mimmunМедицинская иммунологияMedical Immunology (Russia)1563-06252313-741XSPb RAACI10.15789/1563-0625-2018-4-597-600mimmun-1568Research ArticleКРАТКИЕ СООБЩЕНИЯSHORT COMMUNICATIONSИЗУЧЕНИЕ СВОЙСТВ ВОДНО-СОЛЕВОГО МИКСТАЛЛЕРГЕНА ИЗ КЛЕЩЕЙ ДОМАШНЕЙ ПЫЛИ С ЦЕЛЬЮ СОЗДАНИЯ СУБЛИНГВАЛЬНОЙ ФОРМЫSTUDY OF THE PROPERTIES OF THE MIXED WATER/SALT HOUSE DUST MITE ALLERGEN AIMING TO DESIGN ITS SUBLINGUAL FORMБержецВ. М.BerzhetsV. M.

д.б.н., профессор, заведующая лабораторией по разработке аллергенов,

Москва

PhD, MD (Biology), Professor, Head, Laboratory of Allergens,

Moscow

ХлгатянС. В.KhlgatianS. V.

д.б.н., ведущий научный сотрудник лаборатории по разработке аллергенов,

Москва

PhD, MD (Biology), Leading Research Associate, Laboratory of Allergens,

Moscow

ПетроваС. Ю.PetrovaS. Yu.

к.м.н., старший научный сотрудник лаборатории по разработке аллергенов,

105064, Москва, М. Казенный пер., 5а

PhD (Medicine), Senior Research Associate, Laboratory of Allergens,

105064, Moscow, Maliy Kazenniy lane, 5a

laball@yandex.ruХрулеваВ. А.KhrulevaV. A.

младший научный сотрудник лаборатории по разработке аллергенов,

Москва

Junior Research Associate, Laboratory of Allergens,

Moscow

ЕфремовМ. А.EfremovM. A.

младший научный сотрудник лаборатории клеточных взаимодействий,

Москва

Junior Research Associate, Laboratory of Cell Interactions,

Moscow

ВасильеваА. В.VasilyevaA. B.

научный сотрудник лаборатории по разработке аллергенов,

Москва

Research Associate, Laboratory of Allergens,

Moscow

ПетроваН. С.PetrovaN. S.

к.б.н., старший научный сотрудник лаборатории по разработке аллергенов,

Москва

PhD (Biology), Senior Research Associate, Laboratory of Allergens,

Moscow

АкутинаВ. А.AkutinaV. A.

младший научный сотрудник лаборатории по разработке аллергенов,

Москва

Junior Research Associate, Laboratory of Allergens,

Moscow

ФГБНУ «Научно-исследовательский институт вакцин и сывороток имени И.И. Мечникова»РоссияI.I. Mechnikov Research Institute of Vaccines and SeraRussian FederationФГБУН «Институт биоорганической химии имени академиков М.М. Шемякина и Ю.А. Овчинникова Российской академии наук»РоссияShemyakin–Ovchinnikov Institute of Bioorganic Chemistry, Russian Academy of SciencesRussian Federation201825062018204597600Copyright © Бержец В.М., Хлгатян С.В., Петрова С.Ю., Хрулева В.А., Ефремов М.А., Васильева А.В., Петрова Н.С., Акутина В.А., 20182018Бержец В.М., Хлгатян С.В., Петрова С.Ю., Хрулева В.А., Ефремов М.А., Васильева А.В., Петрова Н.С., Акутина В.А.Berzhets V.M., Khlgatian S.V., Petrova S.Y., Khruleva V.A., Efremov M.A., Vasilyeva A.B., Petrova N.S., Akutina V.A.Данная работа распространяется под лицензией Creative Commons Attribution 4.0.This work is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 License.https://www.mimmun.ru/mimmun/article/view/1568

