References

mimmun

Медицинская иммунология

Medical Immunology (Russia)

1563-06252313-741X

SPb RAACI

10.15789/1563-0625-2018-5-657-666

mimmun-1634

Research Article

ОРИГИНАЛЬНЫЕ СТАТЬИ

ORIGINAL ARTICLES

РЕГУЛЯТОРНЫЕ Т-КЛЕТКИ В ФОЛЛИКУЛЯРНОЙ ЖИДКОСТИ У ЖЕНЩИН, ПРОХОДЯЩИХ ЛЕЧЕНИЕ ПО ПРОГРАММЕ ЭКО

REGULATORY T CELLS IN FOLLICULAR FLUID OF WOMEN UNDERGOING IVF TREATMENT

Андреева

E. А.

Andreeva

E. A.

эмбриолог, аспирант лаборатории клеточной иммунотерапии.

Embryologist, Postgraduate Student, Laboratory of Cellular Immunotherapy.

630099, Russian Federation, Novosibirsk, Yadrintsevskaya str., 14.

ct_lab@mail.ru

Хонина

Н. А.

Khonina

N. A.

д.м.н., врач клинический иммунолог, ведущий научный сотрудник лаборатории клеточной иммунотерапии.

PhD, MD (Medicine), Immunologist, Leading Research Associate, Laboratory of Cellular Immunotherapy.

Тихонова

М. А.

Tikhonova

M. A.

к.б.н., старший научный сотрудник лаборатории клеточной иммунотерапии.

PhD (Biology), Senior Research Associate, Laboratory of Cellular Immunotherapy.

Баторов

Е. В.

Batorov

E. V.

к.м.н., научный сотрудник лаборатории клеточной иммунотерапии.

PhD (Medicine), Research Associate, Laboratory of Cellular Immunotherapy.

Пасман

Н. М.

Pasman

N. M.

д.м.н., профессор, врач акушер-гинеколог, заведующая кафедрой акушерства и гинекологии медицинского факультета.

Новосибирск.

PhD, MD (Medicine), Professor, Clinical Obstetrician/Gynecologist, Head, Obstetrics and Gynecology Department, Faculty of Medicine.

Черных

E. Р.

Chernykh

E. R.

д.м.н., профессор, член-корр. РАН, заведующая лабораторией клеточной иммунотерапии.

PhD, MD (Medicine), Professor, Corresponding Member, Russian Academy of Sciences, Head, Laboratory of Cellular Immunotherapy.

ФГБНУ «Научно-исследовательский институт фундаментальной и клинической иммунологии».РоссияResearch Institute of Fundamental and Clinical Immunology.Russian Federation

ФГАОУ ВО «Новосибирский государственный университет».РоссияNovosibirsk State University.Russian Federation

2018

04112018

205657666

2018

Андреева E.А., Хонина Н.А., Тихонова М.А., Баторов Е.В., Пасман Н.М., Черных E.Р.

Andreeva E.A., Khonina N.A., Tikhonova M.A., Batorov E.V., Pasman N.M., Chernykh E.R.

Данная работа распространяется под лицензией Creative Commons Attribution 4.0.

This work is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 License.

https://www.mimmun.ru/mimmun/article/view/1634

Данная работа посвящена исследованию различных субпопуляций FoxP3+ регуляторных Т-клеток (Treg) в фолликулярной жидкости (ФЖ) женщин, проходивших лечение методом ЭКО, и взаимосвязи Treg с параметрами фолликуло-/оогенеза, качеством эмбрионов и исходом ЭКО. В исследование были включены 53 женщины, участвующие в программе стимуляции суперовуляции в возрасте от 25 до 46 лет. Содержание Treg в ФЖ определяли методом проточной цитофлуориметрии с использованием моноклональных антител. Исследования ФЖ выявили наличие в ней FoxP3+Т-клеток как в популяции CD4+ (CD4+FoxP3+), так и CD4(CD4-FoxP3+) лимфоцитов. При этом FoxP3-клетки определяли в популяциях CD4+CD25+ и CD4+CD25лимфоцитов. Женщины с наименьшим числом фолликулов и ооцитов характеризовались наибольшим содержанием в ФЖ CD4+CD25-FoxP3+ и CD4FoxP3+ клеток соответственно. Ретроспективный анализ также выявил сопряженность между относительным содержанием Treg и качеством ооцитов и эмбрионов. Высокий индекс оплодотворения (ИО 0,75-1,0) ассоциировался с более высоким содержанием в ФЖ CD4-FoxP3+ клеток, а высокое качество бластоцист на 5 сутки в сравнении с оппозитной группой характеризовалось более высоким содержанием в ФЖ не только CD4-FoxP3+, но и CD4+FoxP3+ клеток. При этом наступление и прогрессирование беременности также регистрировалось у женщин с наибольшим числом CD4-FoxP3+ клеток. Полученные данные свидетельствуют о наличии различных субпопуляций FoxP3+Т-клеток в ФЖ и их возможном участии в регуляции ранних этапов репродуктивного процесса. Особую роль среди различных субпопуляций Treg, по-видимому, играют СD4-FoxP3+Т-клетки, количество которых прямо сопряжено с эффективностью оогенеза, бластуляции и наступлением клинической беременности.

