mimmunМедицинская иммунологияMedical Immunology (Russia)1563-06252313-741XSPb RAACI10.15789/1563-0625-2018-4-535-542mimmun-1561Research ArticleОРИГИНАЛЬНЫЕ СТАТЬИORIGINAL ARTICLESОЦЕНКА ЭФФЕКТИВНОСТИ РЕКОМБИНАНТНЫХ ЦИТОКИНОВ ЧЕЛОВЕКА ОТЕЧЕСТВЕННОГО ПРОИЗВОДСТВА (sci-store.ru) ПРИ ПОЛУЧЕНИИ МОНОЦИТАРНЫХ ДЕНДРИТНЫХ КЛЕТОКEFFICIENCY EVALUATION OF THE HOME-PRODUCED RECOMBINANT HUMAN CYTOKINES FROM the sci-store.ru FOR GENERATION OF MONOCYTE-DERIVED DENDRITIC CELLSТалаевВ. Ю.TalayevV. Yu.

д.м.н., профессор, заведующий лабораторией клеточной иммунологии,

603950, г. Нижний Новгород, ул. М. Ямская, 71

PhD, MD (Medicine), Professor, Head, Laboratory of Cellular Immunology,

603950, Nizhny Novgorod, M. Yamskaya str., 71

talaev@inbox.ruТалаеваМ. В.TalayevaM. V.

к.б.н., старший научный сотрудник лаборатории клеточной иммунологии,

г. Нижний Новгород

PhD (Biology), Senior Research Associate, Laboratory of Cellular Immunology,

Nizhny Novgorod

ВоронинаЕ. В.VoroninaE. V.

младший научный сотрудник лаборатории клеточной иммунологии,

г. Нижний Новгород

Junior Research Associate, Laboratory of Cellular Immunology,

Nizhny Novgorod

ЗаиченкоИ. Е.ZaichenkoI. E.

к.б.н., ведущий научный сотрудник лаборатории клеточной иммунологии,

г. Нижний Новгород

PhD (Biology), Leading Research Associate Laboratory of Cellular Immunology,

Nizhny Novgorod

ФБУН «Нижегородский научно-исследовательский институт эпидемиологии и микробиологии имени акад. И.Н. Блохиной» РоспотребнадзораРоссияNizhny Novgorod Research I.N. Blokhin Institute of Epidemiology and MicrobiologyRussian Federation201825062018204535542Copyright © Талаев В.Ю., Талаева М.В., Воронина Е.В., Заиченко И.Е., 20182018Талаев В.Ю., Талаева М.В., Воронина Е.В., Заиченко И.Е.Talayev V.Y., Talayeva M.V., Voronina E.V., Zaichenko I.E.This work is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 License.https://www.mimmun.ru/mimmun/article/view/1561

Дендритные клетки – это специализированные антигенпрезентирующие клетки, критически необходимые для вовлечения наивных Т-лимфоцитов в процесс иммунного ответа. Дендритные клетки используются в многочисленных научных исследованиях, а также нашли практическое применение как основной компонент дендритноклеточных вакцин. Широко применяемым способом получения дендритных клеток является индукция их созревания из моноцитов под действием цитокинов в условиях in vitro. В данной работе незрелые и зрелые дендритные клетки получали из моноцитов взрослых здоровых доноров с использованием рекомбинантных цитокинов различных производителей, а затем сравнивали фенотип полученных клеток. Показано, что рекомбинантные белки человека интерлейкин-4 и гранулоцитарно-макрофагальный колониестимулирующий фактор производства sci-store.ru эффективно стимулируют дифференцировку моноцитов человека в незрелые моноцитарные дендритные клетки в условиях in vitro. Полученные незрелые дендритные клетки демонстрируют типичную морфологию и фенотип, характеризующийся отсутствием моноцитарного маркера CD14 и экспрессией HLA-DR и костимулирующей молекулы CD80. Часть клеток экспрессирует костимулирующую молекулу CD86. Рекомбинантный белок человека интерлейкин-6 производства sci-store.ru в составе смеси медиаторов воспаления, состоящей из интерлейкина-6, интерлейкина-1β, фактора некроза опухоли-α и простагландина E2, эффективно стимулирует терминальную дифференцировку незрелых дендритных клеток в зрелые дендритные клетки с характерной морфологией и фенотипом. Практически все дендритные клетки, полученные с использованием этого реагента, были лишены CD14 и экспрессировали HLA-DR, CD80, CD83 и CD86 с высокими показателями интенсивности флуоресценции.