В настоящее время аллерген-специфическая иммунотерапия (АСИТ) является наиболее патогенетически обоснованным методом лечения IgE-зависимых аллергических заболеваний. В широкой клинической практике в настоящий момент используют подкожный (ПКИТ) и сублингвальный (СЛИТ) способы АСИТ. Сублингвальная иммунотерапия отличается удобством применения, выраженным снижением системных и местных побочных эффектов и доказанной клинической эффективностью. В России, к сожалению, в настоящее время сублингвальных форм клещевых аллергенов для проведения АСИТ не производится. Ранее в нашей лаборатории была разработана технология получения сублингвального препарата аллергена из клещей D. farina и было показано, что полученный препарат не токсичен и не вызывает выраженных побочных эффектов. Целью настоящего исследования является получение препарата микст-аллергена из клещей D. pteronyssinus и D. farinae, предназначенного для проведения аллерген-специфической иммунотерапии сублингвальным способом. Задачи исследования: изучение физико-химических и иммунобиологических свойств полученного без фенольного водно-солевого микст-экстракта (БВСМЭ) из клещей D. pteronyssinus и D. farinae. Изучали свойства полученного БВСМЭ из клещей домашней пыли Dermatophagoides pteronyssinus (Der p) и Dermatophagoides farinae (Der f), прошедшего стерилизующую фильтрацию. БВСМЭ анализировали методом электрофореза в ПААГ в присутствии додецил-сульфата натрия и обращенно-фазовой высокоэффективной жидкостной хромотографией. Проводили ИФА с кроличьими поликлональными сыворотками, полученными в результате сенсибилизации животных рекомбинантными аллергенами Der f1 и Der f2. В ИФА показана положительная реакция БВСМЭ с IgG-антителами кроликов. Изучали острую и хроническую токсичность полученного микст-аллергенного препарата на лабораторных животных. Согласно проведенному патоморфологическому анализу было показано, что препарат не обладает токсичностью и не вызывает местного раздражающего действия у испытуемых животных. Полученный БВСМЭ содержит нативные белки, сохраняет иммуногенные свойства, не токсичен и не вызывает выраженных побочных эффектов. Данный экстракт может быть использован в качестве основы для создания сублингвальной формы клещевого микст-аллергена, что особенно перспективно для применения в педиатрической практике.

Сurrent allergen-specific immunotherapy (AIT) is the most pathogenetically justified method of the IgE-dependent treatment of allergic diseases. Subcutaneous (SCIT) and sublingual (SLIT) AIT are currently used in wide clinical practice. Sublingual immunotherapy is characterized by the convenience of use, decreased incidence of systemic and local side effects, and proven clinical efficacy. However, sublingual form of home dust mite allergen for AIT is not yet produced in Russia. Previously, the technology for sublingual form of D. farinae (Der f) mites allergen was developed in our laboratory, and this extract was shown to be non-toxic and free of any significant side effects. We obtained a sublingual form of mixed D. pteronyssinus (Der р)/D. farina mites allergen for sublingually allergen-specific immunotherapy. We studied physico-chemical and immunobiological properties of the Der р and Der f mites phenol-free water-salt mixed extract (WWSME). WWSME was studied after sterilizing filtration. WWSME was analyzed by electrophoresis in polyacrylamide gel in the presence of dodecyl-sodium sulfate and reverse-phase high-performance liquid chromatography. ELISA was performed with polyclonal rabbit serum, obtained by sensitization of animals with recombinant Der f1 and Der f2 allergens. ELISA shows positive reaction of WWSME with IgG-antibodies of rabbits. We studied acute and chronic toxicity of received mixed allergen in laboratory animals. Pathomorphological studies have shown that WWSME has no detectable toxicity and does not cause local irritation in the animals. The WWSME product contains native proteins, retains immunogenic properties, is non-toxic and does not cause significant side effects. This extract can be used as the basis for designing a sublingual form of dust mite mixed allergen, which is especially promising for pediatric applications.

