mimmunМедицинская иммунологияMedical Immunology (Russia)1563-06252313-741XSPb RAACI10.15789/1563-0625-2019-2-279-292mimmun-1511Research ArticleОРИГИНАЛЬНЫЕ СТАТЬИORIGINAL ARTICLESОСОБЕННОСТИ АЛЛОГЕННЫХ ВЗАИМОДЕЙСТВИЙ В КРАТКОСРОЧНОЙ КУЛЬТУРЕ ЛИМФОЦИТОВ СУПРУГОВ, ИМЕЮЩИХ ДЕТЕЙ С ВРОЖДЕННЫМИ ПОРОКАМИ СЕРДЦА ИЛИ РАННИЕ РЕПРОДУКТИВНЫЕ ПОТЕРИPECULIARITIES OF ALLOGENIC INTERACTIONS IN THE SHORT-TERM CULTURE OF LYMPHOCYTES OF SPOUSES WHO HAVE CHILDREN WITH CONGENITAL HEART DISEASES OR EARLY REPRODUCTIVE LOSSESШабалдинА. В.ShabaldinA. V.

ведущий научный сотрудник лаборатории клеточных технологий отдела экспериментальной и клинической кардиологии НИИ КПССЗ СО РАМН

PhD, MD (Medicine), Leading Research Associate, Laboratory of cell Technologies, Research Institute for Complex Issues

weit2007@yandex.ruШмулевичС. А.ShmulevichS. A.

заведующая детским отделением

Head, Pediatric Department

ЧистяковаГ. Н.ChistyakovaG. N.

д.м.н., профессор, руководитель научного отдела иммунологии клинической микробиологии, врач клинической лабораторной диагностики высшей категории

MD, Professor, Head of the Scientific Department of Immunology of Clinical Microbiology, Clinical Laboratory Diagnostic Doctor of the highest categor

РемизоваИ. И.RemizovaI. I.

к.б.н., старший научный сотрудник отделения иммунологии и микробиологии, биолог высшей категории

Ph.D., Senior Researcher of the Department of Immunology and Microbiology, biologist of the highest category

ЛукоянычеваЕ. Б.LukoyanychevaE. B.

заведующая иммунологической лабораторией ГБУЗ Областная больница, г. Кемерово

head of the immunological laboratory of the Leningrad Regional Hospital

ГоршковаС. В.GorshkovaS. V.

лаборант-исследователь лаборатории клеточных технологий

Laboratory Assistant, Laboratory of Cell Technology

ШабалдинаЕ. В.ShabaldinaE. V.

д.м.н., доцент, заведующая кафедрой оториноларингологии и клинической иммунологии

PhD, MD (Medicine), Associate Professor, Head, Department of Otolaryngology and Clinical Immunology

НИИ Комплексных проблем сердечно-сосудистых заболеваний СО РАМН (НИИ КПССЗ СО РАМН)РоссияResearch Institute for Complex Issues of Cardiovascular DiseasesRussian FederationГБУЗ Кемеровской области «Кемеровский областной клинический кардиологический диспансер имени академика Л.С. Барбараша»РоссияKemerovo L. Barbarash Cardiological DispensaryRussian FederationФГБНУ «Научно-исследовательский институт охраны материнства и младенчества»РоссияResearch Institute of Maternity and Infancy CareRussian FederationГБУЗ Кемеровской области «Кемеровская областная клиническая больница»РоссияRegional HospitalRussian FederationФГБНУ «Научно-исследовательский институт комплексных проблем сердечно-сосудистых заболеваний»РоссияResearch Institute for Complex Issues of Cardiovascular DiseasesRussian FederationФГБОУ ВО «Кемеровский государственный медицинский университет»РоссияKemerovo State Medical UniversityRussian Federation201901032019212279292Copyright © Шабалдин А.В., Шмулевич С.А., Чистякова Г.Н., Ремизова И.И., Лукоянычева Е.Б., Горшкова С.В., Шабалдина Е.В., 20192019Шабалдин А.В., Шмулевич С.А., Чистякова Г.Н., Ремизова И.И., Лукоянычева Е.Б., Горшкова С.В., Шабалдина Е.В.Shabaldin A.V., Shmulevich S.A., Chistyakova G.N., Remizova I.I., Lukoyanycheva E.B., Gorshkova S.V., Shabaldina E.V.Данная работа распространяется под лицензией Creative Commons Attribution 4.0.This work is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 License.https://www.mimmun.ru/mimmun/article/view/2019-21-2-9

