрессорной активности М2-макрофагов // Иммунология, 2016. Т. 37, № 6. С. 311-315.Sakhno I.V., Shevela E.Ya., Tikhonova M.A., Ostanin A.A., Chernykh E.R. Molecular mechanisms of M2 macrophage immunosuppressive activity. Immunologiya = Immunologiya, 2016, Vol. 37, no. 6, pp. 311-315. (In Russ.)Талаев В.Ю., Плеханова М.В., Матвеичев А.В. Экспериментальные модели, пригодные для оценки влияния компонентов новых разрабатываемых вакцин на дифференцировку дендритных клеток // Медиаль, 2014. Т. 2, № 12. С. 135-153.Talaev V.Yu., Plekhanova M.V., Matveichev A.V. Experimental models suitable for evaluating the effect of components of new vaccines under development on dendritic cell differentiation. Medial, 2014, Vol. 2, no. 12, pp. 135-153. (In Russ.)Черных Е.Р., Леплина О.Ю., Тыринова Т.В., Тихонова М.А., Ступак В.В., Мишинов С.В., Пендюрин И.В., Останин А.А. Противоопухолевая активность дендритных клеток здоровых доноров и больных с опухолями головного мозга // Медицинская иммунология, 2010. Т. 12, № 3. С. 199-206.Chernykh E.R., Leplina O.Yu., Tyrinova T.V., Tikhonova M.A., Stupak V.V., Mishinov S.V., Pendyurin I.V., Ostanin A.A. Anti-tumor activity of dendritic cells in healthy donors and patients with brain tumors. Meditsinskaya immunologiya = Medical Immunology (Russia), 2010, Vol. 12, no. 3, pp. 199-206. (In Russ.)Черных Е.Р., Тыринова Т.В., Леплина О.Ю., Тихонова М.А., Курочкина Ю.Д., Олейник Е.А., Сахно Л.В., Останин А.А. Фенотип и функции дендритных клеток человека, генерированных из субпопуляций моноцитов CD14+, оппозитных по экспрессии CD16 // Бюллетень сибирской медицины, 2019. Т. 18, № 1. С. 266-276.Chernykh E.R., Tyrinova T.V., Leplina O.Yu., Tikhonova M.A., Kurochkina Yu.D., Oleynik E.A., Sakhno L.V., Ostanin A.A. Phenotype and functions of human dendritic cells derived from CD14+ monocyte subsets opposed to CD16 expression. Byulleten sibirskoy meditsiny = Bulletin of Siberian Medicine, 2019, Vol. 18, no. 1, pp. 266-276. (In Russ.)Шевела Е.Я., Янковская А.А., Сахно Л.В., Останин А.А., Черных Е.Р. Патент. РФ 2717024 Способ идентификации функционального М1 и М2 фенотипа макрофагов человека, генерированных in vitro из моноцитов крови / № 2019118746, заявл. 17.06.2019; опубл. 17.03.2020, Бюл. № 8.Shevela E.Ya., Yankovskaya A.A., Sakhno L.V., Ostanin A.A., Chernykh E.R. Pat. RF 2717024 Method for identification of functional M1 and M2 phenotype of human macrophages generated in vitro from blood monocytes / No. 2019118746, Appl. 06/17/2019; publ. 03.17.2020, Bul. No. 8.Banchereau J., Steinman R.M. Dendritic cells and the control of immunity. Nature, 1998, Vol. 392, no. 6673, pp. 245-252.Banchereau J., Steinman R.M. Dendritic cells and the control of immunity. Nature, 1998, Vol. 392, no. 6673, pp. 245-252.Blanco P., Palucka A.K., Pascual V., Banchereau J. Dendritic cells and cytokines in human inflammatory and autoimmune diseases. Cytokine Growth Factor Rev., 2008, Vol. 19, no. 1, pp. 41-52.Blanco P., Palucka A.K., Pascual V., Banchereau J. Dendritic cells and cytokines in human inflammatory and autoimmune diseases. Cytokine Growth Factor Rev., 2008, Vol. 19, no. 1, pp. 41-52.Cassetta L., Cassol E., Poli G. Macrophage polarization in health and disease. Sci. World J., 2011, Vol. 