клещи домашней пылиDermatophagoides pteronyssinusDermatophagoides farinaeсублингвальная формааллергияАСИТhome dust mite allergensDermatophagoides pteronyssinusDermatophagoides farinaesublingual formallergyallergenspecific immunotherapyReferencesАстафьева Н.Г., Гамова И.В., Удовиченко Е.Н., Перфилова И.А., Кобзев Д.Ю., Вачугова Л.К. Место аллергенспецифической иммунотерапии в лечении атопии // Consilium medicum, 2013. № 3. С. 55-61. [Аstafyeva N.G., Gamova I.V., Udovichenko E.N., Perfilova I.A., Kobzev D.Yu., Vachugova L.K. Place of the allergenspecific immunotherapy in the atopy’s treatment. Consilium medicum, 2013, no. 3, pp. 55-61. (In Russ.)]Астафьева Н.Г., Гамова И.В., Удовиченко Е.Н., Перфилова И.А., Кобзев Д.Ю., Вачугова Л.К. Место аллергенспецифической иммунотерапии в лечении атопии // Consilium medicum, 2013. № 3. С. 55-61. [Аstafyeva N.G., Gamova I.V., Udovichenko E.N., Perfilova I.A., Kobzev D.Yu., Vachugova L.K. Place of the allergenspecific immunotherapy in the atopy’s treatment. Consilium medicum, 2013, no. 3, pp. 55-61. (In Russ.)]Бержец В.М., Коренева Е.А., Петрова Н.С., Пищулина Л.А. Способ получения гранулированной лекарственной формы из аллергена клещей рода Dermatophagoides farinae // Патент на изобретение №: 2216353. 2002. С. 1. [Berzhets V.M., Koreneva E.A., Petrova N.S., Pishchulina L.A. A method of preparing a granular medicine form from Dermatophagoides farinae allergen. Рatent for innovation No. 2216353, 2002, р. 1.Бержец В.М., Коренева Е.А., Петрова Н.С., Пищулина Л.А. Способ получения гранулированной лекарственной формы из аллергена клещей рода Dermatophagoides farinae // Патент на изобретение №: 2216353. 2002. С. 1. [Berzhets V.M., Koreneva E.A., Petrova N.S., Pishchulina L.A. A method of preparing a granular medicine form from Dermatophagoides farinae allergen. Рatent for innovation No. 2216353, 2002, р. 1.Бжедугова Е.Р., Ненашева Н.М. Эффективность и безопасность сублингвальной аллерген-специфической иммунотерапии аллергенами клещей домашней пыли // Российский аллергологический журнал, 2008. № 6. С. 67-73. [Bzhedugova E.R., Nenasheva N.M. Efficacy and safety of house dust mite sublingual immunotherapy. Rossiyskiy allergologicheskiy zhurnal = Russian Allergology Journal, 2008, no. 6, pp. 67-73. (In Russ.)]Бжедугова Е.Р., Ненашева Н.М. Эффективность и безопасность сублингвальной аллерген-специфической иммунотерапии аллергенами клещей домашней пыли // Российский аллергологический журнал, 2008. № 6. С. 67-73. [Bzhedugova E.R., Nenasheva N.M. Efficacy and safety of house dust mite sublingual immunotherapy. Rossiyskiy allergologicheskiy zhurnal = Russian Allergology Journal, 2008, no. 6, pp. 67-73. (In Russ.)]Воробьева О.В., Гущин И.С. Контролируемые исследования эффективности и безопасности аллерген-специфической иммунотерапии: исторический аспект // Российский аллергологический журнал, 2011. № 4. С. 3-14. [Vorobyeva O.V., Guschin I.S. Controlled trials of the efficacy and safety of allergen-specific immunotherapy: historical aspect. Rossiyskiy allergologicheskiy zhurnal = Russian Allergology Journal, 2011, no. 4, pp. 3-14. (In Russ.)]