Проведено изучение аллогенных по HLA взаимодействий в краткосрочной культуре лимфоцитов супругов, имеющих детей с врожденными пороками сердца или ранние репродуктивные потери. Обследованы: 21 семейная пара (основная группа), имеющих детей со спорадическими врожденными пороками сердца (дефект межжелудочковой перегородки) без хромосомных заболеваний (ВПС); 50 семейных пар (группа сравнения), имеющих две и более репродуктивные потери (выкидыши, замершие беременности, привычное невынашивание беременности - ПНБ) в ранние сроки гестации (до 9 недель); и 41 семья, имеющих трех и более здоровых детей (контрольная группа). Оценка иммунного ответа в СКЛ оценивалась по увеличению экспрессии HLA-DR в смешанной культуре по отношению к спонтанным культурам лимфоцитов. Первичная окраска женских и мужских лимфоцитов моноклональными антителами к CD45 конъюгированными с различными флуоресцентными красителями (PC-5 и PC-7) позволила оценить иммунный ответ женских лимфоцитов на мужские и наоборот. Проведена оценка супрессорного эффекта женской аутосыворотки на смешанную культуру лимфоцитов супругов. Результаты исследования показали различие в аллогенных по HLA взаимодействиях в краткосрочной культуре лимфоцитов супругов, имеющих репродуктивные потери и детей с врожденными пороками сердца. Репродуктивные потери были ассоциированы с низким блокирующим эффектом женской аутосыворотки на аллогенные по HLA взаимодействия в краткосрочной культуре лимфоцитов супругов. Врожденные пороки сердца были ассоциированы с высокой активностью женских В-лимфоцитов (CD3-/HLA-DR+) в краткосрочной смешанной культуре лимфоцитов супругов.

 

 

We have studied HLA allogeneic interactions in short-term cultures of lymphocytes from the parents having children with congenital heart defects (CHD), or subject to early reproductive losses. Twentyone married couples (CHD as the main group) who had children with sporadic CHD (interventricular septal defect) without chromosomal diseases were observed. Fifty married couples (a comparison group) had two or more reproductive losses in early gestation (up to 9 weeks), denoted as PNPs (miscarriages, missed abortions, habitual miscarriages. Forty-one families with three or more healthy children represented a control group. Immune response in cell cultures was evaluated by increasing expression of HLA-DR in a mixed culture, as compared to spontaneous lymphocyte cultures. Initial labeling of female and male lymphocytes with monoclonal antibodies to CD45 conjugated to different fluorescent dyes (PC-5 and PC-7) allowed us to evaluate the immune response of female lymphocytes to males and vice versa. The suppressor effect of autologous female serum upon the mixed culture of the lymphocytes of the spouses was also evaluated. Results of the present study showed a difference in HLA allogeneic interactions in the short-term culture of lymphocytes registered for spouses with reproductive losses and children with congenital heart defects. Reproductive losses were associated with a low blocking effect of female auto-serum upon allogeneic HLA interactions in the short-term culture of the lymphocytes of the spouses. Congenital heart defects were associated with high activity of female B-lymphocytes (CD3-/HL-DR+) in short-term mixed culture of lymphocytes from the spouses.