Dendritic cells are specialized antigen-presenting cells which are required to involve naive T-lymphocytes into immune response. Dendritic cells are used in numerous research studies, and have also found practical application as a main component of dendritic cell vaccines. In vitro induction of their maturation from monocytes using cytokines is the most widely used method to obtain these cells. In present study, we compared phenotypes of both immature and mature dendritic cells induced from monocytes of adult healthy donors by means of recombinant cytokines provided by different manufacturers. It is shown that recombinant human IL-4 and GM-CSF supplied by sci-store.ru could effectively stimulate in vitro differentiation of human monocytes to immature monocytic dendritic cells. The resulting immature dendritic cells exhibited a typical morphology and phenotype characterized by the absence of CD14 monocyte marker as well as HLA-DR and CD80 costimulatory molecule expression. A fraction of these cells expressed the CD86 costimulatory molecule. The recombinant human IL-6 from sci-store.ru, when used in a mixture of inflammatory mediators (IL-6, IL-1β, TNFα and PGE2), has induced effective terminal differentiation of immature dendritic cells to mature dendritic cells exhibiting typical morphology and phenotype. Virtually all dendritic cells obtained with this reagent were devoid of CD14, and expressed HLA-DR, CD80, CD83 and CD86 at high fluorescence intensity.

дендритные клеткимоноцитыцитокинысозреваниемембранные молекулыdendritic cellsmonocytescytokinesmaturationmembrane moleculesReferencesТалаев В.Ю., Заиченко И.Е., Матвеичев А.В., Талаева М.В., Воронина Е.В. Регуляция апоптоза в процессе созревания дендритных клеток – приглашение на казнь // Иммунология, 2016. Т. 37, № 5. С. 281-291. [Talayev V.Yu., Zaichenko I.E., Matveichev A.V., Talayeva M.V., Voronina E.V. Regulation of apoptosis during dendritic cell maturation – invitation to an execution. Immunologiya = Immunology, 2016, Vol. 37, no. 5, pp. 281-291. (In Russ.)]Талаев В.Ю., Заиченко И.Е., Матвеичев А.В., Талаева М.В., Воронина Е.В. Регуляция апоптоза в процессе созревания дендритных клеток – приглашение на казнь // Иммунология, 2016. Т. 37, № 5. С. 281-291. [Talayev V.Yu., Zaichenko I.E., Matveichev A.V., Talayeva M.V., Voronina E.V. Regulation of apoptosis during dendritic cell maturation – invitation to an execution. Immunologiya = Immunology, 2016, Vol. 37, no. 5, pp. 281-291. (In Russ.)]Colonna M., Trinchirei G., Liu Y.J. Plasmacytoid dendritic cells in immunity. Nat. Immunol., 2004, Vol. 5, no. 12, pp. 1219-1226.Colonna M., Trinchirei G., Liu Y.J. Plasmacytoid dendritic cells in immunity. Nat. Immunol., 2004, Vol. 5, no. 12, pp. 1219-1226.Guermonprez P., Valladeau J., Zitvogel L., Thery C., Amigorena S. Antigen presentation and T cell stimulation by dendritic cells. Annu. Rev. Immunol., 2002, Vol. 20, pp. 621-667.Guermonprez P., Valladeau J., Zitvogel L., Thery C., Amigorena S. Antigen presentation and T cell stimulation by dendritic cells. Annu. Rev. Immunol., 2002, Vol. 20, pp. 621-667.Ingersoll M.A., Platt A.M., Potteaux S., Randolph G.J. Monocyte trafficking in acute and chronic inflammation. Trends Immunol., 2011, Vol. 32, no. 10, pp. 470-477.Ingersoll M.A., Platt A.M., Potteaux S., Randolph G.J. Monocyte trafficking in acute and chronic inflammation. Trends Immunol., 2011, Vol. 32, no. 10, pp. 470-477.Kalantari T., Kamali-Sarvestani E., Ciric B., Karimi M.H., Kalantari M., Faridar A., Xu H., Rostami A. Generation of immunogenic and tolerogenic clinical-grade dendritic cells. Immunol. Res., 2011, Vol. 51, no. 2-3, pp. 153-160.Kalantari T., Kamali-Sarvestani E., Ciric B., Karimi M.H., Kalantari M., Faridar A., Xu H., Rostami A. Generation of immunogenic and tolerogenic clinical-grade dendritic cells. Immunol. Res., 2011, Vol. 51, no. 2-3, pp. 