Воробьева О.В., Гущин И.С. Контролируемые исследования эффективности и безопасности аллерген-специфической иммунотерапии: исторический аспект // Российский аллергологический журнал, 2011. № 4. С. 3-14. [Vorobyeva O.V., Guschin I.S. Controlled trials of the efficacy and safety of allergen-specific immunotherapy: historical aspect. Rossiyskiy allergologicheskiy zhurnal = Russian Allergology Journal, 2011, no. 4, pp. 3-14. (In Russ.)]Коровкина Е.С., Мокроносова М.А. Аллергия к клещам домашней пыли с позиций молекулярной аллергологии // Медицинская иммунология, 2012. Т. 14, № 4-5. С. 279-288. [Korovkina E.S., Mokronosova M.A. House dust mite allergy in view of molecular allergology. Meditsinskaya immunologiya = Medical Immunology (Russia), 2012, Vol. 14, no. 4-5, pp. 279-288. (In Russ.)] doi: 10.15789/1563-0625-2012-4-5-279-288.Коровкина Е.С., Мокроносова М.А. Аллергия к клещам домашней пыли с позиций молекулярной аллергологии // Медицинская иммунология, 2012. Т. 14, № 4-5. С. 279-288. [Korovkina E.S., Mokronosova M.A. House dust mite allergy in view of molecular allergology. Meditsinskaya immunologiya = Medical Immunology (Russia), 2012, Vol. 14, no. 4-5, pp. 279-288. (In Russ.)] doi: 10.15789/1563-0625-2012-4-5-279-288.Сублингвальная иммунотерапия. Меморандум Всемирной организации по аллергии (WAO) // Астма, 2010. Т. 11, № 1. С. 5-57. [Sublingual Immunotherapy: Memorandum WAO (WAO). Astma = Asthma, 2010, Vol. 11, no. 1, pp. 5-57. (In Russ.)]Сублингвальная иммунотерапия. Меморандум Всемирной организации по аллергии (WAO) // Астма, 2010. Т. 11, № 1. С. 5-57. [Sublingual Immunotherapy: Memorandum WAO (WAO). Astma = Asthma, 2010, Vol. 11, no. 1, pp. 5-57. (In Russ.)]Хутеева С.Х., Федосеева В.Н. Аллергенспецифическая иммунотерапия бронхиальной астмы. М.: Экон, 2000. С. 250. [Khuteeva S.Kh., Fedoseeva V.N. Allergen-specific immunotherapy of Asthma]. Moscow: Ekon, 2000, p. 250.Хутеева С.Х., Федосеева В.Н. Аллергенспецифическая иммунотерапия бронхиальной астмы. М.: Экон, 2000. С. 250. [Khuteeva S.Kh., Fedoseeva V.N. Allergen-specific immunotherapy of Asthma]. Moscow: Ekon, 2000, p. 250.Park K.H., Son M., Choi S.Y., Park H.J., Lee J.H., Jeong K.Y., Lee J.S., Park J.W. In vitro evaluation of allergen potencies of commercial house dust mite sublingual immunotherapy reagents. Allergy Asthma Immunol. Res., 2015, Vol. 7, no. 2, рр. 124-129.Park K.H., Son M., Choi S.Y., Park H.J., Lee J.H., Jeong K.Y., Lee J.S., Park J.W. In vitro evaluation of allergen potencies of commercial house dust mite sublingual immunotherapy reagents. Allergy Asthma Immunol. Res., 2015, Vol. 7, no. 2, рр. 124-129.Yuta A., Miyamoto Y., Ogihara H., Hattori R., Okubo K. Antigen specific sublingual immunotherapy for pediatric Japanese cedar pollinosis. Arerugi, 2009, Vol. 58, no. 2, рр. 124-132.Yuta A., Miyamoto Y., Ogihara H., Hattori R., Okubo K. Antigen specific sublingual immunotherapy for pediatric Japanese cedar pollinosis. Arerugi, 2009, Vol. 58, no. 2, рр. 124-132.

The authors declare that there are no conflicts of interest present.