mimmunМедицинская иммунологияMedical Immunology (Russia)1563-06252313-741XSPb RAACI10.15789/1563-0625-2018-3-431-438mimmun-1534Research ArticleКРАТКИЕ СООБЩЕНИЯSHORT COMMUNICATIONSВЛИЯНИЕ ХЕЛПЕРНЫХ И РЕГУЛЯТОРНЫХ Т-КЛЕТОК НА ФЕНОТИПИЧЕСКИЙ СОСТАВ В-ЛИМФОЦИТОВ КРОВИ И ЩИТОВИДНОЙ ЖЕЛЕЗЫ ПРИ БОЛЕЗНИ ГРЕЙВСАEFFECTS OF HELPER AND REGULATORY CELLS UPON PHENOTYPIC COMPOSITION OF BLOOD B LYMPHOCYTES AND THYROID GLAND IN GRAVES’ DISEASEСавченкоА. А.SavchenkoA. A.

Доктор медицинских наук, профессор, руководитель лаборатории клеточно-молекулярной физиологии и патологии ФИЦ КрНЦ СО РАН; заведующий кафедрой физиологии КрГМУ им. проф. В.Ф. Войно-Ясенецкого

PhD, MD (Medicine), Professor, Head, Laboratory of Cellular and Molecular Physiology and Pathology, Research Institute of Medical Problems of the North, KRC SB RAS; Head, Physiology Department KSV.F. Voino-Yasenetsky MU

ДудинаМ. А.DudinaM. A.

Кандидат медицинских наук, ассистент кафедры внутренних болезней № 2

БорисовА. Г.BorisovA. G.

Кандидат медицинских наук, ведущий научный сотрудник лаборатории клеточно-молекулярной физиологии и патологии ФИЦ КрНЦ СО РАН; доцент кафедры инфекционных болезней КрГМУ

PhD (Medicine), Leading Research Associate, Laboratory of Cellular and Molecular Physiology and Pathology, Research Institute of Medical Problems of the North, KRC SB RAS; Associate Professor, Department of Infectious Diseases KSV.F. Voino-Yasenetsky MU

ДогадинС. А.DogadinS. A.

Доктор медицинских наук, профессор, профессор кафедры внутренних болезней № 2

PhD (Medicine), Assistant Professor, Department of Internal Medicine

КудрявцевИ. В.KudryavtsevI. V.

Кудрявцев Игорь Владимирович - кандидат биологических наук, старший научный сотрудник отдела иммунологии ИЭМ; доцент кафедры иммунологии Первый С-ПГМУ им. акад. И.П. Павлова.

197376, Санкт-Петербург, ул. Aкад. Павлова, 12, тел.: 8 (812) 234-29-29

 

Kudryavtsev Igor V. - PhD (Biology), Senior Research Associate, Department of Immunology IEM; Assistant Professor, Department of Immunology, Pavlov First St. Petersburg State I. Pavlov MU.

197376, St. Petersburg, Acad. Pavlov str., 12, phone: 7 (812) 234-29-29

igorek1981@yandex.ruМошевА. В.MoshevA. V.

Младший научный сотрудник лаборатории клеточно-молекулярной физиологии и патологии

Junior Research Associate, Laboratory of Cellular and Molecular Physiology and Pathology

МаньковскийВ. А.MankovskiyV. А.

Врач-хирург хирургического отделения № 2.

Красноярск

Clinical Surgeon, The Surgery Department No. 2.

