mimmunМедицинская иммунологияMedical Immunology (Russia)1563-06252313-741XSPb RAACI10.15789/1563-0625-2017-4-421-430mimmun-1313Research ArticleОРИГИНАЛЬНЫЕ СТАТЬИORIGINAL ARTICLESУЧАСТИЕ ПЕРФОРИН/ГРАНЗИМ Б-ЗАВИСИМОГО МЕХАНИЗМА В РЕАЛИЗАЦИИ ЦИТОТОКСИЧЕСКОГО ЭФФЕКТА ДЕНДРИТНЫХ КЛЕТОК ПРОТИВ КЛЕТОК ГЛИОБЛАСТОМЫ ЧЕЛОВЕКАINVOLVEMENT OF PERFORIN/GRANZYME B-DEPENDENT SIGNALING PATHWAY IN CYTOTOXIC ACTIVITY OF DENDRITIC CELLS TOWARDS HUMAN GLIOBLASTOMA CELLSТыриноваТ. В.TyrinovaT. V.

Тыринова Тамара Викторовна – кандидат биологических наук,  научный сотрудник лаборатории клеточной иммунотерапии.

630099, Новосибирск, ул. Ядринцевская, 14, тел.: 8 (383) 228-21-01, факс: 8 (383) 222-70-28

Tyrinova Tamara  V. - PhD (Biology), Research Associate, Laboratory of Cellular Immunotherapy.

630099, Russian Federation, Novosibirsk, Yadrintsevskaya str., 14. Phone: 7 (383) 228-21-01. Fax: 7 (383) 222-70-28

ct_lab@mail.ruЛеплинаО. Ю.LeplinaO. Yu.

Доктор медицинских наук, ведущий научный сотрудник лаборатории клеточной иммунотерапии.

PhD, MD (Medicine), Leading Research Associate, Laboratory of Cellular Immunotherapy.

МишиновС. В.MishinovS. V.

Кандидат медицинских наук, врач-нейрохирург отделения нейрохирургии.

PhD (Medicine), Neurosurgeon, Neurosurgery Department.

ТихоноваМ. А.TikhonovaM. A.

Кандидат биологических наук,  старший научный сотрудник лаборатории клеточной иммунотерапии.

PhD (Biology), Senior Research Associate, Laboratory of Cellular Immunotherapy.

КалиновскийА. В.KalinovskiyA. V.

Кандидат медицинских наук, заведующий  операционным блоком.

PhD (Medicine), Head, Surgical Unit.

ЧерновС. В.ChernovS. V.

Кандидат медицинских наук, заведующий  отделением нейроонкологии.

PhD (Medicine), Head, Neurooncology Department.

СтупакВ. В.StupakV. V.

Доктор медицинских наук, профессор, зав. отделением нейрохирургии.

PhD, MD (Medicine), Professor, Head, Neurosurgery Department.

ОстанинА. А.OstaninA. A.

Доктор медицинских наук, профессор, главный научный сотрудник лаборатории клеточной иммунотерапии.

PhD, MD (Medicine), Professor, Main Research Associate, Laboratory of Cellular Immunotherapy.

ЧерныхЕ. Р.ChernykhE. R.

Доктор медицинских наук, профессор, член-корр. РАН, заведующая  лабораторией клеточной иммунотерапии.

PhD, MD (Medicine), Professor, Corresponding Member, Russian Academy of Sciences, Head, Laboratory of Cellular Immunotherapy.

ФГБНУ «Научно-исследовательский институт фундаментальной и клинической иммунологии»РоссияResearch Institute of Fundamental and Clinical ImmunologyRussian FederationФГБУ «Научно-исследовательский институт травматологии и ортопедии им. Я.Л. Цивьяна»РоссияYa.L. Tsivyan Research Institute of Traumatology and OrthopedicsRussian FederationФГБУ «Федеральный центр нейрохирургии» Министерства здравоохранения РФРоссияFederal Neurosurgical CenterRussian Federation201730082017194421430Copyright © Тыринова Т.В., Леплина О.Ю., Мишинов С.В., Тихонова М.А., Калиновский А.В., Чернов С.В., Ступак В.В., Останин А.А., Черных Е.Р., 20172017Тыринова Т.В., Леплина О.Ю., Мишинов С.В., Тихонова М.А., Калиновский А.В., Чернов С.В., Ступак В.В., Останин А.А., Черных Е.Р.Tyrinova T.V., Leplina O.Y., Mishinov S.V., Tikhonova M.A., Kalinovskiy A.V., Chernov S.V., Stupak V.V., Ostanin A.A., Chernykh E.R.Данная работа распространяется под лицензией Creative Commons Attribution 4.0.This work is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 License.https://www.mimmun.ru/mimmun/article/view/1313