смешанная культура лимфоцитоврепродуктивные потериврожденные пороки сердцаHLA-DRmixed lymphocyte culturereproductive losscongenital heart diseaseHLA-DRReferencesБеленкова О.В., Мозес В.Г., Шабалдин А.В., Шабалдина Е.В. Характер аллогенных взаимодействий супругов в кратковременной смешанной культуре при иммунных формах репродуктивных потерь // Журнал теоритической и клинической медицины (Узбекистан), 2014. Т. 3, № 1. С. 219-222. [Belenkova O.V., Mozes V.G., Shabaldin A.V., Shabaldina E.V. The nature of allogenic interactions of spouses in a short-term mixed culture with immune forms of reproductive losses. Zhurnal teoriticheskoy i klinicheskoy meditsiny (Uzbekistan) = Journal of Theoretical and Clinical Medicine (Uzbekistan), 2014, Vol. 3, no. 1, pp. 219-222. (In Russ.)]Беленкова О.В., Мозес В.Г., Шабалдин А.В., Шабалдина Е.В. Характер аллогенных взаимодействий супругов в кратковременной смешанной культуре при иммунных формах репродуктивных потерь // Журнал теоритической и клинической медицины (Узбекистан), 2014. Т. 3, № 1. С. 219-222. [Belenkova O.V., Mozes V.G., Shabaldin A.V., Shabaldina E.V. The nature of allogenic interactions of spouses in a short-term mixed culture with immune forms of reproductive losses. Zhurnal teoriticheskoy i klinicheskoy meditsiny (Uzbekistan) = Journal of Theoretical and Clinical Medicine (Uzbekistan), 2014, Vol. 3, no. 1, pp. 219-222. (In Russ.)]Газиева И.А., Чистякова Г.Н., Ремизова И.И. Роль нарушений продукции цитокинов в генезе плацентарной недостаточности и ранних репродуктивных потерь // Медицинская иммунология, 2014. Т. 16, № 6. С. 539-550. [Gazieva I.A., Chistyakova G.N., Remizova I.I. Role of сytokine production disorders in genesis of placental insufficiency and early reproductive losses. Meditsinskaya immunologiya = Medical Immunology (Russia), 2014, Vol. 16, no. 6, pp. 539-550. (In Russ.)] doi: 10.15789/1563-0625-2014-6-539-550.Газиева И.А., Чистякова Г.Н., Ремизова И.И. Роль нарушений продукции цитокинов в генезе плацентарной недостаточности и ранних репродуктивных потерь // Медицинская иммунология, 2014. Т. 16, № 6. С. 539-550. [Gazieva I.A., Chistyakova G.N., Remizova I.I. Role of сytokine production disorders in genesis of placental insufficiency and early reproductive losses. Meditsinskaya immunologiya = Medical Immunology (Russia), 2014, Vol. 16, no. 6, pp. 539-550. (In Russ.)] doi: 10.15789/1563-0625-2014-6-539-550.Самбур М.Б. Способ оценки взаимодействия лимфоцитов in vitro, основанный на определении их розеткообразующей способности // Иммунология, 1991. № 2. С. 30-33. [Sambur M.B. A method for evaluating the interaction of lymphocytes in vitro, based on the determination of their rosette-forming ability. Immunologiya = Immunology, 1991, no. 2, pp. 30-33. (In Russ.)]Самбур М.Б. Способ оценки взаимодействия лимфоцитов in vitro, основанный на определении их розеткообразующей способности // Иммунология, 1991. № 2. С. 30-33. [Sambur M.B. A method for evaluating the interaction of lymphocytes in vitro, based on the determination of their rosette-forming ability. Immunologiya = Immunology, 1991, no. 2, pp. 30-33. (In Russ.)]Сепиашвили Р.И. Функциональная система иммунного гомеостаза // Аллергология и иммунология, 2015. Т. 16, № 1. С. 91-100. [Sepiashvili R.I. The functional system of immune homeostasis. Allergologiya i immunologiya = Allergology and Immunology, 2015, Vol. 16, no. 1, pp. 91-100. (In Russ.)]Сепиашвили Р.И. Функциональная система иммунного гомеостаза // Аллергология и иммунология, 2015. Т. 16, № 1. С. 91-100. [Sepiashvili R.I. The functional system of immune homeostasis. Allergologiya i immunologiya = Allergology and Immunology, 2015, Vol. 16, no. 1, pp. 91-100. (In Russ.)]Хаитов Р.М., Алексеев Л.П., Кофиади И.