11, pp. 2391-2402.Cassetta L., Cassol E., Poli G. Macrophage polarization in health and disease. Sci. World J., 2011, Vol. 11, pp. 2391-2402.Cheda A., Nowosielska E.M., Wrembel-Wargocka J., Janiak M.K. Production of cytokines by peritoneal macrophages and splenocytes after exposures of mice to low doses of X-rays. Radiat. Environ. Biophys., 2008, Vol. 47, pp. 275-283.Cheda A., Nowosielska E.M., Wrembel-Wargocka J., Janiak M.K. Production of cytokines by peritoneal macrophages and splenocytes after exposures of mice to low doses of X-rays. Radiat. Environ. Biophys., 2008, Vol. 47, pp. 275-283.Duque G.A., Descoteaux A. Macrophage cytokines: involvement in immunity and infectious diseases. Front. Immunol., 2014, Vol. 5, 491. doi: 10.3389/fimmu.2014.00491.Duque G.A., Descoteaux A. Macrophage cytokines: involvement in immunity and infectious diseases. Front. Immunol., 2014, Vol. 5, 491. doi: 10.3389/fimmu.2014.00491.Fleetwood A.J., Lawrence T., Hamilton J.A., Cook A.D. Granulocyte-macrophage colony-stimulating factor (CSF) and macrophage CSF-dependent macrophage phenotypes display differences in cytokine profiles and transcription factor activities: implications for CSF blockade in inflammation. J. Immunol., 2007, Vol. 178, no. 8, pp. 5245-5252.Fleetwood A.J., Lawrence T., Hamilton J.A., Cook A.D. Granulocyte-macrophage colony-stimulating factor (CSF) and macrophage CSF-dependent macrophage phenotypes display differences in cytokine profiles and transcription factor activities: implications for CSF blockade in inflammation. J. Immunol., 2007, Vol. 178, no. 8, pp. 5245-5252.Fogg D.K., Sibon C., Miled C., Jung S., Aucouturier P., Littman D.R., Cumano A., Geissmann F.A. Clonogenic bone marrow progenitor specific for macrophages and dendritic cells. Science, 2006, Vol. 311, no. 5757, pp. 83-87.Fogg D.K., Sibon C., Miled C., Jung S., Aucouturier P., Littman D.R., Cumano A., Geissmann F.A. Clonogenic bone marrow progenitor specific for macrophages and dendritic cells. Science, 2006, Vol. 311, no. 5757, pp. 83-87.Geissmann F., Gordon S., Hume D.A., Mowat A.M., Randolph G.J. Unravelling mononuclear phagocyte heterogeneity. Nat. Rev. Immunol., 2010, Vol. 10, no. 6, pp. 453-460.Geissmann F., Gordon S., Hume D.A., Mowat A.M., Randolph G.J. Unravelling mononuclear phagocyte heterogeneity. Nat. Rev. Immunol., 2010, Vol. 10, no. 6, pp. 453-460.Gordon S. Alternative activation of macrophages. Nat. Rev. Immunol., 2003, Vol. 3, pp. 23-35.Gordon S. Alternative activation of macrophages. Nat. Rev. Immunol., 2003, Vol. 3, pp. 23-35.Gordon S., Taylor P.R. Monocyte and macrophage heterogeneity. Nat. Rev. Immunol., 2005, Vol. 5, no. 12, pp. 953-964.Gordon S., Taylor P.R. Monocyte and macrophage heterogeneity. Nat. Rev. Immunol., 2005, Vol. 5, no. 12, pp. 953-964.Homma S., Yamamoto M., Yamamoto N. Vitamin D-binding protein (group-specific component) is the sole serum protein required for macrophage activation after treatment of peritoneal cells with lysophosphatidylcholine. Immunol. Cell Biol., 1993, Vol. 71, pp. 249-257.Homma S., Yamamoto M., Yamamoto N. Vitamin D-binding protein (group-specific component) is the sole serum protein required for macrophage activation after treatment of peritoneal cells with