The aim of the study was to evaluate FoxP3+ regulatory T cell (Тreg) subsets in the follicular fluid (FF) of the women undergoing in vitro fertilization (IVF), and their relationships with features of folliculogenesis and oogenesis, as well as quality of embryos and retrospective assessment of IVF outcomes. The study included 53 women at the age of 25 to 46 years stimulated by superovulation. The count of Tregs in the FF samples was determined by flow cytometry using appropriate monoclonal antibodies. The FF examination revealed of FoxP3+ T cells from both CD4+ (CD4+FoxP3+) and CD4(CD4-FoxP3+) T lymphocyte subsets. Moreover, the FoxP3+ cells were registered in CD4+CD25+ and CD4+CD25T lymphocyte subsets. Follicular fluid of women with a relatively small number of follicles contained higher numbers of CD4+CD25-FoxP3+ T cells, whereas a reduced number of oocytes was associated with the highest count of CD4-FoxP3+ T cells in FF. Retrospective analysis showed the a relationship between percentage of Tregs, and quality of oocytes and embryos. High fertilization index (0.75-1.0), reflecting maturity of the oocytes was associated with higher count of CD4-FoxP3+ T cells in the FF. Better quality of blastocysts was associated with a higher count of both CD4-FoxP3+ and CD4+FoxP3+ T cells. Onset and progression of pregnancies was also registered in women with relatively high counts of CD4-FoxP3+ T cells. The obtained data showed presence of different FoxP3+ T cell subtypes in follicular fluid, and its possible role in controlling early stages of reproductive process. CD4-FoxP3+ T cells seem to be the most important subpopulation; their counts are associated with efficacy of oogenesis, blastulation and pregnancy occurence.

бесплодиерегуляторные Т-клеткиЭКОфолликулярная жидкостьооцитыбеременность

infertilityregulatory T cellsIVFfollicular fluidoocytespregnancy

References1

Arruvito L., Sanz M., Banham A.H., Fainboim L. Expansion of СD4+CD25+ and FOXP3+ regulatory T cells during the follicular phase of the menstrual cycle: implications for human reproduction. J. Immunol., 2007, Vol. 178, no. 4, рр. 2572-2578.

Bao S.H., Wang X.P.,De Lin Q., Wang W.J., Yin G.J., Qiu L.H. Decidual CD4+CD25+CD127dim/- regulatory T cells in patients with unexplained recurrent spontaneous miscarriage. Eur. J. Obstet. Gynecol. Reprod. Biol., 2011, Vol. 55, pp. 94-98.

Basuino L., Silveira C.F. Human follicular fluid and effects on reproduction. JBRA Assist. Reprod., 2016, Vol. 20, no. 1, pp. 38-40.

Bedke Т., Pretsch L., Karakhanova S., Enk A.H., Mahnke K. Endothelial cells augment the suppressive function of CD4+CD25+Foxp3+ Regulatory T cells: Involvement of programmed death-1 and IL-10. J. Immunol., 2010, Vol. 184, pp. 5562-5570.

Bonelli M., Savitskaya A., Steiner C.W., Rath E., Smolen J.S., Scheinecker C. Phenotypic and functional analysis of CD4+CD25-Foxp3+ T cells in patients with systemic lupus erythematosus. J. Immunol., 2009, Vol. 182, no. 3, pp. 1689-1695.

Boyman O., Sprent J. The role of interleukin-2 during homeostasis and activation of the immune system. Nat. Rev. Immunol., 2012, pp. 180-190.

Bukulmez O., Arici A. Leukocytes in ovarian function. Hum. Reprod. Update, 2000, Vol. 6, no. 1, pp. 1-15.

Chakraborty S., Panda A.K., Bose S., Roy D., Kajal K., Guha D., Sa G. Transcriptional regulation of FOXP3 requires integrated activation of both promoter and CNS regions in tumor-induced CD8+ Treg cells. Sci Rep., 2017, no. 7, Article number 1628. doi:10.1038/s41598-017-01788-z.

Chaput N., Darrasse-Jèze G., Bergot A.S., Cordier C., Ngo-Abdalla S., Klatzmann D., Azogui O. Regulatory T cells prevent CD8 T cell maturation by inhibiting CD4 Th cells at tumor sites. J. Immunol., 2007, Vol. 179, no. 8, pp. 4969-4978.

Chen W.J., Hu X.F., Yan M. Human umbilical vein endothelial cells promote the inhibitory activation of CD4(+)CD25(+)Foxp3(+) regulatory T cells via PD-L1. Atherosclerosis, 2016, Vol. 244, pp. 108-112.

Du M.R., Guo P.F., Piao H.L., Wang S.C., Sun C., Jin L.P., Tao Y., Li Y.H., Zhang D., Zhu R., Fu Q. Embryonic trophoblasts induce decidual regulatory T cell differentiation and maternal-fetal tolerance through thymic stromal lymphopoietin instructing dendritic cells. J. Immunol., 2014, Vol. 15, no. 192 (4), pp. 1502-1511.