А. Роль иммуногенетики в решении фундаментальных и прикладных задач персонализированной медицины // Медицина экстремальных ситуаций, 2016. Т. 3, № 57. С. 9-24. [Khaitov R.M., Alekseev L.P., Kofiadi I.A. Role of immunogenetics in addressing fundamental and applied tasks of personalized medicine. Meditsina ekstremalnykh situatsiy = Medicine of Extreme Situations, 2016, Vol. 3, no. 57, pp. 9-24. (In Russ.)]Хаитов Р.М., Алексеев Л.П., Кофиади И.А. Роль иммуногенетики в решении фундаментальных и прикладных задач персонализированной медицины // Медицина экстремальных ситуаций, 2016. Т. 3, № 57. С. 9-24. [Khaitov R.M., Alekseev L.P., Kofiadi I.A. Role of immunogenetics in addressing fundamental and applied tasks of personalized medicine. Meditsina ekstremalnykh situatsiy = Medicine of Extreme Situations, 2016, Vol. 3, no. 57, pp. 9-24. (In Russ.)]Чистякова Г.Н., Шабалдин А.В., Беленкова О.В., Мозес В.Г., Матвеева В.Г., Шабалдина Е.В., Ремизова И.И., Газиева И.А. Патент РФ № 2581925 «Способ определения аллогенного иммунного ответа в кратковременной смешанной культуре лимфоцитов неродственных доноров». [Chistyakova G.N., Shabaldin A.V., Belenkova O.V., Mozes V.G., Matveeva V.G., Shabaldina E.V., Remizova I.I., Gazieva I.A. Patent No. 2581925 “A method for determining the allogeneic immune response in a short-term mixed culture of lymphocytes from unrelated donors”].Чистякова Г.Н., Шабалдин А.В., Беленкова О.В., Мозес В.Г., Матвеева В.Г., Шабалдина Е.В., Ремизова И.И., Газиева И.А. Патент РФ № 2581925 «Способ определения аллогенного иммунного ответа в кратковременной смешанной культуре лимфоцитов неродственных доноров». [Chistyakova G.N., Shabaldin A.V., Belenkova O.V., Mozes V.G., Matveeva V.G., Shabaldina E.V., Remizova I.I., Gazieva I.A. Patent No. 2581925 “A method for determining the allogeneic immune response in a short-term mixed culture of lymphocytes from unrelated donors”].Шабалдин А.В., Мозес В.Г., Беленкова О.В., Шабалдина Е.В. Патент РФ № 2585091 «Способ определения антител к аллогенным HLA-G». [Shabaldin A.V., Mozes V.G., Belenkova O.V., Shabaldina E.V. Patent No. 2585091 “Method for the determination of antibodies to allogeneic HLA-G”].Шабалдин А.В., Мозес В.Г., Беленкова О.В., Шабалдина Е.В. Патент РФ № 2585091 «Способ определения антител к аллогенным HLA-G». [Shabaldin A.V., Mozes V.G., Belenkova O.V., Shabaldina E.V. Patent No. 2585091 “Method for the determination of antibodies to allogeneic HLA-G”].Ширшев С.В. Гормональные механизмы регуляции иммунной системы в период беременности // Успехи современной биологии, 2005. № 6. С. 555-566. [Shirshev S.V. Hormonal mechanisms of the immune system regulation in pregnancy. Uspekhi sovremennoy biologii = Biology Bulletin Reviews, 2005, no. 6, pp. 555-566. (In Russ.)]Ширшев С.В. Гормональные механизмы регуляции иммунной системы в период беременности // Успехи современной биологии, 2005. № 6. С. 555-566. [Shirshev S.V. Hormonal mechanisms of the immune system regulation in pregnancy. Uspekhi sovremennoy biologii = Biology Bulletin Reviews, 2005, no. 6, pp. 555-566. (In Russ.)]Ярилин А.А. Иммунология. M.: ГЭОТАР-Медиа, 2010. 740 с. [Yarilin A.A. Immunology]. Moscow: GEOTAR-Media, 2010. 740 p.Ярилин А.А. Иммунология. M.: ГЭОТАР-Медиа, 2010. 740 с. [Yarilin A.A. Immunology]. Moscow: GEOTAR-Media, 2010. 