Грануло-опосредованная цитотоксичность для клеток-эффекторов является универсальным механизмом подавления опухолевого роста  и  индукции гибели  клеток-мишеней. Целью работы явилось изучение экспрессии цитолитических молекул дендритными клетками (ДК), генерированными в присутствии IFNα (IFN-ДК),  а также  исследование роли  грануло-опосредованного механизма в реализации цитотоксической активности IFN-ДК против опухолевых клеточных линий. IFN-ДК генерировали путем культивирования прилипающей фракции МНК в присутствии GM-CSF и IFNα в течение 4 суток с последующим дозреванием с ЛПС  в течение 24 ч. Опухолевые линии были получены из фрагментов опухоли пациентов с внутримозговой глиобластомой. Индукция созревания IFN-ДК под действием ЛПС  ассоциировалась с накоплением внутриклеточного пула молекул перфорина и гранзима Б. Экспрессия перфорина в ЛПС-стимулированных IFN-ДК прямо коррелировала с внутриклеточной экспрессией лизосомально-ассоциированного мембранного белка-1 (LAMP-1/ CD107a), при этом  уровень последнего не менялся в ответ на стимуляцию ЛПС. В то же время ЛПС стимулировал дегрануляцию в IFN-ДК, о чем свидетельствовало увеличение доли  клеток, экспрессирующих CD107a на  поверхностной мембране ДК.  Активация ЛПС  генерированных из  моноцитов крови тех же доноров ДК по стандартному протоколу (в присутствии GM-CSF и IL-4  [IL-4-ДК]) не влияла на уровень экспрессии перфорина и гранзима Б в IL-4-ДК, которая была  значимо ниже по  сравнению с аналогичными культурами IFN-ДК.  В ответ  на  стимуляцию ЛПС  отмечалось увеличение внутриклеточного пула CD107a в IL-4-ДК при отсутствии изменений в поверхностной экспрессии CD107a. Исследование цитотоксической активности ЛПС-стимулированных IFN-ДК против  глиобластомных клеточных линий показало вовлеченность перфорин/гранзим  Б-сигнального пути в реализацию цитотоксической активности ДК, поскольку блокирование этого механизма с помощью ингибитора вакуолярной Н+-АТФ-азы конканамицина А (СМА) ослабляло цитотоксическую активность IFN-ДК. При  этом  различная выраженность подавления цитотоксичности ДК  с помощью СМА свидетельствовала о существовании перфорин/гранзим Б-независимых механизмах цитотоксического действия IFN-ДК против глиобластомных клеток.

Granule-mediated cytotoxicity of effector cells is a universal mechanism of tumor growth inhibition and induction of tumor cell death. The aim of present  study was to evaluate  expression  of lytic molecules in DCs generated in presence of IFNα (IFN-DCs), and to analyze  the role of granule-mediated mechanism for IFN-DC cytotoxic activity against tumor cell lines. IFN-DCs were generated by culturing of plastic-adherent peripheral blood mononuclear cells in presence of GM-CSF and IFNα for 4 d followed by LPS addition for 24 h. The tumor cell lines were obtained from malignant tissues from patients with glioblastoma multiforme. Maturation of IFN-DCs in presence of LPS was accompanied by accumulation of intracellular perforin and granzyme B molecules. Perforin expression  showed a direct  correlation with intracellular lysosome-associated membrane  protein-1  (LAMP-1/CD107a)  expression   in  LPS-stimulated  IFN-DCs.   However, CD107a expression  did not increase  under  LPS stimulation. At the same time,  LPS caused  upregulated degranulation in IFN-DCs, as shown  by an increase  of surface  CD107a expression  on IFN-DCs. LPS  activation of DCs generated from the same donors  in the presence of GM-CSF and IL-4  (IL-4-DCs) did not influence perforin and  granzyme B  expression   in  IL-4-DCs which  was  significantly   lower  than  in  IFN-DCs.  Intracellular pool of CD107a molecules was increased in response  to LPS  stimulation of IL-4-DCs, but surface  CD107a expression  did not  change  on IL-4-DCs. Studies  of cytotoxic activity  of LPS-stimulated IFN-DCs revealed that  concanamicyn A (CMA), an  inhibitor of vacuolar  H+-ATPase and  of perforin/granzyme B-mediated signaling  pathway, caused  reduced cytotoxicity of donor DCs  towards  glioblastoma cell lines. Involvement of perforin/granzyme B-signaling pathway  into the DCs cytotoxicity was confirmed with glioblastoma cell lines, since blockage  of this mechanism with vacuolar  H+ ATPase  blocker (CMA) caused  inhibition of the IFN-DC cytotoxicity. Differently reduced DC cytotoxic activity by CMA may suggest that the glioblastoma cell lysis can be mediated via perforin/granzyme B-independent mechanisms.