Krasnoyarsk

ФГБНУ «Федеральный исследовательский центр „Красноярский научный центр Сибирского отделения Российской академии наук“, обособленное подразделение «Научно-исследовательский институт медицинских проблем Севера»; ФГБОУ ВО «Красноярский государственный медицинский университет имени проф. В.Ф. Войно-Ясенецкого» Министерства здравоохранения РФРоссияResearch Institute of Medical Problems of the North, Siberian Branch, Krasnoyarsk Research Center, Russian Academy of Sciences; Krasnoyarsk State V.F. Voino-Yasenetsky Medical UniversityRussian FederationФГБОУ ВО «Красноярский государственный медицинский университет имени проф. В.Ф. Войно-Ясенецкого» Министерства здравоохранения РФРоссияKrasnoyarsk State V.F. Voino-Yasenetsky Medical UniversityRussian FederationФГБНУ Институт экспериментальной медицины; ГБОУ ВПО «Первый Санкт-Петербургский государственный медицинский университет имени акад. И.П. Павлова» Министерства здравоохранения РФРоссияResearch Institute of Experimental Medicine; First St. Petersburg State I. Pavlov Medical UniversityRussian FederationФГБНУ «Федеральный исследовательский центр „Красноярский научный центр Сибирского отделения Российской академии наук“, обособленное подразделение «Научно-исследовательский институт медицинских проблем Севера»РоссияResearch Institute of Medical Problems of the North, Siberian Branch, Krasnoyarsk Research Center, Russian Academy of SciencesRussian FederationКГБУЗ Краевая клиническая больницаРоссияRegional Clinical HospitalRussian Federation201810062018203431438Copyright © Савченко А.А., Дудина М.А., Борисов А.Г., Догадин С.А., Кудрявцев И.В., Мошев А.В., Маньковский В.А., 20182018Савченко А.А., Дудина М.А., Борисов А.Г., Догадин С.А., Кудрявцев И.В., Мошев А.В., Маньковский В.А.Savchenko A.A., Dudina M.A., Borisov A.G., Dogadin S.A., Kudryavtsev I.V., Moshev A.V., Mankovskiy V.А.Данная работа распространяется под лицензией Creative Commons Attribution 4.0.This work is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 License.https://www.mimmun.ru/mimmun/article/view/1534

Целью исследования явилось сравнительное изучение влияния хелперных (Th-клетки) и регуляторных Т-клеток (Treg) на фенотипический состав В-лимфоцитов крови и ткани щитовидной железы при болезни Грейвса (БГ). Обследовано 43 женщины с болезнью Грейвса. Диагноз БГ основывался на клинико-лабораторных признаках заболевания: жалобах, клинической картине тиреотоксикоза при объективном осмотре, характерных сонографических изменениях ЩЖ, а также повышенном титре антител к рецептору тиреотропного гормона в сыворотке крови и соответствующих изменениях тиреоидного статуса. В качестве контроля обследовано 67 практически здоровых женщин. Исследование фенотипа Th-клеток, Treg и В-лимфоцитов крови и ткани щитовидной железы проводили методом проточной цитометрии с использованием прямой иммунофлуоресценции, соответственно, цельной периферической крови и лимфоцитов, выделенных из ткани щитовидной железы. При исследовании влияния хелперных и регуляторных Т-клеток на фенотипический состав В-лимфоцитов обнаружено, что при БГ в крови снижено количество Treg. В ткани щитовидной железы относительное количество Treg у больных БГ соответствует их уровню в крови. Изменений содержания Т-хелперов в крови, экспрессирующих и не экспрессирующих CD25-рецептор, по сравнению с контрольными значениями не обнаружено. У больных БГ в периферической крови повышено содержание В1-клеток. В ткани щитовидной железы процентное количество данной субпопуляции В-лимфоцитов снижено относительно уровня, выявленного в крови, но при повышении содержания В-клеток памяти. Количество активированных В-лимфоцитов (по CD23-маркеру) в крови у больных БГ снижено относительно контрольных значений. В ткани щитовидной железы обнаружено еще более выраженное снижение относительного количества активированных В-клеток по сравнению с уровнем, выявленным у больных аутоиммунным заболеванием в крови. С помощью корреляционного анализа установлено, что если у лиц контрольной группы повышение содержания активированных В-лимфоцитов в крови сопровождается сонаправленной реакцией со стороны Treg (обычный иммунорегуляторный процесс), то при БГ подобный механизм нарушается. В крови у обследованных больных количество Treg и активированных Т-хелперов положительно взаимосвязано с общими В-лимфоцитами, В2-клетками и наивными В-лимфоцитами, тогда как в ткани щитовидной железы Treg полностью исключены из системы взаимосвязей с активированными В-лимфоцитами. Предполагается, что у больных БГ наблюдается не только снижение содержания Treg в крови, но и нарушение их функциональной активности.

