mimmunМедицинская иммунологияMedical Immunology (Russia)1563-06252313-741XSPb RAACI10.15789/1563-0625-2008-4-5-327-336mimmun-182Research ArticleОРИГИНАЛЬНЫЕ СТАТЬИORIGINAL ARTICLESВЗАИМОДЕЙСТВИЕ РАЗЛИЧНЫХ МОЛЕКУЛЯРНЫХ ФОРМ ИММУНОГЛОБУЛИНА КЛАССА А И РЕКОМБИНАНТНЫХ ДЕРИВАТОВ РЕЦЕПТОРНОГО ВАС БЕЛКА СТРЕПТОКОККОВ ГРУППЫ ВINTERACTION BETWEEN DIFFERENT MOLECULAR FORMS OF IMMUNOGLOBULIN A AND RECOMBINANT DERIVATIVES POLYPEPTIDES OF BAC RECEPTOR PROTEINS FROM GROUP B STREPTOCOCCIКоржуеваА. С.KorzhuevaA. S.Alexander_suvorov1@hotmail.comИбрагимоваД. Г.IbragimovaD. G.Alexander_suvorov1@hotmail.comУстиновичИ. А.UstinovichI. A.Alexander_suvorov1@hotmail.comТотолянАртем А.TotolianArtem A.Alexander_suvorov1@hotmail.comСамойловичМ. П.SamoilovichM. P.Alexander_suvorov1@hotmail.comСуворовА. Н.SuvorovA. N.

Руководитель лаборатории молекулярной генетики патогенных микроорганизмов

 

Alexander_suvorov1@hotmail.comНИИ Экспериментальной Медицины РАМН, Санкт-ПетербургRussian FederationФГУ «РНЦРХТ Росмедтехнологий»Russian Federation200817072014104-5327336Copyright © Коржуева А.С., Ибрагимова Д.Г., Устинович И.А., Тотолян А.А., Самойлович М.П., Суворов А.Н., 20142014Коржуева А.С., Ибрагимова Д.Г., Устинович И.А., Тотолян А.А., Самойлович М.П., Суворов А.Н.Korzhueva A.S., Ibragimova D.G., Ustinovich I.A., Totolian A.A., Samoilovich M.P., Suvorov A.N.Данная работа распространяется под лицензией Creative Commons Attribution 4.0.This work is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 License.https://www.mimmun.ru/mimmun/article/view/182

Резюме. Работа посвящена исследованию взаимодействия между иммуноглобулином класса А и рекомбинантными полипептидами Р6, Р7, Р8, созданными на основе поверхностного белка Bac стрептококков группы В, обладающего IgA-рецепторной активностью.

В настоящее время существует потребность в иммунохимических реагентах, строго специфичных в отношении IgA как для создания диагностикумов по детекции уровня IgA в биологических жидкостях, так и для аффинного выделения IgA и его фрагментов.

С целью изучения возможности реализации указанных выше направлений применения протеинов в ходе исследования была определена способность рекомбинантных полипептидов Р6, Р7, Р8, связывающих Fc-область IgA, вступать во взаимодействие с различными формами IgA (сывороточный IgA, секреторный IgA, подклассы сывороточного IgA – IgA1, IgA2) и подтверждена избирательность связывания лиганда.

Выяснено, что строение рекомбинантного деривата Р6, среди трех представленных полипептидов, является оптимальным для осуществления IgA-рецепторной способности.

Определены структурные особенности связывания иммуноглобулина А фрагментами Вас белка: положение сайта связывания на молекуле IgA (приближен к эпитопам трех МкАт), изменчивость структуры данного сайта, а также устойчивость сайта связывания полипептидов Р6, Р7, Р8 к частичному восстановлению дисульфидных связей на молекуле IgA.

Abstract. The article concerns interactions between immunoglobulin A and recombinant P6, P7, P8 polypeptides, designed on the basis of externally localized Bac protein of the Group B streptococci, possessing IgA-binding activity.

There is a current demand for immunochemical reagents that are strictly specific for IgA, in order to develop antigenic standards for detection of IgA levels in biological fluids, as well as for affinity purification of IgA and its fragments.

To analyze an opportunity of the abovementioned application ways for these proteins, a special study was performed to assay an interaction capability of recombinant P6, P7, P8 polypeptides binding to Fc regions of different IgA forms (serum IgA, secretory IgA, subclasses of serum IgA – IgA1, IgA2). Selectivity of ligand binding was specially confirmed.

It was found out that, among three presented polypeptides, the structure of recombinant P6 derivative proved to be optimal for IgA-binding ability of Bac protein.

Structural features of IgA-binding fragments of Bac protein, i.e., binding site position on the IgA molecule (proximity to epitopes for three monoclonal antibodies), variability of the site structure, as well as resistance of binding site for P6, P7, P8 in IgA molecule against partial disulfide bonds reduction. (Med. Immunol., vol. 10, N 4-5, pp 327-336).