дендритные клеткиинтерферон-альфаперфорингранзим БCD107aглиобластомаdendritic cellsinterferon-alphaperforingranzyme BCD107aglioblastoma multiformeReferencesAktas E., Kucuksezer U.C., Bilgic S., Erten G., Deniz G., Relationship between CD107a expression and cytotoxic activity. Cell Immunol., 2009, Vol. 254, pp. 149-154.Aktas E., Kucuksezer U.C., Bilgic S., Erten G., Deniz G., Relationship between CD107a expression and cytotoxic activity. Cell Immunol., 2009, Vol. 254, pp. 149-154.Alter G., Malenfant J.M., Altfeld M. CD107a as a functional marker for the identification of natural killer cell activity. J. Immunol. Methods, 2004, Vol. 294, no. 1-2, pp. 15-22.Alter G., Malenfant J.M., Altfeld M. CD107a as a functional marker for the identification of natural killer cell activity. J. Immunol. Methods, 2004, Vol. 294, no. 1-2, pp. 15-22.Anguille S., Lion E., Tel J., de Vries I.J.M., Couderé K., Fromm P.D., Van Tendeloo V.F., Smits E.L., Berneman Z.N. Interleukin-15-induced CD56+ myeloid dendritic cells combine potent tumor antigen presentation with direct tumoricidal potential. PLoS One, 2012, Vol. 7, e51851. doi:10.1371/journal.pone.0051851.Anguille S., Lion E., Tel J., de Vries I.J.M., Couderé K., Fromm P.D., Van Tendeloo V.F., Smits E.L., Berneman Z.N. Interleukin-15-induced CD56+ myeloid dendritic cells combine potent tumor antigen presentation with direct tumoricidal potential. PLoS One, 2012, Vol. 7, e51851. doi:10.1371/journal.pone.0051851.Banchereau J., Steinman R.M. Dendritic cells and the control of immunity. Nature, 1998, Vol. 392, pp. 245-252.Banchereau J., Steinman R.M. Dendritic cells and the control of immunity. Nature, 1998, Vol. 392, pp. 245-252.Barcia C. Jr., Gómez A., Gallego-Sanchez J.M., Perez-Vallés A., Castro M.G., Lowenstein P.R., Barcia C., Herrero M.-T. Infiltrating CTLs in human glioblastoma establish immunological synapses with tumorigenic cells. Am. J. Pathol., 2009, Vol. 175, pp. 786-798.Barcia C. Jr., Gómez A., Gallego-Sanchez J.M., Perez-Vallés A., Castro M.G., Lowenstein P.R., Barcia C., Herrero M.-T. Infiltrating CTLs in human glioblastoma establish immunological synapses with tumorigenic cells. Am. J. Pathol., 2009, Vol. 175, pp. 786-798.Bellail A.C., Tse M.C., Song J.H., Phuphanich S., Olson J.J., Sun S.Y., Hao C. DR5-mediated DISC controls caspase-8 cleavage and initiation of apoptosis in human glioblastomas. J. Cell Mol. Med., 2010, Vol. 14, no. 6A, pp. 1303-1317.Bellail A.C., Tse M.C., Song J.H., Phuphanich S., Olson J.J., Sun S.Y., Hao C. DR5-mediated DISC controls caspase-8 cleavage and initiation of apoptosis in human glioblastomas. J. Cell Mol. Med., 2010, Vol. 14, no. 6A, pp. 1303-1317.Bratke K., Nielsen J., Manig F., Klein C., Kuepper M., Geyer S., Julius P., Lommatzsch M., Virchow J.C. Functional expression of granzyme B in human plasmacytoid dendritic cells: a role in allergic inflammation. Clin. Exp. Allergy, 2010, Vol. 40, pp. 1015-1024.Bratke K., Nielsen J., Manig F., Klein C., Kuepper M., Geyer S., Julius P., Lommatzsch M., Virchow J.C. Functional expression of granzyme B in human plasmacytoid dendritic cells: a role in allergic inflammation. Clin. Exp. Allergy, 2010, Vol. 40, pp. 1015-1024.Capper D., Gaiser T., Hartmann C., Habel A., Mueller W., Herold-Mende C., von Deimling A., Siegelin M.D. Stem-cell-like glioma cells are resistant to TRAIL/Apo2L and exhibit down-regulation of caspase-8 