The aim of this work was a comparative study of the helper- (Th cells) and regulatory T cells (Treg) effects upon the phenotypic composition of B lymphocytes in blood and thyroid tissue in Graves’ disease (GD). 43 women with GD were examined. The diagnosis of GD was based on clinical and laboratory signs of the disease: complaints, clinical picture of the thyrotoxicosis with objective examination, characteristic sonographic changes in thyroid gland, as well as elevated titers of antibodies to thyroid-stimulating hormone receptor in blood serum, and corresponding changes in thyroid status. 67 practically healthy women were examined as a control. The studies of Th cells, Treg and B lymphocytes phenotypes in blood and thyroid tissue were carried out by flow cytometry using direct immunofluorescence, respectively, in whole peripheral blood and lymphocytes isolated from thyroid tissue. The relative amounts of Tregs in thyroid gland from the patients with GD corresponds to their level in the blood. We did not find any changes in the content of blood T helpers expressing vs. non-expressing CD25 receptors, as compared to the control values. In patients with GD, an increased B1 cells content was revealed in peripheral blood. The percentage of this B cell subpopulation in thyroid tissue is reduced when compared to the levels found in blood, but with increased memory B cells contents. The number of activated B lymphocytes (by CD23 marker) in blood of patients with GD is reduced when compared to control values. It was found that, in thyroid tissue, there is an even more pronounced decrease in the relative amount of activated B cells compared to the levels detected in blood from these patients. By means of correlation analysis, it was found that increase in activated B lymphocytes in blood from controls is accompanied by a co-directional reaction from Treg (the usual immunoregulatory process). In Graves’ disease, such a relationship was not found. The amounts of Treg and activated T helper cells in blood of the patients did positively correlate with common B lymphocytes, B2 cells and na ve B lymphocytes. Meanwhile, Treg’s in thyroid tissue, were completely excluded from the system of interactions with activated B lymphocytes. It is assumed that a decrease in Treg’s content in peripheral blood, along with altered functional activity is observed in patients with GD.