lysophosphatidylcholine. Immunol. Cell Biol., 1993, Vol. 71, pp. 249-257.Hume D.A. Macrophages as APC and the dendritic cell myth. J. Immunol., 2008, Vol. 181, no. 9, pp. 5829-5835.Hume D.A. Macrophages as APC and the dendritic cell myth. J. Immunol., 2008, Vol. 181, no. 9, pp. 5829-5835.Inui T., Kuchiike D., Kubo K., Mette M., Uto Y., Hori H., Sakamoto N. Clinical experience of integrative cancer immunotherapy with GcMAF. Anticancer Res., 2013, Vol. 33, no. 7, pp. 2917-2919.Inui T., Kuchiike D., Kubo K., Mette M., Uto Y., Hori H., Sakamoto N. Clinical experience of integrative cancer immunotherapy with GcMAF. Anticancer Res., 2013, Vol. 33, no. 7, pp. 2917-2919.Ishikawa M., Inoue T., Inui T., Kuchiike D., Kubo K., Uto Y., Nishikata T. A novel assay system for macrophageactivating factor activity using a human U937 cell line. Anticancer Res., 2014, Vol. 34, no. 8, pp. 4577-4581.Ishikawa M., Inoue T., Inui T., Kuchiike D., Kubo K., Uto Y., Nishikata T. A novel assay system for macrophageactivating factor activity using a human U937 cell line. Anticancer Res., 2014, Vol. 34, no. 8, pp. 4577-4581.Jaguin M., Houlbert N., Fardel O., Lecureur V. Polarization profiles of human M-CSF-generated macrophages and comparison of M1-markers in classically activated macrophages from GM-CSF and M-CSF origin. Cell. Immunol., 2013, Vol. 281, pp. 51-61.Jaguin M., Houlbert N., Fardel O., Lecureur V. Polarization profiles of human M-CSF-generated macrophages and comparison of M1-markers in classically activated macrophages from GM-CSF and M-CSF origin. Cell. Immunol., 2013, Vol. 281, pp. 51-61.Kisker O., Onizuka S., Becker C.M., Fannon M., Flynn E., d’Amato R., Zetter B., Folkman J., Ray R., Swamy N., Pirie-Shepherd S. Vitamin D binding protein-macrophage activating factor (DBP-maf) inhibits angiogenesis and tumor growth in mice. Neoplasia, 2003, Vol. 5, no. 1, pp. 32-40.Kisker O., Onizuka S., Becker C.M., Fannon M., Flynn E., d’Amato R., Zetter B., Folkman J., Ray R., Swamy N., Pirie-Shepherd S. Vitamin D binding protein-macrophage activating factor (DBP-maf) inhibits angiogenesis and tumor growth in mice. Neoplasia, 2003, Vol. 5, no. 1, pp. 32-40.Kroemer G., Galluzzi L., Kepp O., Zitvogel L. Immunogenic cell death in cancer therapy. Annu. Rev. Immunol., 2013, Vol. 31, pp. 51-72.Kroemer G., Galluzzi L., Kepp O., Zitvogel L. Immunogenic cell death in cancer therapy. Annu. Rev. Immunol., 2013, Vol. 31, pp. 51-72.Kuchiike D., Uto Y., Mukai H., Ishiyama N., Abe C., Tanaka D., Kawai T., Kubo K., Mette M., Inui T., Endo Y., Hori H. Degalactosylated/desialylated human serum containing GcMAF induces macrophage phagocytic activity and in vivo antitumor activity. Anticancer Res., 2013, Vol. 33, no. 7, pp. 2881-2885.Kuchiike D., Uto Y., Mukai H., Ishiyama N., Abe C., Tanaka D., Kawai T., Kubo K., Mette M., Inui T., Endo Y., Hori H. Degalactosylated/desialylated human serum containing GcMAF induces macrophage phagocytic activity and in vivo antitumor activity. Anticancer Res., 2013, Vol. 33, no. 7, pp. 2881-2885.Kurosaka K., Takahashi M., Kobayashi Y. Activation of extracellular signal-regulated kinase 1/2 is involved in production of CXC-chemokine by macrophages during phagocytosis of late apoptotic