mimmunМедицинская иммунологияMedical Immunology (Russia)1563-06252313-741XSPb RAACI10.15789/1563-0625-2016-4-385-394mimmun-1062Research ArticleИММУНОЛОГИЧЕСКИЕ МЕТОДЫIMMUNOLOGICAL METHODSИММУНОМЕТРИЧЕСКИЙ МЕТОД ОПРЕДЕЛЕНИЯ КОНЦЕНТРАЦИЙ СВОБОДНЫХ ЛЕГКИХ ЦЕПЕЙ ИММУНОГЛОБУЛИНОВ ЧЕЛОВЕКАIMMUNOMETRIC ASSAY TO DETERMINE FREE LIGHT CHAIN CONCENTRATIONS OF HUMAN IMMUNOGLOBULINSСамойловичМ. П.SamoylovichM. P.

д.б.н., ведущий научный сотрудник лаборатории гибридомной технологии,

Санкт-Петербург

PhD, MD (Biology), Leading Research Associate, Hybridoma Technology Laboratory,

St. Petersburg

ГрязеваИ. В.GriazevaI. V.

к.б.н., старший научный сотрудник лаборатории гибридомной технологии,

Санкт-Петербург

hD (Biology), Senior Research Associate, Hybridoma Technology Laboratory,

St. Petersburg

МазингА. В.MazingA. V.

к.м.н., ведущий научный сотрудник, лаборатория диагностики аутоиммунных заболеваний,

Санкт-Петербург

hD (Medicine), Leading Research Associate, Laboratory of Diagnostics of Autoimmune Diseases,

St. Petersburg

ЛапинС. В.LapinS. V.

к.м.н., заведующий лабораторией диагностики аутоиммунных заболеваний,

Санкт-Петербург

PhD (Medicine), Head, Laboratory of Diagnostics of Autoimmune Diseases,

St. Petersburg

КлимовичВ. Б.KlimovichV. B.

д.м.н., профессор, заведующий лабораторией гибридомной технологии,

197136, Санкт-Петербург, ул. Гатчинская, 9, кв. 18

PhD, MD (Medicine), Professor, Head, Hybridoma Technology Laboratory,

197136, St. Petersburg, Gatchinskaya str. 9, apt 18

vklimovich@gmail.comФГБУ «Российский научный центр радиологии и хирургических технологий»; Санкт-Петербургский государственный университетРоссияRussian Research Center for Radiology and Surgical Technologies; St. Petersburg State UniversityRussian FederationФГБУ «Российский научный центр радиологии и хирургических технологий»РоссияRussian Research Center for Radiology and Surgical TechnologiesRussian FederationГБОУ ВПО «Первый Санкт-Петербургский государственный медицинский университет имени академика И.П. Павлова»РоссияFirst I.P. Pavlov State Medical UniversityRussian Federation201623082016184385394Copyright © Самойлович М.П., Грязева И.В., Мазинг А.В., Лапин С.В., Климович В.Б., 20162016Самойлович М.П., Грязева И.В., Мазинг А.В., Лапин С.В., Климович В.Б.Samoylovich M.P., Griazeva I.V., Mazing A.V., Lapin S.V., Klimovich V.B.Данная работа распространяется под лицензией Creative Commons Attribution 4.0.This work is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 License.https://www.mimmun.ru/mimmun/article/view/1062