Т-регуляторные клеткиТ-хелперыВ-лимфоцитысубпопуляциякровьткань щитовидной железыболезнь ГрейвсаT regulatory cellsT helpersB lymphocytessubpopulationbloodthyroid tissueGraves’ diseaseReferencesВанушко В.Э., Фадеев В.В. Болезнь Грейвса (клиническая лекция) // Эндокринная хирургия, 2013. № 1. С. 23-33.Vanushko V.E., Fadeev V.V. Graves’ disease (clinical lecture). Endokrinnaya khirurgiya = Endocrine Surgery, 2013, no. 1, pp. 23-33. (In Russ.)Кудрявцев И.В., Субботовская А.И. Опыт измерения параметров иммунного статуса с использованием шестицветного цитофлуоримерического анализа // Медицинская иммунология, 2015. Т. 17, № 1. С. 19-26. doi: 10.15789/1563-0625-2015-1-19-26.Kudryavtsev I.V., Subbotovskaya A.I. Application of six-color flow cytometric analysis for immune profile monitoring. Meditsinskaya immunologiya = Medical Immunology (Russia), 2015, Vol. 17, no. 1, pp. 19-26. (In Russ.) doi: 10.15789/1563-0625-2015-1-19-26.Савченко А.А., Догадин С.А., Дудина М.А., Мацынина В.П. Клинико-иммунологические показатели и их взаимосвязь с тиреоидным статусом у больных болезнью Грейвса в зависимости от уровня аутоантител к тиреопероксидазе // Проблемы эндокринологии, 2016. Т. 62, № 1. С. 4-9. doi: 10.14341/probl20166214-9.Savchenko A.A., Dogadin S.A., Dudina M.A., Matsynina V.P. The clinical and immunological indices and their interaction with thyroid status in patients with Graves’ disease depending on thyrocytes peroxidase autoantibodies level. Problemy endokrinologii = Problems of Endocrinology, 2016, Vol. 62, no. 1, pp. 4-9. (In Russ.) doi: 10.14341/probl20166214-9.Dhaliwal B., Pang M.O., Keeble A.H., James L.K., Gould H.J., McDonnell J.M., Sutton B.J., Beavil A.J. IgE binds asymmetrically to its B cell receptor CD23. Sci. Rep., 2017, Vol. 7, p. 45533.Dhaliwal B., Pang M.O., Keeble A.H., James L.K., Gould H.J., McDonnell J.M., Sutton B.J., Beavil A.J. IgE binds asymmetrically to its B cell receptor CD23. Sci. Rep., 2017, Vol. 7, p. 45533.Eshaghkhani Y., Sanati M.H., Nakhjavani M., Safari R., Khajavi A., Ataei M., Jadali Z. Disturbed Th1 and Th2 balance in patients with Graves’ disease. Minerva Endocrinol., 2016, Vol. 41, no. 1, pp. 28-36.Eshaghkhani Y., Sanati M.H., Nakhjavani M., Safari R., Khajavi A., Ataei M., Jadali Z. Disturbed Th1 and Th2 balance in patients with Graves’ disease. Minerva Endocrinol., 2016, Vol. 41, no. 1, pp. 28-36.Hu Y., Tian W., Zhang L.L., Liu H., Yin G.P., He B.S., Mao X.M. Function of regulatory T-cells improved by dexamethasone in Graves’ disease. Eur. J. Endocrinol., 2012, 166, Vol. 4, pp. 641-646.Hu Y., Tian W., Zhang L.L., Liu H., Yin G.P., He B.S., Mao X.M. Function of regulatory T-cells improved by dexamethasone in Graves’ disease. Eur. J. Endocrinol., 2012, 166, Vol. 4, pp. 641-646.Klatka M., Grywalska E., Partyka M., Charytanowicz M., Kiszczak-Bochynska E., Rolinski J. Th17 and Treg cells in adolescents with Graves’ disease. Impact of treatment with methimazole on these cell subsets. Autoimmunity, 2014, Vol. 47, no. 3, pp. 201-211.Klatka M., Grywalska E., Partyka M., Charytanowicz M., Kiszczak-Bochynska E., Rolinski J. Th17 and Treg cells in adolescents with Graves’ disease. Impact of treatment with methimazole on these cell subsets. Autoimmunity, 2014, Vol. 47, no. 3, pp. 201-211.Kurozumi A., Okada Y., Arao T., Narisawa M., Torimoto K., Yamamoto S., Tanaka Y. Induction of thyroid remission using rituximab in a patient with type 3 autoimmune polyglandular syndrome including Graves’ disease and type 1 