by promoter methylation. Acta Neuropathol., 2009, Vol. 117, no. 4, pp. 445-456.Capper D., Gaiser T., Hartmann C., Habel A., Mueller W., Herold-Mende C., von Deimling A., Siegelin M.D. Stem-cell-like glioma cells are resistant to TRAIL/Apo2L and exhibit down-regulation of caspase-8 by promoter methylation. Acta Neuropathol., 2009, Vol. 117, no. 4, pp. 445-456.Choi B.D., Gedeon P.C., HerndonII J.E., Archer G.E., Reap E.A., Sanchez-Perez L., Mitchell D.A., Bigner D.D., Sampson J.H. Human regulatory T cells kill tumor cells through granzyme-dependent cytotoxicity upon retargeting with a bispecific antibody. Cancer Immunol. Res., 2013, Vol. 1, no. 3, pp. 163-167.Choi B.D., Gedeon P.C., HerndonII J.E., Archer G.E., Reap E.A., Sanchez-Perez L., Mitchell D.A., Bigner D.D., Sampson J.H. Human regulatory T cells kill tumor cells through granzyme-dependent cytotoxicity upon retargeting with a bispecific antibody. Cancer Immunol. Res., 2013, Vol. 1, no. 3, pp. 163-167.Clément M.V., Haddad P., Soulié A., Legros-Maida S., Guillet J., Cesar E., Sasportes M. Involvement of granzyme B and perforin gene expression in the lytic potential of human natural killer cells. Res Immunol., 1990, Vol. 141, no. 6, pp. 477-489.Clément M.V., Haddad P., Soulié A., Legros-Maida S., Guillet J., Cesar E., Sasportes M. Involvement of granzyme B and perforin gene expression in the lytic potential of human natural killer cells. Res Immunol., 1990, Vol. 141, no. 6, pp. 477-489.Cullen S.P., Brunet M., Martin S.J. Granzymes in cancer and immunity. Cell Death Differ., 2008, Vol. 17, no. 4, pp. 616-623.Cullen S.P., Brunet M., Martin S.J. Granzymes in cancer and immunity. Cell Death Differ., 2008, Vol. 17, no. 4, pp. 616-623.Fanger N.A., Maliszewski C.R., Schooley K., Griffith T.S. Human dendritic cells mediate cellular apoptosis via tumor necrosis factor-related apoptosis-inducing ligand (TRAIL). J. Exp. Med., 1999, Vol. 190, pp. 1155-1164.Fanger N.A., Maliszewski C.R., Schooley K., Griffith T.S. Human dendritic cells mediate cellular apoptosis via tumor necrosis factor-related apoptosis-inducing ligand (TRAIL). J. Exp. Med., 1999, Vol. 190, pp. 1155-1164.Jahrsdörfer B., Vollmer A., Blackwell S.E., Maier J., Sontheimer K., Beyer T., Mandel B., Lunov O., Tron K., Nienhaus G.U., Simmet T., Debatin K.M., Weiner G.J., Fabricius D. Granzyme B produced by human plasmacytoid dendritic cells suppresses T-cell expansion. Blood, 2010, Vol. 115, no. 6, pp. 1156-1165.Jahrsdörfer B., Vollmer A., Blackwell S.E., Maier J., Sontheimer K., Beyer T., Mandel B., Lunov O., Tron K., Nienhaus G.U., Simmet T., Debatin K.M., Weiner G.J., Fabricius D. Granzyme B produced by human plasmacytoid dendritic cells suppresses T-cell expansion. Blood, 2010, Vol. 115, no. 6, pp. 1156-1165.Janjic B.M., Lu G., Pimenov A., Whiteside T.L., Storkus W.J., Vujanovic N.L. Innate direct anticancer effector function of human immature dendritic cells. I. involvement of an apoptosis-inducing pathway. J. Immunol., 2002, Vol. 168, pp. 1823-1830.Janjic B.M., Lu G., Pimenov A., Whiteside T.L., Storkus W.J., Vujanovic N.L. Innate direct anticancer effector function of human immature dendritic cells. I. involvement of an apoptosis-inducing pathway. J. Immunol., 2002, Vol. 168, pp. 1823-1830.Karrich J.J., Jachimowski L.C.M., Nagasawa M., Kamp A., Balzarolo M., Wolkers M.C., Uittenbogaart C.H., Marieke van Ham S., Blom