рекомбинантные полипептидыстрептококки группы Врецепторы IgAВас белокиммунохимические реагентыrecombinant polypeptidesgroup B streptococciIgA receptorВас proteinimmunochemical reagentsReferencesГрязева И.В., Климович В.Б. Моноклональные антитела и тест-системы для выявления секреторного IgA и свободного секреторного компонента // Мед. иммунология. – 1999. – Т. 1, № 3-4. – С. 59.Грязева И.В., Климович В.Б. Моноклональные антитела и тест-системы для выявления секреторного IgA и свободного секреторного компонента // Мед. иммунология. – 1999. – Т. 1, № 3-4. – С. 59.Грязева И.В., Климович В.Б., Пашкова С.Ф. Моноклональные антитела к легким цепям иммуноглобулинов человека и их применение в иммуноанализе // Иммунология. – 1994. – № 3. – С. 31-37.Грязева И.В., Климович В.Б., Пашкова С.Ф. Моноклональные антитела к легким цепям иммуноглобулинов человека и их применение в иммуноанализе // Иммунология. – 1994. – № 3. – С. 31-37.Дэвени Т., Гергей Я. Аминокислоты, пептиды и белки: Пер. с англ. А.Н. Маца / Под ред. Р.С. Незлина. – М.: Мир, 1976. – 356 с.Дэвени Т., Гергей Я. Аминокислоты, пептиды и белки: Пер. с англ. А.Н. Маца / Под ред. Р.С. Незлина. – М.: Мир, 1976. – 356 с.Климович В.Б., Самойлович М.П., Крутецкая И.Ю., Пашкова С.Ф. Моноклональные антитела против подклассов IgG человека. Эпитопная специфичность и применение в иммуноанализе // Иммунология. – 1998. – № 3. – С. 30-32.Климович В.Б., Самойлович М.П., Крутецкая И.Ю., Пашкова С.Ф. Моноклональные антитела против подклассов IgG человека. Эпитопная специфичность и применение в иммуноанализе // Иммунология. – 1998. – № 3. – С. 30-32.Мерингова Л.Ф., Леонтьева Г.Ф., Устинович И.А., Грабовская К.Б., Суворов А.Н., Тотолян Артем А. Сравнительное изучение антигенных и иммуногенных свойств рекомбинантных полипептидов – фрагментов белка BAC стрептококка группы B // Мед. иммунология. – 2004. – Т. 6, № 6. – C. 493-498.Мерингова Л.Ф., Леонтьева Г.Ф., Устинович И.А., Грабовская К.Б., Суворов А.Н., Тотолян Артем А. Сравнительное изучение антигенных и иммуногенных свойств рекомбинантных полипептидов – фрагментов белка BAC стрептококка группы B // Мед. иммунология. – 2004. – Т. 6, № 6. – C. 493-498.Устинович И.А. Изучение области связывания IgA на рекомбинантном BAC белке стрептококка группы B: Диcс. ... канд. биол. наук. – СПб., 2000. – 109 с.Устинович И.А. Изучение области связывания IgA на рекомбинантном BAC белке стрептококка группы B: Диcс. ... канд. биол. наук. – СПб., 2000. – 109 с.Леонтьева Г.Ф., Суворов А.Н., Мерингова Л.Ф., Грабовская К.Б., Устинович И.А., Тотолян А.А. Экспериментальная оценка рекомбинантных полипетидов как вакцины против стрептококков группы B // Журн. микробиологии, эпидемиологии и иммунобиологии. – 2005. – № 2. – С. 35-40.Леонтьева Г.Ф., Суворов А.Н., Мерингова Л.Ф., Грабовская К.Б., Устинович И.А., Тотолян А.А. Экспериментальная оценка рекомбинантных полипетидов как вакцины против стрептококков группы B // Журн. микробиологии, эпидемиологии и иммунобиологии. – 2005. – № 2. – С. 35-40.Areschoung T., Lindahl G., Stálhammar-Carlemalm M. Surfase proteins of Streptococcus agalactiae and related proteins in other bacterial pathogens // Clin. Microbiol. Rev. – 2005. – Vоl. 18, N 1. – P. 102-127.Areschoung T., Lindahl G., Stálhammar-Carlemalm M. Surfase proteins of Streptococcus agalactiae and related proteins in other bacterial pathogens // Clin. Microbiol. Rev. – 2005. – Vоl. 18, N 1. – P. 102-127.Brady L.J., Boyle M. Identification of non-immunoglobulin A-Fc-binding forms and low-molecular-weight secreted forms of the group B streptococcal β antigen // Infect. Immun. – 1989. – Vol. 57, N 5. – P. 1573-1581.Brady L.J., Boyle M. Identification of non-immunoglobulin A-Fc-binding forms and low-molecular-weight secreted forms of the group B streptococcal β antigen // Infect. Immun. – 1989. – Vol. 57, N 5. – P. 1573-1581.Lindahl G., Akeström B., Vaerman J.