Gardner D.K., Schoolcraft W.B. Culture and transfer of human blastocysts. Curr. Opin. Obstet. Gynecol., 1999, Vol. 11, no. 3, pp. 307-311.

Churlaud G., Pitoiset F., Jebbawi F., Lorenzon R., Bellier B., Rosenzwajg M., Klatzmann D. Human and mouse CD8+CD25+FOXP3+ regulatory T cells at steady state and during interleukin-2 therapy. Front. Immunol., 2015, Vol. 6, p. 171.

Horwitz D.A. Identity of mysterious CD4+CD25-Foxp3+ cells in SLE. Arthritis Res. Ther., 2010, Vol. 12, no. 1, p. 101.

Kiniwa Y., Miyahara Y., Wang H.Y., Peng W., Peng G., Wheeler T.M., Thompson T.C., Old L.J., Wang R.F. CD8+ Foxp3+ regulatory T cells mediate immunosuppression in prostate cancer. Clin. Cancer Res., 2007, Vol. 13, no. 23, pp. 6947-6958.

Kollmann Z., Schneider S., Fux M., Bersinger N.A., Wolff M. Gonadotrophin stimulation in IVF alters the immune cell profile in follicular fluid and the cytokine concentrations in follicular fluid and serum. Hum. Reprod., 2017, Vol. 32, no. 4, pp. 820-831.

Martins W.P., Nastri C.O., Rienzi L., Poel S.Z., Gracia C., Racowsky C. Blastocyst vs cleavage-stage embryo transfer: systematic review and meta-analysis of reproductive outcomes. Ultrasound Obstet. Gynecol., 2017, Vol. 49, no. 5, pp. 583-591.

Mei S., Tan J., Chen H., Chen Y., Zhang J. Changes of CD4+CD25high regulatory T cells and FOXP3 expression in unexplained recurrent spontaneous abortion patients. Fertill. Steril., 2010, Vol. 94, no. 6, pp. 2244-2247.

Miyara M., Yoshioka Y., Kitoh A., Shima T., Wing K., Niwa A., Parizot C., Taflin C., Heike T., Valeyre D., Mathian A., Nakahata T., Yamaguchi T., Nomura T., Ono M., Amoura Z., Gorochov G., Sakaguchi S. Functional delineation and differentiation dynamics of human CD4+ T cells expressing the FoxP3 transcription factor. Immunity, 2009, Vol. 30, no. 6, pp. 899-911.

Oakley O.R., Kim H.Y., El-Amouri I., Lin P.P., Cho J., Bani-Ahmad M., Ko C. Periovulatory leukocyte infiltration in the rat ovary. Endocrinology, 2010, Vol. 151, no. 9, pp. 4551-4559.

Ohkura N., Kitagawa Y., Sakaguchi S. Development and maintenance of regulatory T cells. Immunity, 2013, Vol. 38, no. 3, pp. 414-423.

Rudensky A.Y. Regulatory T cells and Foxp3. Immunol. Rev., 2011, Vol. 241, no. 1, pp. 260-268.

Sakaguchi S. Naturally arising CD4+ regulatory T cells for immunologic self-tolerance and negative contro of immune responses. Annu Rev. Immunol., 2004, Vol. 22, pp. 531-562.

Woidacki K., Meyer N., Schumacher A., Goldschmidt A., Maurer M., Zenclussen A.C. Transfer of regulatory T cells into abortion-prone mice promotes the expansion of uterine mast cells and normalizes early pregnancy angiogenesis. Sci Rep., 2015, Report 5, 13938. doi:10.1038/srep13938.

Yagi H., Nomura T., Nakamura K. Crucial role of FOXP3 in the development and function of human CD25+CD4+ regulatory T cells. Int. Immunol., 2004, Vol. 16, no. 11, pp. 1643-1656.

Yang H.X., Zhang W., Zhao L.D., Li Y., Zhang F.C., Tang F.L., He W., Zhang X.: Are CD4+CD25-Foxp3+ cells in untreated new-onset lupus patients regulatory T cells? Arthritis Res. Ther., 2009, Vol. 11, no. 5, p. R153.

Yu J., Qian L., Wu F., Li M., Chen W., Wang H. Decreased frequency of peripheral blood CD8+CD25+FoxP3+regulatory T cells correlates with IL-33 levels in pre-eclampsia. Hypertens Pregnancy, 2017, Vol. 36, no. 2, pp. 217-225.

Zamah A.M., Hassis M.E., Albertolle M.E., Williams K.E. Proteomic analysis of human follicular fluid from fertile women. Clin. Proteomics, 2015, Vol. 12, no. 1, p. 5.

Zóka A., Barna G., Somogyi A., Műzes G., Oláh Á., Al-Aissa Z., Hadarits O., Kiss K., Firneisz G. Extension of the CD4+Foxp3+CD25(-/low) regulatory T-cell subpopulation in type 1 diabetes mellitus. Autoimmunity, 2015, Vol. 48, no. 5, pp. 289-297.

The authors declare that there are no conflicts of interest present.