B. IL-21-stimulated human plasmacytoid dendritic cells secrete granzyme B, which impairs their capacity to induce T-cell proliferation. Blood, 2013, Vol. 121, no. 16, pp. 3103-3111.Karrich J.J., Jachimowski L.C.M., Nagasawa M., Kamp A., Balzarolo M., Wolkers M.C., Uittenbogaart C.H., Marieke van Ham S., Blom B. IL-21-stimulated human plasmacytoid dendritic cells secrete granzyme B, which impairs their capacity to induce T-cell proliferation. Blood, 2013, Vol. 121, no. 16, pp. 3103-3111.Kataoka T., Takaku K., Magae J., Shinohara N., Takayama H., Kondo S., Nagai K. Acidification is essential for maintaining the structure and function of lytic granules of CTL. Effect of concanamycin A, an inhibitor of vacuolar type H(+)-ATPase, on CTL-mediated cytotoxicity. J. Immunol., 1994, Vol. 153, no. 9, pp. 3938-3947.Kataoka T., Takaku K., Magae J., Shinohara N., Takayama H., Kondo S., Nagai K. Acidification is essential for maintaining the structure and function of lytic granules of CTL. Effect of concanamycin A, an inhibitor of vacuolar type H(+)-ATPase, on CTL-mediated cytotoxicity. J. Immunol., 1994, Vol. 153, no. 9, pp. 3938-3947.Korthals M., Safaian N., Kronenwett R., Maihöfer D., Schott M., Papewalis C., Diaz Blanco E., Winter M., Czibere A., Haas R., Kobbe G., Fenk R. Monocyte derived dendritic cells generated by IFN-alpha acquire mature dendritic and natural killer cell properties as shown by gene expression analysis. J. Transl. Med., 2007, Vol. 5, p. 46.Korthals M., Safaian N., Kronenwett R., Maihöfer D., Schott M., Papewalis C., Diaz Blanco E., Winter M., Czibere A., Haas R., Kobbe G., Fenk R. Monocyte derived dendritic cells generated by IFN-alpha acquire mature dendritic and natural killer cell properties as shown by gene expression analysis. J. Transl. Med., 2007, Vol. 5, p. 46.Krzewski K., Gil-Krzewska A., Nguyen V., Peruzzi G., Coligan J.E. LAMP1/CD107a is required for efficient perforin delivery to lytic granules and NK-cell cytotoxicity. Blood, 2013, Vol. 121, no. 23, pp. 4672-4683.Krzewski K., Gil-Krzewska A., Nguyen V., Peruzzi G., Coligan J.E. LAMP1/CD107a is required for efficient perforin delivery to lytic granules and NK-cell cytotoxicity. Blood, 2013, Vol. 121, no. 23, pp. 4672-4683.Liu Sh., Yu Y., Zhang M., Wang W., Cao X. The involvement of TNF-α-related apoptosis-inducing ligand in the enhanced cytotoxicity of IFN-β-stimulated human dendritic cells to tumor cells. J. Immunol., 2001, Vol. 166, no. 9, pp. 5407-5415.Liu Sh., Yu Y., Zhang M., Wang W., Cao X. The involvement of TNF-α-related apoptosis-inducing ligand in the enhanced cytotoxicity of IFN-β-stimulated human dendritic cells to tumor cells. J. Immunol., 2001, Vol. 166, no. 9, pp. 5407-5415.Mori S., Jewett A., Murakami-Mori K., Cavalcanti M., Bonavida B. The participation of the Fas-mediated cytotoxic pathway by natural killer cells is tumor-cell-dependent. Cancer Immunol. Immunother., 1997, Vol. 44, pp. 282-290.Mori S., Jewett A., Murakami-Mori K., Cavalcanti M., Bonavida B. The participation of the Fas-mediated cytotoxic pathway by natural killer cells is tumor-cell-dependent. Cancer Immunol. Immunother., 1997, Vol. 44, pp. 282-290.Ogbomo H., Zemp F.J., Lun X., Zhang J., Stack D., Rahman M.M., Mcfadden G., Mody C.H., Forsyth P.A. Myxoma virus infection promotes NK lysis of malignant gliomas in vitro and in vivo. PLoS One, 2013, Vol. 8, e66825. doi:10.1371/journal.pone.0066825.Ogbomo