Выявление свободных легких цепей (СЛЦ) иммуноглобулинов (Ig) и их соотношения (каппа/лямбда коэффициент) используют при диагностике и мониторинге миеломной болезни и других гаммапатий, первичного амилоидоза и рассеянного склероза. Разработанный ранее метод детекции СЛЦ, основанный на применении моноклональных антител (МКАТ) против криптических и постоянно экспонируемых эпитопов СЛЦ, не обеспечивал выявления редких вариантов белков Бенс-Джонса лямбда-типа и значительной части свободных лямбда-цепей, экскретируемых с мочой. Для усовершенствования метода использовано новое МКАТ (1С8) изотипа IgG2b, которое связывает СЛЦ лямбда-типа, но не взаимодействует сцелостными молекулами IgG, IgA иIgM. МКАТ распознает эпитоп лямбда цепей, который присутствует на антигене в циркулирующей крови здоровых доноров и пациентов с миеломной болезнью, не разрушается и не маскируется в процессе почечной фильтрации. Цель исследования состояла в определении основных характеристик новой системы и в оценке ее диагностических возможностей при выявлении моноклональных гаммапатий. В качестве калибраторов использованы смеси белков Бенс-Джонса каппа- или лямбда-типа, выделенных из мочи пациентов с миеломной болезнью. Предложенный метод позволяет выявлять в сыворотке и в моче СЛЦ каппа- и лямбда-типа в интервале концентраций от 1 до 100 нг/мл, что на три порядка превышает возможности метода Freelite, основанного на использовании поликлональных антител. Предложенный метод позволяет выявлять сопоставимые концентрации СЛЦ и вычислять коэффициент каппа/ лямбда. Метод обеспечивает выявление в сыворотке и моче СЛЦ в присутствии 10-тысячекратного избытка целостных молекул IgG. Калибровочные графики для определения концентраций СЛЦ обоих типов имеют в логарифмической системе координат вид линейных зависимостей с одинаковым углом наклона. Порог детекции СЛЦ каппа- и лямбда-типа равен 5 и 3 нг/мл соответственно. В сыворотках крови здоровых доноров средние величины концентраций (М±SD) свободных каппа-цепей составили 6,7±2,1, в моче – 4,2±3,8 мкг/мл. Соответствующие значения для лямбда-цепей составили 4,7±1,96 и 1,6±1,0 мкг/мл. Величины коэффициентов каппа/лямбда в сыворотке крови и моче сопоставимы с данными, приводимыми в литературе. В сыворотках и моче пациентов с множественной миеломой выявлены моноклональные СЛЦ того же типа, что и парапротеин, обнаруженный в сыворотке крови с помощью электрофореза с последующей иммунофиксацией. Значения коэффициентов каппа/лямбда при этом соответствовали типу выявленной гаммапатии.

Detection of total free light chains (FLC) of immunoglobulins and their ratio (kappa/lambda quotient) are used in diagnostics and monitoring of multiple myeloma and other gammapathies, primary amyloidosis and multiple sclerosis. Previously described immunoassays with monoclonal antibodies (Mabs) against cryptic and constantly exposed epitopes of FLC failed to recognize rare variants of lambda Bence-Jones proteins and a significant proportion of lambda chains excreted with urine. Aiming to improve this approach, a novel murine Mab (IgG2b coded as 1C8) was employed, which specifically binds free lambda chains but doesn’t interact with native IgA, IgG, and IgM. The novel Mab recognized an epitope exposed at free lambda chains in peripheral blood of healthy donors and patients with multiple myeloma. It is not destroyed or masked upon renal filtration.

The aim of this study was to determine basic features of improved assay system, and to estimate its potential in diagnostics of monoclonal gammapathies. The mixtures of three Bence-Jones proteins of either kappa- or lambda- types purified from the urine of multiple myeloma patients were used as calibrator samples.

Improved immunometric assay is able to detect free kappa and lambda chains in serum and urine at a scale of 1 to 100 ng/ml, thus being three orders more sensitive than, e.g., detection levels of Freelite method based on polyclonal antibodies.

A novel assay allows to detect free kappa and lambda chains at comparable levels in serum or urine, and to deduce kappa/lambda ratio. The proposed assay is able to detect FLC in 10,000-fold excess of whole IgG molecules. The calibrating plots for both antigens are linear on log-log scales, with very similar slopes. Detection thresholds for kappa or lambda chains proved to be 5 and 3 ng/ml, respectively. Mean concentrations of free kappa chains in sera of healthy donors were 6.7±2.1, in urine, 4.2±3.8 mcg/ml. Mean concentrations of free lambda chains were 4.7±1.96, and 1.6±1.0 mcg/ml, respectively. This method, if applied to serum and urine samples from multiple myeloma patients, revealed free light chains were similar to the paraproteins detected by means of electrophoresis/immunofixation. The values of kappa/lambda ratios corresponded to the types of gammapathies revealed.