diabetes mellitus: a case report. Endocr. J., 2015, Vol. 62, no. 1, pp. 69-75.Kurozumi A., Okada Y., Arao T., Narisawa M., Torimoto K., Yamamoto S., Tanaka Y. Induction of thyroid remission using rituximab in a patient with type 3 autoimmune polyglandular syndrome including Graves’ disease and type 1 diabetes mellitus: a case report. Endocr. J., 2015, Vol. 62, no. 1, pp. 69-75.Maecker H., McCoy P., Nussenblatt R. Standardizing immunophenotyping for the human immunology project. Nat. Rev. Immunol., 2012, Vol. 12, pp. 191-200.Maecker H., McCoy P., Nussenblatt R. Standardizing immunophenotyping for the human immunology project. Nat. Rev. Immunol., 2012, Vol. 12, pp. 191-200.Pawlowski P., Grubczak K., Kostecki J., Ilendo-Poskrobko E., Moniuszko M., Pawlowska M., Rejdak R., Reszec J., Mysliwiec J. Decreased frequencies of peripheral blood CD4+CD25+CD127-Foxp3+ in patients with Graves’ disease and Graves orbitopathy: Enhancing effect of insulin growth factor-1 on Treg cells. Horm. Metab. Res., 2017, Vol. 49, no. 3, pp. 185-191.Pawlowski P., Grubczak K., Kostecki J., Ilendo-Poskrobko E., Moniuszko M., Pawlowska M., Rejdak R., Reszec J., Mysliwiec J. Decreased frequencies of peripheral blood CD4+CD25+CD127-Foxp3+ in patients with Graves’ disease and Graves orbitopathy: Enhancing effect of insulin growth factor-1 on Treg cells. Horm. Metab. Res., 2017, Vol. 49, no. 3, pp. 185-191.Peng D., Xu B., Wang Y., Guo H., Jiang Y. A high frequency of circulating Th22 and Th17 cells in patients with new onset Graves’ disease. PLoS ONE, 2013, Vol. 8, no. 7, e68446. doi: 10.1371/journal.pone.0068446.Peng D., Xu B., Wang Y., Guo H., Jiang Y. A high frequency of circulating Th22 and Th17 cells in patients with new onset Graves’ disease. PLoS ONE, 2013, Vol. 8, no. 7, e68446. doi: 10.1371/journal.pone.0068446.Segundo C., Rodríguez C., García-Poley A., Aguilar M., Gavilán I., Bellas C., Brieva J.A. Thyroid-infiltrating B lymphocytes in Graves’ disease are related to marginal zone and memory B cell compartments. Thyroid, 2001, Vol. 11, no. 6, pp. 525-530.Segundo C., Rodríguez C., García-Poley A., Aguilar M., Gavilán I., Bellas C., Brieva J.A. Thyroid-infiltrating B lymphocytes in Graves’ disease are related to marginal zone and memory B cell compartments. Thyroid, 2001, Vol. 11, no. 6, pp. 525-530.Smith T.J., Hegedüs L. Graves’ disease. N. Engl. J. Med., 2016, Vol. 375, no. 16, pp. 1552-1565.Smith T.J., Hegedüs L. Graves’ disease. N. Engl. J. Med., 2016, Vol. 375, no. 16, pp. 1552-1565.Song R.H., Yu Z.Y., Qin Q., Wang X., Muhali F.S., Shi L.F., Jiang W.J., Xiao L., Li D.F., Zhang J.A. Different levels of circulating Th22 cell and its related molecules in Graves’ disease and Hashimoto’s thyroiditis. Int. J. Clin. Exp. Pathol., 2014, Vol. 7, no. 7, pp. 4024-4031.Song R.H., Yu Z.Y., Qin Q., Wang X., Muhali F.S., Shi L.F., Jiang W.J., Xiao L., Li D.F., Zhang J.A. Different levels of circulating Th22 cell and its related molecules in Graves’ disease and Hashimoto’s thyroiditis. Int. J. Clin. Exp. Pathol., 2014, Vol. 7, no. 7, pp. 4024-4031.Yuan Q., Zhao Y., Zhu X., Liu X. Low regulatory T cell and high IL-17 mRNA expression in a mouse Graves’ disease model. J. Endocrinol. Invest., 2017, Vol. 40, no. 4, pp. 397-407.Yuan Q., Zhao Y., Zhu X., Liu X. Low regulatory T cell and high IL-17 mRNA expression in a mouse Graves’ disease model. J. Endocrinol. Invest., 2017, Vol. 40, no. 4, pp. 397-407.

The authors declare that there are no conflicts of interest present.