740 p.Erlebacher A. Immunology of the maternal-fetal interface. Annu Rev. Immunol., 2013, no. 31, pp. 387-411.Erlebacher A. Immunology of the maternal-fetal interface. Annu Rev. Immunol., 2013, no. 31, pp. 387-411.García-Enguídanos A., Calle M.E., Valero J., Luna S., Domınguez-Rojas V. Risk factors in miscarriage and malformation: a review. Eur. J. Obstet. Gynecol. Reprod. Biol., 2002, Vol. 102, no. 2, pp. 111-119.García-Enguídanos A., Calle M.E., Valero J., Luna S., Domınguez-Rojas V. Risk factors in miscarriage and malformation: a review. Eur. J. Obstet. Gynecol. Reprod. Biol., 2002, Vol. 102, no. 2, pp. 111-119.Ganu R.S., Harris R.A., Collins K., Aagaard K.M. Early origins of adult disease: Approaches for investigating the programmable epigenome in humans, nonhuman primates, and rodents. ILAR J., 2012, Vol. 53, no. 3-4, pp. 306-321.Ganu R.S., Harris R.A., Collins K., Aagaard K.M. Early origins of adult disease: Approaches for investigating the programmable epigenome in humans, nonhuman primates, and rodents. ILAR J., 2012, Vol. 53, no. 3-4, pp. 306-321.Inada K., Shima T., Nakashima A. Characterization of regulatory T cells in decidua of miscarriage cases with abnormal or normal fetal chromosomal content. J. Reprod. Immunol., 2013, Vol. 97, no. 1, pp. 104-111.Inada K., Shima T., Nakashima A. Characterization of regulatory T cells in decidua of miscarriage cases with abnormal or normal fetal chromosomal content. J. Reprod. Immunol., 2013, Vol. 97, no. 1, pp. 104-111.Liddy K.A., White M.Y., Cordwell S.J. Functional decorations: post-translational modifications and heart disease delineated by targeted proteomics. Genome Med., 2013, Vol. 5, no. 2, p. 20.Liddy K.A., White M.Y., Cordwell S.J. Functional decorations: post-translational modifications and heart disease delineated by targeted proteomics. Genome Med., 2013, Vol. 5, no. 2, p. 20.Koichi I., Tadao T., Norio T. Possible mechanisms of immunotherapy for maintaining pregnancy in recurrent spontaneous aborters: analysis of anti-idiotypic antibodies directed against autologous T-cell receptors. Hum. Reprod., 1999, Vol. 14, no. 3, pp. 650-655.Koichi I., Tadao T., Norio T. Possible mechanisms of immunotherapy for maintaining pregnancy in recurrent spontaneous aborters: analysis of anti-idiotypic antibodies directed against autologous T-cell receptors. Hum. Reprod., 1999, Vol. 14, no. 3, pp. 650-655.Miranda S., Litwin S., Barrientos G. Dendritic cells therapy confers a protective microenvironment in murine pregnancy. Scand. J. Immunol., 2006, Vol. 64, no. 5, pp. 493-499.Miranda S., Litwin S., Barrientos G. Dendritic cells therapy confers a protective microenvironment in murine pregnancy. Scand. J. Immunol., 2006, Vol. 64, no. 5, pp. 493-499.Mjosberg J., Berg G., Jenmalm M.C., Ernerudh J. FOXP3+ regulatory T cells and T helper 1, T helper 2, and T helper 17 cells in human early pregnancy deciduas. Biol. Reprod., 2010, Vol. 82, no. 4, pp. 698-705.Mjosberg J., Berg G., Jenmalm M.C., Ernerudh J. FOXP3+ regulatory T cells and T helper 1, T helper 2, and T helper 17 cells in human early pregnancy deciduas. Biol. Reprod., 2010, Vol. 82, no. 4, pp. 698-705.Morin-Papunen L., Tiilikainen A., Hartikainen-Sorri A.L. Maternal HLA immunization during pregnancy: presence of anti HLA antibodies in half of multigravidous women. Med. Biol., 1984, Vol. 62, no. 6, pp. 323-325.Morin-Papunen L., Tiilikainen A., Hartikainen-Sorri A.L. Maternal HLA immunization during pregnancy: presence of anti HLA antibodies in half of multigravidous women. Med. Biol., 1984, Vol. 62, no. 6, pp. 323-325.Oyama K., El-Nachef D., Zhang Y., Sdek P., MacLellan W.R. Epigenetic regulation of cardiac myocyte differentiation. Frontiers in Genetics, no. 5, p. 375.Oyama K., El-Nachef D., Zhang Y., Sdek P., MacLellan W.R. Epigenetic regulation of cardiac myocyte differentiation. Frontiers in Genetics, no. 5, p. 375.Robertson S.A., Prins J.R., Sharkey D.J., Moldenhauer L.M. Seminal fluid and the generation of regulatory T cells for embryo implantation. Am. J. Reprod. Immunol., 2013, Vol. 69, no. 4, pp. 315-303.Robertson S.A., Prins J.R., Sharkey D.J., Moldenhauer L.M. Seminal fluid and the generation of regulatory T cells for embryo implantation. Am. J. Reprod. Immunol., 2013, Vol. 69, no. 4, pp. 315-303.

The authors declare that there are no conflicts of interest present.