свободные легкие цепиIgбелки Бенс-Джонсагаммапатиииммуноферментный анализмоноклональные антителасыворотка кровимочаimmunoglobulinfree light chainsBence-Jones proteinsgammapathiesimmunoenzyme assaymonoclonal antibodiesserumurineРоссийский научный фондReferencesГрязева И.В., Климович В.Б., Пашкова С.Ф. Моноклональные антитела к легким цепям иммуноглобулинов человека и их применение в иммуноанализе // Иммунология, 1994. № 3. С. 31-37. [Gryazeva I.V., Klimovich V.B., Pashkova S.F. Application of monoclonal antibodies to light chains of human immunoglobulins in immunoassays. Immunologiya = Immumologia, 1994, no. 3, pp. 31-37. (In Russ.)]Грязева И.В., Климович В.Б., Пашкова С.Ф. Моноклональные антитела к легким цепям иммуноглобулинов человека и их применение в иммуноанализе // Иммунология, 1994. № 3. С. 31-37. [Gryazeva I.V., Klimovich V.B., Pashkova S.F. Application of monoclonal antibodies to light chains of human immunoglobulins in immunoassays. Immunologiya = Immumologia, 1994, no. 3, pp. 31-37. (In Russ.)]Климович В.Б., Самойлович М.П., Крутецкая И.Ю., Грязева И.В., Шмидт Е.Н., Котова Т.С. Получение и иммунохимическая характеристика моноклональных антител против IgM человека // Биотехнология, 1997. № 4. С. 40-46. [Klimovich V.B., Samoylovich M.P., Krutetskaya I.Yu., Gryazeva I.V., Schmidt E.N., Kotova T.S. Development and characterization of monoclonal antibodies against human IgM. Biotekhnologiya = Biotechnology, 1997, no. 4. pp. 40-46. (In Russ.)]Климович В.Б., Самойлович М.П., Крутецкая И.Ю., Грязева И.В., Шмидт Е.Н., Котова Т.С. Получение и иммунохимическая характеристика моноклональных антител против IgM человека // Биотехнология, 1997. № 4. С. 40-46. [Klimovich V.B., Samoylovich M.P., Krutetskaya I.Yu., Gryazeva I.V., Schmidt E.N., Kotova T.S. Development and characterization of monoclonal antibodies against human IgM. Biotekhnologiya = Biotechnology, 1997, no. 4. pp. 40-46. (In Russ.)]Климович В.Б. Самойлович М.П., Грязева И.В., Крутецкая И.Ю. Моноклональные антитела против иммуноглобулинов в диагностике заболеваний человека // Медицинский Академический Журнал. 2008. Т. 8, № 3. С. 84-95. [Klimovich V.B., Samoilovich M.P., Griazeva I.V., Krutetskaya I.Yu. Monoclonal antibodies against immunoglobulins in diagnostics of human deseases. Meditsinskiy akademicheskiy zhurnal = Medical Academic Journal, 2008, Vol. 8, no. 3, pp. 84-95. (In Russ.)]Климович В.Б. Самойлович М.П., Грязева И.В., Крутецкая И.Ю. Моноклональные антитела против иммуноглобулинов в диагностике заболеваний человека // Медицинский Академический Журнал. 2008. Т. 8, № 3. С. 84-95. [Klimovich V.B., Samoilovich M.P., Griazeva I.V., Krutetskaya I.Yu. Monoclonal antibodies against immunoglobulins in diagnostics of human deseases. Meditsinskiy akademicheskiy zhurnal = Medical Academic Journal, 2008, Vol. 8, no. 3, pp. 84-95. (In Russ.)]Самойлович М.П., Крутецкая И.Ю., Климович В.Б., Шмидт Е.Н., Пашкова С.Ф., Котова Т.С. Моноклональные антитела против подклассов IgG человека. Получение и определение специфичности // Иммунология, 1998. № 3. С. 27-30. [Samoylovich M.P., Krutetskaya I.Yu., Klimovich V.B., Schmidt E.N., Pashkova S.F., Kotova T.S. Monoclonal antibodies to human IgG subclasses. Development and specificity determination. Immunologiya = Immunology, 1998, no. 3, pp. 27-30. (In Russ.)]