153-160.Kamgang R.K., Ramos I., Duarte L.R., Ghielmetti M., Freudenberg M., Dahinden C., Padovan E. Using distinct molecular signatures of human monocytes and dendritic cells to predict adjuvant activity and pyrogenicity of TLR agonists. Med. Microbiol. Immunol., 2008, Vol. 197, pp. 369-379.Kamgang R.K., Ramos I., Duarte L.R., Ghielmetti M., Freudenberg M., Dahinden C., Padovan E. Using distinct molecular signatures of human monocytes and dendritic cells to predict adjuvant activity and pyrogenicity of TLR agonists. Med. Microbiol. Immunol., 2008, Vol. 197, pp. 369-379.Kawai T., Akira S. Toll-like receptor and RIG-I-like receptor signaling. Ann. N.Y. Acad. Sci., 2008, Vol. 1143, pp. 1-20.Kawai T., Akira S. Toll-like receptor and RIG-I-like receptor signaling. Ann. N.Y. Acad. Sci., 2008, Vol. 1143, pp. 1-20.Merad M., Sathe P., Helft J., Miller J., Mortha A. The dendritic cell lineage: ontogeny and function of dendritic cells and their subsets in the steady state and the inflamed setting. Annu. Rev. Immunol., 2013, Vol. 31, pp. 563-604.Merad M., Sathe P., Helft J., Miller J., Mortha A. The dendritic cell lineage: ontogeny and function of dendritic cells and their subsets in the steady state and the inflamed setting. Annu. Rev. Immunol., 2013, Vol. 31, pp. 563-604.Naik S.H. Dendritic cell protocols. New York: Humana Press, 2010, p. 446.Naik S.H. Dendritic cell protocols. New York: Humana Press, 2010, p. 446.Naik S.H., Sathe P., Park H.Y., Metcalf D., Proietto A.I., Dakic A., Carotta S., O’Keeffe M., Bahlo M., Papenfuss A., Kwak J.Y., Wu L., Shortman K. Development of plasmacytoid and conventional dendritic cell subtypes from single precursor cells derived in vitro and in vivo. Nat. Immunol., 2007, Vol. 8, no. 11, pp. 1217-1226.Naik S.H., Sathe P., Park H.Y., Metcalf D., Proietto A.I., Dakic A., Carotta S., O’Keeffe M., Bahlo M., Papenfuss A., Kwak J.Y., Wu L., Shortman K. Development of plasmacytoid and conventional dendritic cell subtypes from single precursor cells derived in vitro and in vivo. Nat. Immunol., 2007, Vol. 8, no. 11, pp. 1217-1226.Onai N., Obata-Onai A., Schmid M.A., Ohteki T., Jarrossay D., Manz M.G. Identification of clonogenic common Flt3+M-CSFR+ plasmacytoid and conventional dendritic cell progenitors in mouse bone marrow. Nat. Immunol., 2007, Vol. 8, no. 11, pp. 1207-1216.Onai N., Obata-Onai A., Schmid M.A., Ohteki T., Jarrossay D., Manz M.G. Identification of clonogenic common Flt3+M-CSFR+ plasmacytoid and conventional dendritic cell progenitors in mouse bone marrow. Nat. Immunol., 2007, Vol. 8, no. 11, pp. 1207-1216.Sallusto F., Lanzavecchia A. Efficient presentation of soluble antigen by cultured human dendritic cells is maintained by granulocyte/macrophage colony stimulating factor plus interleukin 4 and downregulated by tumor necrosis factor alpha. J. Exp. Med., 1994, Vol. 179, no. 4, pp. 1109-1118.Sallusto F., Lanzavecchia A. Efficient presentation of soluble antigen by cultured human dendritic cells is maintained by granulocyte/macrophage colony stimulating factor plus interleukin 4 and downregulated by tumor necrosis factor alpha. J. Exp. Med., 1994, Vol. 179, no. 4, pp. 1109-1118.Steinman R.M. The dendritic cell system and its role in immunogenicity. Annu. Rev. Immunol., 1991, Vol. 9, pp. 271-296.Steinman R.M. The dendritic cell system and its role in immunogenicity. Annu. Rev. Immunol., 1991, Vol. 9, pp. 271-296.Wu L., Dakic A. Development of dendritic cell system. Cell. Mol. Immunol., 2004, Vol. 1, no. 2, pp. 112-118.Wu L., Dakic A. Development of dendritic cell system. Cell. Mol. Immunol., 2004, Vol. 1, no. 2, pp. 112-118.Wu L., Liu Y-J. Development of dendritic-cell lineages. Immunity, 2007, Vol. 26, pp. 741-750.Wu L., Liu Y-J. Development of dendritic-cell lineages. Immunity, 2007, Vol. 26, pp. 741-750.

The authors declare that there are no conflicts of interest present.