cells. Biochem. Biophys. Res. Commun., 2003, Vol. 306, no. 4, pp. 1070-1074.Kurosaka K., Takahashi M., Kobayashi Y. Activation of extracellular signal-regulated kinase 1/2 is involved in production of CXC-chemokine by macrophages during phagocytosis of late apoptotic cells. Biochem. Biophys. Res. Commun., 2003, Vol. 306, no. 4, pp. 1070-1074.Lamagna C., Aurrand-Lions M., Imhof B.A. Dual role of macrophages in tumor growth and angiogenesis. J. Leukoc. Biol., 2006, Vol. 80, no. 4, pp. 705-713.Lamagna C., Aurrand-Lions M., Imhof B.A. Dual role of macrophages in tumor growth and angiogenesis. J. Leukoc. Biol., 2006, Vol. 80, no. 4, pp. 705-713.Martinez F.O., Sica A., Mantovani A., Locati M. Macrophage activation and polarization. Front. Biosci., 2008, Vol. 1, no. 13, pp. 453-461.Martinez F.O., Sica A., Mantovani A., Locati M. Macrophage activation and polarization. Front. Biosci., 2008, Vol. 1, no. 13, pp. 453-461.Mohamad S.B., Nagasawa H., Uto Y., Hori H. Tumor cell alpha-N-acetylgalactosaminidase activity and its involvement in GcMAF-related macrophage activation. Comp. Biochem. Physiol. A Mol. Integr. Physiol., 2002, Vol. 132, pp. 1-8.Mohamad S.B., Nagasawa H., Uto Y., Hori H. Tumor cell alpha-N-acetylgalactosaminidase activity and its involvement in GcMAF-related macrophage activation. Comp. Biochem. Physiol. A Mol. Integr. Physiol., 2002, Vol. 132, pp. 1-8.Murray P.J., Wynn T.A. Protective and pathogenic functions of macrophage subsets. Nat. Rev. Immunol., 2011, Vol. 11, no. 11, pp. 723-737.Murray P.J., Wynn T.A. Protective and pathogenic functions of macrophage subsets. Nat. Rev. Immunol., 2011, Vol. 11, no. 11, pp. 723-737.Nagasawa H., Uto Y., Sasaki H., Okamura N., Murakami A., Kubo S., Kirk K.L., Hori H. Gc protein (vitamin D-binding protein): Gc genotyping and GcMAF precursor activity. Anticancer Res., 2005, Vol. 25, no. 6, pp. 3689-3696.Nagasawa H., Uto Y., Sasaki H., Okamura N., Murakami A., Kubo S., Kirk K.L., Hori H. Gc protein (vitamin D-binding protein): Gc genotyping and GcMAF precursor activity. Anticancer Res., 2005, Vol. 25, no. 6, pp. 3689-3696.Nagy L., Szanto A., Szatmari I., Szeles, L. Nuclear hormone receptors enable macrophages and dendritic cells to sense their lipid environment and shape their immune response. Physiol. Rev., 2012, Vol. 92, pp. 739-789.Nagy L., Szanto A., Szatmari I., Szeles, L. Nuclear hormone receptors enable macrophages and dendritic cells to sense their lipid environment and shape their immune response. Physiol. Rev., 2012, Vol. 92, pp. 739-789.Naraparaju V.R., Yamamoto N. Roles of β-galactosidase of B lymphocytes and sialidase of T lymphocytes in inflammation-primed activation of macrophages. Immunol. Lett., 1994, Vol. 43, no. 3, pp. 143-148.Naraparaju V.R., Yamamoto N. Roles of β-galactosidase of B lymphocytes and sialidase of T lymphocytes in inflammation-primed activation of macrophages. Immunol. Lett., 1994, Vol. 43, no. 3, pp. 143-148.O’Shea J.J., Siegel R.M. Cytokines and cytokine receptors. Clinical immunology. Ed. Rich R.R., Fleisher T.A., Shearer W.T., Schroeder H.W., Frew A.J., Weyand C.M. Elsevier, 2019, pp. 127-155.O’Shea J.J., Siegel R.M. Cytokines and cytokine receptors. Clinical immunology. Ed. Rich R.R., Fleisher T.A., Shearer