Самойлович М.П., Крутецкая И.Ю., Климович В.Б., Шмидт Е.Н., Пашкова С.Ф., Котова Т.С. Моноклональные антитела против подклассов IgG человека. Получение и определение специфичности // Иммунология, 1998. № 3. С. 27-30. [Samoylovich M.P., Krutetskaya I.Yu., Klimovich V.B., Schmidt E.N., Pashkova S.F., Kotova T.S. Monoclonal antibodies to human IgG subclasses. Development and specificity determination. Immunologiya = Immunology, 1998, no. 3, pp. 27-30. (In Russ.)]Abe M., Goto T., Kosaka M., Wolfenbarger D., Weiss D.T., Solomon A. Differences in kappa to lambda (kappa:lambda) ratios of serum and urinary free light chains. Clin. Exp. Immunol., 1998, Vol. 111, no. 2, pp. 457-462.Abe M., Goto T., Kosaka M., Wolfenbarger D., Weiss D.T., Solomon A. Differences in kappa to lambda (kappa:lambda) ratios of serum and urinary free light chains. Clin. Exp. Immunol., 1998, Vol. 111, no. 2, pp. 457-462.Abe M., Goto T., Wolfenbarger D., Weiss D.T., Solomon A. Novel immunization protocol and ELISA screening methods used to obtain and characterize monoclonal antibodies specific for human light chain variableregion subgroups. Hybridoma, 1993, Vol. 12, no. 4, pp. 475-483.Abe M., Goto T., Wolfenbarger D., Weiss D.T., Solomon A. Novel immunization protocol and ELISA screening methods used to obtain and characterize monoclonal antibodies specific for human light chain variableregion subgroups. Hybridoma, 1993, Vol. 12, no. 4, pp. 475-483.Boscato L.M., Egan G.M., Stuart M.C. Specificity of two-site immunoassays. J. Immunol. Methods, 1989, Vol. 117, no. 2, pp. 221-229.Boscato L.M., Egan G.M., Stuart M.C. Specificity of two-site immunoassays. J. Immunol. Methods, 1989, Vol. 117, no. 2, pp. 221-229.Bradwell A.R., Carr-Smith H.D., Mead G.P., Tang L.X., Showell P.J., Drayson M.T., Drew R. Highly sensitive automated immunoassay for immunoglobulin free light chains in serum and urine. Clin. Chem., 2001, Vol. 47, pp. 673-680.Bradwell A.R., Carr-Smith H.D., Mead G.P., Tang L.X., Showell P.J., Drayson M.T., Drew R. Highly sensitive automated immunoassay for immunoglobulin free light chains in serum and urine. Clin. Chem., 2001, Vol. 47, pp. 673-680.Brebner J.A., Stockley R.A. Polyclonal free light chains: a biomarker of inflammatory disease or treatment target? F1000 Med. Rep., 2013, Vol. 5, 4.Brebner J.A., Stockley R.A. Polyclonal free light chains: a biomarker of inflammatory disease or treatment target? F1000 Med. Rep., 2013, Vol. 5, 4.Bridoux F., Leung N., Hutchison C.A., Touchard G., Sethi S., Fermand J.P., Picken M.M., Herrera G.A., Kastritis E., Merlini G., Roussel M., Fervenza F.C., Dispenzieri A., Kyle R.A., Nasr S.H. International Kidney and Monoclonal Gammopathy Research Group. Diagnosis of monoclonal gammopathy of renal significance. Kidney Int., 2015, Vol. 87, no. 4, pp. 698-711.Bridoux F., Leung N., Hutchison C.A., Touchard G., Sethi S., Fermand J.P., Picken M.M., Herrera G.A., Kastritis E., Merlini G., Roussel M., Fervenza F.C., Dispenzieri A., Kyle R.A., Nasr S.H. International Kidney and Monoclonal Gammopathy Research Group. Diagnosis of monoclonal gammopathy of renal significance. Kidney Int., 2015, Vol. 87, no. 4, pp. 698-711.Daval S., Tridon A., Mazeron