H., Zemp F.J., Lun X., Zhang J., Stack D., Rahman M.M., Mcfadden G., Mody C.H., Forsyth P.A. Myxoma virus infection promotes NK lysis of malignant gliomas in vitro and in vivo. PLoS One, 2013, Vol. 8, e66825. doi:10.1371/journal.pone.0066825.Papewalis C., Jacobs B., Wuttke M., Ullrich E., Baehring T., Fenk R., Willenberg H.S., Schinner S., Cohnen M., Seissler J., Zacharowski K., Scherbaum W.A., Schott M. IFN-skews monocytes into CD56+-expressing dendritic cells with potent functional activities in vitro and in vivo. J. Immunol., 2008, Vol. 180, pp. 1462-1470.Papewalis C., Jacobs B., Wuttke M., Ullrich E., Baehring T., Fenk R., Willenberg H.S., Schinner S., Cohnen M., Seissler J., Zacharowski K., Scherbaum W.A., Schott M. IFN-skews monocytes into CD56+-expressing dendritic cells with potent functional activities in vitro and in vivo. J. Immunol., 2008, Vol. 180, pp. 1462-1470.Renner D., Jin F., Parney I., Pirko I., Pavelko K., Johnson A. A duality of roles for perforin in CD8+ T cellglioma interactions: contributions to cytotoxicity and altered vascular permeability. Neuro Oncol., 2014, Vol. 16 (suppl. 5), v109. doi:10.1093/neuonc/nou257.10.Renner D., Jin F., Parney I., Pirko I., Pavelko K., Johnson A. A duality of roles for perforin in CD8+ T cellglioma interactions: contributions to cytotoxicity and altered vascular permeability. Neuro Oncol., 2014, Vol. 16 (suppl. 5), v109. doi:10.1093/neuonc/nou257.10.Stary G., Bangert C., Tauber M., Strohal R., Kopp T., Stingl G. Tumoricidal activity of TLR7/8-activated inflammatory dendritic cells. J. Exp. Med., 2007, Vol. 204, pp. 1441-1451.Stary G., Bangert C., Tauber M., Strohal R., Kopp T., Stingl G. Tumoricidal activity of TLR7/8-activated inflammatory dendritic cells. J. Exp. Med., 2007, Vol. 204, pp. 1441-1451.Tyrinova T.V., Leplina O.Y., Mishinov S.V., Tikhonova M.A., Shevela E.Y., Stupak V.V., Pendyurin I.V., Shilov A.G., Alyamkina E.A., Rubtsova N.V., Bogachev S.S., Ostanin A.A., Chernykh E.R. Cytotoxic activity of ex-vivo generated IFNα-induced monocyte-derived dendritic cells in brain glioma patients. Cell Immunol., 2013, Vol. 284, pp. 146-153.Tyrinova T.V., Leplina O.Y., Mishinov S.V., Tikhonova M.A., Shevela E.Y., Stupak V.V., Pendyurin I.V., Shilov A.G., Alyamkina E.A., Rubtsova N.V., Bogachev S.S., Ostanin A.A., Chernykh E.R. Cytotoxic activity of ex-vivo generated IFNα-induced monocyte-derived dendritic cells in brain glioma patients. Cell Immunol., 2013, Vol. 284, pp. 146-153.Vanderheyde N., Vandenabeele P., Goldman M., Willems F. Distinct mechanisms are involved in tumoristatic and tumoricidal activities of monocyte-derived dendritic cells. Immunol. Lett., 2004, Vol. 91, no. 2-3, pp. 99-101.Vanderheyde N., Vandenabeele P., Goldman M., Willems F. Distinct mechanisms are involved in tumoristatic and tumoricidal activities of monocyte-derived dendritic cells. Immunol. Lett., 2004, Vol. 91, no. 2-3, pp. 99-101.Zhang B., Zhang J., Tian Z. Comparison in the effects of IL-2, IL-12, IL-15 and IFNα on gene regulation of granzymes of human NK cell line NK-92. Int. Immunopharmacol., 2008, Vol. 8, pp. 989-996.Zhang B., Zhang J., Tian Z. Comparison in the effects of IL-2, IL-12, IL-15 and IFNα on gene regulation of granzymes of human NK cell line NK-92. Int. Immunopharmacol., 2008, Vol. 8, pp. 989-996.

The authors declare that there are no conflicts of interest present.