W.T., Schroeder H.W., Frew A.J., Weyand C.M. Elsevier, 2019, pp. 127-155.Rehder D.S., Nelson R.W., Borges C.R. Glycosylation status of vitamin D binding protein in cancer patients. Protein Sci., 2009, Vol. 18, no. 10, pp. 2036-2042.Rehder D.S., Nelson R.W., Borges C.R. Glycosylation status of vitamin D binding protein in cancer patients. Protein Sci., 2009, Vol. 18, no. 10, pp. 2036-2042.Roszer T. Understanding the mysterious M2 macrophage through activation markers and effector mechanisms. Mediators Inflamm., 2015, Vol. 2015, 816460. doi: 10.1155/2015/816460.Roszer T. Understanding the mysterious M2 macrophage through activation markers and effector mechanisms. Mediators Inflamm., 2015, Vol. 2015, 816460. doi: 10.1155/2015/816460.Saburi E., Saburi A., Ghanei M. Promising role for Gc-MAF in cancer immunotherapy: from bench to bedside. Casp. J. Intern. Med., 2017, Vol. 8, no. 4, pp. 228-238.Saburi E., Saburi A., Ghanei M. Promising role for Gc-MAF in cancer immunotherapy: from bench to bedside. Casp. J. Intern. Med., 2017, Vol. 8, no. 4, pp. 228-238.Sica A., Bronte V. Altered macrophage differentiation and immune dysfunction in tumor development. J. Clin. Invest., 2007, Vol. 117, no. 5, pp. 1155-1166.Sica A., Bronte V. Altered macrophage differentiation and immune dysfunction in tumor development. J. Clin. Invest., 2007, Vol. 117, no. 5, pp. 1155-1166.Tarique A.A., Logan J., Thomas E., Holt P.G., Sly P.D., Fantino E. Phenotypic, functional, and plasticity features of classical and alternatively activated human macrophages. Am. J. Respir. Cell Mol. Biol., 2015, Vol. 53, no. 5, pp. 676-688.Tarique A.A., Logan J., Thomas E., Holt P.G., Sly P.D., Fantino E. Phenotypic, functional, and plasticity features of classical and alternatively activated human macrophages. Am. J. Respir. Cell Mol. Biol., 2015, Vol. 53, no. 5, pp. 676-688.Thyer L., Ward E., Smith R., Branca J.J.V., Morucci G., Gulisano M., Noakes D., Eslinger R., Pacini S. GC protein-derived macrophage-activating factor decreases α-N-acetylgalactosaminidase levels in advanced cancer patients. Oncoimmunology, 2013, Vol. 2, no. 8, pp. 1-7.Thyer L., Ward E., Smith R., Branca J.J.V., Morucci G., Gulisano M., Noakes D., Eslinger R., Pacini S. GC protein-derived macrophage-activating factor decreases α-N-acetylgalactosaminidase levels in advanced cancer patients. Oncoimmunology, 2013, Vol. 2, no. 8, pp. 1-7.Thyer L., Ward E., Smith R., Fiore M., Magherini S., Branca J., Morucci G., Gulisano M., Ruggiero M., Pacini S. A novel role for a major component of the vitamin d axis: vitamin d binding protein-derived macrophage activating factor induces human breast cancer cell apoptosis through stimulation of macrophages. Nutrients, 2013, Vol. 5, no. 7, pp. 2577-2589.Thyer L., Ward E., Smith R., Fiore M., Magherini S., Branca J., Morucci G., Gulisano M., Ruggiero M., Pacini S. A novel role for a major component of the vitamin d axis: vitamin d binding protein-derived macrophage activating factor induces human breast cancer cell apoptosis through stimulation of macrophages. Nutrients, 2013, Vol. 5, no. 7, pp. 2577-2589.Weagel E., Smith C., Liu P., Robinson R., O’Neill K. Macrophage polarization and its role in cancer. J. Clin. Cell Immunol., 