N., Ristori J.M., Evrard B. Risk of antigen excess in serum free light chain measurements [letter]. Clin. Chem., 2007, Vol. 53, no. 11, pp. 1985-1986.Daval S., Tridon A., Mazeron N., Ristori J.M., Evrard B. Risk of antigen excess in serum free light chain measurements [letter]. Clin. Chem., 2007, Vol. 53, no. 11, pp. 1985-1986.Davern S., Tang L.X., Williams T.K., Macy S.D., Wall J.S., Weiss D.T., Solomon A. Immunodiagnostic capabilities of anti-free immunoglobulin light chain monoclonal antibodies. Am. J. Clin. Pathol., 2008, Vol. 130, no. 5, pp. 702-711.Davern S., Tang L.X., Williams T.K., Macy S.D., Wall J.S., Weiss D.T., Solomon A. Immunodiagnostic capabilities of anti-free immunoglobulin light chain monoclonal antibodies. Am. J. Clin. Pathol., 2008, Vol. 130, no. 5, pp. 702-711.Dimopoulos M., Kyle R., Fermand J.P., Rajkumar S.V., San Miguel J., Chanan-Khan A., Ludwig H., Joshua D., Mehta J., Gertz M., Avet-Loiseau H., Beksaç M., Anderson K.C., Moreau P., Singhal S., Goldschmidt H.., Boccadoro M., Kumar S., Giralt S., Munshi N.C., Jagannath S. International Myeloma Workshop Consensus Panel 3. Consensus recommendations for standard investigative workup: report of the International Myeloma Workshop Consensus Panel 3. Blood, 2011, Vol. 117, no. 18, pp. 4701-4705.Dimopoulos M., Kyle R., Fermand J.P., Rajkumar S.V., San Miguel J., Chanan-Khan A., Ludwig H., Joshua D., Mehta J., Gertz M., Avet-Loiseau H., Beksaç M., Anderson K.C., Moreau P., Singhal S., Goldschmidt H.., Boccadoro M., Kumar S., Giralt S., Munshi N.C., Jagannath S. International Myeloma Workshop Consensus Panel 3. Consensus recommendations for standard investigative workup: report of the International Myeloma Workshop Consensus Panel 3. Blood, 2011, Vol. 117, no. 18, pp. 4701-4705.Hales C.N., Woodhead J.S. Labelled antibodies and their use in the immunometric assay. Meth. Enzymol., 1980, Vol. 70А, pp. 334-355.Hales C.N., Woodhead J.S. Labelled antibodies and their use in the immunometric assay. Meth. Enzymol., 1980, Vol. 70А, pp. 334-355.Hutchison C.A., Basnayake K., Cockwell P. Serum free light chain assessment in monoclonal gammopathy and kidney disease. Nat. Rev. Nephrol., 2009, Vol. 5, no. 11, pp. 621-618.Hutchison C.A., Basnayake K., Cockwell P. Serum free light chain assessment in monoclonal gammopathy and kidney disease. Nat. Rev. Nephrol., 2009, Vol. 5, no. 11, pp. 621-618.Hutchinson A.T., Jones D.R., Raison R.L. The ability to interact with cell membranes suggests possible biological roles for free light chain. Immunol. Lett., 2012, Vol. 142, no. 1-2, pp. 75-77.Hutchinson A.T., Jones D.R., Raison R.L. The ability to interact with cell membranes suggests possible biological roles for free light chain. Immunol. Lett., 2012, Vol. 142, no. 1-2, pp. 75-77.Kaplan B., Aizenbud B.M., Golderman S., Yaskariev R., Sela B.A. Free light chain monomers in the diagnosis of multiple sclerosis. J. Neuroimmunol., 2010, Vol. 229, no. 1-2, pp. 263-271.Kaplan B., Aizenbud B.M., Golderman S., Yaskariev R., Sela B.A. Free light chain monomers in the diagnosis of multiple sclerosis. J. Neuroimmunol., 2010, Vol. 229, no. 1-2, pp. 263-271.Katzmann J.A., Clark R.J., Abraham R.S., Bryant S., Lymp J.F., Bradwell A.R., Kyle R.A. Serum reference intervals and