-P., Stenberg L. Characterization of an IgA receptor from group B streptococci: specificity for serum IgA // Eur. J. Immunol. – 1990. – Vol. 20, N 10. – P. 2241-2247.Lindahl G., Akeström B., Vaerman J.-P., Stenberg L. Characterization of an IgA receptor from group B streptococci: specificity for serum IgA // Eur. J. Immunol. – 1990. – Vol. 20, N 10. – P. 2241-2247.Suvorov A., Ustinovitch I., Meringova L., Grabovskaya K., Leontieva G., Vorobieva E., Totolian A. Construction of recombinant polypeptides based on beta antigen C (Bac) protein & their usage for protection against group B streptococcal infection // Indian J. Med. Res. – 2004. – N 119 (Suppl). – P. 228-232.Suvorov A., Ustinovitch I., Meringova L., Grabovskaya K., Leontieva G., Vorobieva E., Totolian A. Construction of recombinant polypeptides based on beta antigen C (Bac) protein & their usage for protection against group B streptococcal infection // Indian J. Med. Res. – 2004. – N 119 (Suppl). – P. 228-232.Forsgren A., Sjöquist J. «Protein A» from S. aureus. I. Pseudo-immune reaction with human gamma-globulin // J. Immunol. – 1966. – Vol. 97, N 6. – P. 822-827.Forsgren A., Sjöquist J. «Protein A» from S. aureus. I. Pseudo-immune reaction with human gamma-globulin // J. Immunol. – 1966. – Vol. 97, N 6. – P. 822-827.Jerlström P.J., Talay S.R., Valentin-Weigand P., Timmis K.N., Chhatwal G.S. Identification of an Immunoglobulin A binding motif located in the β-antigen of the C protein complex of group B streptococci // Infect. Immun. – 1996. – Vol. 64, N 7. – P. 2787-2793.Jerlström P.J., Talay S.R., Valentin-Weigand P., Timmis K.N., Chhatwal G.S. Identification of an Immunoglobulin A binding motif located in the β-antigen of the C protein complex of group B streptococci // Infect. Immun. – 1996. – Vol. 64, N 7. – P. 2787-2793.Mitchell T.J. The pathogenesis of streptococcal infections: from tooth decay to meningitis // Nat. Rev. Microbiol. – 2003. – Vol. 1, N 3. – P. 219-230.Mitchell T.J. The pathogenesis of streptococcal infections: from tooth decay to meningitis // Nat. Rev. Microbiol. – 2003. – Vol. 1, N 3. – P. 219-230.Anthony B.F., Concepcion N.F., Puentes S.M., Payne N.R. Nonimmune binding of human immunoglobulin A to type II group B streptococci // Infect. Immun. – 1990. – Vol. 58, N 6. – P. 1789-1795.Anthony B.F., Concepcion N.F., Puentes S.M., Payne N.R. Nonimmune binding of human immunoglobulin A to type II group B streptococci // Infect. Immun. – 1990. – Vol. 58, N 6. – P. 1789-1795.Yang H.H., Madoff L.C., Guttormsen H.K., Liu Y.D., Paoletti L.C. Recombinant group B streptococcus Beta C protein and a variant with the deletion of its immunoglobulin A-binding site are protective mouse maternal vaccines and effective carriers in conjugate vaccines // Infect. Immun. – 2007. – Vol. 75, N 7. – P. 3455-3461.Yang H.H., Madoff L.C., Guttormsen H.K., Liu Y.D., Paoletti L.C. Recombinant group B streptococcus Beta C protein and a variant with the deletion of its immunoglobulin A-binding site are protective mouse maternal vaccines and effective carriers in conjugate vaccines // Infect. Immun. – 2007. – Vol. 75, N 7. – P. 3455-3461.Russell-Jones G.J., Gotschlich E.C., Blake M.S. A surface receptor specific for human IgA on group B streptococci possessing the Ibc protein antigen // J. Exp. Med. – 1984. – Vol. 160. – P. 1467-1475.Russell-Jones G.J., Gotschlich E.C., Blake M.S. A surface receptor specific for human IgA on group B streptococci possessing the Ibc protein antigen // J. Exp. Med. – 1984. – Vol. 160. – P. 1467-1475.Pleass R.J., Areschoug T., Lindahl G., Woof J.M. Streptococcal IgA-binding proteins bind in the Cα2-Cα3 interdomain region and inhibit binding of IgA to human CD89 // J. Biol. Chem. – 2001. – Vol. 276, N 11. – P. 8197-8204.Pleass R.J., Areschoug T., Lindahl G., Woof J.M. Streptococcal IgA-binding proteins bind in the Cα2-Cα3 interdomain region and inhibit binding of IgA to human CD89 // J. Biol. Chem. – 2001. – Vol. 276, N 11. – P. 8197-8204.

The authors declare that there are no conflicts of interest present.