2015, Vol. 6, pp. 4-11.Weagel E., Smith C., Liu P., Robinson R., O’Neill K. Macrophage polarization and its role in cancer. J. Clin. Cell Immunol., 2015, Vol. 6, pp. 4-11.Yamamoto N., Homma S. Vitamin D3 binding protein (group-specific component) is a precursor for the macrophage-activating signal factor from lysophosphatidylcholine-treated lymphocytes. Proc. Natl. Acad. Sci., 1991, Vol. 88, no. 19, pp. 8539-8543.Yamamoto N., Homma S. Vitamin D3 binding protein (group-specific component) is a precursor for the macrophage-activating signal factor from lysophosphatidylcholine-treated lymphocytes. Proc. Natl. Acad. Sci., 1991, Vol. 88, no. 19, pp. 8539-8543.Yamamoto N., Kumashiro R. Conversion of vitamin D3 binding protein (group-specific component) to a macrophage activating factor by the stepwise action of beta-galactosidase of B cells and sialidase of T cells. J. Immunol., 1993, Vol. 151, no. 5, pp. 2794-2802.Yamamoto N., Kumashiro R. Conversion of vitamin D3 binding protein (group-specific component) to a macrophage activating factor by the stepwise action of beta-galactosidase of B cells and sialidase of T cells. J. Immunol., 1993, Vol. 151, no. 5, pp. 2794-2802.Yamamoto N., Naraparaju V.R., Asbell S.O. Deglycosylation of serum vitamin D3-binding protein leads to immunosuppression in cancer patients. Cancer Res., 1996, Vol. 56, no. 12, pp. 2827-2831.Yamamoto N., Naraparaju V.R., Asbell S.O. Deglycosylation of serum vitamin D3-binding protein leads to immunosuppression in cancer patients. Cancer Res., 1996, Vol. 56, no. 12, pp. 2827-2831.Yamamoto N., Suyama H., Yamamoto N. Immunotherapy for prostate cancer with Gc protein-derived macrophage-activating factor, GcMAF. Transl. Oncol., 2008, Vol. 1, pp. 65-72.Yamamoto N., Suyama H., Yamamoto N. Immunotherapy for prostate cancer with Gc protein-derived macrophage-activating factor, GcMAF. Transl. Oncol., 2008, Vol. 1, pp. 65-72.Yaraee R., Askari N., Naseri M. The effect of ms14 on production of pro-inflammatory cytokines by macrophages. Iran. J. Basic Med. Sci., 2011. Vol. 14, no. 1, pp. 89-93.Yaraee R., Askari N., Naseri M. The effect of ms14 on production of pro-inflammatory cytokines by macrophages. Iran. J. Basic Med. Sci., 2011. Vol. 14, no. 1, pp. 89-93.Zhang G.-M., Wang X.-H., Sun L.-J. Effect of tacrolimus on maturity and allostimulatory activity of cultured dendritic cells of rats in vitro. Chinese Journal of Pharmacology and Toxicology, 2009, Vol. 23, no. 5, pp. 345-350.Zhang G.-M., Wang X.-H., Sun L.-J. Effect of tacrolimus on maturity and allostimulatory activity of cultured dendritic cells of rats in vitro. Chinese Journal of Pharmacology and Toxicology, 2009, Vol. 23, no. 5, pp. 345-350.Zhou F., Zhang G-X., Rostami A. Distinct role of IL-27 in immature and LPS-induced mature dendritic cell-mediated development of CD4+CD127+3G11+ regulatory T cell subset. Front. Immunol., 2018, Vol. 9, 2562. doi 10.3389/fimmu.2018.02562.Zhou F., Zhang G-X., Rostami A. Distinct role of IL-27 in immature and LPS-induced mature dendritic cell-mediated development of CD4+CD127+3G11+ regulatory T cell subset. Front. Immunol., 2018, Vol. 9, 2562. doi 10.3389/fimmu.2018.02562.

The authors declare that there are no conflicts of interest present.