diagnostic ranges for free kappa and free lambda immunoglobulin light chains: relative sensitivity for detection of monoclonal light chains. Clin. Chem., 2002, Vol. 48, no. 9, pp. 1437-1444.Katzmann J.A., Clark R.J., Abraham R.S., Bryant S., Lymp J.F., Bradwell A.R., Kyle R.A. Serum reference intervals and diagnostic ranges for free kappa and free lambda immunoglobulin light chains: relative sensitivity for detection of monoclonal light chains. Clin. Chem., 2002, Vol. 48, no. 9, pp. 1437-1444.Legg A., Hobbs J.A.R., Mead G.P., Bradwell A.R. Monoclonal vs Polyclonal Free Light Chain Assays. Am. J. Clin. Pathol., 2009, Vol. 131, no. 6, pp. 897-903.Legg A., Hobbs J.A.R., Mead G.P., Bradwell A.R. Monoclonal vs Polyclonal Free Light Chain Assays. Am. J. Clin. Pathol., 2009, Vol. 131, no. 6, pp. 897-903.Ling N.R., Lowe J., Hardie D., Evans S., Jefferis R. Detection of free kappa chains in human serum and urine using pairs of monoclonal antibodies reacting with C kappa epitopes not available on whole immunoglobulins. Clin. Exp. Immunol., 1983, Vol. 52, no. 1, pp. 234-240.Ling N.R., Lowe J., Hardie D., Evans S., Jefferis R. Detection of free kappa chains in human serum and urine using pairs of monoclonal antibodies reacting with C kappa epitopes not available on whole immunoglobulins. Clin. Exp. Immunol., 1983, Vol. 52, no. 1, pp. 234-240.Nakano T., Matsui M., Inoue I., Awata T., Katayama S., Murakoshi T. Free immunoglobulin light chain: its biology and implications in diseases. Clin. Chim. Acta, 2011, Vol. 412, no. 11-12, pp. 843-849.Nakano T., Matsui M., Inoue I., Awata T., Katayama S., Murakoshi T. Free immunoglobulin light chain: its biology and implications in diseases. Clin. Chim. Acta, 2011, Vol. 412, no. 11-12, pp. 843-849.Nakano T., Nagata A. ELISAs for free human immunoglobulin light chains in serum: improvement of assay specificity by using two specific antibodies in a sandwich detection method. J. Immunol. Methods, 2004, Vol. 293, no. 1-2, pp. 183-189.Nakano T., Nagata A. ELISAs for free human immunoglobulin light chains in serum: improvement of assay specificity by using two specific antibodies in a sandwich detection method. J. Immunol. Methods, 2004, Vol. 293, no. 1-2, pp. 183-189.Nakano T., Miyazaki S., Shinoda Y., Inoue I., Katayama S., Komoda T., Nagata A. Proposed reference material for human free immunoglobulin light chain measurement. J. Immunoassay Immunochem., 2006, Vol. 27, no. 2, pp. 129-137.Nakano T., Miyazaki S., Shinoda Y., Inoue I., Katayama S., Komoda T., Nagata A. Proposed reference material for human free immunoglobulin light chain measurement. J. Immunoassay Immunochem., 2006, Vol. 27, no. 2, pp. 129-137.Nelson M., Brown R.D., Gibson J., Joshua D.E. Measurement of free kappa and lambda chains in serum and the significance of their ratio in patients with multiple myeloma. Br. J. Haematol., 1992, Vol. 81, no. 2, pp. 223-230.Nelson M., Brown R.D., Gibson J., Joshua D.E. Measurement of free kappa and lambda chains in serum and the significance of their ratio in patients with multiple myeloma. Br. J. Haematol., 1992, Vol. 81, no. 2, pp. 223-230.Makshakov G., Nazarov V., Kochetova O., Surkova E., Lapin S., Evdoshenko E. Diagnostic and Prognostic Value of the Cerebrospinal Fluid Concentration of Immunoglobulin Free Light Chains in Clinically Isolated Syndrome with Conversion to Multiple Sclerosis. PLoS One, 2015, Vol. 10, no. 11, e0143375.Makshakov G., Nazarov V., Kochetova O., Surkova E., Lapin S., Evdoshenko E. Diagnostic and Prognostic Value of the Cerebrospinal Fluid Concentration of Immunoglobulin Free Light Chains in Clinically Isolated Syndrome with Conversion to Multiple Sclerosis. PLoS One, 2015, Vol. 10, no. 11, e0143375.Powe D.G., Groot-Kormelink T., Sisson M., Blokhuis B.J., Kramer M.F., Jones N.S., Redegeld F.A. Evidence for the involvement of free light chain immunoglobulins in allergic and nonallergic rhinitis. J. Allergy Clin. Immunol., 2010, Vol. 125, no. 1, pp. 139-145.Powe D.G., Groot-Kormelink T., Sisson M., Blokhuis B.J., Kramer M.F., Jones N.S., Redegeld F.A. Evidence for the involvement of free light chain immunoglobulins in allergic and nonallergic rhinitis. J. Allergy Clin. Immunol., 2010, Vol. 125, no. 1, pp. 139-145.Pratt G. The evolving use of serum free light chain assays in haematology. Br. J. Haematol., 2008, Vol. 141, no. 4, pp. 413-422.Pratt G. The evolving use of serum free light chain assays in haematology. Br. J. Haematol., 2008, Vol. 141, no. 4, pp. 413-422.Rajkumar S.V., Dimopoulos M.A., Palumbo A., Blade J., Merlini G., Mateos M.V., Kumar S., Hillengass J., Kastritis E., Richardson P., Landgren O., Paiva B., Dispenzieri A., Weiss B., LeLeu X., Zweegman S., Lonial S., Rosinol L., Zamagni E., Jagannath S., Sezer O., Kristinsson S.Y., Caers J., Usmani S.Z., Lahuerta J.J., Johnsen H.E., Beksac M., Cavo M., Goldschmidt H., Terpos E., Kyle R.A., Anderson K.C., Durie B.G., Miguel J.F. International Myeloma Working Group updated criteria for the diagnosis of multiple myeloma. Lancet Oncol., 2014, Vol. 15, no. 12, pp. 538-548.Rajkumar S.V., Dimopoulos M.A., Palumbo A., Blade J., Merlini G., Mateos M.V., Kumar S., Hillengass J., Kastritis E., Richardson P., Landgren O., Paiva B., Dispenzieri A., Weiss B., LeLeu X., Zweegman S., Lonial S., Rosinol L., Zamagni E., Jagannath S., Sezer O., Kristinsson S.Y., Caers J., Usmani S.Z., Lahuerta J.J., Johnsen H.E., Beksac M., Cavo M., Goldschmidt H., Terpos E., Kyle R.A., Anderson K.C., Durie B.G., Miguel J.F. International Myeloma Working Group updated criteria for the diagnosis of multiple myeloma. Lancet Oncol., 2014, Vol. 15, no. 12, pp. 538-548.Tate J.R., Gill D., Cobcroft R., Hickman P.E. Practical considerations for the measurement of free light chains in serum. Clin. Chem., 2003, Vol. 49, no. 8, pp. 1957-1958.Tate J.R., Gill D., Cobcroft R., Hickman P.E. Practical considerations for the measurement of free light chains in serum. Clin. Chem., 2003, Vol. 49, no. 8, pp. 1957-1958.Tate J.R., Mollee M., Dimeski G., Carter A.C., Gill D. Analytical performance of serum free light-chain assay during monitoring of patients with monoclonal light-chain diseases. Clin. Chim. Acta, 2007, Vol. 376, no. 1-2, pp. 30-36.Tate J.R., Mollee M., Dimeski G., Carter A.C., Gill D. Analytical performance of serum free light-chain assay during monitoring of patients with monoclonal light-chain diseases. Clin. Chim. Acta, 2007, Vol. 376, no. 1-2, pp. 30-36.

The authors declare that there are no conflicts of interest present.